苦豆子总碱对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦平滑肌作用机制的影响

目的:观察苦豆子总碱(total alkali Sophora alopecuroids,TASa)对糖尿病胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)大鼠胃窦平滑肌活动的影响。方法:1腹腔注射链脲佐菌素建造糖尿病大鼠模型;2测定糖尿病大鼠胃内色素残留率和小肠传输速率以证实DGP模型的建立;3用恒温灌流浴槽,将标本分为正常组(NS)和DGP模型组,模型组分:TASa,TASa+异搏定(1×10-7mg·L-1),TASa+酚妥拉明(1×10-6mg·L-1),TASa+苯海拉明(1×10-6mg·L-1),TASa+消炎痛(1×10-6mg·L-1)和TASa+阿托品(1×10-6mg·L-1)6组,以探讨TASa对DGP大鼠胃窦平滑肌的作用及机制。结果:TASa能增强DGP大鼠胃窦平滑肌收缩波的振幅、持续时间和收缩面积(P0.01),但对频率无显著影响;异搏定能明显抑制TASa收缩平滑肌的作用,而阿托品、酚妥拉明、苯海拉明和消炎痛无影响。结论:TASa可能是激活Ca2+通道而加强DGP大鼠胃窦平滑肌的收缩作用。     

王不留行对大鼠子宫平滑肌的影响

目的:观察王不留行(Vaccaria segetalis Garcke,VSG)水煎剂对大鼠子宫平滑肌离体肌条的作用机制。方法:采用恒温灌流浴槽,记录子宫平滑肌离体肌条收缩波的振幅、持续时间、收缩面积和频率,给予VSG(2 mg·L-1,4 mg·L-1,8 mg·L-1,16 mg·L-1,32 mg·L-1)并观察其量效关系(r);将标本分为正常组(NS)、VSG、VSG+异搏定、VSG+酚妥拉明、VSG+苯海拉明、VSG+消炎痛和VSG+阿托品7组,探讨VSG收缩离体肌条的作用机制。结果:VSG能增强肌条收缩波的振幅、持续时间、面积和频率,并有量效依赖性(持续时间:r=0.94,t=5.41,P<0.01;收缩面积:r=0.86,t=3.41,P<0.05;频率r=0.96,t=7.18,P<0.05),而振幅的量效关系不明显(r=0.06,t=0.12,P>0.05)。异搏定和阿托品能抑制VSG收缩子宫肌条的作用,而苯海拉明、消炎痛和酚妥拉明无影响。结论:VSG可能是通过L-钙通道和M型受体,升高胞浆内Ca2+而增强子宫平滑肌的收缩作用。     

乌梅水煎剂增强大鼠离体子宫平滑肌运动作用的研究

目的:探讨乌梅对未孕大鼠离体子宫平滑肌条运动的影响及其机制.方法:用生物机能仪记录子宫平滑肌肌条运动,并分别使用消炎痛(2×10-5 mol/L)、酚妥拉明(2×10-6mol/L )、异搏定(2×10-7mol/L)、苯海拉明(2×10-6mol/L)4种阻断剂,观察乌梅水煎醇沉液(以下简称乌梅)对离体子宫平滑肌运动的影响.结果:乌梅能增强未孕大鼠离体子宫平滑肌的舒张运动,使收缩波的频率加快,振幅增大,持续时间延长.结论:乌梅增强未孕大鼠离体子宫平滑肌的收缩运动,该作用主要是通过前列腺素的合成与释放及L型钙通道发挥作用,与H1受体、α受体无关.     

舒胃汤对功能性消化不良大鼠小肠推进功能及CNP/cGMP信号通路的影响

目的探讨舒胃汤对功能性消化不良(FD)模型大鼠小肠推进功能及C-钠尿肽(CNP)/环磷酸鸟苷(cGMP)信号通路的影响及机制。方法取80只Wistar大鼠,按体质量随机分为空白组、模型组、舒胃汤组(30.68 g·kg~(-1))、莫沙必利组(1.37 mg·kg~(-1))。采用改良复合病因方法(慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节+夹尾激怒)复制FD模型,造模结束后,连续灌胃给药14 d。采用碳末法检测小肠推进率;多道生理记录系统检测CNP(1×10-8mol·L-1)对大鼠离体胃窦肌条的收缩抑制率;ELISA法检测胃窦组织中cGMP含量;Western Blot法检测胃窦组织B型钠尿肽受体(NPR-B)蛋白含量;RT-PCR法检测胃窦平滑肌NPR-B mRNA表达。结果与空白组比较,模型组的小肠推进率明显降低(P 0.01),离体胃窦肌条的收缩抑制率明显升高(P 0.01),cGMP蛋白含量、NPR-B蛋白及mRNA表达明显升高(P 0.01)。与模型组比较,舒胃汤组的小肠推进率明显升高(P 0.05),离体胃窦肌条的收缩抑制率明显降低(P 0.01),cGMP蛋白含量、NPR-B蛋白及mRNA表达明显降低(P 0.05)。结论舒胃汤可有效改善FD模型大鼠胃肠功能低下状态,其机制可能与下调CNP/cGMP信号通路中CNP受体蛋白NPR-B表达及关键蛋白cGMP含量有关。     

苦参碱对豚鼠离体胆囊平滑肌条收缩功能的影响

目的:观察苦参碱对豚鼠离体胆囊平滑肌运动功能的影响并初步探讨其影响机制。方法:将胆囊肌条置于灌流肌槽内,用BL-420E+生理记录仪记录肌条的收缩活动。结果:苦参碱能提高胆囊肌条的张力、减慢收缩频率、增高收缩幅度。消炎痛、酚妥拉明、异搏定、阿托品可部分阻断苦参碱对胆囊肌条的作用。结论:苦参碱对胆囊肌条的作用机制可能与前列腺素受体、α受体、Ca2+以及M受体有关。     

芫花对未孕大鼠离体子宫平滑肌条作用的研究

目的:观察芫花根皮水煎剂对人工动情期大鼠离体子宫平滑肌条的作用,以探讨其作用机理。方法:将离体子宫平滑肌条悬挂于离体平滑肌灌流肌槽装置内,采用分离加药的方法以观察结果。结果:芫花根皮水煎剂可兴奋大鼠离体子宫平滑肌并有剂量依赖性关系;阿托品、酚妥拉明、六烃季胺、苯海拉明不能阻断芫花兴奋大鼠离体子宫平滑肌的作用;异搏定可完全阻断芫花兴奋大鼠离体子宫平滑肌的作用,前列腺素合成酶抑制剂消炎痛可使芫花的兴奋作用降低。结论:芫花对未孕大鼠离体子宫平滑肌条的兴奋作用,可能是通过作用于平滑肌细胞膜的Ca2+通道和部分刺激前列腺素合成、释放的途径实现的。     

溪黄草与虎杖对豚鼠离体胆囊肌条运动的实验研究

目的:观察溪黄草与虎杖水煎剂对豚鼠离体胆囊肌条平滑肌运动的影响,并探讨其作用机理。方法:将胆囊肌条置于离体平滑肌肌槽内,用生理记录仪记录肌条的收缩活动。结果:溪黄草水煎剂、虎杖水煎剂可提高豚鼠胆囊肌条的张力,加快收缩频率及减少收缩波平均振幅;阿托品、异搏定可阻断溪黄草对胆囊肌条的作用;酚妥拉明、异搏定可阻断虎杖对胆囊肌条的作用。结论:溪黄草对胆囊肌条的作用与M受体、Ca2+有关;虎杖对胆囊肌条的作用与α受体、Ca2+有关。     

乌梅对大鼠离体子宫平滑肌条运动的影响及机理探讨

目的:观察乌梅水煎剂对人工动情期大鼠离体子宫平滑肌条的作用。方法:将离体子宫平滑肌条悬挂于离体平滑肌灌流肌槽装置内,采用累积加药的方法加入乌梅。观察结果。结果:(1)乌梅水煎剂可兴奋子宫平滑肌条,并有剂量依赖性关系(r=0.9179,P<0。001)。(2)阿托品、酚妥拉明、六烃季胺、苯海拉明及消炎痛未能阻断乌梅的兴奋作用(Jp>0.05)。(3)异搏定可完全阻断乌梅兴奋大鼠离体子宫平滑肌条的作用(P<0.001)。结论:乌梅的兴奋作用未经由 M 受体、α肾上腺素能受体、神经节 N 受体及 H_1受体起作用,也非经前列腺素能途径。乌梅可能是作用于平滑肌细胞膜的 Ca~(2 )通道而发挥此作用的。这种药理作用可能与其妇科临床功效有关。     

王不留行对家兔离体主动脉环张力的影响及其机制

目的:研究王不留行水煎液(DSC)对兔离体主动脉环张力的影响及其机制.方法:采用家兔离体主动脉环张力记录法.结果:DSC可浓度依赖性地引起动脉血管静息张力的增加.用10-7mol/L酚妥拉明、10-5mol/L异搏定、10-6mol/L苯海拉明或无钙K-H液温育后均可明显减弱DSC的收缩作用;而去除内皮细胞后,10-7mol/L阿托品则无明显影响.结论:DSC可引起主动脉环收缩,其机制可能与平滑肌细胞上的肾上腺素能α受体、异搏定敏感的Ca2 通道、细胞外Ca2 以及组胺H1受体有关,而与血管内皮细胞和胆碱能M受体无关.     

苦豆子总碱舒张家兔离体主动脉的研究

目的:研究苦豆子总碱(total alkali Sophora alopecuroids L,TASa)舒张家兔离体主动脉血管的作用机制.方法:采用离体恒温灌流浴槽,以去甲肾上腺素(noradrenaline,NA)预收缩后,给予TASa(5,10,20,40 mg·L~(-1))观察其舒张血管的量效关系;将标本分为对照组、TASa组、TASa+吲哚美辛(1×10-5mol·L~(-1))、TASa+普萘洛尔(1×10~(-5) mol·L~(-1))、TASa+左旋硝基精氨酸(1×10~(-4)mol·L~(-1))和TASa+去内皮细胞6组探讨TASa舒张血管的机制;用TASa(40 mg·L~(-1))温育标本后,观察TASa对NA(1×10~(-8)～1×10~(-5) mol·L~(-1)),KCl(6.3～100 mmol·L~(-1))和CaCl_2,(1×10~(-5)～1×10~(-2) mol·L~(-1))量效收缩曲线的影响.结果:TASa能舒张主动脉血管,有量效依赖性(r=0.94,P<0.01);去内皮、左旋硝基精氨酸、吲哚美辛和普萘洛尔对TASa舒张血管的作用无明显影响;TASa能压低NA,KCl和CaCl_2的量效收缩曲线.结论:TASa可能是抑制内质网Ca~(2+)释放和拮抗Ca~(2+)通道,降低胞浆Ca~(2+)而使血管舒张.     

大黄对豚鼠胃窦环行肌条的影响

 目的研究大黄对豚鼠离体胃平滑肌条收缩活动的影响及其可能的机制。方法将豚鼠胃窦环形肌条置于盛有Krebs液的灌流肌槽中,并记录其等长收缩活动。观察不同浓度(1%,3%,10%,30%,100%)的大黄对胃窦环形肌条收缩活动的影响以及阿托品、维拉帕米和六烃季胺对大黄引起的胃窦环形肌条收缩活动的影响。结果大黄剂量依赖性增大胃窦环行肌条的收缩波平均振幅和增高胃窦环行肌条张力,每1mL含1g生药的大黄加快胃窦环行肌条的收缩频率。阿托品、维拉帕米和六烃季胺部分阻断大黄对豚鼠胃窦环行肌条的兴奋作用。结论大黄对豚鼠胃窦环行肌条的收缩活动有兴奋作用。大黄的这一兴奋作用部分经由胆碱能M受体、胆碱能N受体和L-型钙通道介导。     

环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肠平滑肌收缩性的影响

目的:探讨环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肠平滑肌收缩性的影响.方法:在纯化的蛋白体系中进行平滑肌肌球蛋白Ca2+依赖性磷酸化反应,采用甘油聚丙烯酰胺凝胶电泳测定肌球蛋白轻链磷酸化程度,孔雀绿法测定肌球蛋白Mg2+-ATPase活性.以平滑肌肌球蛋白Mg2+-ATPase活性、肌球蛋白磷酸化以及在克氏液中孵育的肠平滑肌收缩振幅为指标,考察环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白Mg2+-ATPase活性和肌球蛋白磷酸化程度的调节作用,以及环氧橙皮油素对大鼠离体小肠平滑肌收缩性的影响.结果:在肌球蛋白轻链的Ca2+依赖性磷酸化反应中,在40～320 μmol·L-1浓度内环氧橙皮油素能抑制磷酸化肌球蛋白Mg2+-ATPase活性及其轻链磷酸化程度(P＜0.01),这种抑制作用与1-(5-氯-1-萘-磺酰)-六氢-1,4-二氮杂卓(ML-9)具有协同作用;40 - 320μmol·L-1浓度内环氧橙皮油素可剂量依赖性抑制大鼠离体小肠平滑肌收缩,且可拮抗新斯的明、乙酰胆碱引起的促进收缩作用,相加阿托品引起的抑制收缩作用(P＜0.01).结论:环氧橙皮油素可通过抑制平滑肌肌球蛋白的功能,抑制胃肠平滑肌的收缩性.     

Simo decoction promotes contraction of antral circular smooth muscle mainly via muscarinic M3 receptor

Ethnopharmacological relevance

Simo Decoction (SMD), a traditional Chinese medicine, included four elements, such as Fructus aurantii, Radix aucklandiae, Semen arecae and Radix linderae. It has been used to improve gastrointestinal dysmotility in clinical practice for a long history in China. However, the explicit mechanisms are unclear. The aim of this study was to investigate the effect of SMD on contractions of antral circular smooth muscle strips of Sprague-Dawley (SD) rats and its underlying mechanism.

Materials and methods

The antral circular strips were prepared in the organ bath under baseline or to be incubated with muscarinic receptor antagonist atropine (10⁻⁶ M), muscarinic M3 receptor antagonist 4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidine methiodide (4-DAMP) (0.4×10⁻⁶ M), muscarinic M2 receptor antagonist gallamine (10⁻⁶ M), adrenergic receptor agonist adrenaline (10⁻⁷ M), exogenous nitric oxide (NO) donor l-arginine (10⁻⁴ M), nicotinic receptor antagonist hexamethonium chloride (10⁻⁴ M) and Ca²⁺ channel antagonist nifedipine (30 nM), and consecutive concentrations of SMD were added to the bath to observe the strip responses. As a control, the responses of strips after administration with the same volume of Krebs solution as SMD were also noted. The strip responses to acetylcholine (10⁻⁷–10⁻³ M) were also noted in organ bath to compare with SMD-induced contraction.

Results

SMD dose-dependently evoked hypercontractility of antral circular strips, and the maximal contractile effect of circular smooth muscle induced by SMD was significantly higher than that induced by acetylcholine (10⁻³ M). The responses of antral circular strips to SMD were completely antagonized by atropine, 4-DAMP or 4-DAMP+gallamine, but partly inhibited by gallamine and partly suppressed by adrenaline, l-arginine, hexamethonium chloride and nifedipine.

Conclusions

SMD promotes contractions of antral circular strips in rats mainly via activation of muscarinic M3 receptor, but partly via activation of muscarinic M2 receptor, Ca²⁺ channel and nicotinic receptor, inhibition of adrenergic receptor and releasing of NO.     

槟榔对豚鼠胃平滑肌的作用及机制探讨

目的：观察槟榔对豚鼠离体胃平滑肌肌条的作用,探讨其可能的效应机制。方法：制备豚鼠离体平滑肌肌条,以生理盐水为空白对照组,观察不同浓度槟榔对平滑肌肌条的效应（以Ach标化）,并比较加入阻断剂后槟榔作用效应的变化。结果：①不同浓度槟榔均能增高豚鼠离体胃平滑肌条的收缩力,增大收缩振幅及收缩波曲线下面积,与生理盐水对照组比较有显著增高（P〈0.01）。②阻断剂阿托品及维拉帕米可部分阻断槟榔的收缩效应,降低其作用后收缩振幅（P〈0.05）。结论：槟榔对豚鼠离体胃平滑肌条的收缩活动有明显兴奋作用,且呈剂量正相关性,M受体阻断剂阿托品和Ca2＋阻断剂维拉帕米可部分阻断这种效应,槟榔对豚鼠离体平滑肌肌条的收缩效应部分介导于M-胆碱能受体,L型电压依赖性Ca2＋通道。     

苦丁茶对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能的影响

目的 :研究苦丁茶对豚鼠离体气管平滑肌的影响。方法 :以累积技术建立CaCl₂ 和组织胺 (His)的量效曲线 ,研究了苦丁茶对CaCl₂ ,His和乙酰胆碱 (Ach)等致喘介质对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能的影响。结果 :CaCl₂ 和His引起气管条明显的收缩 ,pD₂ 分别为 3.59和 5 .34。苦丁茶能明显压低CaCl₂ 和His的量效曲线 ,并使曲线右移。苦丁茶对Ach和His 3×10^-6mmol·L^-1引起的气管平滑肌收缩有明显的逆转作用 ,IC₅₀ 分别为 0.16mg·ml^-1和 0.2 1mg·ml^-1。结论 :提示苦丁茶有明显的舒张豚鼠离体气管平滑肌的作用。     

氢溴酸槟榔碱对C57BL/6和W/W^v突变小鼠离体胃肠平滑肌条动力的作用研究

目的利用C57BL/6和W/W^v突变小鼠研究Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)对小鼠胃肠各部位平滑肌条运动的影响,并通过胆碱能受体拮抗剂阿托品和钠通道阻断剂河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)给药干预初步探讨氢溴酸槟榔碱(arecoline hydrobromide,Ah)促进小鼠平滑肌条动力作用的机制。方法制备C57BL/6和W/W^v突变小鼠胃肠各部位(胃体、胃窦、空肠和结肠)平滑肌环形肌条标本,分别观察和记录2种小鼠离体胃肠各部位平滑肌条的运动,比较2种小鼠胃肠各部位肌条收缩情况(收缩振幅、收缩频率和张力),并观察Ah对2种小鼠胃肠各部位肌条收缩的影响及阿托品、TTX对Ah促动力作用的干预。结果C57BL/6小鼠胃体部平滑肌环形肌条的收缩为具有较高振幅储存食物和低频率少量推进性的收缩波形,胃窦部为高振幅高张力较高频率推进性的收缩波形,空肠部为低振幅高频率快速推进性的收缩波形,结肠部为分散性中等振幅和频率的收缩波形;W/W^v突变小鼠胃体部环形肌条的收缩频率、收缩振幅都在较低水平,张力较其他部位偏高,胃窦部收缩频率、收缩振幅和张力都在较高水平,空肠部的收缩频率仍是最高,收缩振幅和张力却最低,结肠部的收缩频率最低,收缩振幅和张力处于中等水平;C57BL/6小鼠各部位肌条的收缩力均远大于W/W^v突变小鼠(P<0.05,P<0.01,P<0.001);Ah能明显增加C57BL/6小鼠各部位肌条的收缩力(P<0.05,P<0.01,P<0.001),对W/W^v突变小鼠各部位肌条的收缩力只有轻微增加(P<0.05,P<0.001);阿托品能抑制Ah的促动力作用,而TTX并不能阻断。结论ICCs在调控小鼠胃肠平滑肌条运动中具有重要作用,氢溴酸槟榔碱的促动力作用机制除了ICCs网络的调控外,还有一部分神经调控。另外,氢溴酸槟榔碱可能是经M型受体起作用的。     

枳壳及辛弗林对兔离体小肠运动的影响

目的 :观察枳壳及辛弗林对兔离体小肠运动的影响并探讨其作用机制。方法 :以家兔小肠收缩强度为指标 ,观察枳壳水煎剂及辛弗林对肠平滑肌收缩的影响。结果 :枳壳水煎剂 ( 12 5 %、2 5 %、5 0 %、75 %、10 0 % )和辛弗林 ( 0 1mg/ml、1mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、2 0mg/ml)均能显著抑制家兔离体小肠 (十二指肠 )的自发活动 ,使收缩力降低 ,紧张性下降 ,且呈量效关系。枳壳对乙酰胆碱 (Ach)、氯化钡 (BaCl2 )、5 羟色胺 ( 5 HT)引起的收缩加强均有显著拮抗作用 ,能使先用阿托品、肾上腺素、多巴胺而紧张性降低的离体兔肠进一步松弛 ;枳壳能微弱拮抗酚妥拉明的作用 ,对心得安的抑制效应影响不大。辛弗林能显著拮抗BaCl2 、5 HT引起的小肠 (空肠和回肠 )收缩加强 ,并拮抗肾上腺素 (Adr)、多巴胺 (DA)引起的小肠 (空肠和回肠 )收缩抑制 ,协同酚妥拉明的作用。结论 :枳壳水煎剂和辛弗林均能抑制家兔离体小肠运动 ,随剂量加大而作用加强。枳壳的抑制效应通过以 5 HT受体介导 ,由直接对平滑肌抑制作用为主 ,以M受体介导为辅。辛弗林主要通过介导 5 HT、Adr受体和直接对平滑肌作用产生上述抑制效应。辛弗林对离体兔肠作用与枳壳有一定的一致性 ,可能是枳壳作用胃肠运动的有效成分之一。     

健脾化湿颗粒对大鼠结肠上皮细胞OCLN、AQPs及平滑肌细胞cAMP、AC的影响

目的探究健脾化湿颗粒对大鼠结肠上皮细胞OCLN、AQPs及平滑肌细胞cAMP、AC的影响。方法采用CCK⁃8法检测不同浓度健脾化湿颗粒对上皮细胞的存活率影响;利用Western blot检测健脾化湿颗粒对上皮细胞OCLN、AQP3、AQP4蛋白表达的影响;分别用健脾化湿颗粒及Ach、阿托品干预平滑肌细胞后,利用显微标尺测量平滑肌细胞长度,ELISA法检测平滑肌细胞cAMP、AC的水平。结果健脾化湿颗粒(≤1 mg/mL)处理上皮细胞24 h后,细胞存活率≥90%。与正常组比较,健脾化湿颗粒上调上皮细胞OCLN、AQP3,AQP4蛋白表达,促进结肠平滑肌的舒张,下调结肠平滑肌AC、cAMP的水平(P<0.05,P<0.01)。健脾化湿颗粒可抑制Ach引起的平滑肌细胞收缩,及cAMP、AC水平的上调;与阿托品协同作用促进平滑肌细胞舒张,及cAMP、AC水平的下调(P<0.05,P<0.01)。结论健脾化湿颗粒可能通过调节离体大鼠结肠OCLN、AQP3、AQP4蛋白表达及平滑肌细胞舒缩功能来改善D⁃IBS腹泻症状。     

小半夏加茯苓汤及其拆方对家兔离体胃肠运动的影响

目的:研究小半夏加茯苓汤(Xiaobanxia Fuling decoction,XBFD)及其拆方水提物对家兔离体胃肠运动的影响.方法:用生物信号分析系统记录小半夏加茯苓汤及其拆方提取物对家兔正常离体胃、肠平滑肌和工具药乙酰胆碱、阿托品所致离体胃、肠平滑肌收缩的影响,采集胃、肠平滑肌收缩的曲线和数据,比较用药前后胃、肠平滑肌收缩的振幅、频率和张力变化.结果:小半夏加茯苓汤及其拆方提取物对正常离体胃底和胃窦平滑肌自主活动具有不同程度的兴奋作用,对家兔正常离体十二指肠平滑肌的正常舒缩活动有抑制作用,加药前后比较显著差异(P＜0.01);能拮抗氯化乙酰胆碱引起的胃肠平滑肌强直痉挛(P＜0.01);对阿托品引起的十二指肠平滑肌舒缩活动减弱具有协同作用(P＜0.05),而对阿托品作用后的胃底和胃窦平滑肌有兴奋作用(P＜0.01),原方及拆方的作用强度表现为:小半夏加茯苓汤＞小半夏汤＞生姜＞半夏.结论:小半夏加茯苓汤及其拆方提取物对家兔离体胃肠运动具有双向调节作用,复方药效优于拆方.其作用途径不仅与M胆碱受体有关,还可能与其他调节因素有关.