Duffy血型的基因分型

目的 建立Duffy血型基因分型方法。方法 根据Duffy血型cDNA结构,合成分型引物,建立聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）分型方法,对102例浙江省汉族无血缘关系的献血者进行基因分型。结果 PCR-SSP分型方法与血清学分型方法结果完全一致,102例浙江省汉族人,Fy^a纯合子91例（89.22%),Fy^aFy^b杂合子10例（9.80%),Fy^b纯合子1例（0.98%)。Fy^b基因频率0.9412,Fy^b基因频率0.0588。结论 PCR-SSP对Duffy血型基因分型,具有方法可靠、稳定,试剂来源广泛等优点,适合于临床常规应用,浙江省汉族Duffy血型基因以Fy^a为主。     

Duffy血型的基因分型

目的建立Duffy血型基因分型方法。方法根据Duffy血型cDNA结构,合成分型引物,建立聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分型方法,对102例浙江省汉族无血缘关系的献血者进行基因分型。结果PCR-SSP分型方法与血清学分型方法结果完全一致,102例浙江省汉族人,Fya纯合子91例(89.22%),FyaFyb杂合子10例(9.80%),Fyb纯合子1例(0.98%)。Fya基因频率0.9412,Fyb基因频率0.0588。结论PCR-SSP对Duffy血型基因分型,具有方法可靠、稳定,试剂来源广泛等优点,适合于临床常规应用。浙江省汉族Duffy血型基因以Fya为主。     

四川省汉族人群Duffy血型基因分型研究

目的研究四川地区Duffy血型基因型分布,为建立红细胞库奠定基础。方法对150名汉族健康献血者采用PCR-SSP方法进行Duffy血型系统进行基因分型检测。结果四川地区汉族人群Duffy基因分型检测结果,Fya基因频率为:0.929.Fyb:0.071;检出3例Fy(a-b-)个体。结论 PCR-SSP法检测Duffy血型简单、快捷、准确,为建立红细胞库奠定了基础。     

PCR-SSP法检测Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因分型研究

目的调查Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因分型情况。方法用分子生物学技术(PCR-SSP)进行DNA水平的检测,并以Rh阳性无偿献血者作为对照。结果Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因频率为Fya=0.9252,Fyb=0.0747;而Rh阳性无偿献血者的基因频率为Fya=0.95,Fyb=0.05。无Fy(a-b-)个体。结论Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因分型结果显示和Rh阳性无偿献血者无明显差异。     

内蒙古自治区满族Duffy血型分布

笔者曾于1992年10月对内蒙古呼和浩特市满族人Duffy血型分布进行调查,现报告如下.     

PCR-高分辨熔解曲线法在Kidd血型基因分型中的应用

目的:探讨PCR-高分辨熔解曲线(HRM)法在Kidd血型基因分型中的应用。方法:采用简单随机抽样法,选择2019年10月至11月,于深圳市血液中心参加无偿献血的256例献血者为研究对象。本组献血者年龄为18～60岁;男性献血者为142例,女性为114例。采用血型血清学试验方法对本组献血者全血标本的红细胞抗原表型进行检...     

熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型的研究

目的探讨熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型,了解大连地区汉族人群HPA-15基因多态性。方法设计合成HPA-15等位基因特异性引物和1条公共引物,其中在2条等位基因特异性引物的5'末端分别加入具有不同长度并富含GC碱基的序列。使用这3条引物,进行实时PCR反应。在PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,进行基因分型。应用熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法对100名大连地区汉族人群的血液标本进行HPA-15基因分型。此外对熔解曲线分析法的重复性进行评价。结果 100个血液标本的熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法的基因分型结果是完全一致的。10个血标本的2次熔解曲线分析结果是一致的。大连地区汉族人群HPA-15a、-15b基因频率分别为0.58和0.42。大连地区汉族人群与国内部分地区汉族人群相比,HPA-15等位基因频率的差异无统计学意义(P>0.05)。与新疆维吾尔族人群相比,HPA-15等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HPA的熔解曲线基因分型方法具有快速、简单、准确、通量高、重复性好等优点,要优于常规的PCR-SSP法。在国内HPA-15等位基因分布存在着种族差异。     

温州地区人群Duffy血型基因频率分布及供受者Duffy血型不相合情况调查

目的了解本地人群Duffy血型基因频率的分布以及输血供受者Duffy血型不相合的情况。方法 2018年3月—2018年5月随机收集416(人)份温州献血者的血液标本(5 mL/份,EDTA-K_2抗凝),采用间接抗球蛋白法测定其Duffy血型抗原;计算Duffy基因型及基因频率,根据基因频率计算本地供受(血)人群Duffy抗原不相合的机率。结果本组温州地区献血人群的FYA和FYB基因频率分别为0.942 3和0.057 7,观察值与期望值符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律并与国内其他地区献血者人群相近(P>0.05),Duffy血型Fy~a和Fy~b抗原供受者不相合机率分别为0.003 3和0.099 6,总不相合几率0.102 9。结论温州地区献血人群Duffy血型基因频率符合中国汉族人群该基因频率的分布特征;供受者Fy~a和Fy~b抗原不配合机率为建立本地献血者Duffy血型资料库、进一步保障临床用血安全提供依据。     

深圳献血人群Duffy血型基因多态性的研究

目的建立Duffy血型的分子生物学检测方法,研究深圳献血人群Duffy血型基因多态性。方法在2011年8～11月本中心900名无血源关系献血者标本中,用卡式微柱凝胶抗球蛋白方法鉴定Duffy血型表现型,建立Duffy血型的基因分型方法 PCR-SSP法及PCR产物直接测序法,对900例标本DNA进行PCR-SSP法检测,其中50例做Duffy血型基因编码区域序列测定。结果血清学结果为Fy(a+b-)855例,Fy(a+b+)43例,Fy(a-b+)2例,Fy(a-b-)0例。900例Duffy血型PCR-SSP法基因分型结果与血清学表现型完全一致。50例FY基因编码序列部分测序结果与血清学、PCR-SSP法吻合,表现型FY(a+b-)标本测序结果可见FY基因第2外显子第125位核苷酸碱基为纯合子G;表现型FY(a-b+)标本测序结果为第125位核苷酸碱基为纯合子A。结论 Duffy血型PCR-SSP基因分型方法及PCR产物直接测序法可以正确地鉴定Duffy基因型,适用于Duffy血型基因多态性的研究。深圳地区Fya的基因频率为0.973 9,Fyb的基因频率为0.026 1。     

High-Resolution Melting Curve Analysis to Predict Extended Blood Group Phenotypes among Thai Donors and Patients

BackgroundHigh-resolution melting (HRM) analysis is an alternative method for red cell genotyping. Differences in melting curves between homozygous and heterozygous genotypes can predict phenotypes in blood group systems based on single-nucleotide polymorphisms. This study aimed to implement HRM analysis to predict additional extended blood group phenotypes in Thai donor and patient populations.MethodsBlood samples obtained from 300 unrelated Thai blood donors and 23 patients with chronic transfusions were included. HRM analysis was developed and validated in genotyping of KEL*01 and KEL*02, JK*01 and JK*02, FY*01, FY*02, and FY*02 N.01, DI*01 and DI*02, GYPB*03 and GYPB*04, RHCE*E and RHCE*e, and DO*01 and DO*02. Then genotyping results from HRM and polymerase chain reaction with sequence-specific primer (PCR-SSP) and phenotyping results were compared.ResultsThe validated genotyping results in known DNA controls by HRM analysis agreed with DNA sequencing. The genotyping results among 300 donors in 15 alleles by HRM analysis were in complete concordance with those obtained by serological testing and PCR-SSP. The sensitivity and specificity of the HRM assay were both 100%. Among patients, 13 had alloantibodies that possessed predicted antigen-negative phenotypes corresponding to those antibody specificities, and the highest probability of genotyped-matched donors was given to the remaining patients.ConclusionsWe developed and implemented the HRM analysis assay for red cell genotyping to predict extended blood group antigens in Thai donor and patient populations. The data from this study may help inform about and support transfusion care of Thai patients to reduce the risk of alloimmunisation.     

南京汉族人群Duffy血型等位基因FYES及FYX调查研究

目的研究南京地区汉族人群中Duffy血型等位基因FYES及FYX的表达情况。方法随机提取200例无偿献血者EDTA-K2抗凝外周血血样DNA,采用PCR-SSP方法进行Duffy血型FYA、FYB等位基因分型;采用Sanger双脱氧链末端终止测序法分析Duffy血型FYES及FYX等位基因序列特点。结果PCR基因分型结果与测序结果一致,200例标本中,检出FYA/FYA 180例,FYA/FYB 20例;测序结果表明,200例标本中未发现FYES及FYX等位基因表达。结论 FYES及FYX等位基因在中国南京地区汉族人群中表达频率极低,与其他人种相比具有显著性差异。     

不同基因亚型乳腺癌组织中Duffy抗原趋化因子受体表达的研究

目的：探讨不同基因亚型乳腺癌组织中Duffy抗原趋化因子受体（duffy antigen receptor for chemokines,DARC）的表达差异。方法：中国福利会国际和平妇幼保健院乳腺癌临床组织标本300例,患者年龄28~80（53.74±11.37）岁,通过免疫组织化学技术检测DARC、雌激素受体（estrogen receptor,ER）、孕激素受体（progesterone receptor,PR）、细胞角蛋白5（cytok-eratin5,CK5）、人表皮细胞生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）、人表皮细胞生长因子受体2（epidermalgrowth factor receptor2,HER2）表达,并分析DARC在不同基因亚型乳腺癌组织中的表达差异。结果：38.60%基底细胞样乳腺癌组织中DARC呈高表达,46.15%HER2型乳腺癌组织中DARC呈高表达,76.92%腔内导管上皮A型乳腺癌组织中DARC呈高表达,55.68%腔内导管上皮B型乳腺癌组织中DARC呈高表达,63.16%类正常腺体型乳腺癌组织中DARC呈高表达。各组之间的DARC表达差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：不同基因亚型乳腺癌组织中DARC表达有显著差异。     

流式细胞术应用于Kidd血型Jka抗原检测的建立

目的:建立流式细胞术鉴定Kidd血型Jka抗原的实验方法,并验证其准确性。方法:随机选取96(人)份无偿献血者血液样本,将红细胞与IgG性质抗-Jka混合孵育,随后结合荧光素Alexa Fluor 647标记的羊抗人IgG二抗,采用流式细胞术检测样本红细胞表面Jka抗原。通过流式细胞术获得每个样品的荧光直方图。利用血清学凝集试验比较衡量流式细胞术检测Jka抗原强度的准确性,利用PCR-SSP与基因测序分型验证流式细胞术检测Jka抗原阴阳性的正确性。结果:流式细胞术对于红细胞Jka抗原强度的检测与血清学鉴定结果相一致,血清学凝集强度越高,流式细胞术检测荧光强度也越高,Jka抗原强度也越高。流式细胞术检测灵敏度优于血清学方法,Jka抗原阳性包括弱阳性样本与阴性样本的荧光强度差别很大,极易区分。全部样本流式细胞术检测结果与基因分型结果完全一致,证实了流式细胞术的准确性。结论:成功建立了流式细胞术鉴定红细胞Kidd血型Jka抗原的方法,灵敏度优于传统的血清学方法,可以准确区分不同强度的Jka血型抗原。     

Duffy血型基因定型及其用于HDN产前诊断的探讨

目的　探讨用分子生物学方法检测血液Duffy血型基因型及该方法应用于HDN产前检查的可行性。方法　采用聚合酶链反应 限制性酶切片短长度多态性 (PCR RFLP)方法检测Duffy基因型。结果　用本研究采用的方法检出了 90例中国辽宁地区汉族血液样品Duffy血型的 3种基因型 ;检测出丈夫为Fy(a+b - )型、本人为Fy(a -b +)型的孕妇羊水样品 1例 ,其Duffy基因型为FYAFYB。结论　本方法可准确检测血液及羊水样品的Duffy基因型 ,可用于Duffy血型不合引起的HDN的产前诊断     

The Duffy blood groups of Jarawas - the primitive and vanishing tribe of Andaman and Nicobar Islands of India

Andaman and Nicobar Islands, union territory of India were inhabited by 14 aboriginal tribes. Some of these tribal populations have already become extinct, and the numbers of the existing ones are also dwindling. This group of islands being highly endemic for malaria, it was considered worthwhile to study the hunter-gatherer primitive tribe, Jarawas, for their Duffy blood group phenotype. Jarawas, the primitive tribe of Andaman Islands, inhabit the three jungle areas of South and one jungle area of Middle Andaman. Blood samples of 116 Jarawas were collected and tested for Duffy blood group and malarial parasite infectivity. The Duffy blood grouping was performed as per standard serological techniques, and peripheral smears were screened for malarial parasite and if present parasite density count was performed and the species identified. The results showed a total absence of both Fy(a) and Fy(b) antigens in two areas (Kadamtala and R.K. Nallah) and low prevalence of Fy(a) antigen in another two areas (Jirkatang and Tirur). There was absence of malarial parasite Plasmodium vivax infection though Plasmodium falciparum infection was present in 27.59% of cases. A very high frequency of Fy (a-b-) in the Jarawa tribe from all the four jungle areas of Andaman Islands along with total absence of P. vivax infections suggests the selective advantage offered to Fy (a-b-) individuals against P vivax infection.     

猪红细胞血型抗原修饰异种输血的研究进展

异种器官移植所取得的突破性进展为异种输血的研究带来了曙光。人与猪的红细胞的血清学和生物化学特性有许多相似之处，因此猪就成为实现异种输血最具有可能性的红细胞供体，猪红细胞上存在异种抗原，包括αGal抗原和non-αGal抗原。αGal抗原和人血清中天然存在的抗αGal抗体结合后引起的免疫排斥反应在抗体介导的凝集反应中起主要作用。但是non-αGal抗原和人血清中天然存在的抗non-αGal抗体结合引起的免疫排斥反应作用也不能低估，经特定修饰，改造以及的猪红细胞，是来源丰富的异种血源。     

中国人群LW血型基因多态性的研究

本研究探讨中国人群Landsteiner—Wiener（LW）血型基因的多态性。随机采集深圳市血液中心160名非血缘关系无偿志愿捐血者外周血样EDTA抗凝血标本，并提取DNA。对这160例DNA标本直接进行LW血型基因的第一外显子测序分析，同时用优化的LWa／LWb等位基因PCR—SSP方法进行了的基因分型。结果表明：在对这160例捐血者基因组DNA的分子生物学研究中发现LW血型等位基因均为LWa纯合子。结论：在中国人群中LWa等位基因更常见，本次研究中100％的献血者LW血型等位基因均为LWa，目前还未发现LWb等位基因。