成人肠系膜动脉平滑肌细胞增殖模型的稳定性研究

目的：研究动脉血管平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）的生长特性和体外血管活性物质对ＡＳＭＣ增殖作用的影响。方法：应用复合酶法和贴块法成功地进行了成人ＡＳＭＣ分离，经低浓度的人胰岛素生长因子Ｉ（ＨＩＬＧＦ－Ｉ）作用，成人ＡＳＭＣ呈典型的“谷”与“峰”样生长，经历了１０多个月传代培养至３５代，并用ＰＭＡ作ＭＴＴ细胞毒性实验，结果：该细胞生长活性未见异常改变。结论：此方法能使分离下来的ＡＳＭＣ的休眠期缩短，传代后生     

凝血酶与血管平滑肌细胞的增殖

凝血酶不仅在凝血过程中起主导作用，而且与血管平滑肌细胞的增殖密切相关。本文扼要综述了凝血酶的酶学特性、细胞受体及其对生长因子和原癌基因表达的影响，探讨了凝血酶与血管平滑肌细胞增殖的关系。     

长期口服卡托普利对动脉平滑肌细胞增殖能力的抑制作用

给10周龄自发性高血压大鼠(SHR)口服卡托普利(CAP)10周后,采用MTT法检测其主动脉平滑肌细胞(SMC)在体外培养环境中的增殖能力,同时用放射免疫法测定培养的SMC内血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)浓度。结果表明:长期口服CAP能抑制SHR动脉SMC的增殖能力,且该作用与细胞内Ang Ⅱ含量无关。     

血管平滑肌细胞的增殖因素及机制

血管平滑肌细胞(VSMC)增殖已成为目前心血管疾病研究领域里的热点,VSMC增殖、迁移及凋亡在冠状动脉粥样硬化(AS)、冠状动脉搭桥术、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后血管再狭窄的发生和发展过程中起重要作用.本文作者对VSMC增殖及促增殖因素和机制进行综述.     

高浓度氧抑制兔动脉平滑肌细胞的增殖

目的　探讨缺氧和高氧环境对兔主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用 ,间接判断缺氧与冠脉再狭窄的关系和研究氧疗是否能用于 PTCA支架后冠脉再狭窄的防治 .方法　用含 10 0 m L· L- 1小牛血清的 RPMI16 40培养液体外培养新西兰白兔的主动脉平滑肌细胞至 3～ 7代 ,将含 5 0 m L· L- 1小牛血清的 RPMI16 40培养液与动脉平滑肌细胞的混悬液10 0 μL 加入 96孔培养板中培养 ,按照实验分组分别在 10 0 ,2 10 ,2 5 0 ,5 0 0和 75 0 m L· L- 1 O2 及纯氧环境中培养主动脉平滑肌细胞 48h.用 MTT法和 3H- Td R掺入法检测动脉平滑肌细胞增殖的数量 .结果　以 2 10 m L· L- 1 O2 环境下动脉平滑肌细胞增殖的数量为基准对照组 ,其他各组为实验组 .5 0 0 m L· L- 1 O2 至纯氧环境下动脉平滑肌细胞的增殖显著低于对照组 (P<0 .0 5 ) ,2 5 0 m L· L- 1 O2 与 2 10 m L·L- 1 O2环境下主动脉平滑肌细胞的增殖无显著差异 (P>0 .0 5 ) ,10 0m L· L- 1 O2 环境下动脉平滑肌细胞的增殖显著高于对照组(P<0 .0 5 ) .结论　动脉平滑肌细胞的增殖随着培养环境中氧浓度升高而降低 ,缺氧促进动脉平滑肌细胞的增殖 ,高氧对动脉平滑肌细胞增殖具有显著的抑制作用 ;氧疗可能有助于降低冠脉再狭窄率 ,并为高压氧治疗其他以动脉血管     

IL-13对小鼠气道平滑肌细胞的促增殖作用

目的:探讨IL-13对小鼠气道平滑肌细胞(ASMC)的促增殖作用及其机制.方法:将分离的小鼠ASMC进行传代培养,在培养液中分别加入PBS、IL-13、IL-13+AG1478、IL-13+TGF-α中和抗体、IL-13+EGF中和抗体、IL-13+HB-EGF中和抗体、IL-13+地塞米松;用MTT比色法和3H-TdR掺入法测定ASMC增殖,用ELISA法测定上清液中TGF-α的浓度.结果:IL-13组的MTT D值和3H-TdR掺入量较对照组明显增加(P＜0.01),IL-13+AG1478组、IL-13+TGF-α中和抗体组、IL-13+地塞米松组MTT D值和3H-TdR掺入量均显著低于IL-13组(P＜0.01),IL-13组1 h和3 h ASMC分泌TGF-α均显著高于对照组(P＜0.01),IL-13+地塞米松组显著低于IL-13组(P＜0.01).结论:IL-13能促进ASMC的增殖,其可能机制为IL-13刺激ASMC分泌TGF-α,TGF-α与EGFR结合使之活化,引起细胞增殖.     

一氧化氮对肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡作用的研究

目的：研究一氧化氮（NO）对肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖和凋亡的作用。方法：通过非核素标记细胞增殖检测试剂盒、^H-TdR掺入、形态学、流式细胞术等方法研究NO与PASMC增殖和凋亡的关系。结果：25－500μmol/L的NO供体S－亚硝基乙酰青霉胺（SNAP）呈剂量依赖性地减少PASMC的细胞和DNA合成，500μmol/L的SNAP显著减少S期和G2／M期的细胞比例，增加G0／G1期的细胞比例。100－500μmol/L的SNAP呈剂量依赖性地增加PASMC的凋亡率。结论：NO可抑制PASMC增殖并促进其凋亡。早期给予NO对肺动脉高压血管重建可能有一定的预防作用。     

一氧化氮介导内皮细胞对平滑肌细胞增殖的调节作用

用噻唑蓝比色法观察了过经氢、Ｌ－精氨酸、Ｎ－硝基－Ｌ－精氮酸处理的内皮细胞条件培养液对平滑肌细胞增殖的影响。结果显示：过氧化氢和Ｎ－硝基－Ｌ－精氨酸处理的内皮细胞条件培养液对平滑肌细胞增殖有明显促进作用;而Ｌ精氨酸内皮细胞条件培养液有明显的抑制平滑肌细胞增殖作用,说明内皮细胞通过合成释放一氧化氮平滑肌细胞增殖。     

尼群地平对猪主动脉平滑肌细胞增殖的影响

观察不同剂量的尼群地平对培养的猪主动脉平滑肌细胞增殖的影响。结果表明：不同剂量的尼群地平对平滑肌细胞增殖的抑制作用汪样，最佳剂量为２．５μｇ／ｍｌ     

黄色素对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究黄色素（ＳＹ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及其作用机制。方法 以培养的家兔ＶＳＭＣ为材料，采用细胞计数和＾３２Ｐ掺入法，研究了ＳＹ对ＶＳＭＣ的增殖及ＶＳＭＣ中酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性的影响。结果 ＳＹ对血清刺激的ＶＳＭＣ的增殖具有抑制作用，且呈剂量和时间依赖性。１．０ｇ／Ｌ达到最大抑制，抑制率为５４．６％，４ｄ（１．０ｇ／Ｌ ＳＹ）达到最大抑制，抑制率为５２．０％，超过４ｄ     

不同低氧环境对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨不同低氧环境对大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖活性的影响.方法 将原代培养的大鼠PASMCs分为常氧组(21% O2,5% CO2)、低氧组(10% O2,85% N2,5% CO2)、缺氧组(1% O2,94% N2,5%...     

莲心碱对内皮素促血管平滑肌细胞增殖及癌基因表达的影响

采用内皮素建立培养的血管平滑肌细胞增殖模型。用＾３Ｈ胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）参入法,流式细胞术,免疫细胞化学及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法,观察了莲心碱对血管平 肌细胞增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响。结果发现：Ｌｉｅｎ能逆转内皮素所致的「＾３Ｈ」ＴｄＲ参入量增多,阻止血管平滑肌细胞由静止期进入ＤＮＡ合成期和有丝分裂期,并能逆转内皮素引起的ｃ－ｆｃｓ,ｃ－ｍｙｃ,ｃ－ｓｉｓ原癌基因相     

G蛋白反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的影响

使用硫代修饰的Ｇ蛋白（Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白）反义寡聚脱氧核苷酸（Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ）作用于含２０％胎牛血清ＤＭＥ培养液培养基的血管平滑肌细胞（ｖＳＭＣ）。通过细胞计数和免疫细胞化学方法，观察了Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ对ｖＳＭＣ增殖和ＰＣＮＡ表达的影响。结果表明，Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ联合应用能明显抑制ｖＳＭＣ增殖；免疫细胞化学分析亦显示ｖＳＭＣ中ＰＣＮＡ蛋白表达显著减少。而相同浓度的正义ＯＤＮｓ只有微小抑制作用。结果提示，Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ有可能应用于防治临床血管活性物质依赖性细胞增生性疾病的研究。     

猪十二指肠类肝素对血管平滑肌细胞增殖的抑制

猪十二指肠类肝素（冠心舒）是一种富含硫酸基的硫酸多糖，对培养的兔主动脉平滑肌细胞增殖以结晶紫、ＭＴＴ染色和３Ｈ－ΤｄＲ掺入等方法测定显示明显抑制作用，作用强度与肝素相仿。同浓度的右旋糖酐对此无抑制作用，说明猪十二指肠类肝素抑制血管平滑肌增生与分子中所含硫酸基有关。猪十二指肠类肝素口服有效，抗凝效价又低于肝素，提示本品有可能用于防治动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄。     

同型半胱氨酸对体外培养的大鼠动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 :观察同型半胱氨酸 (HCY)对大鼠动脉平滑肌细胞 (ASMCS)增殖的影响。方法 :利用体外细胞培养技术 ,通过 MTT比色测定、细胞计数及流式细胞仪对细胞周期的测定 ,观察同型半胱氨酸对大鼠动脉平滑肌细胞增殖的影响。结果 :同型半胱氨酸能促进大鼠动脉平滑肌细胞的增殖 ,呈明显的剂量依赖关系。药物作用两天后 ,0 .2 m M· L-1HCY组与对照组相比 ,细胞数目增加 4 6 .4 8%,MTT比色OD值增加 4 5 .6 9%(P<0 .0 1) ;经细胞周期的测定 ,结果表明 HCY作用后 G0 ～ G1期细胞数由对照组的 87.2 2 %降低至 76 .6 5 %,减少了 12 .12 %;S期的细胞数由对照组的 0 .0 0 %增加到 6 .6 6 %,处于DNA合成期的细胞数明显增加。结论 :同型半胱氨酸能促进大鼠动脉平滑肌细胞的增殖 ,呈明显的剂量依赖关系。推测 HCY可能通过促进平滑肌细胞的增殖导致动脉粥样硬化的发生。     

二甲基亚砜和1,2-丙二醇对深低温保存兔颈总动脉平滑肌细胞的影响

①目的 用二甲基亚砜(Me2SO)和1．2-丙二醇(PROH)深低温保存兔颈总动脉,评价两种保护剂对深低温保存复温后血管平滑肌细胞再生能力和超微结构的影响。②方法 将免颈总动脉用含有1.5mol／L的Me2SO或1．5mol／L PROH的低温保护剂深低温保存，并在冰袋中缓慢复温．新鲜血管作为对照。复温后和新鲜血管的平滑肌细胞进行体外培养，观察平滑肌细胞的再生能力;同时在透射电镜下观察平滑肌细胞的超微结构。③结果 体外培养结果显示，新鲜血管的平滑肌细胞体外培养24h后开始生长．PROH保存血管的平滑肌细胞在培养24～36h后开始生长；Me2SO保存血管的平滑肌细胞体外培养36～48h开始生长．而且再生细胞的数目显著少于前者，生长速度慢。透射电镜下，与新鲜血管的平滑肌细胞相比．PROH或Me2SO冷冻保存后血管的平滑肌细胞的线粒体等细胞器均无显著变化。但是Me2SO保存血管的平滑肌细胞核染色质的电子密度发生显著变化，异染色质的电子密度明显降低，与新鲜或PROH深低温保存血管平滑肌细咆核常染色质的低电子密度和异染色质的高电子密度明显不同。④结论 1.5mol／L PROH能够有效地保持平滑肌细胞的活性．并且对细胞的再生能力没有明显的损伤作用。Me2SO损伤平滑肌细胞的再生能力、同时引起平滑肌细胞核染色质超做结构的变化。     

纤维蛋白刺激平滑肌细胞的增生和胞内胆固醇堆积

在培养的家兔主动脉平滑肌细胞上观察到，纤维蛋白能够剂量依赖性地刺激平滑肌细胞增生，刺激胶原合成，增加细胞内胆固醇堆积，提示纤维蛋白很可能参与了动脉粥样硬化的发生。