用增强的化学发光免疫分析法测定血清中庆大霉素的含量

以微晶纤维素—庆大霉素偶联物为固相抗原,兔抗庆大霉素为一抗,HRP—驴抗兔为标记二抗,以鲁米诺—对羟基联苯—过氧化氢为化学发光体系,用竞争抑制法测定庆大霉素。庆大霉素(含血清)的线性范围为0.03～1.0μg/tube,检出限为3.3～11.4ng/tube,双对数线性相关系数|r|=0.981±0.016,回收率88.2±4.5％,基本上符合临床对庆大霉素监测要求。     

固相生物素－亲和素ELISA检测HIV抗体方法的建立与应用

采用生物素化ＨＩＶ合成肽抗原与预吸附在ＥＩＡ反应板上的亲和素结合，建立检测ＨＩＶ抗体的固相生物素－亲和素ＥＬＩＳＡ方法。经ＨＩＶ（１＋２）抗体参考血清Ｐａｎｅｌ检定，其灵敏度（１３／１３）１００％，特异性（２８／２８）１００％，批内变异系数＜７％，批间变异系数＜１０％。１０５６８例确认血清标本验证，阳性检出率１００％，阴性总符合率９９．８％，假阳性率０．２％。与常规间接ＥＬＩＳＡ法比较，本法操作简便，试验所需时间短，灵敏度、特异性和稳定性提高明显     

用化学发光法测定辣根过氧化物酶几种体系的研究

作者采用四种体系,确定了用化学发光法测定辣根过氧化物酶(HRP)的最佳测定条件和操作步骤。用鲁米诺-H_2O_2(NaOH)可以方便地测定0.05～4pmol HRP,绝对检测限16fmol。用邻苯二酚-H_2O_2(pH6.5)体系可测定0.1～100pmol HRP,绝对检测限3～17fmol。用鲁米诺-H_2O_2-对碘苯酚(pH8.5)体系,可由1分钟时的光强度测定10～50fmol HRP,绝对检测限10fmol。用对羟基联苯代替对碘苯酚,测1或3分钟时的光强度可测定6～40fmol HRP,绝对检测限6.5或3.3fmol.     

生物素化壳聚糖微球用于体外肿瘤靶向治疗

生物素－亲和素介导的肿瘤靶向治疗是近几年来肿瘤早瘤早期诊断、治疗研究的热点，将包封有ＴＮＦα的壳聚糖微球生物素化，以生物素化无唾液酸胎球蛋白为导向系统，采用“三步法”研究了微球体外抗肿瘤毒性实验。结果表明：生物素化壳聚糖微球对体外培养的肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１有显著的抑制作用（抑制率为６０．８％，Ｐ〈０．０１）。     

化学发光免疫法测定胰岛素的研究

作者以ABEI标记抗体,用双抗夹心法测定胰岛素含量,其固相化学发光采用 ABEI-CoCl_2-H_O_2体系,线性范围为每管0.3～150μU胰岛素,双对数回归方程的相关系数为0.985,绝对检测限为每管0.32μU胰岛素。     

生物素标记法分析MCF-10A细胞质膜蛋白质

 目的 优化细胞膜蛋白分离纯化技术,以期实现快速、高效分析细胞膜蛋白质。方法 本文以乳腺细胞系MCF-10A为模型,用sulfo-NHS-LC-biotin标记完整的活细胞,使细胞表面蛋白生物素化,细胞裂解后利用链亲和素对膜蛋白进行分离富集,再洗脱膜蛋白,达到分离纯化的目的。利用液相层析偶合串联质谱技术（liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）鉴定提取得到MCF 10A膜蛋白。结果 sulfo-NHS-LC-biotin浓度为0.2 mg/mL时得到的标记纯化膜蛋白最多,可作为标记最适浓度。利用这种方法鉴定出256个蛋白质,生物信息学分析表明其中膜蛋白占63%,比传统膜蛋白分离纯化方法得到的结果好。结论 这种方法省去常规分离膜蛋白时所需的超速离心,具有操作简单、可行性高、平行性高的特点,有望用于规模化肿瘤膜蛋白的差异比较,为肿瘤早期诊断及治疗提供新的靶标。     

不同生物素检测系统在核酸分子杂交检测中的应用——Ⅲ 链霉亲和素-碱性磷酸酶标记生物素检测系统

使用链霉亲和素(sA)结合碱性磷酸酶标记生物素(B-Ap)对斑点杂交结果进行检测。先摸索出sA和B-Ap的最佳浓度比。当反应液中sA浓度为1μg/ml,sA和B-Ap浓度比为1.7～2.0时,斑点杂交检测敏感性可达到pg水平。     

比色法测定硫酸庆大霉素滴眼液的含量

目的研究快速测定硫酸庆大霉素滴眼液含量的方法。方法根据庆大霉素在碱性条件下能与Cu2＋形成复合物，并有稳定的光吸收的原理，采用比色法测定硫酸庆大霉素滴眼剂含量，检测波长为560nm。结果庆大霉素在4．0～20．0mg/mL浓度范围内吸收度与浓度呈良好的线性关系，相关系数r=0．9998，平均回收率为99．5％，日内、日间相对标准误差（RSD）在1．3％～1．6％。结论本方法快速、简便、准确，可用于硫酸庆大霉素滴眼液的质量控制。     

头孢曲松和庆大霉素对铜绿假单胞菌协同作用的探讨

目的:讨论头孢曲松和庆大霉素对铜绿假单胞菌药敏试验中的协同作用,为临床用药提供依据。方法:用K-B法通过单一使用头孢曲松、庆大霉素以及头孢曲松和庆大霉素联合使用对40株铜绿假单胞菌进行药敏试验,并对结果进行分析。结果:铜绿假单胞菌对头孢曲松、庆大霉素、头孢曲松联合庆大霉素的敏感率分别为15.0%、35.0%和90.0%,经t检验比较,差异有显著性(P<0.01)。结论:头孢曲松和庆大霉素对铜绿假单胞菌的抗菌效果有明显的协同作用,临床在治疗怀疑铜绿假单胞菌感染时可经验使用二者联合用药。     

ICA和RIA及ELISA法测定CEA的比较

目的:比较测定癌胚抗原(CEA)的3种方法:磁粒子捕获免疫发光法(ICA)、放射免疫法(RIA)与酶联免疫吸附法(ELISA)。方法:分别进行线性、精密度、对比试验比较。结果:3种方法曲线相似但线性范围不同,ICA法最宽。精密度试验中ICA法批内为1.2%,批间为4.4%;RIA法批内为3.5%,批间为8.6%;ELISA法批内为13.6%,批间为20.1%。比较试验显示RIA与ICA的结果相关性比RIA与ELISA好。结论:ICA法测定CEA优于RIA和ELISA法。     

酶免疫法测定血清幽门螺杆菌特异性免疫复合物

目的建立酶免疫法测定血清幽门螺杆菌特异性免疫复合物(Hp-IC),并探讨其与Hp感染的关系.方法采用链霉亲和素-生物素技术建立夹心式酶免疫法定量测定血清Hp-IC.结果Hp阳性组血清Hp-IC浓度(0.571±0.496)mg/L,阳性率82.6%(199/241),显著高于Hp阴性组(0.033±0.024)mg/L,阳性率19.8%(39/197),P均＜0.01.血清Hp-IC测定,诊断Hp感染的特异性为80.2%,敏感性为82.6%.本法检测灵敏度2μg/L,批内差异2.8%,批间差异4.3%.结论血清Hp-IC与Hp感染密切相关,Hp-IC测定可作为Hp感染诊断的辅助指标之一.     

Imx 系统连续监测肝癌及慢性肝炎患者血清甲胎蛋白的变化

采用全自动免疫分析系统（Ｉｍｘ），对原发性肝癌（ＰＨＣ）、慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）患者的血清甲胎蛋白（ＡＦＰ）含量进行观察。结果：ＰＨＣ患者血清ＡＦＰ含量的异常率为７５％（６６／８８），ＣＡＨ患者的异常率为２１．８％（２２／１０１）。并对１１例ＰＨＣ患者进行了手术前后ＡＦＰ含量的动态观察，对１５例ＣＡＨ患者进行了ＡＦＰ含量连续监测。发现：ＰＨＣ患者术后ＡＦＰ持续增高者预后不良；ＣＡＨ患者ＡＦＰ持续增高有癌变的可能。提示：ＡＦＰ含量的变化与ＰＨＣ和ＣＡＨ的病程变化和预后相吻合。     

化学发光法测定大黄素大黄酚的淬灭系统研究

复方中成药制剂中有效成分的含量测定是鉴定中成药质量的关键之一，尤其是准确简便的方法更是当前药品检验工作所需要的。作者经优选试验，以鲁米诺－Ｈ２Ｏ２－Ｃｒ３＋为化学发光淬灭系统，确定了测定大黄素和大黄酚的最佳测定条件和操作步骤。测得大黄素的线性范围为１０－４～１０－８ｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９６５），检出限为１．５７×１０－９ｇ／ｍｌ；测定１０－７ｇ／ｍｌ大黄素时，ＲＳＤ为０．４％，回收率为９２．８±０．５％（ｎ＝６）。测定大黄酚可以得到同样满意的结果。本法用于经薄层分离后的中成药中大黄素、大黄酚的测定，结果与标准比色法一致。     

重症肌无力患者血清乙酰胆碱受体抗体与柠檬酸提取物抗体测定及其临床意义

研究重症肌无力（ＭＧ）病人血清乙酰胆碱受体抗体（ＡｃｈＲａｂ）与抗骨骼肌柠檬酸提取物抗体（ＣＡＥａｂ）的含量改变及临床意义。方法以固相酶联免疫吸附法测定１２３例ＭＧ病人血清ＡｃｈＲａｂ与ＣＡＥａｂ含量。结果两种抗体的阳性率分别为７８％和２４．４％，明显高于健康献血员和非ＭＧ病人组（Ｐ＜０．０１）。ＣＡＥａｂ在合并胸腺瘤组与临床无瘤组的阳性率分别为７１％和９．８％，差别有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论ＡｃｈＲａｂ的测定可为ＭＧ病人的早期诊断提供可靠的实验室依据，ＣＡＥａｂ的测定有助于合并胸腺瘤ＭＧ病人的早期发现。     

茜素红比色法测定血清钙的实验研究

为探讨应用某素比色法测定血清钙的实验方法及该法的线性、准确率、精密度、镁离子的干扰及ｐＨ的影响，对实验设计的有关指标进行测定；３份血清批内与批间的ＣＶ值分别为２．０９％～２．４３％与３．１２％～４．７７％；４份血清钙不同加入值的平均回收率为９９．５％；该法３０份血清与原子吸收分光光度法（ＡＡＳ法）相比较，其回归方程为Ｙ＝０．９７Ｘ＋０．０４，ｒ＝０．９６４。表明该法不仅可用于手工测定，而且可应用于自动分析仪。