甘油-卵黄-柠檬酸钠型冷冻保护剂未经冷冻对人精子运动学参数的影响

目的 研究甘油-卵黄-柠檬酸钠(glycerol-egg yolk-sodium citrate,GYC)型冷冻保护剂对人精子运动学参数的影响.方法 供精者精液标本183例,按照世界卫生组织推荐的方法和仪器行精液常规分析和计算机辅助精子分析(computer-aided sperm analysis,CASA);加入GYC型冷冻保护液后再次行CASA获得精子运动学参数.结果 加入GYC型冷冻保护剂后,供精者精子各项运动学参数与加入冷冻保护剂前的运动学参数均有显著的正相关(P<0.05);加入冷冻保护剂后,除BCF外,供精者精子各项参数的改变均有统计学意义(P<0.05).结论 GYC型冷冻保护剂对人精子的运动学参数有影响;人精子冷冻保护剂的配方仍需改良.     

含甘油冷冻保护液和冷冻复苏过程对人精子运动状态的影响

目的: 观察添加含甘油冷冻保护剂和冷冻复苏过程对精子运动能力的影响。　方法: 采用计算机辅助的精液分析技术对 18份人精液的精子运动状态进行检测,对比分析加入含甘油冷冻保护剂前后与冷冻复苏后的结果。　结果: 加入高渗透压的冷冻保护剂后,精液中快速直线运动精子的比例增加(P<0. 05),同时精子运动曲线速度(VCL)、直线速度(VSL)和平均路径速度(VAP)值均增加(P均 <0. 005),但前向运动精子和精子活率并无改变;冷冻前和复苏后比较,精子的各项运动速度和各级运动精子的比例均明显下降 (P均≤0. 01),精子头侧摆幅度(ALH)减小,摆动性(WOB)、直线性(LIN)、以及前向性 (STR)差异均无显著性 (P>0. 05)。复苏后精子运动模式特征的差异仅表现在与处理前相比较时。　结论: 在添加甘油的高渗透压的冷冻保护剂后,精子的运动速度更快,a级精子增多。冻融过程的损伤削弱精子的运动能力甚至使部分精子丧失运动能力导致精子活率全面下降。不同的冷冻复苏环节对精子运动的影响有所不同。     

不采用冷冻保护剂的玻璃化法与常规冷冻法对人精子冷冻复苏效果的比较

目的比较不采用冷冻保护剂的玻璃化法与常规冷冻法对人精子冷冻复苏的效果。方法将15份上游后的精液标本分别采用常规精子冷冻和不使用冷冻保护剂的冷冻环玻璃化法冷冻,比较精子复苏后的活力、形态及精子膜的完整性三项指标。结果冷冻前、前向活动精子百分率、正常精子形态百分率及精子膜完整率分别为(79±6.42)%、(34±9.36)%和(91±5.18)%;不采用冷冻保护剂的玻璃化法冷冻复苏后,三者分别为(42.20±8.35)%、(31.00±7.63)%和(50.00±9.34)%。常规冷冻法冷冻复苏后,三者分别为(38.00±15.80)%、(30.00±5.24)%和(47.00±13.67)%。冷冻前后前向活动精子百分率和精子膜完整率的差别有统计学意义,但两种冷冻方法相比差异无统计学意义。结论使用不加入冷冻保护剂的玻璃化方法冷冻人的精子是可行的,可取得与常规冷冻相同的效果。     

Percoll法处理对人精子运动参数的影响

为观察来源于３种不同精液标本精子运动参数的差异及其Ｐｅｒｃｏｌｌ处理后的变化，本文对新收集的正常精液精子（Ｉ组）少精及弱精症精子（Ⅱ组）及正常精液冻融精子（Ⅲ组）各１０份，分别于Ｐｅｒｃｏｌｌ处理前后电子计算机精液分析仪（Ｃｏｍｐｕｔｅｒａｓｓｉｓｔｅｄｓｅｍｅｎａｎａｌｙｓｅｒ）进行运动特性分析，记录ＭＯＴ，ＶＳＬ，ＶＣＬ，ＬＩＮ，ＡＬＨ及ＶＡＰ６项参数，其结果进行统计学分析，Ｐｅｒｃｏｌｌ处理     

复温方法及保护剂对人冷冻精液复温后精子存活率的影响

作者对冷冻精液的四种复温方法及两种保护剂分别进行了202例和194例次的对比观察。结果表明:冷冻的复温效果受复温方法影响.快复温比慢复温效果好,37℃水浴和48℃水浴复温效果明显优于室温(22℃)空气中和孵箱(37℃)内放置(P<0.001),并结合观察结果,对快速复温及效果良好的机制进行了讨论。甘油和甘油-卵黄-柠檬酸钠复合剂两种冻精复温后,精子存活率十分接近(P>0.05).表明两种保护剂对精子的保护效能大致相同.     

Percoll法处理对人精子运动参数的影响

为观察来源于３种不同精液标本精子运动参数的差异及其Ｐｅｒｃｏｌ处理后的变化，本文对新收集的正常精液精子（Ⅰ组），少精及弱精症精子（Ⅱ组）及正常精液冻融精子（Ⅲ组）各１０份，分别于Ｐｅｒｃｏｌ处理前后用电子计算机精液分析仪（Ｃｏｍｐｕｔｅｒａｓｉｓｔｅｄｓｅｍｅｎａｎａｌｙｓｅｒ）进行运动特性分析，记录ＭＯＴ、ＶＳＬ、ＶＣＬ、ＬＩＮ、ＡＬＨ、及ＶＡＰ６项参数，其结果进行统计学分析。Ｐｅｒｃｏｌ处理后，各组精子６项参数值均较处理前提高，差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５～０．００１）。处理前Ⅰ组与Ⅱ、Ⅲ组除ＶＳＬ无显著差异外，余５项参数值均有显著差异。Ⅲ组的ＡＬＨ，ＶＣＬ最高，其它参数Ⅰ组最高。Ｐｅｒｃｏｌ处理后差异值降低。Ｐｅｒｃｏｌ处理后精子运动６项参数值均提高；异常精液精子运动特性与正常精液精子有明显差异；正常精子冷冻复苏后其ＶＣＬ及ＡＬＨ明显提高。     

冷冻前平衡处理对人精子冻融后相关参数的影响

目的:研究冻前平衡处理对冷冻精子复苏率的影响,优化一步熏蒸法,以寻找人类精子冷冻的最优方法。方法:使用50例自愿供精者的正常精液标本,同1例供精者的精液一式3份,分别采用不平衡直接冷冻法、室温平衡10 min后冷冻与4℃平衡10 min后冷冻的方法进行处理。复苏后用计算机辅助精液分析(CASA)系统分析3组标本冷冻前后精子运动参数的变化,并检测各组标本精子的畸形率和存活率。结果:4℃平衡组的前向运动精子复苏率[(61.88±16.94)%]显著高于未平衡组[(48.61±16.44)%]和室温平衡组[(49.41±13.77)%](P<0.05),而室温平衡组与未平衡组前向运动精子复苏率则无显著性差异。3组标本经冷冻复苏后其精子畸形率和存活率无显著性差异。结论:冻前4℃平衡10 min的冷冻前处理方法操作简单,实验条件易控,对提高精子复苏率有重要意义。     

不同冷冻方法对人睾丸精子冷冻保存效果的研究

目的比较不同冷冻保护剂和不同冷冻载体对人睾丸精子的冷冻保存效果。方法选取在兰州大学第一医院生殖医学专科医院进行诊断性睾丸穿刺获得成熟活动精子的患者,以及行睾丸精子ICSI术后的患者,在知情同意下将剩余睾丸组织冷冻保存,共46例。将每例睾丸组织分为4份,随机分成4组进行冷冻:1.8ml冷冻管+甘油复合冷冻剂(A组,46例);1.8ml冷冻管+Fasrun冷冻保护剂(B组,46例);0.25 ml麦管+Fasrun冷冻保护剂(C组,46例);超微量冷冻麦管+Fasrun冷冻保护剂(D组,46例)。冷冻标本经液氮熏蒸后投入液氮,比较各组复苏后精子活力和复苏率。结果冷冻前各组的活动睾丸精子能够满足ICSI操作所用精子量;冷冻复苏后,C组和D组能够容易找到正常活动精子(≥0.1/200倍视野)的例数显著高于A组、B组(P0.05);D组解冻后运动精子复苏率显著高于A组、B组(P0.05),C组解冻后运动精子复苏率显著高于A组(P0.05)。结论应用改良的超微量冷冻麦管+Fasrun冷冻保护剂能够提高睾丸精子的冷冻复苏率。     

精子冻存技术及上游法精子处理技术对精子DNA完整性的影响

目的通过对冷冻前后及精子处理前后精子DNA完整性的比较,探讨冷冻技术、冷冻时间及上游法精子处理技术对精子DNA完整性的影响。方法（1）精液常规检测正常的患者30例,手淫法取精,精液液化混匀后分4份,分别用于精子染色质扩散（SCD）实验检测精子DNA完整性、上游法处理精液、以及两组冻存实验（不加保护剂直接冻存的为冻存1组;添加蛋黄葡萄糖保护剂冻存的为冻存2组）;（2）上游法处理后的精液一部分用于检测精子动力和形态,一部分用于精子DNA完整性检测;（3）冻存1组分别于冻存第7天和第90天解冻,SCD实验检测精子DNA完整性;（4）冻存2组分别于第7天和第90天解冻,0．1ml用于精子DNA完整性检测,剩余精液应用上游法处理,检测上游处理前后精子DNA的完整性。结果（1）冻存1组中,冻存90d后解冻的精子DNA损伤率[（25．6土7．3）％]显著高于冻存7d者[（22．4±7．4）％]（P〈0．05）,且均显著高于新鲜精液的精子DNA损伤率[（20．6±7．3）％]（P〈O．05）;冻存2组中,冻存90d后精子DNA损伤率显著高于冻存7d者[（25．9±7．2）％VS．（23．6土7．8）％]（P〈O．05）,且均显著高于新鲜精液（P〈0．05）;而冻存7d和90d后,两个冻存组间比较,精子DNA损伤率均无显著差异（P〉0．05）。（2）新鲜精液经上游法处理后,精子DNA损伤率由处理前的（20．6±7．3）％降为（6．4±2．5）％（P〈O．05）;冻存2组中精液冻存7d和90d后复苏上游法处理后,精子DNA损伤率较未经上游法处理者均显著降低[分别为（9．38±2．8）％VS．（23．6±7．8）％和（9．7±2．6）％VS．（25．9±7．2）％]（P％0．05）。结论冻存对精子DNA有损伤,冻存时间对于精子DNA完整性有影响。不添加保护剂直接冻存和添加保护剂对精子DNA完整性的影响无显著差异。不论是新鲜精液还是冻存复苏精液,上游法处理并不会增加精子DNA的损伤,且有利于筛选出具有更好DNA完整性的精子。     

甘油、卵黄及其复合液对新鲜精子的影响

甘油、卵黄及其复合液对新鲜精子的影响王新生王沛涛崔向东甘油和卵黄是精子低温冷冻保存的常用保护剂成分。本研究分别对甘油溶液、卵黄溶液及甘油－卵黄－枸椽酸钠复合液（ＣＰＭ）对新鲜精子的功能指标的影响进行了观察。一、材料与方法１．材料来源：正常生育男性，年...     

冷冻对人精子遗传物质的影响

精液冷冻是辅助生殖技术的一个必要环节。由于AID的广泛应用及人类精子库的建立 ,关于冷冻保存对人精子遗传物质的影响日益受到重视。本文就冷冻保存对人精子染色体及染色质的影响以及防范措施进行综述     

冷冻保护剂与精液比例对冷冻复苏后精子活动力的影响

目的:比较冷冻保护剂与精浆的不同比例对人类精子冷冻复苏后活动力的影响。方法:将57例志愿者的精液标本分别采用冷冻保护剂∶精液=1∶1和冷冻保护剂∶精液=1∶3的体积比进行冷冻,比较精子复苏后的前向活动率和总活动率。结果:冷冻前的前向运动精子百分率和总活动率分别为(58.60±5.57)%和(66.17±5.24)%。采用冷冻保护剂∶精液=1∶1比例进行冷冻复苏后的前向运动精子百分率和总活动率分别为(40.53±8.97)%和(51.23±9.30)%;采用冷冻保护剂∶精液=1∶3比例进行冷冻复苏后的前向运动精子百分率和总活动率分别为(44.70±8.67)%和(51.50±7.40)%。冷冻前后精子的前向运动百分率和总活动率差异有显著性(P<0.05)。两种不同比例的保护剂相比冷冻后前向运动精子百分率差异有显著性(P<0.05),而总活动率差异没有统计学意义。结论:冷冻对精子活动力损伤明显,冷冻保护剂∶精液=1∶3比例较冷冻保护剂∶精液=1∶1比例可提高冷冻后前向运动精子百分率。     

冰箱冷冻法和程序降温仪冷冻法对人类精液冷冻复苏后精子参数的影响

<正>近些年,随着更多的精子库在国内得到卫生部的批准而成立,精液的冷冻技术也有了很大的提高,除了世界卫生组织《人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)推荐的冷冻方法外[1],还衍生出了更多的其他精液冷冻方法[2-3]。程序降温仪由于能够精确控制液氮蒸气注入冷冻室的速率,降温速率精确,仍然为首选的冷冻方法。但由于人们对精子库认识的加深和理解,更多的捐精志愿者来到精子库进行精液的捐献,而仅靠程序降温仪已经不能满足     

中药还精方对人精子运动及相关参数的影响

本研究采用血清药理学的方法,通过人精子与含药血清共培养,观察了中药还精方对人精子运动的作用,并运用计算机辅助的精液自动分析系统客观地评价中药还精方对精子的影响,以期进一步阐明中药还精方在男性不育症治疗中的作用.     

肾移植对精子形态及运动参数的影响

目的 探讨肾移植对人精子形态及运动参数的影响。方法 对15例男性尿毒症患者在肾移植前后分别进行了精液各项指标的测定，并与12名正常男性进行对照。结果 肾移植后患者的精子活力、存活率及精子运动活力参数较术前有明显改善（P〈0．05），而精子密度、精子正常形态率、头部缺陷精子百分率、MAI和SDI及精子运动方式参数与术前相比无明显改善（P〉0．05）。结论 接受肾移植后患者精子运动能力得到了明显改观，但精子形态及密度的改善并不明显。这一结果是否与服用环胞素A引起FSH水平升高有关，需要进一步研究。     

代谢综合征对精子DNA碎片及核蛋白组型的影响

<正>代谢综合征(metabolic syndrome,MS)是指人体的蛋白质、脂肪、碳水化合物等物质发生代谢紊乱的病理状态,是以胰岛素抵抗为病理生理基础的复杂性代谢紊乱症候群,是导致糖尿病、心脑血管疾病的重要危险因素。其中,睾酮低下是MS的独立危险因素。MS病因尚未完全明确,目前,国内外学者认为其是多基因和多种环境相互作用的结果,且与遗传、免疫等有密切的关系。Morrison等~([1])认为随     

乙肝病毒对人精液参数和精子DNA完整性的影响

目的:探讨精液中乙肝病毒存在对精液参数和精子DNA完整性的影响。方法:采用实时荧光定量PCR技术对153例血清乙肝表面抗原阳性患者精液进行乙肝DNA定量检测,采用精子染色质扩散法检测精子DNA损伤指数(DFI),对比分析精液HBV DNA阳性组(A组,n=43)与阴性组(B组,n=110)精液参数包括精液体积、精子浓度、存活率、前向运动精子百分率、平均直线速率(VSL)、平均路径速率(WAP)结果,以及HBV DNA拷贝数与精子DNA损伤指数的关系。结果:乙肝感染者精液HBV DNA检出率为28.1%(43/153);两组年龄、精液体积、精子浓度无统计学差异(P>0.05),A组精子存活率显著低于B组[(51.4±17.1)%vs(58.0±18.8)%,P>0.05],前向运动精子率显著低于B组[(24.5±10.1)%vs(29.6±13.3)%,P>0.05],VSL显著低于B组[(19.9±4.5)μm/s vs(23.7±4.0)μm/s,P<0.01],WAP显著低于B组[(23.4±5.3)μm/s vs(26.5±7.0)μm/s,P<0.01];A组精子DNA碎片指数显著高于B组[(24.2±9.4)%vs(19.3±8.0)%,P<0.01];精液中HBV DNA拷贝数与精子DNA碎片指数呈正相关(r=0.819,P<0.01)。结论:精液中HBV DNA存在对精子数量尚未构成显著影响,但可能改变一些精液参数,包括精子活力和运动速度以及精子DNA完整性,精液中乙肝病毒载量和精子DNA损伤之间呈现病毒载量-效应关系。     

冷冻技术对精子印记基因DNA甲基化影响的研究

目的检测常规精液冷冻技术中冷冻保护剂、冷冻过程及冷冻时间长短对精子父源印记基因H19及母源印记基因MEST印记控制区域(imprinting control region,ICR)的DNA甲基化的影响程度。方法以10例符合精子库捐精条件的正式志愿者为研究对象,将每份精液样品平均分为4组:A组为新鲜精液,作为对照;B组加入同体积冷冻保护剂,不冷冻;C组加同体积冷冻保护剂,冷冻2d;D组加同等体积冷冻保护剂,冷冻两个月。通过亚硫酸氢盐克隆测序法分析H19及MEST ICR的DNA甲基化状态。结果四组(A、B、C、D组)H19基因ICR区的DNA甲基化率以克隆数计算时分别为58.70%、53.85%、49.46%和45.74%,以CpG岛数计算时分别为97.57%、97.33%、97.13%和96.56%,两者都有降低趋势,但组间差异均无统计学意义(P0.05);四组MEST基因ICR区甲基化率以克隆数计算时分别为41.10%、45.33%、47.30%和50.68%,以CpG岛数计算甲基化率时分别为1.77%、1.74%、2.00%和2.26%,有升高趋势,但差异亦无统计学意义(P0.05)。结论常规精液冷冻复苏技术对精子父源印记基因H19及母源印记基因MEST的ICR区甲基化程度未见明显影响。     

不同灭菌法对深冻及冻干人骨拉力螺钉生物力学性能的影响

目的 测试不同灭菌法对深冻及冻干人骨拉力螺钉（ｌａｇ－ｓｃｒｅｗ ｍａｄｅ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ,ＬＨＢ）的剪切和扭转生物力学性能的影响。方法 取青壮年新鲜尸体标本的股骨干,经深冻后制成４８枚直径为５ｍｍ的ＬＨＢ,随机等分成６组（Ｆ￣Ｆ）。分别作如下处理：Ａ组：单纯深冻;Ｂ组：深冻＋环氧乙烷（ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｏｘｉｄｅ,ＥＯ）熏蒸;Ｃ组：深冻＋＾６０Ｃｏ照射,Ｄ组：深冻＋冻干;Ｅ组：深