神经节苷脂对脑瘫大鼠大脑皮质区Nestin、NGF表达的影响

目的观察神经节苷脂（GM1）对脑瘫大鼠大脑皮质区神经巢蛋白（Nestin）、神经生长因子（NGF）表达的影响,探讨GM1促进脑瘫神经修复的可能机制。方法选择出生10周雄性SD大鼠200只,随机分为3组：假手术组60只,脑瘫模型140只,再分为模型组70只,腹腔注射生理盐水;GM1组70只,腹腔注射GM1。分别在术后0~24 h的7个时间点利用酶联免疫法检测大鼠大脑皮质区Nestin、NGF表达情况,并在实验前和后1~4 d观察大鼠的体质量变化情况。结果 （1）大鼠大脑皮质区Nestin表达GM1组0~24 h、模型组0~12 h明显高于假手术组（P〈0.01）;GM1组16~24 h明显高于模型组（P〈0.01）。（2）GM1组大鼠大脑皮质区NGF表达0~24 h明显高于模型组（P〈0.05）和假手术组（P〈0.01）。模型组NGF表达仅0、4、8 h高于假手术组（P〈0.05）。（3）GM1组术后第1、2天体质量缓慢增加,至第3、4天明显高于模型组（P〈0.05）,接近假手术组（P〉0.05）,模型组体质量增加不明显。结论预防性使用GM1是通过增强大脑皮质的Nestin和NGF表达并延长表达时间来发挥其对实验性脑瘫大鼠的神经保护作用。     

糖尿病早期大鼠背根神经节IGF-I与GAP-43 mRNA的表达

目的:观察糖尿病早期(2周)大鼠背根神经节中胰岛素样生长因子-I(IGF-I)与生长相关蛋白-43(GAP-43)基因的表达变化以及胰岛素对其的影响。方法:按60mg/kg予SD大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素制备胰岛素依赖性糖尿病大鼠模型,然后将造模成功的大鼠随机分成模型组与治疗组,治疗组于造模成功后第2天开始皮下注射胰岛素进行治疗,qd。2周后取各组大鼠背根神经节(DRG),Trizol法提取总RNA,应用RT-PCR法测定IGF-I与GAP-43 mRNA的表达。结果:在糖尿病早期大鼠DRG中,IGF-I,GAP-43 mRNA的表达显著下调,胰岛素能明显上调IGF-I mRNA的表达,对GAP-43 mRNA的表达有上调趋势。结论:在早期糖尿病DRG中IGF-I,GAP-43 mRNA表达下调,参与了糖尿病外周神经病变的发生发展。     

不同程度急性脑外伤大鼠脑神经节苷脂含量的研究

目的 研究不同程度急性脑外伤大鼠神经节苷脂的含量变化。方法 选取Wistar大鼠34只，采用落体撞击法造成左顶脑轻度（50g.2cm)，中度（50g.10cm)，重度（50g.20cm)挫裂伤，于伤后12小时测定伤侧和对侧脑组织中脂结合唾液酸含量和神经节苷脂组分（GM1，GD3，GD1a,GD1b,GT1b)的相对百分含量变化。结果 不同程度急性脑外伤后，除轻度损伤的对侧外，伤侧和对侧脑组织中脂结合唾液酸含量均随损伤程度增加呈明显下降趋势，神经节苷脂各组分的变化以GM1最为显，伤，对侧均随损伤程度增加而显增加，除轻度损伤外，GT1b含量亦明显增加。结论 不同程度急性脑外伤后脑内GM1的合成加速，推测急性脑外伤后脑内存在自我调节机制来增加GM1的合成，建议在急性脑外伤早期及时补充GM1，有助于减轻脑水肿，增强神经元再生，降低死亡率。     

单唾液酸神经节苷脂对体外循环后大鼠海马细胞超微结构的影响

目的:探讨单唾液酸神经节苷脂(GM1)对大鼠体外循环(CPB)后海马细胞的超微结构的影响.方法:选用雄性SD大鼠,经右颈静脉插管引流,尾动脉插管灌注建立CPB,转流时间l h,建立CPB动物模型.随机分为CPB模型组、CPB模型+GM1组、输血组和假手术组,每组10只.采用透射电镜技术观测海马细胞的超微结构.结果:CPB后神经细胞出现粗面内质网和游离核糖体明显减少,线粒体肿胀,空泡化,嵴断裂,溶解,消失,细胞膜崩解;神经丝模糊、突触间隙模糊不清,出现较多神经细胞凋亡.GM1干预后神经细胞的超微结构轻度改善,突触间隙增宽,凋亡细胞减少.结论:CPB可导致大鼠海马神经元和突触的超微结构病变;GM1可通过减轻CPB后脑细胞超微结构的损害.     

神经节苷脂对大鼠脑缺血损伤后海马组织的保护作用

目的探讨神经节苷脂对脑缺血损伤后大鼠海马组织的保护作用。方法取健康成年雄性SpragueDawley大鼠60只,随机分为假手术组、缺血组和神经节苷脂治疗组(治疗组),每组20只。缺血组和治疗组制备大脑中动脉狭窄模型。模型建立成功后,假手术组和缺血组注射9 g.L-1的氯化钠溶液1 mL.kg-1.d-1,治疗组注射神经节苷脂20 mg.kg-1.d-1。采用末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记法检测各组神经元凋亡。结果假手术组、缺血组和治疗组大鼠CA1区凋亡神经元数量分别为2.23±0.67、26.17±4.82、15.40±5.30。缺血组大鼠CA1区神经元凋亡数目高于假手术组和治疗组,差异均有统计学意义(P<0.01);治疗组大鼠海马CA1区神经元凋亡数高于假手术组(P<0.01)。结论神经节苷脂可能是通过减少海马神经元凋亡,进而改善脑损伤,起到对脑缺血损伤后大鼠的神经保护作用。     

新生鼠脑缺血预处理后海马CA1区GAP-43的表达

目的:观察新生Wistar鼠脑缺血再灌注后海马CA1区生长相关蛋白43(GAP-43)的表达和意义. 方法:通过阻断7日龄新生Wistar大鼠右侧颈总动脉45 min制备脑缺血模型,设置假手术组、缺血再灌注组和预缺血-缺血再灌注组. 采用免疫组化方法和计算机图像分析技术检测三组新生鼠不同时点海马CA1区脑组织GAP-43的动态变化及三组光镜下脑组织病理改变. 结果: ①脑组织病理改变:假手术组大鼠无异常病理改变,缺血再灌注组神经细胞变性、坏死,预缺血组-病理损伤较缺血再灌注组轻. ②GAP-43表达:缺血再灌注组海马GAP-43表达在再灌注后24 h时开始增高,7 d达高峰,至14 d与假手术组比较差异有统计学意义(P＜0.05);预缺血-缺血再灌注组GAP-43表达较缺血再灌注组增加更明显,与假手术组和缺血再灌注组比较均差异有统计学意义(P＜0.05). 结论: 新生鼠脑缺血预处理可减轻再次严重脑缺血对神经细胞的损伤,脑缺血预处理后海马CA1区GAP-43表达和合成增加,GAP-43表达增加可能与神经元再生和轴突重塑有关,是脑缺血后神经细胞内源性代偿机制之一.     

金思维对老年性痴呆大鼠海马CA1区GAP-43表达的影响

目的观察β淀粉样肽(Aβ)对大鼠海马CA1区GAP-43表达的改变及中药金思维对其的影响。方法应用凝聚态Aβ1-42在大鼠海马内注射以建立老年性痴呆(AD)动物模型;4周后取脑冰冻切片,采用免疫组化法和计算机图像分析技术测定海马CA1区GAP-43阳性神经元数目及光密度值。结果海马CA1区GAP-43阳性细胞数模型组和正常组(分别为52.33±28.45和59·60±22.84)相比无显著差异;金思维组(77.06±14.66)与模型组和多奈哌齐组(51.26±22·44)相比均有显著性差异(P<0.01)。海马CA1区GAP-43阳性细胞OD值模型组和正常组(分别为92.77±7.37和71·30±11.65)相比有显著差异(P<0·01);金思维组(75.44±5.29)与模型组比较有显著差异(P<0.01);而与多奈哌齐组(73.09±5·18)相比无显著性差异(P>0.05)。结论金思维可使老年性痴呆模型大鼠海马区GAP-43的表达量增加,为金思维促神经生长、改善突触可塑性和学习记忆功能的分子机制提供了新的内容。     

母源性BDE-209暴露对子鼠海马GAP-43、BDNF表达的影响

目的 检测母源性BDE-209暴露对子鼠海马生长相关蛋白-43(GAP-43)、脑源性神经生长因子(BDNF)表达的影响,探讨母源性BDE-209神经发育毒性的可能机制.方法 3月龄Wistar大鼠自妊娠0天起随机分为实验组A、B、C、D和对照组E,各实验组母鼠在妊娠期及哺乳期给予不同剂量BDE-209(100、300、600、1200mg/kg)胃灌,对照组胃灌等量花生油.21 d子鼠断乳后各组随机选取10只雄性子鼠,用免疫组织化学法检测GAP-43、BDNF在子鼠海马的表达情况.结果 实验组子鼠海马GAP-43表达下降,C、D组与E组比较差异有统计学意义(P=0.013,P=0.000),A、B组与E组比较差异无统计学意义(P=0.177,P=0.093).实验组子鼠海马BDNF表达下降,B、C、D组与E组比较差异有统计学意义(P=0.033,P=0.005,p=0.001),A组和E组比较差异无统计学意义(P=0.066).结论 高剂量母源性BDE-209暴露可以降低子鼠海马GAP-43、BDNF的表达,导致神经元的生长、发育及信号传导障碍,影响神经系统发育,对神经系统功能的发挥造成损伤.     

半导体激光照射对大鼠神经损伤后脊髓GAP-43表达的影响

目的　研究 1 5m W半导体激光照射对大鼠损伤坐骨神经后脊髓中神经生长相关蛋白 (growth associated pro-tein,GAP-4 3 )表达的影响 .方法　 96只雄性 SD大鼠制成坐骨神经损伤模型 ,1 5m W半导体激光照射神经损伤部位 ,免疫组化方法观察脊髓内 GAP-4 3表达的变化 .结果　 1 wk内激光照射组和对照组无明显差异 .第 2周和第 4周时激光照射组脊髓内 GAP-4 3表达明显高于对照组 .第 8周时激光照射组较对照组脊髓内 GAP-4 3表达稍低 .结论　 1 5m W半导体激光照射可引起损伤神经后大鼠脊髓中 GAP-4 3表达的变化 ,有促进完成神经再生的作用 .     

川芎嗪对宫内生长受限幼鼠生长发育及脑损伤GAP-43蛋白表达的影响

目的:研究钳夹子宫血管致宫内生长受限幼鼠(FGR)脑神经相关生长蛋白-43(GAP-43)的表达及川芎嗪对FGR幼鼠及脑海马GAP-43蛋白表达的影响。方法:通过钳夹子宫血管30 min建立FGR模型,测出生当天及生后7 d假手术组、模型组、川芎嗪低剂量组及川芎嗪高剂量组幼鼠的体重、脑重、肝重,应用免疫组化方法观察川芎嗪对FGR幼鼠脑海马GAP-43蛋白表达的影响。结果:出生当天,模型组幼鼠的体重、脑重、肝重、GAP-43蛋白的表达均明显低于假手术组(P<0.01);川芎嗪低剂量组体重、脑重、肝重、GAP-43蛋白的表达与模型组无显著差别(P>0.05),川芎嗪高剂量组体重、脑重、肝重、GAP-43蛋白的表达明显高于模型组(P<0.01)。生后7 d,4组幼鼠体重无明显差异(P>0.05),但模型组的脑重、肝重及GAP-43蛋白的表达仍显著低于假手术组及川芎嗪高剂量组(P<0.05);同川芎嗪低剂量组无显著差异。结论:足够剂量的川芎嗪对钳夹子宫血管致FGR幼鼠脑组织有明显的保护作用。     

外伤性癫痫大鼠海马NCAM及GAP-43的动态表达

目的：动态观察神经细胞黏附分子（NCAM）及颗粒细胞生长相关蛋白-43（GAP-43）在外伤性癫痫（PTE）大鼠海马的表达,探讨有关发病机制。方法：立体定向注射1000nmolFeCl2：于大鼠右侧运动皮层致痫,在不同时间点行为学视频、脑电图监测,用免疫组织化学法检测1、2、3、4周大鼠海马内NCAM及GAP-43的表达。结果：所有大鼠在注射FeCl2后不久记录到癫痫样放电,致痫后1周即可见海马神经元NCAM大量表达,15天达高峰,20天后减少,持续30天;GAP-43表达在5～7天达高峰,2周后明显减少。结论：FeCl2皮层注射可以制成PTE动物模型。与NCAM及GAP-43表达相关的神经元及胶质细胞的动态变化在PTE的发病机制中起重要作用。NCAM表达增加而GAP-43表达减少可能为FeCl2致痫的共同途径。     

GDNF基因修饰的神经干细胞促进脑中风后大鼠的GAP-43表达

目的研究胶质源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的神经干细胞(NSCs)移植对脑中风后大鼠缺血侧脑组织内生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响,探讨GDNF基因修饰的神经干细胞(GDNF/NSCs)移植对大鼠脑中风的神经保护作用机制。方法取新生大鼠脑组织分离培养NSCs,收集第6代前的NSCs备用。用重组腺病毒GDNF转染神经干细胞,制备GDNF/NSCs。暂时性阻塞大鼠大脑中动脉制备脑中风模型,3天后,用脑立体定位仪向中风侧侧脑室分别给予NSCs、GDNF/NSCs和生理盐水。再灌注时间1w、2w、3w、5w、7w后处死大鼠(n=3)。裂解中风侧脑组织,离心后得到脑组织蛋白样品,通过蛋白免疫印迹(Western Blotting)检测GAP-43表达。结果 GDNF/NSCs、NSCs、NS各组GAP-43的表达在1w、2w、3w、5w、7w各时间点均逐渐降低。NSCs组、GDNF/NSCs组显著高于NS组(P<0.05);GDNF/NSCs组高于NSCs组(P<0.05)。结论 GDNF/NSCs移植治疗脑中风的机制可能与促进GAP-43表达有关。     

康复训练对脑梗死大鼠脑GAP-43表达的影响

目的：研究康复训练对脑梗死大鼠脑的生长相关蛋白（GAP－43）表达的影响。方法：SD大鼠采用光化学法制成脑梗死模型后,随机分康复组,制动组,自由组及正常组,每组大鼠在1,3,7,14,21,28d取脑组织免疫组化染色,以观察脑梗死大鼠各组不同时期脑的GAP－43表达。结果：1,3,7,14d脑梗死周边区可见GAP－43阳性细胞,21,28d时梗死周边GAP－43阳性细胞逐渐减少,康复组较制动组在7,14d明显增加,尤以胼胝体为。结论：康复训练可引起损伤周边区GAP－43表达的变化。提示该区有促进神经新生枝芽的生长作用。     

大鼠脊髓挫伤后脊髓和骨骼肌中GAP-43的表达变化

目的 观测大鼠脊髓挫伤后损伤位点尾侧和骨骼肌中GAP-43的含量变化,探讨其在脊髓损伤修复中的作用及与脊髓可塑性的关系.方法 SD成年大鼠40只,分为正常组和脊髓挫伤组,分别取材脊髓和腓肠肌,用免疫组化了解GAP-43的原位分布和Western Blot榆测GAP-43的含量;各组大鼠在存活期间均行后肢BB运动功能评分.结果 各组大鼠脊髓腹角少量神经元和腓肠肌细胞内均可观察到GAP-43阳性反应物;大鼠脊髓挫伤后3 d,脊髓及骨骼肌中的GAP-43表达均开始增加,脊髓于14 d达高峰,而骨骼肌21 d达到高峰;BBB运动功能评分从7 d起逐步恢复,21 d接近正常.结论 大鼠脊髓损伤后,脊髓和骨骼肌中GAP-43含量变化的趋势与下肢运动功能的恢复较一致,提示GAP-43表达增加与脊髓挫伤后的可塑性有关.     

马桑内酯致痫大鼠皮层及海马神经元的放电模式

在腹腔注射马桑内酯所致的急性癫痫和慢性点燃癫痫大鼠模型上，观察了大脑皮层和海马神经元膜电位的变化及放电模式。结果显示：皮层脑电图出现明显的阵发性痫样放电，胞内微电极记录皮层及海马神经元放电的模式为：①单纯去极化；②去极化并伴有阵发性或持续性放电；③去极化与超极化交替出现等。表明马桑内酯可以引起大脑皮层及海马神经元生物电活动的改变，其改变形式不一，但主要引起去极化。     

糖皮质激素对大鼠脑皮层、海马及海马脑片神经元膜电位的影响

应用细胞内生物电记录技术,于侧脑室和灌流槽内给予地塞米松,观察了大鼠大脑皮层、海马及海马脑片神经元膜电位的变化。结果如下:（1）在体实验记录的40个神经元中,有24个神经元对地塞米松呈去极化反应.平均幅值为（ 11.80±1.89)mV;有6个神经元的反应为超极化,平均幅值为（ 6.50±1.02）mV;有10个神经元无反应。（2）海马脑片实验,在所记录的7个神经元中有5个神经元对地塞米松呈去极化反应,平均幅值为（4.40±0.89）mV,未引起膜电导变化。结果表明:地塞米松对皮层及海马神经元的作用以去极化反应为主,部分神经元应为超极化。提示糖皮质激素对中枢神经元主要起兴奋作用,部分神经元产生抑制性影响。     

铅暴露对大鼠大脑皮质和海马NOS的影响

目的 观察铅暴露对大鼠海马和大脑皮质一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨铅暴露对中枢神经系统损害的机制.方法 4周龄Wistar雄性大鼠,按体重用45 mg/kg醋酸铅灌胃30天;第30天时测定大鼠海马和大脑皮质总NOS和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,对大鼠脑组织冰冻切片进行β-NADPH染色,并对海马各区nNOS阳性神经元进行数量统计分析.结果 与空白对照组大鼠比较,染铅组大鼠海马和大脑皮质总NOS活性明显降低,而iNOS活性均升高,海马CA1和齿状回nNOS阳性神经元数量减少,差异有显著性(P＜0.01).结论 铅暴露可以使大鼠海马和大脑皮质总NOS活性降低,iNOS活性升高,海马nNOS阳性神经元数量减少.     

促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后神经生长蛋白43和微管相关蛋白-2表达的影响

目的 观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的保护作用及神经细胞神经生长蛋白43(GAP-43)、微管相关蛋白-2(MAP-2)表达的影响。方法 制作SCI模型,分为假手术组、生理盐水组、EPO治疗组。用免疫组织化学染色方法检测神经细胞内GAP-43和MAP-2的表达变化,同时通过BBB运动评分检测动物的运动功能。结果 EPO治疗组较生理盐水组GAP-43和MAP-2表达水平高,EPO治疗组的BBB运动评分明显优于生理盐水组。结论 EPO能够通过增加GAP-43和MAP-2表达,促进神经细胞生长。     

新生与成年大鼠大脑皮质KIF基因表达的差异

目的 探讨大鼠大脑皮质神经元驱动蛋白超家族(KIF)基因在脑发育时期和成年期表达的差异，揭示KIF在脑发育和神经功能维持方面的作用。方法 运用RT—PCR方法检测KIF1A、KIF2、KIF3A、KIF4与KIF5A基因在新生1d大鼠和成年大鼠大脑皮质的表达。结果 在大脑皮质中，新生大鼠和成年大鼠的KIF2、KIF3A与KIF4基因表达无明显差异，而KIF1A与KIF5A在成年大鼠的表达量明显大于在新生大鼠大脑皮质中的表达量。结论 KIF1A、KIF5A可能在维持大鼠大脑皮质神经元的高级活动方面发挥作用。     

血管性痴呆大鼠学习记忆能力与大脑皮质ED1表达

目的：研究血管性痴呆（Vascular Dementia,VD）大鼠巨噬细胞-小胶质细胞胞质抗原（ED1）及学习记忆能力的改变。方法：雄性Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、假手术组和VD模型组,采用4-血管阻断（4-Vesselocclusion,4-VO）全脑缺血再灌注制备VD大鼠模型,Y-型迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,SABC法检测大脑皮质ED1阳性表达细胞。结果：与正常组、假手术组相比较,模型组大鼠学习、记忆能力受损明显,ED1免疫神经元表达增高（P〈0.05）。结论：VD模型大鼠学习记忆能力下降可能与ED1表达增高有关。