氧自由基对大鼠肺功能和形态学的影响

氧自由基对大鼠肺功能和形态学的影响首都儿科研究所呼吸功能室（北京１０００２０）黄伟雄宋国维孙丽萍马广松甘小庄氧自由基与肺损伤的关系日益引起人们关注。本实验采用气道滴注氧自由基发生剂黄嘌呤（ｘａｎｔｈｉｎｅ，Ｘ）和黄嘌呤氧化酶（ｘａｎｔｈｉｎｅｏｘｉｄ...     

体内抑制黄嘌呤氧化酶活性的一个简单测定方法

别嘌呤醇是一种黄嘌呤氧化酶抑制剂。已用于治疗缺氧和组织嘌呤缺乏并发症,如心肌缺血和肾移植。还可能广泛应用于治疗其他疾病(如痛风)。体外测定黄嘌呤氧化酶抑制剂活力是容易的,但体内测定不方便。由于腺嘌呤肾是给大鼠大量腺嘌呤,而引起一种黄嘌呤氧化酶作用产生的腺瞟呤氧     

黄芪皂甙抗犬心肌自由基损伤作用

在黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶制造的自由基损伤模型上，用引导培养心肌细胞动作电位和离体心脏灌流的方法，发现黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶使动作电位的各参数减少，使离体心功能显著下降，而黄芪皂甙可使上述改变向正常方向转化，因此，黄芪皂甙具有抗自由基损伤作用。     

在培养的心肌细胞中锌的抗氧自由基损伤作用的观察

本文通过向培养基中加入黄嘌呤和黄(?)呤氧化酶系统成分造成培养的心肌细胞受氧自由基伤害,以电生理的改变和BaCL_2引起心肌细胞停搏的闭浓度为指标,观察了微量元素Zn的抗氧化损伤作用。结果示:XOD组与对照组比较,动作电位APA、OS、MDP、TP、Vmax及APD_(50)各电参数明显减小。BaCl_2引起心肌细胞停搏的阈浓度亦减低。而加Zn组与对照组比较,以上结果除TP值偏低P<0.05外,其它参数则无显著性改变。加Zn组与XOD组相比,动作电位各电参数明显增大,BaCl_2引起心肌细胞停搏的阈浓度亦增高。提示Zn对培养的心肌细胞氧自由基所致的损伤具有保护作用。     

活性氧对平滑肌细胞合成基质金属蛋白酶-1, 3及其抑制物的影响

目的:探讨活性氧(ROS)对血管平滑肌细胞合成基质金属蛋白酶-1,3(MMP-1,3)和基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)的影响,从而推测其是否促进动脉粥样硬化斑块的破裂。方法:体外培养胎儿主动脉平滑肌细胞,加入含100μmol/L黄嘌呤,5U/L黄嘌呤氧化酶的无血清培养液,孵育24h,收集细胞上清液。用Westernblotting方法检测浓缩后的细胞上清液中MMP-1,3和TIMP-1的含量。结果:黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶组细胞上清液中的MMP-1含量明显少于正常对照组,并且转化成活性形式;MMP-3的含量明显多于正常对照组,并且转化成活性形式;TIMP-1的含量明显少于正常对照组。结论:ROS对MMPs-TIMPs平衡的影响很复杂,可能对动脉粥样硬化斑块的破裂起一定作用。     

家兔肝缺血再灌注损伤时氧自由基的动态变化及川芎嗪的保护作用

目的：观察家兔肝缺血再灌注损伤时氧自由基的动态变化,探讨川芎嗪的保护作用。方法：健康家兔２０只,随机分为对照组（ｎ＝１０）,川芎嗪保护组（ｎ＝１０）,制备肝缺血再灌注损伤模型。连续观察缺血前、缺血２５ｍｉｎ、再灌注２５ｍｉｎ、再灌注６０ｍｉｎ和再灌注１２０ｍｉｎ时血浆中丙二醛（ＭＤＡ）含量和黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷丙转氨酶（ＡＬＴ）活性的动态变化及川芎嗪对上述指标的影响。结果：肝缺血再灌注损伤时,对照组的ＭＤＡ、ＸＯ和ＡＬＴ明显升高,ＳＯＤ显著降低并随灌注时间的延长呈阶…     

肺表面活性物质对大鼠肺损伤后氧合功能的影响

目的和方法：本研究利用氧自由基所致的大鼠肺损伤模型,对肺损伤后肺表面活性物质（ＰＳ）病理改变和外源性ＰＳ替代治疗的作用进行了探讨。结果：大鼠气道滴入黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶２４ｈ后,ＰａＯ２和胸肺顺应性显著下降;肺系数明显增高,组织学观察可见炎症性肺水肿。肺支气管灌洗液分析结果表明ＰＳ含量减少,蛋白含量增高。应用外源性ＰＳ治疗后,ＰａＯ２从处理前３２４±８６ｋＰａ上升到４７５±２９ｋＰａ（Ｐ＜００１）。结论：（１）肺损伤后的不同阶段ＰＳ的病理变化可能是不一致的;（２）外源性ＰＳ的替代治疗有明显效果。     

硫氮酮对失血性休克犬多器官超微结构及脂质过氧化的影响

采用犬失血性休克输血复苏模型，观察了硫氮酮（Ｄｉｌｔｉａｚｅｍ，ＤＺ）对休克犬肝、肾、心、肺４个器官组织超微结构及组织中丙二醛（ＭＤＡ）含量和黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）活性的影响。结果显示：ＤＺ可使休克犬各器官组织超微结构的损伤性改变明显减轻；ＤＺ处理组各器官组织中ＭＤＡ含量和ＸＯ活性均显著低于对照组。表明ＤＺ对失血性休克犬多个器官具有保护作用，该效应与其抑制ＸＯ活性和氧自由基介导的脂质过氧化反应有关。     

缺血—再灌注损伤机制的研究进展

随着临床新技术开展。缺血器官恢复灌流成为现实。然而恢复灌流器官往往不仅功能未恢复,反而使结构损伤和功能障碍更加重了,故称为缺血再灌注损伤(IRI)。IRI的机制至今未能完全阐明,但从近来的大量研究看,IRI与自由基、钙代谢紊乱、血管内皮损伤及白细胞浸润等现象密切相关。 一、自由基的作用机制 自由基的产生:正常情况下,ATP代谢产物次黄嘌呤能迅速被黄嘌呤氧化酶(XOD)转变为黄嘌呤,进而     

胞浆游离钙在氧自由基诱导肾近端肾小管上皮细胞

氧自由基在细胞损伤和肿瘤发生中起重要作用.它以破坏细胞膜结构、影响离子运动和改变基因表达等多种方式损伤受累细胞.本文应用原代培养鼠近端肾小管上皮细胞来研究黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统产生的氧自由基对原癌基因c—fos、c—jun和c—mycmRNA表达的影响.     

氧自由基对人胚软骨细胞超微结构的影响

采用体外软骨细胞培养方法，观察由黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶系产生的氧自由对人胚软骨细胞超微结构的影响，结果表明，该酶系产生的自由基对人胚软骨细胞膜及细胞器产生了明显的损伤作用，从而间接提示炎性关节疾病时活化中性白细胞、巨噬细胞释放的氧自由基可能是引起关节软骨损伤的原因之一。     

黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶对培养心肌细胞的损伤及硒的保护作用

向培养心肌细胞中加入黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(X-XOD)后,动作电位的APA、OS、V_(max)及APD减少,MDP、TP水平上移;细胞在MEM中搏动率降低,加钡后细胞收缩频率迅速增加,且X-XOD作用时间越长,上述改变越显著。X-Mo的作用与此类似,但较轻。加硒则能逆转上述的细胞损伤性变化。这表明X-XOD和X-Mo均能造成心肌细胞损伤,硒对心肌细胞有保护作用。     

阿司匹林,卡托普利及二者合用对豚鼠心肌活性氧损伤的保护作用

用黄嘌呤黄嘌呤氧化酶系统产生活性氧，诱发豚鼠右室前乳头肌氧化损伤，通过动物实验观察了阿司匹林，卡托普利及Ａｓｐ＋Ｃａｐ对心肌活性氧损伤的保护作用。发现Ａｓｐ对Ｘ／ＸＯ诱导的心乳头肌收缩性，不应期，兴奋性和自律性的变化，以及心肌ＳＯＤ活性降低，ＭＤＡ含量升高，无显著抑制作用；     

氧自由基损伤海马神经元及人参皂甙的保护作用

采用胎龄 18天大鼠海马神经元进行培养 ,第 5天以黄嘌呤 -黄嘌呤氧化酶 (X- XO)体系建立氧自由基损伤模型 ,并分别给与人参皂甙 (Gin)、超氧化物歧化酶 (SOD)、Gin+ SOD,观察氧自由基对神经元的损伤及 Gin、SOD的保护作用 ,结果表明 :氧自由基组细胞死亡率明显高于正常组 (P<0 .0 1) ,各抗自由基组细胞死亡率接近正常组 (P>0 .0 5 ) ,自由基组神经元细胞器严重受损 ,脂褐素增多 ,核变形偏位 ,胞浆与胞核比例减少 ,而各抗自由基组上述损伤减轻 ,提示 Gin和 SOD可增强神经元抗氧化能力 ,减轻氧自由基对神经元的损害     

白藜三醇对黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶所致平滑机细胞增殖的干预作用

目的探讨红葡萄酒 (RW)是否对血管SMC增殖具有抑制作用。方法以培养幼兔主动脉平滑肌细胞为研究对象 ,分别给予不同浓度黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶和/或白藜三醇 ,采用免疫组织化学、3H -TdR掺入试验和MTT法技术检测不同处理对平滑肌细胞的增殖作用。结果RES呈剂量依赖性拮抗X/XO对VSMC的促增生效应 ;终浓度50umol/L的RES对X200umol/L/XO200u/L所致促VSMC的增殖效应即有抑制作用(P<0.05) ;终浓度200umol/L的RES对X200umol/L/XO200u/L所致促VSMC的增殖效应则具有极显著的抑制作用 (P<0.001)。结论红葡萄酒中的有效成份白藜三醇可拮抗黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶所致平滑肌细胞的作用 ,这可能有助于减轻或防治氧化损伤对血管平滑肌细胞增殖的影响。     

褪黑素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨褪黑素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 将72只6—7周龄的健康雄性Wistar大鼠,随机分为3组,即褪黑素处理组（Mel组）、酒精溶媒对照组（Ale组）、生理盐水对照组（NS组）。建立肝缺血再灌注损伤模型,于不同时点用TBA法和黄嘌呤氧化酶法分别测定肝组织丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）含量,免疫组织化学方法检测分析核因子-kB（NF-kB）的表达情况,结果MDA含量在再灌注后各时点的Mel组均显著低于Ale及NS对照组（P〈0．05）,SOD含量在再灌注后3h、12h、24h时点的Mel组显著高于Ale及NS对照组（P〈0．05）;Mel组再灌注后各时点的NF-kB蛋白表达阳性率均显著低于Ale组和NS组（P〈0．05）。以上各项指标在各时点Alc组与NS组相比无显著性差异。结论 Mel抗氧化及抑制肝细胞NF—kB的表扶,可能是大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用机制之一。     

钼对培养心肌细胞的双向性影响

黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统(X-XOD)可诱发培养心肌细胞的自由基损伤。鉴于钼是黄嘌呤氧化酶(XOD)的重要组分,而且钼对于心肌细胞有保护作用还是有损伤作用的报道不尽一致,本实验拟以心肌细胞动作电位与自发性搏动为指标,探讨钼对心肌细胞机能影响的规律。 实验方法取新生昆明种小鼠与Wistar大鼠的乳鼠;胎龄4～6个月,水囊引产的人胚心尖,分别经0.1％胰蛋白酶分离心肌细胞,然后将其置入聚苯乙烯培养瓶,在36.5℃、5％CO_2和95％空气的孵箱内培养。常规培养基由80％199及20％小牛血清组成。小鼠心肌细     

高嘌呤食饵诱导的鹌鹑尿酸及糖脂代谢紊乱模型的发病特点与病理机制研究

目的:模拟临床人类饮食结构改变,观察高嘌呤食饵对鹌鹑尿酸及糖脂代谢的影响,探讨高尿酸血症并糖脂代谢紊乱的发病规律与病理机制。方法:采用高嘌呤食饵诱导法塑造鹌鹑尿酸及糖脂代谢紊乱模型,动态观察各组鹌鹑血清尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、血糖(GLU)及相关代谢酶黄嘌呤氧化酶(XOD)、鸟嘌呤脱氨酶(GuDa)、腺苷脱氨酶(ADA)、三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)酶活性、胰岛素(Ins)水平变化。结果:高嘌呤食饵诱导鹌鹑造模10-140 d血清UA水平显著升高;60-140 d伴发血清TG水平显著升高;90-140 d同时伴发血清GLU水平显著升高;造模第10、60、140 d血清XOD活性显著升高;造模第60-140 d模型组鹌鹑全血GAPDH活性显著降低;造模第60-140 d模型组鹌鹑Ins水平显著升高。结论:(1)高嘌呤饮食可诱发鹌鹑UA、TG、GLU多代谢紊乱,模拟临床尿酸及糖脂多代谢紊乱的疾病表现。(2)其发病特点表现为单纯高尿酸血症,而后伴发高甘油三酯血症,最终发展成为高尿酸并高甘油三酯/高血糖血症。(3)该病理机制可能与血清XOD活性、Ins水平升高及全血GAPDH活性降低有关。     

尿酸对果蝇生长发育及寿命等的影响及机制

目的：通过高嘌呤饮食构建果蝇高尿酸血症模型,探讨尿酸（UA）对果蝇生长发育和寿命的影响及机制。方法：收集羽化后8 h内的果蝇1 000只,随机分为对照组（0%腺嘌呤干预）、低浓度干预组（0.1%腺嘌呤干预）、中浓度干预组（0.2%腺嘌呤干预）和高浓度干预组（0.3%腺嘌呤干预）。观察各组果蝇的寿命、攀爬能力及产卵量情况,并应用ELISA测定果蝇体内UA及相关酶的变化,以及氧化应激相关指标的表达变化。此外,收集果蝇卵400只,与上述分组相同,观察各组幼虫的蛹化及羽化情况。结果：与对照组比较,随着培养基中腺嘌呤浓度的升高,各干预组果蝇体内UA、尿酸氧化酶（UOD）和黄嘌呤氧化酶（XOD）表达水平显著升高（P<0.01）。各干预组超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）表达水平及总抗氧化能力（T-AOC）显著升高（P<0.01）,一氧化氮（NO）水平显著降低（P<0.01）,而丙二醛（MDA）水平则呈现先升高后降低的趋势。与对照组比较,随着果蝇体内UA水平的不断升高,各干预组果蝇的平均寿命显著降低（P<0.01）,中、高浓度干...     

OPH对停灌-复灌心肌线粒体抗氧化能力与钙超载的影响

目的 :ＯＰＨ是对心血管系统有明显活性的创新化合物。以往在试管内的研究显示它明显抑制黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统及中性粒细胞产生超氧阴离子 ,抑制Ｆｅｎｔｏｎ反应生成·ＯＨ的速率。它对抗Ｆｅ2 -ｃｙｓｔｅｉｎｅ或Ｆｅ2 -Ｈ2 Ｏ2 等自由基产生系统引起的心肌线粒体损伤 ,使线粒体ＭＤＡ下降 ,ＧＳＨ增加。对于鼠心停灌 -复灌损伤 ,ＯＰＨ改善复灌时的心肌收缩功能 ,增加心肌ＳＯＤ和ＧＳＨ -ｐｘ活性。为进一步了解ＯＰＨ在器官水平的抗氧化作用 ,本研究系统观察它对停灌 -复灌心肌线粒体抗氧化能力与钙超载的影响。方法 :大鼠Ｌａ…