硝基四氮唑蓝还原试验在尿道感染筛查中的应用

目的探讨硝基四氮唑蓝还原试验 (Nitroblue Tetrazolium Reduction test,NBT)在尿道感染筛查中的应用 ,为筛查尿道感染 (Urinary Tract Infections,U TI)提供一种方便、准确、适用于各级医疗单位使用的方法。方法分别用尿培养、尿干化学试纸法和 NBT检测了 5 47份中段尿。结果尿培养的阳性率为 12 .2 % ,在中段尿培养阳性的 6 7份尿液中 NBT阳性为 5 0份 ,NBT与尿培养的阳性符合率为 74.6 % ,二者阳性率差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,NBT阳性分布情况与年龄无关 (P>0 .0 5 )。在筛查 UTI时的 Auc(ROC曲线下面积 )为 0 .84,NBT与干化学法的白细胞酯酶 (L E)比较有较高的特异性 (0 .95 >0 .90 )和阳性预测值 (0 .6 9>0 .47) ,与干化学法的亚硝酸盐(NIT)比较有较高的灵敏度 (0 .75 >0 .2 8)和阴性预测值 (0 .96 >0 .91) ,NBT阳性尿液中的白细胞明显多于阴性尿液 (P<0 .0 5 )。结论提示 NBT可作为一种筛查尿道感染的方法 ,但在应用临床之前应进行多中心、大标本量的验证     

2种糖化血清蛋白自动分析法评价

目的对酶法和硝基四氮唑盐(NBT)法测定糖化血清蛋白的自动化分析法进行评价.方法分别使用Genzyme公司酶法试剂盒和Roche公司NBT试剂盒,在SYNCHRON CX9全自动生化分析仪上建立自动化分析程序,评价2种方法的重复性、线性范围、回收率及相关性.结果重复性酶法批内和批间变异系数(CV)分别为0.65%～0.98%和1.98%～2.84%,NBT法分别为1.11%～1.26%和2.73%～3.15%.线性范围酶法30～1 500 μmol/L,NBT法30～1 000 μmol/L.回收率酶法99.7%～102.4%,NBT法99.1%～103.2%.灵敏度(A/100 μmol/L)酶法0.018 2,NBT法0.025 9.相关性YNBT法=1.003 6X酶法+46.3,r=0.977 6.正常参考范围(±2s)酶法123.4～238.2 μmol/L、NBT法198.2～284.6 μmol/L.结论 2种方法均具有较高的精密度和准确度,测定结果呈直线正相关,应用时必须使用各自的参考范围.     

酚磺乙胺对果糖胺测定的干扰

我们用四氮唑蓝比色法 (NBT)测定 1例胃出血患者,血清葡萄糖为 6. 54mmol/L,而果糖胺 (FMN)高达8. 54mmol/L,两者关系显然不符合,考虑与药物干扰有关。经试验除与已知维生素C干扰有关外,止血药酚磺乙胺对NBT法测FMN亦有严重干扰。于是我们做了酚磺乙胺干扰NBT法测定FMN的体内、外试验,发现静脉注射酚磺乙胺后一定时间内,或血清含有一定药物浓度时,可导致NBT法FMN值假性升高。一、材料和方法1.试剂和仪器　酚磺乙胺 (C10H17NO5S=263. 31)注射液(常州康普药业有限公司 ),批号 0212041;FMN测定试剂盒(NBT显色终点法,上海名…     

酚磺乙胺对果糖胺测定的干扰

我们用四氮唑蓝比色法(NBT)测定1例胃出血患者,血清葡萄糖为6．54mmol／L,而果糖胺(FMN)高达8．54mmol／L,两者关系显然不符合,考虑与药物干扰有关。经试验除与已知维生素C干扰有关外,止血药酚磺乙胺对NBT法测FMN亦有严重干扰。于是我们做了酚磺乙胺干扰。NBT法测定FMN的体内、外试验,发现静脉注射酚磺乙胺后一定时间内,或血清含有一定药物浓度时,可导致NBT法FMN值假性升高。     

2种糖化血清蛋白自动分析法评价

目的　对酶法和硝基四氮唑盐 (NBT)法测定糖化血清蛋白的自动化分析法进行评价。方法　分别使用Genzyme公司酶法试剂盒和Roche公司NBT试剂盒 ,在SYNCHRONCX9全自动生化分析仪上建立自动化分析程序 ,评价 2种方法的重复性、线性范围、回收率及相关性。结果　重复性 :酶法批内和批间变异系数 (CV)分别为 0 .6 5 %～ 0 .98%和 1 .98%～ 2 .84 % ,NBT法分别为 1 .1 1 %～ 1 .2 6 %和 2 .73%～ 3.1 5 %。线性范围 :酶法 30～ 1 5 0 0 μmol/L ,NBT法 30～ 1 0 0 0 μmol/L。回收率 :酶法 99.7%～ 1 0 2 .4 % ,NBT法 99.1 %～ 1 0 3.2 %。灵敏度 (A/ 1 0 0 μmol/L) :酶法 0 .0 1 82 ,NBT法 0 .0 2 5 9。相关性 :YNBT法 =1 .0 0 36X酶法 +46 .3,r =0 .9776。正常参考范围 ( x± 2s) :酶法 1 2 3.4～ 2 38.2 μmol/L、NBT法 1 98.2～ 2 84 .6 μmol/L。 结论　 2种方法均具有较高的精密度和准确度 ,测定结果呈直线正相关 ,应用时必须使用各自的参考范围     

硝基四氮唑蓝还原试验在尿道感染筛查中的应用

目的探讨硝基四氮唑蓝还原试验(NitroblueTetrazoliumReductiontest,NBT)在尿道感染筛查中的应用，为筛查尿道感染(UrinaryTractInfections,UTI)提供一种方便、准确、适用于各级医疗单位使用的方法。方法分别用尿培养、尿干化学试纸法和NBT检测了547份中段尿。结果尿培养的阳性率为12.2%，在中段尿培养阳性的67份尿液中NBT阳性为50份，NBT与尿培养的阳性符合率为74.6%，二者阳性率差异无显著性(P＞0.05)，NBT阳性分布情况与年龄无关(P＞0.05)。在筛查UTI时的Auc(ROC曲线下面积)为0.84，NBT与干化学法的白细胞酯酶(LE)比较有较高的特异性(0.95＞0.90)和阳性预测值(0.69＞0.47)，与干化学法的亚硝酸盐(NIT)比较有较高的灵敏度(0.75＞0.28)和阴性预测值(0.96＞0.91)，NBT阳性尿液中的白细胞明显多于阴性尿液(P＜0.05)。结论提示NBT可作为一种筛查尿道感染的方法，但在应用临床之前应进行多中心、大标本量的验证。     

红细胞G—6—PD活性NBT定量法影响因素探讨

红细胞G—6—PD 活性硝基四氮唑兰(NBT)定量法(中华血液学杂志1981;2(3):188),为诊断溶血性贫血的常用方法.我们对此法某些影响因素做了初步探讨,据道如下.     

干扰素诱导人单核细胞株U937分化化学发光测定和NBT还原率检测

本文通过化学发光技术(CL)和NBT还原试验来观察干扰素和维甲类衍生物诱导人单核细胞株U937功能成熟现象发现(1)γ-干扰素使CL和NBT还原率上升,在一定范围内(10~3～10～4u/ml)CL值和NBT还原率随浓度的上升而上升,当浓度10~5u/ml时反而有所下降。(2)γ-干扰素诱导作用大于α-干扰素。(3)γ-干扰素和维甲酸衍生物联合诱导U937无协同作用。     

介绍一种NBT试验改进法

NBT试验是临床用于鉴别细菌感染或病毒感染的辅助诊断方法之一 ,内毒素激发 NBT试验是区别中性粒细胞吞噬功能紊乱还是缺少细菌刺激的有效方法。但是此试验在操作过程中中性粒细胞易发生破碎 ,使细胞计数和鉴别发生困难 ,影响了结果的准确性。为此我们在 [1 ,2 ] 的基础上对 NBT试验的步骤和方法进行了改进 ,取得了一定的效果 ,现将方法报告如下。1　材料与方法1 .1　材料　 0 .2 % NBT( Sigma公司 )生理盐水原液 ;2 0 0μg/ml内毒素 ( Sigma公司 )应用液 :称取内毒素 1 0 mg溶入 5 0 ml生理盐水中 ;人血白蛋白 (成都蜀阳制药厂产品 )…     

围手术期输血对膀胱癌患者免疫功能的影响

目的通过对围术期膀胱癌患者输血前后T淋巴细胞群及NK细胞活性的变化的观察,探讨输血对膀胱癌患者免疫功能的影响。方法随机选择70例膀胱癌手术病例,分成输血组(BT)47例与非输血组(NBT)23例,分别采集手术前1周之内,以及术后第1天、第3天、第7天的外周静脉血,用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+及NK细胞活性,并计算CD_4~+/CD_8~+比值,分析其变化规律。结果 BT组与NBT组术前各项指标相比较无显著性差异(P0.05);术后第1天,BT组和NBT组各项指标相比较于术前均有显著性差异(P0.05),但BT组与NBT组各项指标相比较无显著性差异(P0.05);术后第3天、第7天,BT组各项指标相比较于术前有显著性差异(P0.05);NBT组各项指标相比较于术前无显著性差异(P0.05);BT组各项指标与NBT组相比较均有显著性差异(P0.05)。结论输血对膀胱癌患者的细胞免疫功能有较强的抑制作用。     

细菌对四唑氨兰的还原作用

细菌能将无色的四唑氮蓝(NBT)还原成深蓝色的甲(?)。不同的菌种还原NBT的能力不同。比较白色葡萄球菌,大肠杆菌,绿脓杆菌在相同条件下还原NBT得到甲(?)的量,发现不仅不同菌种产生甲(?)的量不同,即是同种的不同菌株,产生甲(?)的量也不相同。白色葡萄球菌还原力最强,产生甲(?)最多,绿脓杆菌最弱,大肠杆菌居中。细菌的数量与甲(?)生成量呈正相关线性关系,一般至少10~8/ml菌量产生的甲(?)才能用光电比色法测得。当菌数一定时,NBT的浓度越高,甲(?)产生得越多。细菌处于不同生长期还原NBT能力不同。试验发现,在对数生长期的前期,细菌还原NBT的能力最强。NBT对细菌有毒性作用,在细菌的肉汤培养物中加0.1%NBT后,菌数持续下降,经15分钟后,菌数保持恒定;与此同时,细菌对NBT的还原作用     

四唑氮兰还原试验与碱性磷酸酶染色结果的比较

中性粒细胞碱性磷酸酶(ALP)染色及四唑氮兰还原试验(NBT)对细菌性感染疾病均具有一定的诊断价值,但两者的临床意义尚不完全相同.为此,我们对26例细菌性感染患者和43例非细菌性感染患者进行了NBT 及ALP 染色的对比检查,现将结果报道如下.     

1例成人chediak—Higashi综合征

患者女性,28岁。父母近亲结婚,其兄头发灰白,5岁时因感染而死亡。患者从小对日光过敏,并反复感染脓疱病,均采取手术切除治疗。体检:神清,智力低下,视力差,头发灰白,颜面及四肢色素沉着,右下肢顽固性溃疡。全身肌无力,感觉运动障碍,小脑运动失调。心肺正常,肝脾及表浅淋巴结不肿大。周围血白细胞4200/μl,中性27%,淋巴70%,中性粒细胞功能检查墨粒吞噬功能及四唑氮蓝(NBT)还原功能(NBT试验26%,LPS活性的NBT 30%)正常。游走功能基本正常,溶链菌杀菌功能降低。免疫学检查NK细胞活性及抗体依赖性细胞介导的细胞毒(ADCC)     

硝基四唑氮兰玻片试验的改良法

硝基四唑氮兰(NBT)玻片试验是估计血中中性粒细胞吞噬反应的一种微量快速而简易的方法。这种细胞内NBT还原试验是检测吞噬细胞氧化代谢异常(如慢性肉芽肿病)的一种有用的手段。目前一般采用的Ochs-Igo氏法有缺点,将其改良后可得到较多粘附的粒细胞,且着色明显,形态完整,NBT阳性及阴性细胞容易鉴别。方法:①将含0.05 mg大肠杆菌内毒素(脂多糖B)的溶液充满18mm~2无菌盖玻片,让其干燥一夜。然后将盖玻片放入有湿滤纸及盖玻片支持物的无菌平皿内。②用长75mm肝素化的毛细管自指尖引入血液,滴2～3滴血液于上述涂有内毒素的玻片上。     

肝素对嗜中性白细胞还原四唑染料的影响

作者以不同浓度的肝素作抗凝剂,用两种四唑染料〔四唑氮兰(NBT)和四唑四硝基兰(TNBT)〕作嗜中性白细胞四唑染料还原试验。其方法是将NBT或TNBT溶解于pH 7.2的0.2M磷酸盐缓冲液中,离心除去沉淀,配成的上清染液可应用1～2天。肝素用磷酸盐缓冲液稀释成不同浓度:100、50、20、10和5国际单位/ml。向微量滴定塑料板的各孔中分别加入上述不同浓度的肝素溶液0.005ml(似应改为0.003ml——译者注),使肝素最后浓度为10、5、2、1和0.5国际单位/ml血液(再设一不加肝素的对照孔)。各孔加入指端血液各0.03ml和四唑染料(NBT或TNBT)0.02ml,轻轻通气使之混匀。塑料板上覆盖以湿润玻板,置37℃孵育30分钟,然     

止血敏对果糖胺测定有正干扰

我们用硝基四氮唑蓝（NBT）比色法测定1例胃出血患者血清果糖胺（FMN）高达8．54mmol／L,而血清葡萄糖仅6．54mmol／L,两者关系显然不符,考虑与药物干扰有关。经试验除与已知的维生素C干扰有关外,止血药酚磺乙胺（止血敏）对NBT法测FMN亦有严重干扰。于是我们做了止血敏干扰测定FMN的体内、外试验,发现静脉注射止血敏后一定时间内,或血清含有一定浓度止血敏,可导致NBT法FMN值假性升高。     

腺苷酸环化酶的活化影响NB4细胞对全反式维甲酸的敏感性

目的　探讨急性早幼粒细胞白血病 (APL)细胞对全反式维甲酸 (ATRA)耐药的分子机制。方法　以ATRA敏感及耐药的APL细胞株NB4和NB4 R1为模型 ,观察细胞形态、表面分化抗原以及对四氮唑蓝还原能力的改变 ,分别研究腺苷酸环化酶 (AC)和磷酸二酯酶 (PDE)的特异激活剂毛喉素、拮抗剂 9 (四氢 2 呋喃基 ) 9H 嘌呤 6 氨 (SQ2 2 5 36 )对ATRA诱导分化作用的影响。结果　AC的拮抗剂SQ2 2 5 36能显著抑制ATRA对NB4细胞的诱导分化作用 ,ATRA SQ2 2 5 36组与ATRA组比较 ,CD11b阳性率由 (95 .9± 2 .5 ) %降至 (6 0 .3± 7.1) % ,NBT还原实验吸光度 (A) 540 值由 0 .5 85±0 .0 92降至 0 .170± 0 .0 2 8,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。而AC的激活剂毛喉素则可以克服NB4 R1细胞对ATRA的耐药 ,ATRA 毛喉素组与ATRA组比较 ,CD11b阳性率由 (34.3± 5 .3) %升高至 (94 .6±2 .4 ) % ,NBT还原实验A540 值由 0 .110± 0 .0 2 8升高至 0 .395± 0 .0 4 9,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。PDE的特异激活剂钙调蛋白以及拮抗剂 3 异丁基 1 甲基黄嘌呤 (IBMX)对ATRA的作用基本没有影响。结论　AC能否正常激活也许是APL对ATRA产生耐药的重要原因之一。     

乳酸氧化酶法测定血浆中乳酸

采用乳酸氧化酶氧化乳酸产生丙酮酸和H2 O2 ,然后偶联Trinder显色反应测定血浆中乳酸。方法线性可达 13 2mmol/L ,批内变异系数 (CV)为 0 86 %～ 1 5 6 % ,回收率为 98 9%～ 10 1 5 % ,与LD NBT法比较具有良好的相关 ,r =0 989,Y =0 989X 0 0 3 ,5 0例健康人血浆乳酸参考值为 0 6 1～ 2 5 1mmol/L (x± 2s)。本法简便 ,可靠 ,适合作为乳酸的常规测定方法。     

1,25-二羟基维生素D_3诱导HL-60细胞分化并下调nm23基因的表达

目的　观察 1,2 5 二羟基维生素D3 [1,2 5 (OH) 2 D3 ]对白血病细胞株HL 6 0的诱导分化作用并探讨其机制。方法　通过MTT试验、细胞形态观察、表面标志分析和硝基四氮唑蓝 (NBT)还原反应 ,观察 1,2 5 (OH) 2 D3 作用后HL 6 0细胞增殖的改变和分化情况 ;通过流式细胞仪和RT PCR检测细胞周期和nm2 3基因表达的变化。结果　HL 6 0细胞经 1,2 5 (OH) 2 D3 作用后增殖受抑制、向成熟单核细胞系分化、细胞被阻滞在G1 期、nm2 3基因的表达下调。结论　 1,2 5 (OH) 2 D3 对HL 6 0细胞株具有诱导分化作用 ,其作用机制可能与下调nm2 3基因的表达有关。     

新维甲酸类药物SX-115和CHU-012对NB4细胞系作用及其机制的初步研究

本研究通过应用细胞增殖、形态学、细胞周期动力学、NBT还原试验、表面分化抗原检测、免疫荧光分析和RT-PCR等方法,观察新维甲酸类化合物SX-115和CHU-012对早幼粒细胞白血病细胞系NB4的作用.研究结果发现,SX-115和CHU-012在10-6mol/L时对NB4细胞有诱导分化作用,与同浓度的全反式维甲酸(ATRA)相比,三者作用无明显差异,其作用机制与ATRA相似.