骨髓来源的肝干细胞研究进展

骨髓干细胞具有自我更新和多向分化的潜能,在体内外的多项实验中证明,部分骨髓干细胞能分化为成熟肝脏细胞,或分泌白蛋白,或具有胆管细胞标志,尤其在受损及遗传缺陷肝脏中分化效率较高.目前有骨髓源性肝干细胞的动员、归巢、转化机制及调控已逐渐成为肝干细胞研究的热点,但仍有许多亟待解决的问题.鉴于骨髓干细胞的易于获得及体外培养技术相对成熟,有望用于肝细胞移植、生物型人工肝及基因载体,在治疗肝脏的感染性、遗传性和代谢性疾病以及肝肿瘤等有广阔的前景.     

人骨髓间充质干细胞向肝系细胞分化的实验研究

目的探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)诱导人骨髓间充质干细胞在体外向肝系细胞分化的可能性。方法人骨髓间充质干细胞来自成人骨髓,采用密度梯度离心法分离和反复贴壁法纯化。为有效地促进其向肝细胞分化,本实验使用了HGF和bFGF联合诱导的方法,于0、7、14、21、28d采用细胞免疫荧光法检测肝细胞表面标志甲胎蛋白(alpha_fetoprotein,AFP),细胞角蛋白(cytokeratin 18,CK_18)和细胞角蛋白(cytokeratin 19,CK_19),同时采用Periodic Acid_Schiff(PAS)染色检测诱导细胞糖原合成及贮存功能,并留取不同时段的培养上清液,用放射免疫荧光法(radioimmunoassay,RIA)法检测AFP的分泌量。结果在诱导14d后可观察到诱导细胞变成短梭形和多角形,随诱导时间延长多角形细胞增多,并可形成肝细胞样细胞集落。第14天时AFP,CK_18表达阳性,第21天诱导细胞糖原染色阳性,第28天CK_19表达阳性。培养上清液中14d时,检测到AFP的分泌,浓度为0.1ng/ml;17d时分泌量最高,为0.4ng/ml;21d时下降至0.3ng/ml。结论HGF和bFGF能够诱导人骨髓间充质干细胞在体外分化为肝细胞,这将为肝脏疾病的细胞替代治疗提供新的细胞来源。     

胚胎肝细胞提取液体外诱导骨髓干细胞向肝系细胞分化的实验研究

目的探讨胚胎肝细胞提取液体外诱导骨髓干细胞向肝系细胞分化的可行性。方法通过密度梯度分离法分离出骨髓中单个核细胞,进行体外培养和鉴定。在BMSCs传代培养7d后,把培养细胞分为诱导组和非诱导组;诱导组加入胚胎肝细胞提取液的培养体系,非诱导组加入不含胚胎肝细胞提取液的基础培养体系。在诱导培养d0,d10,d20,d30,d40对诱导分化的细胞进行形态学观察、肝系细胞特异性标志物的鉴定。结果①形态学:诱导培养2周后,长梭形细胞大多数转变成圆形、卵圆形及多角形,细胞呈肝干细胞样圆形。②免疫细胞化学检测:诱导培养d10～20细胞表达AFP、CKl9逐渐增强,d30~40逐渐减弱;诱导培养d10~40细胞表达ALB呈上升趋势;阳性染色细胞胞浆内出现棕黄色颗粒。非诱导组细胞不表达AFP、CKl9、ALB3种蛋白,为阴性染色。③糖原染色:诱导培养的细胞d10~40BMSCs均有糖原表达,非诱导细胞未见糖原表达(P﹤0.05)。结论胚胎肝细胞提取液在体外可以诱导骨髓干细胞向肝系细胞分化,并分化为具有合成、代谢、分泌及储存功能的肝系细胞。     

骨髓基质干细胞的研究进展

目的探讨骨髓基质干细胞的制备方法以及用于治疗的研究现状。方法阅读国内外大量相关文献，加以归纳总结，得出结论。结果骨髓基质干细胞具有分化潜能，易于取材及体外培养扩增，可以作为种子细胞，用于骨缺损等的修复有良好的应用前景。结论骨髓基质干细胞是良好的种子细胞，很有可能用于临床。     

骨髓间充质干细胞研究进展

干细胞是指那些具有高度增殖和多向分化的幼稚细胞。干细胞是近年来研究的热点，现在人们逐渐认识到骨髓中除造血干细胞以外，还含有另一类重要的干细胞一间充质干细胞(Mesenchymal stem cell，MSC)。随着组织细胞工程学和基因工程学的发展，利用MSC的多项分化潜能，在组织工程、细胞因子替代治疗、基因治疗中以及再生医学等方面的应用研究已成为热点。现将骨髓间充质干细胞研究进展作一综述。     

骨髓干细胞移植诱导肝细胞再生的研究进展

终末期肝病一直是临床治疗的难题，近年来肝移植的广泛开展为此病的治疗提供了光明的前景，但由于供体器官紧缺、费用昂贵以及移植后的并发症等问题，使临床应用受到很大限制。随着对干细胞研究的逐步深入，已证实干细胞具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能，而且能够分化为神经细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞等多种组织细胞。在肝脏严重受损、肝细胞增殖受抑制时，骨髓干细胞还具有定向分化为肝前体细胞、肝细胞、胆管上皮细胞的能力，并可能提供即时有效的肝功能，为宿主肝脏再生恢复赢得时间。正因为其潜在的应用前景，骨髓干细胞移植已成为研究的热点问题，现对目前骨髓干细胞移植诱导肝细胞再生的研究进展作一综述。     

成人骨髓含有干细胞

据海外媒体报道,美国明尼苏达大学干细胞研究所所长凯瑟琳日前说,成人骨髓含有能长成许多人体组织的干细胞。 凯瑟琳说:“我们在人体和鼠类细胞的骨髓中找到有能力在实验室中成长的干细胞。”     

骨髓间充质干细胞移植治疗帕金森病的研究进展

骨髓间充质干细胞是一类具有多向分化潜能的成体干细胞,它可在体外分离、培养、扩增及诱导分化,目前可分化为骨细胞、软骨细胞、肌细胞、神经细胞等,是组织工程的重要种子细胞之一。骨髓间充质干细胞转化为神经细胞并进行细胞替代或转基因治疗这一方法为神经系统退行性疾病的治疗提供了广阔的前景。     

大鼠脂肪和骨髓来源间充质干细胞成骨分化比较的体外研究

目的对骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞（AMscs）成骨能力进行比较。方法采用钙钴法染色、四环素荧光标记、Ⅰ型胶原染色、茜素红染色、碱性磷酸酶测定，比较脂肪间充质干细胞和骨髓间充质干细胞成骨能力。结果两种细胞诱导3周后，茜素红染色出现淡红色钙结节；四环素荧光染色出现明亮黄色荧光钙结节。改良钙钴法染色，细胞胞浆中出现黑色颗粒。结论（1）AMSCs向成骨诱导后，可表达Ⅰ型胶原、ALP，并出现钙结节。（2）AMSCs经过诱导后，可向成骨细胞方向分化。     

骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死的研究进展

骨髓间充质干细胞是一种多能干细胞,在一定条件下具有分化为各种组织的能力。心肌梗死是心血管病中最常见、最危重的病症之一,在全世界有很高的发病率。近年来,骨髓间充质干细胞给心血管疾病的治疗带来了新的希望。现就骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死的研究现状予以综述。     

自体骨髓间充质干细胞治疗矽肺的观察

目的 探讨自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗矽肺的安全性和治疗作用.方法 选取我院确诊的10例矽肺患者,经医学伦理委员会批准,患者签署知情同意书后,无菌抽取患者骨髓液100 ml,体外分离、纯化培养BMSCs,收获第3代BMSCs 5×107个,细胞质量检测合格后,用生理盐水50ml稀释,静脉滴注同输,每周1次,连续3次,其中3例患者采用肝细胞生长因子(HGF)基因修饰的自体BMSCs输注.移植后6个月、9个月,观察患者的临床症状、胸部CT、X线胸片、肺功能、T细胞亚群、血清中IgG、铜蓝蛋白(CP)等指标.结果 治疗9个月后,所有患者咳嗽、咳痰、胸闷症状基本消失;肺功能:最大肺活量(FVC)从治疗前平均(71.2％±17.0％)提高到(84.0％±10.9％),第1秒最大呼气量(FEV1.0)从治疗前平均(67.5％±17.7％)提高到(80.6％±14.9％),与治疗前比较,差异有统计学意义(P＜0.01);血清中CP和IgG较治疗前明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01);采用HGF基因修饰的自体BMSCs治疗的患者胸片和肺部CT提示有不同程度好转,肺纹理较治疗前减少、清晰,双肺结节影较治疗前缩小,边缘较治疗前清晰,结节影密集及分布均较治疗前有所减少.结论 自体BMSCs移植治疗矽肺对临床症状改善有一定效果,HGF基因修饰的自体BMSCs可使小结节影缩小,略有变淡,肺纹理较治疗前减少.     

母乳干细胞研究进展

近年来,人母乳干细胞(hBSCs)的提出使得对母乳细胞成分及优点的认识比以往更加多样化.其具有的非侵入性的细胞来源方式、多项分化潜能、自我更新能力等特点,在细胞替代疗法、再生医疗中具有重要意义.这将提供一个新的途径来描述母乳在生命早期的重要性,以及解释母乳如何对婴幼儿和成人远期健康产生积极的影响.本文将从母乳干细胞来源...     

Placental extract protects bone marrow-derived stem/progenitor cells against radiation injury through anti-inflammatory activity

Placental extracts have been reported to have anti-oxidative and anti-inflammatory activities. Because there is increasing evidence that ionizing radiation induces the release of reactive oxygen species (ROS) and inflammatory cytokines, we examined the protective effects of a placental extract against radiation injury. C57BL/6 mice were exposed to 1 Gy of γ-ray radiation every day for 5 days, and placental extract (1 mg/day) was administrated orally soon after each exposure. At 2 days after the last irradiation, mice were euthanized to examine the numbers, colony-forming capacity, and DNA damage of stem/progenitor cells in the peripheral blood and bone marrow. To understand the related mechanisms, we also measured the levels of intracellular and mitochondrial ROS, and 8-OHdG in the plasma and urine, and IL-6 and TNF-α in the plasma. Compared with the placebo treatment, oral administration of placental extract significantly increased the number and colony-forming capacity, but decreased the DNA damage of bone marrow stem/progenitor cells. However, neither the levels of intracellular and mitochondrial ROS in bone marrow cells, nor the levels of 8-OHdG in the urine and plasma significantly differed between groups. Interestingly, in comparison with the placebo treatment, placental extract significantly decreased the levels of the inflammatory cytokines IL-6 and TNF-α in the plasma. Placental extract significantly attenuated the acute radiation injury to bone marrow-derived stem/progenitor cells, and this protection is likely to be related to the anti-inflammatory activity of the placental extract.     

间充质干细胞治疗心脏疾患的研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)存在于多种组织内,是一种具有自我增殖和多项分化潜能的成体干细胞。MSCs体外易培养,且具有免疫调节特性,使其成为实现组织再生的种子细胞。动物心肌梗死模型证实MSCs体内移植,能够分化为心肌细胞和血管细胞,募集内源性心肌干细胞,分泌系列细胞因子,这些特性能够防止和逆转心室重构。Ⅰ期临床试验表明MSCs移植具有提高左室射血分数、抑制心室重构、减少瘢痕面积的作用。     

孤雌生殖和孤雌胚胎干细胞研究进展

孤雌生殖是没有精子参与的卵母细胞激活分裂和发育过程.孤雌生殖技术是获得组织相容性胚胎干细胞系的一项重要技术.孤雌胚胎干细胞既具有与正常胚胎干细胞相同的自我更新和多向分化潜能,又规避了人胚胎干细胞面临的伦理问题,日益受到重视.但孤雌胚胎干细胞系存在建系率低、分化能力有限和异常基因印迹等诸多问题,原因可能与缺乏父本基因有关.目前已经建立了小鼠、猴和人类的孤雌胚胎干细胞系.就近年孤雌生殖和孤雌胚胎干细胞的研究进展综述.     

肝脏疾病研究进展

国际肝病协会年会每2年1次,一般是与国际上一些地区性肝脏病协会年会一起召开,如美国肝病协会年会、亚太地区肝病协会年会和欧州肝病协会年会.今年的年会是与第37届欧州肝病协会年会同时召开,可以说是仅次于美国肝病协会年会的一次盛大的肝脏病领域的学术会议.会议于2002年4月15日～21日在西班牙的马德里召开的.讨论的议题较广泛,包括病毒性肝炎、肝硬化、肝癌、代谢性肝病、酒精性肝病、脂肪肝、自身免疫性肝炎等几乎所有的肝病领域.本文仅就病毒性肝炎及其相关的肝病研究进展作简要的介绍.     

造血干细胞移植治疗骨髓型急性放射病的研究进展

核武器爆炸或核物质泄漏导致的核事故,短时间内会造成急性放射病.人体接受剂量＞0.7Gy辐射可导致骨髓持久抑制即急性放射病,引起全血细胞减少、出血、感染等损伤.大量研究显示,造血干细胞移植是治疗骨髓型急性放射性疾病的主要手段.造血干细胞可以修复骨髓造血损伤,改善造血微环境,促进造血重建.在使用造血干细胞移植术前选择供者、...     

Autologous bone marrow-derived stem cell therapy in patients with severe peripheral arterial disorder

BACKGROUND AND AIMS: Amputation is the only current option for relief of rest pain or gangrene in patients with severe peripheral arterial disease. Up to now, no effective blood-flow enhancement therapies are available. Autologous bone marrow-derived stem cell transplantation is an arising therapy modality with an option of building new blood vessels through endothelial stem and/or progenitor cells. PATIENTS AND METHODS: Five patients with severe peripheral arterial disorder were treated by autologous bone marrow-derived stem cell therapy. CD34+, CD133+ and CD45+/- cell number and ratio were determined. CD34+ cells were isolated by magnetic separation and collected into a 10 ml sample. The cell suspension was administered by local intramuscular injections (0.5-1.0 ml injections in the musculus gastrocnemius). The follow-up (before; 1, 3, 6, 9 and 12 months after the autologous bone marrow-derived stem cell therapy) based on clinical (rest pain, walking distance without pain, changes of non-healing ischaemic ulcers, ankle-brachial index) and laboratory (angiography, Color- and Laser-Doppler scan, measurement of transcutaneous oxygen tension and endothelial function test) parameters was documented and analyzed. RESULTS: Improvement of pain and walking distance was observed in all five cases. In three cases the non-healing ischaemic ulcers disappeared, in one other case they became smaller and thinner, and in one case no change was realized. The average of ankle-brachial index improved significantly (before: 0.41, twelve months after: 0.83). New collaterals were detected by angiography in three patients, but duplex ultrasonography detected improvement in one patient only. Before and 1, 6 and 12 months after stem cell therapy the transcutaneous oxygen tension changed on the foot from 18.80/16.78/23.83/37.50 mmHg, and on the calf from 36.66/31.25/45.00/37.30 mmHg. The macro- and microcirculation parameters did not show improvement after 1 month, however, after 3, 6, 9 and 12 months improved parameters were recorded. Severe adverse events were not observed. In one case elevated level of serum creatinine phosphokinase, and in another case a mild form of vasculitis were detected. CONCLUSION: autologous bone marrow-derived stem cell therapy with isolated CD34+ cells is effective, safe and results in sustained clinical benefit for patients with severe peripheral arterial disease.