莫邪菊的离体培养研究初报

目的为建立莫邪菊的离体培养体系。方法以成熟果实中的种子为外植体,探讨不同生长调节剂对离体培养中愈伤组织诱导、不定芽的分化和试管苗生根的影响。结果培养基配方为MS＋2,4-D2．0mg／L＋6-BA0．2mg／L时,种子破壳萌发率为70％,胚轴处愈伤组织诱导率为100％;MS＋6-BA2．0mg／L为合适的丛生芽诱导和增殖培养基配方;培养基为MS0时生根率为95％,生根效果好且配方简单,移栽的试管苗成活率可达95％。绪论该试验建立的离体培养体系可用于莫邪菊的离体培养。     

盾叶薯蓣离体培养体系的建立及薯蓣皂苷元含量分析

以盾叶薯蓣叶片为外植体,研究不同浓度激素组合对盾叶薯蓣愈伤组织、不定芽及再生植株的影响,并对不同材料诱导获得的再生植株中薯蓣皂苷元含量进行了分析。结果表明,诱导愈伤组织的最适培养基为MS+BA2.0mg·L-1+2,4D0.1mg·L-1;诱导不定芽及芽生长的培养基的最适培养基为MS+BA0.1mg·L-1(0.05mg·L-1)+病毒唑5mg·L-1;诱导试管苗生根的最适培养基为MS/2+IAA0.2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1。相同外植体诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量差异不明显;不同盾叶薯蓣诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量差异明显。     

贡菊不定芽离体诱导增殖培养条件的优化

目的:优化贡菊不定芽诱导与增值的培养条件,为建立和完善贡菊离体快繁体系奠定基础。方法:以贡菊无菌组培苗带芽茎段为试材,通过单因素、组合、正交试验等方法探讨不同植物生长调节剂对不定芽诱导、增值的影响,并对基本培养基进行优化。结果:优选出适用于不定芽诱导的细胞分裂素为6-BA,本实验条件下不定芽诱导最佳配方为:MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1或6-BA2.0-1mg·L-1+IBA0.1 mg·L-1;不定芽增值最佳配方为:MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.02 mg·L-1+IBA0.1 mg·L-1;基本培养基优化结果为:大量元素MS标准浓度+铁盐1.5倍MS标准浓度+蔗糖20 g·L-1+椰子汁30 m L·L-1。结论:6-BA对不定芽诱导有显著影响,IBA、NAA对不定芽诱导增殖具有一定调节作用;基本培养基的改良优化可增强不定芽生长发育。     

pH对红豆杉愈伤组织生长、PAL活性和紫杉醇含量的影响

目的 研究不同pH值对东北红豆杉和南方红豆杉愈伤组织生长和紫杉醇含量的影响。方法 采用不同pH值的B5培养基培养两种红豆杉愈伤组织,测定生长率、PAL活性和紫杉醇含量。结果 不同红豆衫愈伤组织所需最适pH值不同,而有利于愈伤组织生长的pH值均不利于PAL活性的提高和紫杉醇的积累。即：愈伤组织生长快时,PAL活性将下降,紫杉醇含量也减少。结论 pH值明显影响红豆杉愈伤组织的生长及次级代谢水平,从而影响了紫杉醇的合成与积累。     

苦荞麦叶柄的植株再生研究

目的:以苦荞麦叶柄为外植体,建立一套苦荞麦植物的快速繁殖技术。方法:以MS为基本培养基,通过研究激素6-BA、2,4-D、NAA和IBA对愈伤组织诱导、不定芽分化和不定根产生的影响,找出其相应的最佳培养基配方。结果与结论:苦荞麦最佳愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 4.0 mg/L;最佳不定芽分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L;最佳生根培养基为MS+IBA 0.5 mg/L。将组培苗移栽至松软的土壤中,注意适当遮光,组培苗成活率达90%以上。     

野生小红参组织培养的初步研究

用不同外植体、基本培养基、光照条件、激素对野生药材小红参愈伤组织产生和不定芽形成进行实验研究.发现以真叶为外植体,进行暗培养,以MS为基本培养基诱导效果最好.当培养基为MS BA0.2mg/L NAA2.0mg/L时,愈伤组织的诱导率可达100%;培养基为MS KT1.0 mg/L IAA0.1 mg/L时,虽然其不定芽诱导率只有50%,但单株不定芽数为3,不定芽长势最好.     

基质pH值和接种量对西洋参愈伤组织悬浮培养物的影响

本实验探讨了基质初始pH值和接种量对西洋参愈伤组织悬浮培养物生长及皂苷合成的影响，结果表明：基质初始pH6．0～6．5，鲜、干重及皂苷含量均较高；0．8g／瓶的接种量效果最佳。     

北柴胡愈伤组织诱导、分化及不定芽增殖条件研究

目的研究北柴胡叶片、茎段和花芽愈伤组织诱导、分化和不定芽增殖的条件,探讨快速繁殖的新途径。方法选择优良的北柴胡类型,在附加不同种类、不同质量浓度和不同配比外源植物激素的MS培养基中,进行不同外植体愈伤组织的诱导和分化培养以及愈伤组织再生植株的繁殖和生根培养。结果附加2,4-D 1.0 mg/L、KT0.5 mg/L和6-BA 0.5 mg/L的MS培养基最适合于叶片、茎和花芽愈伤组织的诱导,其中以花芽愈伤组织的诱导效果最好;在附加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.03 mg/L和CM 15%、CH500 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高;附加6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.05 mg/L和CH 250 mg/L的MS培养基为芽苗增殖的适宜培养基;附加NAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基是生根的适宜培养基。结论北柴胡的茎段和花芽外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

离体条件下培养物中冬凌草甲素积累与其组织结构关系

目的： 研究冬凌草甲素动态积累变化关键期培养物显微、超微结构的变化,探讨培养物组织结构与冬凌草甲素积累的相关性。 方法： 采用高效液相色谱法研究了离体培养过程中培养物内冬凌草甲素积累的动态变化规律。在此基础之上,采用石蜡切片、透射电镜方法研究了培养物组织结构与冬凌草甲素积累的关系。 结果： 离体培养过程中培养物中冬凌草甲素积累表现出有-无-有的规律性,随着叶片外植体的脱分化,培养物内叶绿体数目逐渐减少,冬凌草甲素的含量也随之逐渐降低,当冬凌草甲素再次积累时,培养物内叶绿体数目再次增多且出现了维管组织的分化。 结论： 冬凌草甲素积累合成与培养物叶绿体数目的多少及内部维管系统的分化有着紧密的联系。     

pH值改变对大鼠离体冠状动脉静息张力的影响及机制

目的研究在基础张力状态下,不同pH对大鼠冠状动脉血管静息张力的影响并探讨机制。方法采用离体血管张力记录方法,大鼠冠状动脉环的张力舒缩状态采用PowerLab和DMT系统记录。观察pH值梯度改变对大鼠冠脉血管环张力的影响。观察内外钙、Na＋/Ca2＋交换体抑制剂KB-R7943（1×10-6 mol/L）、氯离子通道阻断剂NPPB（3×10-5 mol/L）、钙通道阻断剂维拉帕米（1×10-5 mol/L）、Na＋/H＋交换体抑制剂氨氯吡咪（AM,3×10-5 mol/L）、Na＋-K＋-ATP酶抑制剂哇巴因（1×10-6 mol/L）、NO合酶抑制剂L-NAME（1×10-4 mol/L）对浴液pH6.4时冠脉张力的影响。结果随胞外pH值逐渐降低,大鼠离体冠脉血管环的静息张力逐渐增强。外钙内流和内钙释放均参与pH6.4时的冠脉收缩,钙通道阻断剂Verapamil可部分阻断冠脉收缩幅度的升高。与对照组相比,KB-R7943、哇巴因对pH6.4时冠脉收缩幅度无显著影响（P〉0.05）;NPPB、氨氯吡咪均可抑制pH6.4时冠脉收缩幅度的升高（P〈0.05）;L-NAME可增强pH6.4时冠脉收缩幅度（P〈0.05）。结论酸中毒时,随胞外pH值降低,大鼠冠脉的静息张力升高。其作用机制可能与内外钙、氯通道、Na＋/H＋交换有关。     

红花籽油对高脂血症大鼠卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性的影响

利用高脂血症大鼠模型，观察了红花耔油１５ｍｌ／ｋｇ及７．５ｍｌ／ｋｇ连续灌胃３０天对大鼠ＬＣＡＴ活性的影响。结果表明，红花籽油能显著提高高脂血症大鼠的ＬＣＡＴ活性。     

红花酒精溶液对脑卒中偏瘫患者压疮的影响

目的探讨红花酒精溶液对脑卒中偏瘫患者压疮的影响。方法选取我院脑卒中偏瘫患者98例,采用随机数字表法将患者分为两组,各49例,对照组采用常规护理,观察组在对照组的基础上采用红花酒精溶液局部护理。结果观察组压疮发生率为2.04%,明显低于对照组的12.24%,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,全部患者NIHSS评分明显低于治疗前,且观察组NIHSS评分明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论红花酒精溶液预防脑卒中偏瘫患者压疮的效果满意,值得临床推广应用。     

蜜环菌菌丝体液体培养条件的优化

目的:对蜜环菌的液体培养条件进行优化,确定蜜环菌菌丝体的适宜培养条件。方法:通过测定菌丝体生物量的方法,利用液体摇瓶培养方式,筛选适宜的碳源、氮源、无机盐和生长因子,用统计学方法确定液体发酵培养基中碳源、氮源、无机盐和生长因子的最适浓度,最终确定蜜环菌的液体培养基配方。结果:碳源的最适种类为糊精,氮源最适种类为豆饼粉提取液,玉米浆、硫胺素都有促生长作用,乙醇作为小分子碳源对蜜环菌菌体生长有显著促进作用,培养基中添加硫酸铵和硝酸钠对菌体生长有抑制作用,添加磷酸二氢钾促进菌体生长。结论:通过对液体发酵培养条件优化,蜜环菌液体培养的培养基配方如下:25%的豆饼粉提取液,2%的玉米浆,2.5%的糊精,0.06%的硫胺素,1.0%的乙醇,0.3%的磷酸二氢钾,pH值6.0。以此培养基培养蜜环菌,最终菌丝体收率可达到1.9 g/100m l。     

红花如意丸配合穴位埋线治疗月经不调临床疗效观察

目的:观察红花如意丸配合穴位埋线治疗月经不调临床疗效。方法:126例月经不调患者随机分成治疗组和对照组,每组63例,对照组给予常规雌激素、孕激素周期治疗,连续治疗3个月经周期,治疗组服用红花如意丸5丸/次,2次/d,服用3个月经周期,在此基础上配合穴位埋线,2周/次,4周1个疗程,连续3个疗程。在治疗结束后比较2组患者临床疗效、血清雌二醇(Estradiol2,E2)、卵泡刺激素(Follicle Stimulating Hormone,FSH)、黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE-2)和前列腺素2a(prostaglandin2a,PGF-2a)、β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)水平。结果:对照组总有效率为85.7%,治疗组的总有效率为93.7%,2组治疗后血E2、FSH、LH、PGE-2、PGF-2a、β-EP水平与治疗前比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:红花如意丸配合穴位埋线能够有效的治疗月经不调,安全可靠,值得临床推广。     

红花当归单煎共煎液中有效成分含量的变化

 目的 比较红花当归单煎共煎液中有效成分羟基红花黄色素A和阿魏酸含量的变化,初步探索2味中药配伍的变化规律。方法 采用RP-HPLC,色谱柱为Shim-pack VP-ODS C₁₈（4.6 mm×150 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.02 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（磷酸调节pH至 3.5）,采用梯度洗脱进行分析;检测波长为230 nm,流速为1.0 mL·min-1。结果 羟基红花黄色素A回归方程Y=22 821ρ-4 105.1,r=0.999 9,在2.5～50 mg·L-1内线性相关良好,平均加样回收率为100.1％,RSD为2.2%;阿魏酸回归方程Y=70 219ρ-2 573.9,r=0.999 9,在0.5～10 mg·L-1内线性相关良好,平均加样回收率为101.4％,RSD为3.0 %。结论 红花当归共煎液中羟基红花黄色素A和阿魏酸含量比各单煎液中含量高。共煎更有助于有效成分的提取。本方法简便、快速、准确,适用于同时测定羟基红花黄色素A和阿魏酸的含量。     

红花注射液抑制家兔肠系膜微血管运动的实验研究

目的在活体情况下实时观察红花注射液（Safflowar injection,SI）对家兔肠系膜微血管运动的影响,并探讨一氧化氮（nitricoxide,NO）在其中的作用,以进一步明确红花活血化瘀的作用机理。方法取健康雄性大耳白家兔20只,以乌拉坦腹腔注射行基础麻醉,氯醛酮耳缘静脉注射维持麻醉,气管插管置家兔于自发呼吸状态,同步记录呼吸、血压。在活体情况下运用去甲肾上腺素（noradrenaline,NA）血管运动诱导法诱导出血管运动,分别观察静脉注射N^G-单甲基-L-精氨酸（NG_monomethyl．L-arginine,L-NMMA）、SI后血管运动的变化及应用一氧化氮合酶抑制剂L-NMMA对SI作用的影响,摄录结果于监视器上用暂停功能测量。结果单独静脉注射L—NMMA可使被诱导出的血管运动抑制于收缩状态,单独静脉注射SI可使血管运动抑制于舒张状态。在L—NMMA的有效作用时间内应用SI可使被抑制于收缩状态的血管重新扩张．血管运动得以恢复;在SI的有效作用时间内应用L—NMMA则不能使处于舒张状态的血管收缩。结论SI可抑制血管运动于舒张状态并且其作用机制不是通过内源性NO介导的。     

红花黄色素注射液治疗冠心病心绞痛有效性及安全性的系统评价

目的了解红花黄色素注射液治疗冠心病心绞痛的有效性及安全性。方法计算机检索Cochrane图书馆临床对照试验资料库(2011年第1期)、Ovid-medline全文数据库(1966年至2011年5月)、Pubmed数据库(1948年至2011年5月)、Embase数据库(1966年至2011年5月)、中国(CNKI)学术文献总库(1979年至2011年5月)、万方数字化期刊库(1981年至2011年5月)、及维普数据库(1989年至2011年5月)、中国生物医学文献数据库(1978年至2011年5月),手工检索相关文献,按纳入与排除标准选择试验、评价质量,提取资料,并用RevMan4.2软件对数据进行Meta分析。结果共初检出185篇文献,经筛选最终纳入7篇关于红花黄色素注射液治疗冠心病心绞痛的随机对照研究。缓解心绞痛疗效Z=5.81,无明显不良反应。结论红花黄色素注射液治疗冠心病心绞痛安全有效。     

红花注射液对高血压患者脉搏波传导速度和RAAS的影响

目的探讨红花注射液对高血压患者脉搏波传导速度及肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的影响。方法将128例高血压患者随机分为对照组和治疗组,每组64例;对照组采用常规抗高血压药物治疗,治疗组在此基础上加用红花注射液静脉滴注,疗程28 d。观察两组临床疗效及治疗前后脉搏波传导速度(ba PWV、cf PWV、fa PWV)及RAAS指标(ALD、Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ、PRA)变化情况。结果 1治疗组临床总有效率为89.06%,对照组为70.31%;治疗组临床疗效优于对照组(P0.05);2治疗后,两组ba PWV、cf PWV、fa PWV值均较治疗前明显降低(P0.05,P0.01),且治疗组低于对照组(P0.05)。3治疗后,两组血清Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ、ALD、PRA值均较治疗前明显降低(P0.05,P0.01),且治疗组低于对照组(P0.05)。结论红花注射液可以明显降低PWV及RAAS指标发挥治疗高血压的作用。     

实验性大鼠肺血栓栓塞症中ICAM-1、P-选择素的变化及红花注射液对其的影响

目的动态观察红花注射液对大鼠肺血栓栓塞症（PTE）中血管内皮细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和P-选择素的影响.方法将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和治疗组,用颈静脉注入自体血凝块制备动物模型.治疗组在模型建立后立即自鼠尾静脉注射红花注射液2 ml/kg,每天1次,共5天.各组大鼠分别于栓塞后1、3、24、72、120 h处死,行病理观察;采用免疫组化和原位杂交的方法检测肺血管内皮ICAM-1和P选择素蛋白及mRNA的表达水平.结果与正常组比较,模型组大鼠肺栓塞后病理可见肺动脉血栓形成,炎性反应明显;肺血管内皮ICAM-1蛋白及mRNA表达在栓塞后3 h开始增高（P＜0.01）,而P-选择素蛋白及mRNA表达在栓塞后1 h开始增高（P＜0.01）.治疗组大鼠病理损伤减轻,肺血管内皮ICAM-1和P-选择素水平均下降（P＜0.01）.结论红花注射液可减轻大鼠PTE时的肺损伤,这种作用可能是通过下调血管内皮上的黏附分子来实现的.     

红花多糖对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用

目的:观察红花多糖(Safflower polysaccharide,SPS)对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用。方法:不同浓度SPS处理体外培养的SMMC-7721细胞株,采用MTT法测定SPS对SMMC-7721细胞增殖的影响;倒置显微镜观察细胞形态学变化;吖啶橙(AO)染色荧光显微镜观测以及Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:MTT法检测结果显示SPS对人肝癌SMMC-7721细胞体外增殖具有明显的抑制作用,该抑制作用呈明显的时间和剂量依赖性(P<0.05或P<0.01)。光镜下可见SPS组贴壁细胞数明显减少,细胞变小、变圆,折光性差,贴壁不牢,悬浮细胞增多。AO染色荧光显微镜下观察,24h部分细胞出现胞质浓缩,体积缩小,核固缩,染色增强,荧光更为明亮,形成致密浓缩的绿色荧光等;48h和72h部分细胞可见细胞核固缩为新月状。流式细胞术结果显示细胞凋亡率随药物浓度增加亦呈增长趋势。结论:SPS能显著抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长且呈明显的量效和时效关系。SPS可诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡,具有一定的剂量依赖性。