γ射线外照射诱发人体外周血淋巴细胞DNA损伤的研究

目的研究γ射线外照射诱导正常人血淋巴细胞DNA损伤的剂量效应关系。方法以正常人体外周血淋巴细胞为材料,采用单细胞凝胶电泳技术(Single cell gel electrophoresis,SCGE,又称彗星电泳),研究了不同剂量γ射线外照射诱导正常人血淋巴细胞DNA瞬时损伤的情况。结果0、0.1、0.5、12、和3 Gyγ射线外照射淋巴细胞后,彗尾DNA含量(y)与受照剂量(x)关系为y=-1.1063x2 10.398x 3.5362,Olive矩(y)与受照剂量(x)关系为y=-0.0345x2 3.5282x 0.6542。结论γ射线外照射正常人血淋巴细胞DNA有明显的损伤作用,所致原初损伤与受照剂量呈良好的线形平方关系,单细胞凝胶电泳技术有望成为新一代生物剂量计。     

γ-射线对淋巴细胞DNA的损伤

目的 了解γ-射线对淋巴细胞DNA的损伤情况，为预放射线对人体的损伤提供科学依据。方法 应用碱性单细胞凝胶电泳法(SCCGE)测定，观察小鼠和人外周血淋巴细胞的彗星率。结果 在小鼠实验中发现不同剂量组的小鼠彗星率明显高于对照组，不同剂量组之间差异也存在显著性，并且在各个时点的不同剂量之间的慧星率差异均存在显著性，在低剂量组各时点间彗星率差异无显著性，而在高剂量组各时点间差异有显著性，并且以一天中16：00时点最高。结论 γ-射线能引起淋巴细胞DNA损伤，且存在剂量反应关系，此外还提示-天中淋巴细胞对γ-射线的敏感性不同。在探伤工人和对照组间差异也存在显著性。     

γ射线外照射致哺乳动物DNA单链断裂及其重接修复的研究

用核酸酶Ｓ１法研究了γ射线外照射致哺乳动物Ｃ５７小鼠离体培养的脾细胞ＤＮＡ单链断裂及其在３７℃条件下的重接修复结果表明，ＤＮＡ单链断裂数随着辐射剂量的加大而增加；在接近生理条件下，ＤＮＡ单链断裂可发生重接修复，修复过程可分为快修复期及慢修复期。     

电离辐射诱发小鼠脾细胞DNA链断裂及修复

目的通过观察γ射线照射后IRM-2辐射抗性小鼠DNA链的断裂及修复,探讨IRM-2小鼠辐射抗性产生的可能机理。方法采用脉冲场凝胶电泳法,测定不同剂量γ射线诱发IRM-2小鼠及其亲本ICR/JCL和615小鼠脾细胞DNA单、双链断裂及照射后不同时间DNA链断裂的修复动力学。结果对照组IRM-2小鼠本底DNA损伤较低,即ssb和dsb的数目低于未照射的亲本ICR和615小鼠(P<0.01)。不同剂量(1、2、4和8Gy)照射后,IRM-2小鼠ssb和dsb的数量均明显低于经相同剂量照射的亲本ICR和615小鼠(P<0.05和P<0.01)。在较低剂量2Gy时,IRM-2小鼠与亲本小鼠相比,dsb和ssb修复无统计学差异;当分别接受4、8Gy大剂量照射后,IRM-2小鼠表现出较高的修复效率,即IRM-2小鼠0.5h和1hdsb、ssb修复速率比亲本小鼠快(P<0.05和P<0.01),而且修复后剩余的损伤远低于亲本小鼠。结论电离辐射后IRM-2小鼠DNA链断裂量较低,DNA链断裂的修复速率比亲本小鼠快,因此能及时快速地抵抗辐射造成的损伤,具有较强的辐射抗性。     

二甲基甲酰胺诱发的人类外周血细胞DNA断裂损伤

〔目的〕探讨二甲基甲酰胺 (N ,N -dimethylformamide ,DMF)诱发的人类外周血细胞DNA断裂损伤情况。〔方法〕单细胞凝胶电泳法 (SingleCellGelElectropheresis ,SCGE)。〔结果〕接触DMF的作业工人与对照组相比 (t检验 )各指标间均有显著差异 (P <0 .0 1)。接触DMF的作业工人的 2年 -3年组、4年 -5年组、6年 -7年组与对照相比 (方差分析 )各指标间均有显著性差异 (P <0 .0 1) ,其中彗星长、尾长、Olive尾矩、尾DNA 总DNA(%)四个指标的 6年 -7年组与 2年-3年组间有显著性差异 (P <0 .0 5 )。〔结论〕长期接触DMF可引起DNA断裂损伤 ,断裂损伤程度随着接触年限的延长有加重的趋势。     

X射线接触者和恶性肿瘤患者及放射治疗后肿瘤病人淋巴细胞DNA损伤检测

目的：探讨外周血淋巴细胞的DNA链断裂（DNAsb)单独作为潜在的人体健康危害早期生物学指标的可能性。方法：应用碱性单细胞凝胶电泳技术（SCGE）检测了正常健康人、肿瘤患者、X射线接触者和肿瘤放射治疗病人外周血淋巴细胞的DNA链断裂。结果：X射线探伤工人、恶性肿瘤患者、恶性肿瘤放射治疗患者的外周血淋巴细胞彗星百分率及DNA迁移距离均显著高于正常健康人。结论：SCGE检测DNAsb可望成为患癌风险评估的生物学标志。适合于肿瘤易感人群、辐射敏感人群的筛选和生物监测。     

反式二氢二醇环氧苯并芘诱发的细胞DNA断裂损伤

目的　研究反式二氢二醇环氧苯并芘 [Anti 7,8 dihydrodiol 9,10 epoxidebenzo(a)pyrene ,BPDE]诱导的恶性转化的人支气管上皮细胞 (Humanbronchialepithelialcells ,HBE)及其裸鼠成瘤细胞中DNA断裂损伤情况。方法　单细胞凝胶电泳法 (Singlecellgelelectropheresis ,SCGE)。结果　反式BPDE诱导的恶性转化的HBE及其裸鼠成瘤细胞与对照组细胞相比各指标差异均有显著性 (P <0 0 1) ,各指标的高剂量与低剂量组之间差异也有显著性 (P <0 0 5 )。结论　反式BPDE可导致DNA断裂损伤 ,其损伤程度与剂量有一定关系。     

五指毛桃水提液对~(60)Coγ射线所致小鼠组织DNA损伤的防护作用

目的探讨五指毛桃水提液对60Coγ射线损伤小鼠组织DNA的防护作用。方法 40只SPF级雄性小鼠随机分为5组,阴性对照组给予生理盐水,单纯照射组作为辐射模型组,3个低、中、高给药+辐射组分别给予相当于生药5、10、20g·kg-1·d-1的五指毛桃水提液,连续灌胃到第7天。除阴性对照组外,所有小鼠接受全身一次性60Coγ照射,照射剂量为6Gy。照射后第2天处死小鼠,取肺、肝、睾丸、股骨和外周血,分别制作单细胞悬液,用单细胞凝胶电泳实验进行DNA损伤检测。结果辐射模型组小鼠组织细胞DNA的尾部DNA百分率(tail DNA%)和尾矩高于阴性对照组(P0.01),各辐射+给药组的tailDNA%和尾矩均显著低于辐射模型组(P0.01),且随着给药剂量的增加,tail DNA%和尾矩降低。结论五指毛桃水提液对60Coγ射线损伤小鼠组织DNA具有一定的防护作用。     

烹调油烟冷凝物对DNA链损伤作用的实验研究

目的 探讨烹调油烟冷凝物对人外周血淋巴细胞DNA的损伤作用。方法 采用单细胞凝胶电泳检测不同浓度的烹调油烟冷凝物处理60min后的人外周血淋巴细胞的DNA单链断裂、双链断裂及DNA-蛋白交联的情况。结果 各剂量的烹调油烟冷凝物均可引起DNA单、双链断裂(与对照组比较:P<0.05),100μg/ml及其以上浓度的烹调油烟冷凝物可诱导DNA-蛋白交联的形成(与对照组比较P<0.05),交联率分别为21.35%、27.20%、34.30%,并存在着明显的剂量-反应关系。结论 烹调油烟冷凝物能引起人外周血淋巴细胞DNA的损伤,DNA的损伤可能是烹调油烟致细胞恶性转化的重要机制之一。     

彗星实验对放射工作人员DNA损伤评价研究

目的 观察和研究放射工作人员的DNA损伤情况,探讨不同工种、工龄与DNA损伤程度之间的关系.方法 研究对象分为对照组(100人)和放射组(51人);按照工种,将放射组分为放射科组、介入组和骨科组;按照工龄(年)的不同,分为<10、10～和20～组.用中性单细胞凝胶电泳对对照组和各放射组进行检测.结果 放射组与对照组DNA损伤的差异有显著性,放射组的尾部DNA百分含量(TDNA%)、尾矩(TM)、Oliver尾矩(OTM)明显高于对照组,不同工种、工龄间均差异有显著性(P<0.01);介入组高于放射科组,放射科组高于骨科组.结论 长期小剂量电离辐射能引起放射工作人员DNA损伤,随着工龄的增加DNA损伤程度加重.     

应用单细胞凝胶电泳技术检测辐射致外周血淋巴细胞DNA损伤

应用单细胞凝胶电泳试验 （ＳＣＧＥ） 分别检测了受γ射线照射后小鼠及从事Ｘ 射线探伤工人的外周血淋巴细胞ＤＮＡ 单链断裂（ｓｓｂ） , 结果发现： ０－５Ｇｙ 和５－０Ｇｙ 的γ射线照射组小鼠, 外周血淋巴细胞彗星百分率显著高于对照组; 从事Ｘ 射线探伤工人的外周血淋巴细胞彗星百分率也显著升高。提示ＳＣＧＥ 检测的ＤＮＡｓｓｂ 可作为射线对健康影响的早期生物学指标。     

射线对人体淋巴细胞DNA损伤效应的研究

电离辐射作用于机体可引起生物大分子的激发和电离 ,造成ＤＮＡ损伤 ,染色体畸变率增加。染色体畸变已作为评价电离辐射生物学效应的参考指标。我们应用单细胞凝胶电泳 (ＳＣＧＥ)技术对放射人员外周血淋巴细胞ＤＮＡ损伤进行了检测 ,以探讨简易、敏感的评价电离辐射生物学效应的指标。一、对象与方法1 对象 :查阅某市区所有放射人员剂量档案 ,选出有确切累积暴露剂量的放射人员作为研究对象。该市从 1989年开始要求放射人员佩带个人剂量监测仪 ,但由于多种原因 ,自 1989年开始从事放射工作的人员中仅 80人有确切受照剂量接触史 ,均为男性 ,…     

应用单细胞凝胶电泳技术检测食用油烟的DNA损伤作用

应用单细胞凝胶电泳技术对菜油油烟颗粒提取物致大鼠肺Ⅱ型细胞ＤＮＡ断裂作用进行了检测。结果显示，菜油油烟能引起大鼠肺Ⅱ型细胞的ＤＮＡ断裂作用，彗尾长度与细胞油烟暴露水平之间存在明显的剂量反应关系（ｒ＝０．９５７，Ｐ＜０．０５）。本研究结果将有助于进一步了解食用油烟的遗传毒性以及证实食用油烟与肺癌发生的关系。     

γ-H2AX与DNA双链断裂关系的研究进展

H2AX是组蛋白的一个种类,普遍存在于整个基因组中。据报道,DNA双链断裂后可诱导位于丝氨酸-139位C-端保守区域内的H2AX磷酸化形成γ-H2AX,在荧光显微镜下形成可见的γ-H2AX焦点。用特异性抗体的免疫荧光法检测γ-H2AX已成为测定DSB的金标准。目前,多种物理性、化学性和生物性的因素都能诱导形成γ-H2AX焦点。本文综述了不同因素诱导形成γ-H2AX的机制及其与DNA双链断裂之间的关系的研究进展。     

DNA损伤检测—单细胞凝胶电泳技术的研究

单细胞凝胶电泳(SCGE)又称为彗星实验,是一种可以在单个细胞水平上检测DNA断裂的技术。近年来该技术被广泛应用于特定的DNA损伤、DNA特异性染色、DNA修复、遗传毒理、环境生物监测等方面的研究。在前人的基础上对该实验方法做了进一步的研究和改进,使改进后的方法更加快速简捷、经济可行。     

~(60)Coγ射线诱发小鼠DNA甲基化改变

目的探讨基因组启动子甲基化谱及DNA甲基化酶1(DNMT1)表达量在60Co-γ射线照射小鼠各组织的变化及其意义。方法 SPF级C57BL/6J雄性小鼠12只随机分为对照组和照射组,照射组小鼠接受4Gy60Co-γ射线单次全身照射后,均眼球摘除取血后处死,收集各脏器组织,进行外周血白细胞计数和骨髓嗜多染红细胞微核计数,应用甲基化DNA免疫沉淀-芯片(MeDIP-chip)杂交技术对γ射线照射小鼠肝组织基因组启动子(promoter)CpG岛甲基化改变进行分析,并采用免疫组化(SP)法和蛋白质印记(western blot)法检测小鼠各组织DNMT1的表达情况。结果与对照组比较,照射组小鼠基因组启动子甲基化谱发生了明显改变,照射组1 300个基因的启动子CpG岛发生了新的甲基化,660个基因发生去甲基化;提高筛选标准,最后可得到发生明显甲基化的基因有Trim71、Sema3f、Pcdh8、Sox4、1110034A24Rik、Limk1、Nefl、Xpr1,明显去甲基化的基因有Sfrs18、Dr1、Ankrd42、Nae1、Sfi1、Accn1、Srd5a1、Nsun2、Eif1a、Dusp5;照射组小鼠除肺组...     

乙二醛致大鼠淋巴细胞DNA损伤的实验研究

予大鼠腹腔注射不同剂量（12．5、25．0和50．0mg／kg）的乙二醛后16h采血,分离淋巴细胞,做单细胞凝胶电泳实验。另分离正常大鼠淋巴细胞,加入不同浓度（0、0．25、0．50和1．00mmol／L）的乙二醛孵育1h,做单细胞凝胶电泳实验。结果显示,（1）大鼠腹腔注射25．0和50．0mg／kg的乙二醛,淋巴细胞拖尾率与彗尾长均明显高于对照组（P〈0．05）;各剂量组间比较,差异有显著性（P〈0．05）。（2）体外染毒0．50和1．00mmol／L乙二醛,大鼠淋巴细胞拖尾率与彗尾长均高于对照组,且各剂量组间差异有显著性（P〈0．05）。提示腹腔注射25．0和50．0mg／kg及体外染毒0,50和1．00mmol／L乙二醛可致大鼠淋巴细胞DNA损伤,且随着染毒剂量增加,DNA损伤加重。     

放射性核素内照射诱发的DNA损伤效应

目的 研究晚期混合裂变产物内照射对大鼠外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)DNA的损伤作用。方法 雄性Wistar大鼠经不同累积剂量和不同剂量率的晚期混合裂变产物内照射后,获得PBMC单细胞悬液,采用单细胞凝胶电泳(Single cell gel electrophoresis,SCGE)技术,检测细胞DNA链的断裂改变。结果 经晚期混合裂变产物作用后,各照射组PBMC DNA链断裂的迁移长度增加(P <0.05),显示良好的剂量效应关系和剂量率效应关系,均符合直线模型。结论 在本实验的内照射剂量下,晚期混合裂变产物能引起PBMC的DNA损伤,且呈现良好的剂量效应关系和剂量率效应关系。     

单细胞凝胶电泳技术对离体和整体照射致细胞DNA断裂的一致性研究

目的 探讨整体照射与离体照射导致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂的一致性,作为单细胞凝胶电泳技术应用于辐射生物剂量学的前期研究。方法 采用双层铺胶法进行中性单细胞凝胶电泳,观察小鼠淋巴细胞整体与离体照射后的DNA双链断裂,用CASP软件分析彗星图像,SPSS12.0进行数据的统计学分析。结果 彗星头部DNA%(HDNA%)、尾部DNA%(TDNA%)、彗星全长(CL)、尾长(TL)、尾矩(TM)和Olive尾矩(OTM)在整体照射和离体照射组之间的差别均无显著性。结论 离体血γ射线照后即刻进行中性单细胞凝胶电泳,可以客观准确地反映整体照射的淋巴细胞DNA双链断裂损伤。     

硒对大鼠肝细胞DNA损伤的研究

为探讨硒的遗传毒性，应用单细胞凝胶电泳研究亚硒酸钠对离体大鼠肝细胞ＤＮＡ损伤的作用。结果表明，８．７５μｍｏｌ／Ｌ，１７．５０μｍｏｌ／Ｌ，３５．００μｍｏｌ／Ｌ的亚硒酸钠可以引起肝细胞ＤＮＡ单链断裂，出现拖尾的彗星细胞。