马桑内酯所致慢性癫痫大鼠海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋 …

用免疫组织化学方法研究了系统应用马桑内酯所致的慢性癫痫大鼠海马中星表胶质细胞伯胶质纤维酸性蛋白的表达。结果证明,整个海马的胶质纤维酸性蛋白免疫反应明显增强,并可见阳性细胞增生,胞体肥大,尤以齿状回门区和海分子腔隙层及始层为甚,此外,本实验还发现海胶质纤维酸性蛋白的阳性反应随发作后不同时间间隔（２ｈ～９ｄ）而不同,而直至发作后９ｄ胶质纤维酸性蛋白阳性反应程度仍高于对照组,此结果表明,马桑内酯所致癫痫     

TNFα激活的星形胶质细胞在慢性癫痫复发中的作用

目的：研究TNFα激活的星形胶质细胞在慢性癫痫复发中的作用。方法：分别用反相高效液相色谱法和免疫组织化学反应检测细胞释放谷氨酸（Glu）和NF－κBp65表达的变化。将TNFα激活的星形胶质细胞条件培养液（ACM）注射入慢性马桑内酯致痫发作间期大鼠之侧脑室,观察动物行为和脑电图的变化,并用免疫组织化学反应观察海马NF－kBp65和胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达的变化。结果：1．TNFα可明显促进星形胶质细胞释放Glu,并快速诱导星形胶质细胞核内NF－kBp65的表达。2．侧脑室注射ACM可引起大鼠4级癫痫行为及典型的痫样脑电图表现;注射ACM后0．5h即可观察到海马回特别是CA1区细胞核内p65的表达,2－4h达高峰,8h恢复至对照水平;注射ACM后1h海马GFAP免疫反应阳性细胞数开始高于对照组,4h达高峰,8h仍明显高于对照组。结论：TNFα激活的星形胶质细胞可通过释放可溶性的神经活性物质引起慢性癫痫的复发。     

马桑内酯所致慢性癫痫大鼠海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白的表达

用免疫组织化学方法研究了系统应用马桑内酯所致的慢性癫痫大鼠海马中星形胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白的表达。结果证明,整个海马的胶质纤维酸性蛋白免疫反应明显增强,并可见阳性细胞增生、胞体肥大,尤以齿状回门区和海马分子腔隙层及始层为甚。此外,本实验还发现海马胶质纤维酸性蛋白的阳性反应强度随发作后不同时间间隔（２ ｈ～９ ｄ）而不同,且直至发作后９ ｄ,胶质纤维酸性蛋白阳性反应程度仍高于对照组。此结果表明,马桑内酯所致癫痫反复发作可使海马星形胶质细胞内胶质纤维酸性蛋白的表达长期保持在较高水平。     

糖尿病模型大鼠海马区星形胶质细胞活化与凋亡的观察

目的:探讨糖尿病高血糖状态对于大鼠海马星形胶质细胞的影响。方法:应用链脲佐菌素(STZ)诱导Ⅰ型糖尿病SD大鼠模型,分为糖尿病模型1、2、3、4周和5周组(DM1,DM2,DM3,DM4,DM5),同周龄SD大鼠作为对照组。采用免疫荧光、免疫组化和Western Blot等技术,对比观察糖尿病大鼠海马区星形胶质细胞的形态、caspase-3和GFAP的表达情况。结果:免疫荧光和免疫组化检测结果显示:DM1和DM2大鼠海马区星形胶质细胞的胞体增大,突起增粗;DM3和DM4大鼠海马内星形胶质细胞的突起增粗、变长,其数量明显多于正常对照组(P0.05);而DM5大鼠海马内星形胶质细胞的突起僵硬,细胞数量有所减少,但仍高于正常对照组(P0.05)。Western Blot结果显示:DM3,DM4,DM5大鼠海马区GFAP含量明显高于对照组和DM1,DM2(P0.05)。caspase-3/GFAP免疫组化双标结果显示:DM1和DM2大鼠海马区偶见caspase-3阳性标记的星形胶质细胞;而DM3,DM4,DM5大鼠海马区caspase-3/GFAP双标细胞数明显多于正常对照组(P0.05);其中DM5双标阳性细胞数明显多于DM3和DM4(P0.05)。结论:糖尿病高血糖早期可激活星形胶质细胞,持续性糖尿病高血糖可诱导海马区星形胶质细胞活化的抑制,并引起星形胶质细胞凋亡。     

实验性糖尿病大鼠海马星形胶质细胞形态和凋亡的研究

目的:研究糖尿病高血糖大鼠海马星形胶质细胞形态和凋亡改变。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱导Ⅰ型糖尿病SD大鼠模型,并以正常SD大鼠作对照。分别于1、2、4周和8周用组织学、免疫组织化学、免疫荧光和Western Blot等方法对比研究糖尿病高血糖对大鼠海马区星形胶质细胞形态和凋亡的作用。结果:与正常对照比较,大鼠糖尿病高血糖1~2周,脑组织结构基本正常,海马区固缩神经元偶见,4~8周固缩神经元数明显(P0.05),出现轻微脑水肿,星形胶质细胞胞体轻度肿胀;免疫荧光和免疫组织化学检测显示,糖尿病高血糖1~2周,星形胶质细胞胞体增大和突起增粗,4~8周时突起增粗变长,星形胶质细胞数量减少(P0.05);Western Blot结果表明,大鼠糖尿病高血糖4~8周时,脑组织胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)含量明显升高(P0.05);免疫组化双标显示,糖尿病高血糖大鼠1~2周偶见cleavedcaspase-3阳性标记的星形胶质细胞(P0.05),4~8周海马区双标阳性细胞数明显增多(P0.01)。结论:大鼠糖尿病高血糖早期对星形胶质细胞可能有激活作用,而持续的糖尿病高血糖则可抑制海马区星形胶质细胞,并可能导致星形胶质细胞凋亡。     

慢性砷中毒对小鼠海马CA1区星形胶质细胞的影响

目的观察慢性砷中毒对成年小鼠海马CA1区星形胶质细胞的影响,探讨慢性砷中毒对成年小鼠脑部的神经毒性。方法选取健康成年昆明小鼠60只,雌雄各半,分为对照组、慢性砷中毒组,每组30只,分别以蒸馏水、1/10 LD50As2O3即As2O34.5 mg·kg^4.d^-1灌胃,连续3个月,根据其体重变化随时调整用药剂量。灌胃结束后,采用Y型电迷宫检测各组小鼠学习与记忆的功能,其后取小鼠海马组织,利用免疫组织化学技术检测砷中毒对小鼠海马CA1区胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响。结果与正常对照组比较,砷中毒组小鼠的学习、记忆能力明显低于对照组（P〈0.05）;免疫组化染色显示小鼠海马CA1区GFAP阳性细胞明显增多（P〈0.05）,阳性反应产物平均光密度增高（P〈0.05）。结论慢性砷中毒可引起小鼠海马CA1区星形胶质细胞反应性增生。     

大鼠大脑中动脉缺血后海马星形胶质细胞反应的研究

目的:观察大鼠大脑中动脉缺血后皮层损伤侧海马星形胶质细胞反应的变化。方法:采用大鼠大脑中动脉阻塞再灌流模型,应用免疫印迹和免疫组织化学方法测定脑缺血后3d、7d以及30d皮层损伤侧海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达,观察星形胶质细胞增殖的变化。结果:GFAP免疫组化结果显示,脑缺血后7d皮层损伤侧海马CA1、CA2区星形胶质细胞数量较假手术组增加且胞体增大;脑缺血后30d皮层损伤侧海马CA1、CA2区呈胶质疤痕样改变。同时,免疫印迹法显示脑缺血后7d皮层损伤侧海马GFAP表达增强;脑缺血后30d皮层损伤侧海马GFAP表达增高更加明显。此外,免疫印迹法显示脑缺血后3d皮层损伤侧海马PCNA蛋白表达水平升高;脑缺血后7dPCNA蛋白表达水平达到峰值;脑缺血后30d,PCNA蛋白表达水平降低,但仍高于假手术组。结论:大鼠大脑中动脉缺血后可引起其皮层损伤侧海马星形胶质细胞过度反应和增殖。     

大鼠束缚后脑内星形胶质细胞的反应

为了探讨束缚后大鼠脑内星形胶质细胞的反应,本实验将大鼠束缚于小的塑料桶内1、3或6 h,于解束后30 min处死,正常大鼠不被束缚作为对照。脑组织进行抗glial fibrillary acidic-protein(GFAP)免疫组织化学染色。结果显示:在正常大鼠脑内有少数散在静止状态的星形胶质细胞,表现为胞体小、突起细、GFAP淡染,缺乏机能定位分布特点;束缚后脑内星形胶质细胞表现为胞体肥大、突起变粗、GFAP深染、形成激活状态,其分布有明显的机能定位特点,表达于与应激反应调节相关的核团,主要有(1)端脑:扣带回、新皮质(尤其是第Ⅲ和V层)、隔外侧核、杏仁中央核;(2)间脑:丘脑室旁核、外侧膝状体、内侧膝状体、下丘脑的视上核、室旁核、第三脑室室周区、弓状核;(3)脑干:中脑的上丘浅层、中脑导水管周围灰质、下丘的皮质部;脑桥的臂旁外侧核、蓝斑、A5区;延髓的耳蜗核、延髓内脏带(MVZ)等处。反应性星形胶质细胞表达的时程变化是束缚1 h最高,3 h次之,6 h最少。本文结果表明,大鼠被束缚后全脑多处核团的星形胶质细胞发生不同程度的改变,随着束缚时间的延长,动物产生适应性,星形胶质细胞表达减少。     

活化小胶质细胞致星形胶质细胞激活

目的探讨活化小胶质细胞培养液对星形胶质细胞的影响。方法 LPS激活原代培养小胶质细胞,采用活化的小胶质细胞条件培养液刺激星形胶质细胞,观察星形胶质细胞GFAP及IL-1β和TNFα的表达。结果 LPS刺激后,小胶质细胞OX42表达量上升,IL-1β和TNFα的表达量增高;小胶质细胞条件培养液可致星形胶质细胞激活,GFAP表达量上升,IL-1β和TNFα的表达量增加。结论活化小胶质细胞的条件培养液可致星形胶质细胞激活,激活的小胶质细胞和星形胶质细胞表达前炎症介质IL-1β和TNFα。     

雷公藤多甙对大鼠海马内注射β-淀粉样蛋白后星形胶质细胞增生的影响

目的：探讨大鼠海马内注射v淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)后海马星形胶质细胞表达GFAP的变化及雷公藤多甙(TWP)对其的影响。方法：在大鼠左侧海马定向注射Aβ1-40作为Aβ组,注射生理盐水作为对照组,雷公藤多甙腹腔注射治疗海马内注入了Aβ1-40的大鼠为TWP组。用免疫组织化学方法观察各组大鼠海马星形胶质细胞GFAP的表达。结果：Aβ组海马星形胶质细胞增生、肥大,GFAP阳性细胞数增多,细胞截面积明显增大。TWP组星形胶质细胞数较Aβ组减少,并且细胞截面积明显缩小。结论：雷公藤多甙能抑制Aβ诱导的海马星形胶质细胞的反应性增生。     

颞叶癫痫患者颞叶皮层和海马组织内多药耐药相关蛋白1和胶质原纤维酸性蛋白共表达

目的 观察颞叶癫痫病人多耐药基因1（MDR1）、胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）在颞叶和海马组织内的表达。方法 癫痫组样本来自12例颞叶癫痫病例的手术切除标本,对照组为4例非癫痫病的尸检脑组织。应用双重免疫荧光组织化学方法结合激光共聚焦显微镜技术显示MDR1、GFAP和NSE在颞叶和海马组织内的表达。结果 对照组颞叶皮质和海马齿状回内均可见到许多GFAP表达阳性的星形胶质细胞和NSE表达阳性的神经元,未见到表达MDR1的细胞。癫痫组颞叶皮质和海马齿状回内GFAP阳性星形胶质细胞高于对照组。颞叶皮层和海马组织内可见星形胶质细胞MDR1 和GFAP 共表达现象。结论 颞叶难治性癫痫可能与星形胶质细胞的多药耐药性有关。     

大鼠星形胶质细胞在高血糖脑缺血再灌注损伤中的变化

目的:探讨星形胶质细胞在高血糖脑缺血再灌注损伤中的变化规律。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱导Ⅰ型糖尿病高血糖大鼠模型,通过双侧颈总动脉夹闭联合股动脉放血法建立全脑缺血再灌注模型,应用组织学、免疫荧光、组织化学及Western Blot方法,对比观察糖尿病高血糖脑缺血再灌注组(简称糖尿病组)与正常血糖脑缺血再灌注组(简称正常血糖组)在脑缺血15 min、再灌注1 h和6 h大脑额叶皮质区神经元、星形胶质细胞组织学变化及GFAP的表达。结果:正常血糖组再灌注1 h脑组织出现轻度水肿;再灌注6 h脑水肿加重,出现神经元固缩;再灌注1 h,糖尿病组病变与正常血糖组基本相同,再灌注6 h脑水肿加重,固缩神经元进一步增加。再灌注1 h和6 h,糖尿病组Nissl体平均光密度值明显低于正常血糖组(P<0.05)。脑组织GFAP免疫荧光检查可见,再灌注6 h正常血糖组GFAP免疫阳性细胞明显增加。糖尿病组再灌注1 h和6 h,出现GFAP阳性星形胶质细胞数目增加(P<0.05),胞体显著增大,突起增长、增粗。Western Blot结果可见,糖尿病组GFAP的表达明显高于正常血糖组。结论:糖尿病高血糖脑缺血再灌注能够加重神经元损伤,星形胶质细胞出现更明显的数量增加和GFAP表达。     

A demonstration of glial filament distribution in astrocytes isolated from rat cerebral cortex

Astrocytes have been classically described based on morphological characteristics as either protoplasmic or fibrous. However, the appearance of astrocytes at the light microscopic level following immunoreaction with glial filament acidic protein antisera or Cajal's gold-chloride method is markedly different from the morphology of Golgi-impregnated or horseradish peroxidase-filled astrocytes. The present study combines immunohistochemistry using glial fibrillary acidic protein antisera and a cellular suspension of structurally intact astrocytes isolated from the rat cerebral cortex to demonstrate that the distribution of glial filaments is limited to major astrocytic processes. Because the sheet-like processes which decorate the major branches of protoplasmic astrocytes do not contain glial filaments, the entire protoplasmic astrocyte is not visible when viewed in situ in the gray matter of the cerebral cortex. Thus staining techniques that have a propensity for the glial filaments such as antisera to glial fibrillary acidic protein and the gold-chloride method provide only a skeletal outline of the major processes of the protoplasmic astrocyte. On the other hand, fibrous astrocytes which do not have feathery decorations on major processes are visible in the cerebral cortex in their structural entirety. The present investigation also offers additional evidence of the specificity of glial fibrillary acidic protein antisera for astrocytes.     

Immunocytochemical Detection of Astrocytes in Brain Slices in Combination with Nissl Staining

The present study was performed to develop a simple and reliable method for the combined staining of specimens to allow the advantages of immunocytochemical detection of astrocytes and assessment of the functional state of neurons by the Nissl method to be assessed simultaneously. The protocol suggested for processing paraffin sections allows preservation of tissue structure at high quality and allows the selective identification of astrocytes with counterstaining of neurons by the Nissl method. The protocol can be used without modification for processing brain specimens from humans and various mammals-except mice and rabbits.Translated from Morfologiya, Vol. 125, No. 3, pp. 100–102, May–June, 2004.     

星形胶质细胞在大鼠下丘脑的分布

目的:观察星形胶质细胞在正常大鼠下丘脑的分布。方法:利用免疫组织化学技术,观察胶原纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)在下丘脑的表达。结果:GFAP阳性细胞在第三脑室室周区、视上核、下丘脑室旁核外侧大细胞部、正中隆起大量分布;下丘脑其他区域或核团,如前区、外侧区、前外侧核、视交叉上核、室旁核小细胞部、弓状核、腹内侧核等内分布稀疏。结论:星形胶质细胞在正常大鼠下丘脑的分布有明显区域性,可能与其相应区域的生理活动与调节功能有关。     

Changes in state of the glia in different parts of the rat brain after systemic circulatory arrest

Institute of General Resuscitation, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow. (Presented by Academician A. V. Negovskii.) Translated from Byulleten' Éksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 114, No. 8, pp. 176–179, August, 1992.     

雷公藤多甙减少Aβ诱导的大鼠星形胶质细胞数

目的探讨雷公藤多甙对大鼠大脑皮质内注射β-淀粉样蛋白(Aβ)后星形胶质细胞的反应作用。方法采用GFAP免疫组织化学方法观察大脑皮质内注射凝聚态Aβ1-40后星形胶质细胞GFAP阳性细胞数。结果大脑皮质注射Aβ1-40后,GFAP阳性细胞数量明显增多,胞体截面积明显增大;给予雷公藤多甙治疗后,GFAP阳性细胞数量明显减少,胞体截面积明显减小。结论将凝聚态Aβ1-40注射入大鼠大脑皮质后可导致星形胶质细胞的激活,雷公藤多甙对Aβ诱导的星形胶质细胞的活化有抑制作用。     

Activation of Satellite Glial Cells in Rat Trigeminal Ganglion after Upper Molar Extraction

The neurons in the trigeminal ganglion (TG) are surrounded by satellite glial cells (SGCs), which passively support the function of the neurons, but little is known about the interactions between SGCs and TG neurons after peripheral nerve injury. To examine the effect of nerve injury on SGCs, we investigated the activation of SGCs after neuronal damage due to the extraction of the upper molars in rats. Three, 7, and 10 days after extraction, animals were fixed and the TG was removed. Cryosections of the ganglia were immunostained with antibodies against glial fibrillary acidic protein (GFAP), a marker of activated SGCs, and ATF3, a marker of damaged neurons. After tooth extraction, the number of ATF3-immunoreactive (IR) neurons enclosed by GFAP-IR SGCs had increased in a time-dependent manner in the maxillary nerve region of the TG. Although ATF3-IR neurons were not detected in the mandibular nerve region, the number of GFAP-IR SGCs increased in both the maxillary and mandibular nerve regions. Our results suggest that peripheral nerve injury affects the activation of TG neurons and the SGCs around the injured neurons. Moreover, our data suggest the existence of a neuronal interaction between maxillary and mandibular neurons via SGC activation.