高水平氨基糖苷耐药肠球菌的监测

目的了解高水平氨基糖苷耐药(HLAR)肠球菌的分离率,探讨青霉素类或糖肽类与氨基糖苷类药物合用对院内感染肠球菌的协同杀菌作用,为临床治疗肠球菌感染提供参考与指导.方法采用VITEK-AMS仪器对分离自临床标本的101株肠球菌进行氨苄西林、青霉素、万古霉素耐药性和高水平庆大霉素耐药(HLGR)及高水平链霉素耐药(HLSR)测定.结果101株肠球菌中,粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、母鸡肠球菌和耐久肠球菌菌株分别为71、13、8、7和2株.药敏测试结果显示肠球菌对氨苄西林、青霉素、万古霉素耐药分别为21、34和0株;HLGR和HLSR分别为79株和46株. 结论院内感染肠球菌对抗菌药物存在严重耐药性,合理的抗菌药物治疗对高水平氨基糖苷耐药肠球菌感染患者的康复尤为重要.     

高水平氨基糖苷类耐药肠球菌体外耐药监测

目的了解肠球菌的分布和高水平氨基糖苷类耐药肠球菌（HLAR）的耐药现状,为临床合理用药提供依据。方法鉴定采用API鉴定系统,抗生素敏感试验采用Kirby—Bauer纸片扩散法。结果2005年1月至2007年9月检出肠球菌292株,43．1％来源于尿液标本;粪肠球菌占65．3％,屎肠球菌占30．1％,HLAR检出率占80．5％。粪肠球菌和屎肠球菌、HLAR和非HLAR的耐药性均不同。结论加强肠球菌的鉴定和HLAR的检测,有利于临床根据体外药敏试验结果选择用药。     

肠球菌氨基糖苷类高水平耐药基因的检测

目的调查肠球菌对高水平氨基糖苷类的耐药情况，并检测其耐药基因。方法琼脂稀释法筛选对氨基糖苷类高水平耐药的肠球菌，PCR扩增5种高耐药基因：双功能酶AAC(6′)-APH(2″)的编码基因aac(6′)-Ie—aph(2″)-Ia，磷酸转移酶APH(2″)-Id、APH(2″)-Ib的编码基因aph(2″)-Id、aph(2″)-Ib，核苷酸转移酶ANT(6-′)、ANT(3″)(9)的编码基因ant(6′)-Ia和ant(3″)(9)，并通过PCR产物的基因测序及寡核苷酸探针斑点杂交试验验证结果的可靠性。结果粪肠球菌对氨基糖苷类高水平耐药率达63％，屎肠球菌达84％。95％以上庆大霉素高耐肠球菌(HLGR)检测到aac(6′)-Ie—aph(2″)-Ia、3株HLGR肠球菌检测到aph(2″)-Id，99％以上HLSR肠球菌检测到ant(6′)-Ia。结论肠球菌对氨基糖苷类高水平耐药十分普遍，双功能酶AAC(6′)-APH(2″)、核苷转移酶ANT(6′)分别介导了大多数肠球菌对庆大霉素、链霉素的耐药。     

氨基苷类高水平耐药肠球菌的耐药性及修饰酶基因分布

目的明确临床分离的氨基苷类高水平耐药肠球菌（HLAR）耐药性及修饰酶基因类型。方法用琼脂筛选法筛选出HLAR、庆大霉素高水平耐药肠球菌（HLGR）及链霉素高水平耐药肠球菌（HLSR）；采用K—B法测定粪肠球菌及屎肠球菌对12种抗菌药物的耐药性；PCR及序列分析法检测7种氨基苷类修饰酶基因。结果肠球菌中HLAR为73．6％。利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁对HLAR的抗菌作用最好，未检出耐药株。屎肠球菌中B内酰胺类抗生素耐药株以及喹诺酮类药物耐药株明显高于粪肠球菌。所有的屎肠球菌氨基苷类高耐株对氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦及环丙沙星均耐药。aac（6′）-Ie-aph（2″）-Ia基因是HLGR的主要耐药基因，占HLGR的92．6％；3株HLGR存在与aph（2″）-Id高同源性的基因。而6′-ant、3″-ant及str基因在HLSR中的检出率低。结论HLAR已成为医院感染的重要耐药菌。HLGR主要通过aac（6′）-Ie-aph（2″）-Ia基因编码的修饰酶造成对庆大霉素高度耐药。     

氨基糖苷类高水平耐药肠球菌的耐药及分子机制的研究

目的分析氨基糖苷类高水平耐药（HighLevelAminoglyeosideResistant,HLAR）肠球菌的耐药性与耐药基因,并研究其耐药分子机制。方法采用VITEK-2全自动鉴定仪法测定53株氨基糖苷类高水平耐药肠球菌对11种抗菌药物的最小抑菌浓度,用聚合酶链反应（PCR）检测肠球菌转座子Tn917和Tnl546／Tn916、红霉素耐药基因er—mB、毒力岛基因mefA、I类整合酶Intll、氯霉素耐药基cat、表面蛋白基因esp,并对万古霉素耐药肠球菌（Vancomy—cin—resistantEnterococc,VRE）进行基因分型（vanA、vanB、vanC）。结果53株肠球菌检出含ermB26株,占49．0％;含mefA9株,占17．0％;含Tnl546／Tn91619株,占35．8％;含Tn91711株,占20．8％;含Intll26株,占49．1％;含esp15株,占28．3％;未检出cat。53株肠球菌对复方新诺明全部耐药,对红霉素耐药高达94．3％,对高水平庆大霉素、高水平链霉素、环丙沙星、四环素和氨苄西林的耐药率分别为75．5％、73．6％、75．5％、66．0％、62．3％;对利奈唑胺和替考拉宁的敏感率高达98．1％;1株耐万古霉素,其基因和表型均为VanA。结论HLAR肠球菌可携带多种耐药基因,耐药基因与肠球菌耐药性密切相关,可能在多重耐药机制中起重要作用。     

导致高水平氨基糖苷类抗生素耐药的新型16S rRNA甲基化酶研究进展

氨基糖苷类抗生素通过与细菌30S核糖体的16S rRNA亚单位结合，导致读码错误，干扰蛋白合成从而阻止细菌生长。氨基糖苷类抗生素作为一类高效、广谱的抗生素，因其具有浓度依赖性的快速杀菌、可与细胞壁活性抗菌药物产生协同作用的特点，一直是临床上治疗革兰阴性菌所致严重感染的重要药物。但是随着该类药物在临床上的广泛应用，     

肠球菌庆大霉素高水平耐药机理的研究进展

肠球菌已成为医院感染的重要病原。从70年代首次报道肠球菌高耐庆大霉素开始,肠球菌对庆大霉素等氨基糖苷类药物的高水平耐药不断增加,如希腊在1993～1994年粪肠球菌和屎肠球菌对庆大霉素高水平耐药(HLGR)发生率2 0 %左右,1996～1997年则分别达到4 3 7%和2 6 3% ;北京四家医院1997～2 0 0 1年临床分离肠球菌耐药性的分析结果显示粪肠球菌和屎肠球菌HLGR发生率高达4 7 4 %和6 4 9% [1] ,屎肠球菌的耐药率明显高于粪肠球菌[2 ] 。近年来,肠球菌对庆大霉素高水平耐药的机理已有了较深入的研究,对其全面了解将有助于指导临床合理用药、新…     

屎肠球菌高水平庆大霉素耐药基因研究

目的研究我国临床分离高水平庆大霉素耐药屎肠球菌中庆大霉素耐药基因分类及其水平传递情况。方法采用PCR法检测庆大霉素耐药基因aac（6’）-Ie-aph（2″）-Ia、aph（2″）-Ib、aph（2″）-Ic、aph（2″）-Id和aph（3″）-Ⅲa，采用质粒酶切图谱分析耐药菌同源性，采用液体传递和固体传递法研究庆大霉素耐药基因水平传递情况。结果105株临床分离屎肠球菌中，76．2％（80／105）为高水平庆大霉素耐药，其中aac（6′）-Ie-aph（2″）-Ia基因阳性率为95．0％（76／80），aph（3″）-Ⅲa基因阳性率为78．8％（63／80），aph（2″）-Ib、aph（2″）-Ic、aph（2″）-Id基因皆阴性。这些高水平庆大霉素耐药屎肠球菌间大多无明显同源性。21．1％（16／76）菌株携带的aac（6’）-Ie-aph（2″）-Ia基因在屎肠球菌间固体传递，13．2％（10／76）菌株携带的aac（6’）-Ie-aph（2″）-Ia基因在屎肠球菌间液体环境中水平传递。结论本次研究中屎肠球菌中高水平庆大霉素耐药主要由aac（6’）-Ie—aph（2″）-Ia和aph（3″）-Ⅲa基因介导，这些菌株间没有明显同源性，且该基因可在屎肠球菌间水平传递。     

肠球菌属产氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的：了解肠球菌耐氨基糖苷类药物的耐药机制和耐药基因流行状况。方法：对22株肠球菌进行了氨基糖苷类修饰酶aac(6’)／aph(2”)、aph(3’)-Ⅲ和ant(6)-Ⅰ基因的研究。结果：22株肠球菌中9株为高浓度庆大霉素耐药，14株为高浓度链霉素耐药；aac(6’)／aph(2”)、nph(3’)-Ⅲ和ant(6)-Ⅰ基因阳性分别为15株(68．2％)、13株(59．1％)和10株(45．5％)。对2株粪肠球菌和2株屎肠球菌进行3种基因的聚合酶链反应阳性产物测序。测得序列与GenBank已登录的序列作比较结果一致。本研究测得序列并已登录GenBank(登录号分别为AY602207、AY602208、AY602210、AY602211、AY602212、AY602213、AY626918、AY626919、AY626921、AY626922、AY626923)。结论：提示国内肠球菌产氨基糖苷类修饰酶的比率已较高。     

A surveillance of high-level gentamicin-resistant enterococcal bacteremia

Enterococci have recently been recognized as a causative organism of intractable infections, including severe sepsis and infective endocarditis, in immunocompromised patients. This study investigated the epidemiological, microbiological, and prognostic characteristics of high-level gentamicin-resistant (HLGR) enterococcal bacteremia, including severe cases of infective endocarditis, in Japan. A total of 155 enterococcal bacteremia episodes were identified between July 2007 and December 2009. HLGR strains accounted for 28% of all enterococcal strains: HLGR Enterococcus faecalis/Enterococcus faecium strains accounted for 32%/24%. The 30-day mortality rate was 31%. There was no significant difference in the 30-day mortality rates between HLGR and non-HLGR enterococcal bacteremia. There were two cases of HLGR enterococcal endocarditis, which were successfully treated with ampicillin plus ceftriaxone. We consider it important to examine the presence or absence of HLGR strains in all cases of intractable enterococcal infection, especially infective endocarditis.     

屎肠球菌高耐庆大霉素转座子Tn5281的检测

目的　研究高耐庆大霉素 (HLGR)屎肠球菌耐药性与转座子的关系。方法　用聚合酶链反应 (PCR)检测 48株HLGR屎肠球菌Tn5 2 81转座子 ,扩增产物用斑点杂交和测序法验证。结果　 48株HLGR屎肠球菌中 ,13株含有完整的Tn5 2 81,2 6株含有缺少右侧插入序列IS2 5 6的Tn5 2 81缺失型 ,9株不含Tn5 2 81,总阳性率为 81. 3 %。结论　Tn5 2 81在屎肠球菌高耐庆大霉素中起着重要作用。     

Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus with high-level resistance to mupirocin

Staphylococcus aureus with high-level mupirocin resistance has rarely been isolated in Japan. We detected methicillin-resistant S. aureus (MRSA) with high-level mupirocin resistance (HLMR-MRSA; MIC ≥1,024 μg/ml) in a surveillance program of invasive MRSA infection in the Minami Ibaraki Area of Japan. The other 177 strains surveyed in the program showed susceptibility or low-level resistance to mupirocin. The HLMR-MRSA strain, named 115, was isolated from the blood of a patient with peripheral venous catheter-associated infection. The patient had not received administration of mupirocin before the isolation of strain 115. Another HLMR-MRSA strain, named 257, was recovered from the patient’s sputum obtained 1 year after the infection. Close relatedness between genotypes of strains 115 and 257 indicated persistent colonization of strain 115 on the patient. In contrast, no HLMR-MRSA was detected in materials submitted from other inpatients treated in the same wards during the same period, demonstrating that horizontal transmission of HLMR-MRSA did not occur.     

革兰阴性菌中整合子携带氨基糖苷类耐药基因的分布

目的研究湖南地区革兰阴性菌中整合子的流行现状及其携带的耐药基因的特点。方法收集183株革兰阴性菌,MIC法检测其药敏活性,利用不同的引物PCR筛查整合子的种类及整合子可变区,RFLP分析可变区,并测序确定其所携带的耐药基因盒内容。结果细菌均为多重耐药菌;整合子检出率为54.6%,均为Ⅰ类整合子;携带5种整合子可变区,分别是0.75 kb,1.0 kb,1.8 kb,2.0 kb,3.0 kb;可变区内容为intI1-dfr15-aadA2-qacE△1-ampR,dhfrⅫ-orfF-aadA2,aacA4-catB8-aadA1,dhrfⅫ-aadA2,intI1-dfrA12-aadA2-qacE△1-sul1-ISCR1-blaCTX-M-14-IS903。结论Ⅰ类整合子广泛分布于我院分离的革兰阴性菌中,广泛携带氨基糖苷类和磺胺类耐药基因。氨基糖苷类耐药基因盒的高频出现与抗生素选择性压力无关。     

对高浓度氨基糖甙类耐药菌株肠球菌的调查

为了解肠球菌的抗药情况，应用含单－高浓度抗生素肉汤试管法和琼脂平皿法以及高含量纸片扩散法，检测临床标本中分离的８６珠肠球菌对庆大霉素和链霉素的高度耐药菌株（ＭＩＣｓ≥２０００μｇ／ｍｌ）。结果表明，抗庆大霉素高度耐药菌株５９株（６９％），抗链霉素高度耐药菌株５２株。全部试验菌株对万古霉素敏感。提示临床应慎用抗生素，要选择敏感药物进行有效地治疗。