大鼠脑挫伤后细胞间黏附因子1时序性表达的实验性研究

目的观察大鼠脑挫伤后不同时间段细胞间黏附因子1（intercellular adhesion molecule－1,ICAM－1）的表达变化规律。方法参照Feeney法建立大鼠闭合性脑挫伤模型,将实验大鼠分为对照组和脑挫伤后1h、6h、24h、48h、72h、7d组,共7组,每组8只,运用Westernblot方法检测脑挫伤组织中ICAM—1的表达。结果大鼠脑挫伤1h可见ICAM－1有少量表达,伤后24h表达明显增多,72h达到高峰,其后下降,伤后7d仍有表达,且高于对照组水平。各实验组与对照组比较,差异均有统计学意义（均P〈0．05）,各实验组两两比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论大鼠脑挫伤后ICAM－1表达随着时间的变化表达呈现一定的规律性,可为推断脑挫伤早期损伤时间提供一定的参考依据。     

大鼠脑挫伤后脑组织NF-κB表达与损伤时间的关系

目的观察大鼠实验性脑挫伤后不同时间内脑组织核转录因子（NF-κB）表达的变化,探讨NF-κB与脑损伤经过时间的关系。方法参照Feeney’s法建立大鼠脑挫伤模型,在伤后1h,4h,12h,48h,72h,7d,14d,运用Westernblot法分别检测NF-κB的表达量,以非损伤组做为对照。结果NF。KB表达在损伤后1h出现,12h即达到高峰,48h开始下降,7d后表达量仍高于对照组,14d后表达量基本恢复至接近对照组水平,各实验组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论NF-κB在脑挫伤后的表达经历了一个先快速升高后又下降到接近正常水平的过程,其表达的时序性变化可望成为临床法医学脑挫伤的早期鉴定及推断脑损伤时间的指标之一。     

低氧诱导因子HIF-1α在脊髓损伤后的时序性表达及其意义

目的　研究实验性脊髓损伤后低氧诱导因子 (HIF- 1α)的时序性变化及与创伤性凋亡的关系 ,探讨其在脊髓损伤中的意义。方法　以大鼠静压型脊髓损伤模型为研究对象 ,运用免疫组化方法进行 HIF- 1α染色 ,流式细胞术测定凋亡率及 bcl- 2的表达。结果　从脊髓损伤后 1天开始 ,HIF- 1α表达明显增加 ,3～ 7天达到高峰 ,14天时 HIF- 1α阳性染色率下降显著。 HIF- 1α的时序性变化与凋亡率和 bcl- 2含量的变动趋势密切相关。结论　 HIF- 1α可能参与了脊髓损伤后缺血缺氧的继发损害过程 ,它与创伤后凋亡之间有着密切的关系 ,对其进行深入研究可能为找到有效的治疗脊髓损伤的方法提供新的思路     

大鼠脑组织局灶性挫伤后ApoE和S-100表达及其意义的研究

目的:研究脑损伤后神经元和神经胶质细胞内ApoE和S-100的表达随脑损伤时间变化的规律及其在脑损伤时间推断中的作用.方法:通过建立大鼠脑挫伤模型,利用免疫组化染色法(S-P法)对对照组及伤后不同时间组内脑细胞中的S-100和ApoE两种蛋白进行检测,并作统计学分析.结果:伤后0.5 h组大脑皮质神经元中ApoE即出现显著表达(P<0.01),而S-100阳性细胞在伤后2 h开始表达显著增强(P<0.01).随着损伤时间的延长,ApoE和S-100阳性细胞数目及阳性表达范围逐渐扩大.伤后3 d组ApoE阳性细胞表达数量及染色强度达到高峰,且分布广泛,随后表达下降;到5 d组时,S-100阳性产物达到高峰,后下降,但仍高于对照组.结论:脑挫伤后S-100和ApoE在损伤局部的染色变化有一定的时间规律性,可以用于脑挫伤的时间推断.     

重度心肌挫伤心肌细胞中HIF-1表达的实验研究

目的大鼠重度心肌挫伤后观察挫伤区周围心肌细胞不同时间段的HIF-1损伤后经过时间与阳性染色强度变化之间的关系。方法结合计算机彩色图像分析技术,运用免疫组织化学技术(SABC法)观察大鼠实验性重度心肌挫伤后HIF-1的染色变化。结果运用免疫组化染色观察,重度心肌挫伤后在挫伤区周围组织HIF-1α在6 h即出现轻微表达,并分别在24 h和2 d达到高峰,此后逐渐下降,至6 d仍有表达,HIF-1α在正常对照组以及死后损伤组为阴性表达。结论重度心肌挫伤后HIF-1α参与了细胞的损伤;重度心肌挫伤时间推断有可能使用HIF-1α作为死后伤和生前伤的鉴别指标。     

大鼠脑挫伤后碱性成纤维细胞生长因子的表达变化与损伤时间的推断研究

目的研究大鼠脑挫伤后脑组织中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）时序性表达的规律,探讨bFGF的表达与脑损伤经过时间的关系,旨在为法医实践中推断早期脑损伤时间提供科学依据。方法参照Feeney′s法建立SD大鼠脑损伤模型,每组8只将实验动物（n=64）随机分为8个组（7个实验组,1个对照组）,其中实验组依据损伤时间的不同分为1、6、12 h、1、2、3、7d共7个亚组。应用免疫组化（SABC）法及免疫印迹（Western blot）法检测大鼠脑组织bFGF的含量。结果脑挫伤后6 h阳性细胞数逐渐增多,3 d达峰值,7 d已开始下降,但仍高于基础水平。结论挫伤后脑组织中bFGF的表达呈现出一定的时序性规律,为早期脑损伤时间的推断提供了实验依据。     

大鼠脑干损伤GAP-43、NOS3、HIF-1α的表达及其表达时相的相关性研究

目的探讨大鼠脑干损伤后组织的GAP-43、NOS3、HIF-1α的表达特点及其与不同损伤时间的相关性。方法雄性Wistar大鼠55只,采用撞击法制作大鼠机械性脑干损伤动物模型,采集损伤后1h～14d内9个不同时间点的脑干组织,另设正常对照组及假损伤组。采用免疫组化SP法检测GAP-43、NOS3和HIF-1α不同时间点的表达变化及其时相的相关性。结果 GAP-43阳性表达在脑干损伤后3h表达增高,并与正常对照组和假损伤组比较差异均具有统计学意义。7d达高峰,并与正常对照组、假损伤组及邻近上组比较差异具有统计学意义。14d降至正常,与正常对照组及假损伤组比较差异无统计学意义;NOS3在损伤后1h表达增加,并与正常对照组和假损伤组比较差异具有统计学意义。9h达到高峰,并与正常对照组、假损伤组及邻近上组比较差异具有统计学意义,7d表达至正常,与正常对照组及假损伤组比较差异无统计学意义;HIF-1α在损伤后3h阳性表达增加,并与正常对照组和假损伤组比较差异具有统计学意义,24h达到高峰,并与正常对照组、假损伤组及邻近上组比较差异具有统计学意义,7d降至正常,与正常对照组及假损伤组比较差异无统计学意义。结论大鼠脑干损伤后GAP-43、NOS3、HIF-1α表达均有上调,且各自呈一定的时序性变化规律,可望为法医学脑干损伤早期时间的推断提供参考。     

牛磺酸对模拟急性高原低氧大鼠小肠组织HIF-1α及HIF-1β表达的影响

目的 探讨牛磺酸对模拟高原缺氧大鼠小肠组织HIF-1α及HIF-1β表达的影响.方法 动物经基础饲料或添加牛磺酸饲料喂养7 d后,利用低压舱分别模拟4 500 m及5 500 m海拔高度高原缺氧,分别在高原缺氧处理后第2、6、12、24、48、72 h处死动物,剪取小肠组织,RT-PCR检测 HIF-1α、HIF-1β mRNA表达,Western blot检测HIF-1α蛋白表达.结果 缺氧条件下HIF-1α、HIF-1β表达明显增强,在缺氧12 h时达到峰值,随后逐渐减弱;添加牛磺酸组在各时相点的表达相对于未加牛磺酸组显著增强.结论 牛磺酸能够显著增强高原缺氧大鼠小肠组织HIF-1α、HIF-1β的表达.     

HIF-1α、HIF-2α和GLUT-1在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、HIF-2α和葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义。方法：收集广西医科大学第二附属医院2017年3月至2021年3月收治的非霍奇金淋巴瘤和淋巴结增生患者的病理切片标本,其中非霍奇金淋巴瘤42例作为淋巴瘤组,淋巴结增生37例作为淋巴结增生组,用免疫组化法测定两组HIF-1α、HIF-2α和GLUT-1表达情况,并分析三者与淋巴瘤国际预后指数（IPI）评分之间的相关性。结果：HIF-1α、HIF-2α和GLUT-1在淋巴瘤组中的阳性表达率均高于淋巴结增生组（均P<0.01）。淋巴瘤组织中HIF-1α的表达与HIF-2α、GLUT-1的表达呈正相关关系（r=0.593,P<0.05;r=0.583,P<0.05）,HIF-2α的表达与GLUT-1的表达呈正相关关系（r=0.331,P<0.05）。IPI 3～5分组的HIF-1α、HIF-2α和GLUT-1阳性表达率均高于0～2分组（均P<0.05）,且HIF-1α、HIF-2α、GLUT-1的表达与IPI评分均呈正相关关系（0<...     

胶质瘤中HIF-1α的表达及其与预后关系

目的 探讨HIF-1α在脑胶质瘤中表达及其与预后关系.方法 采用免疫组化方法检测胶质瘤标本中HIF-1α的表达情况,分析HIF-1α与胶质瘤临床病理特征及预后关系.结果 胶质瘤标本HIF-1α表达呈阳性反应,胶质瘤标本HIF-1α阳性表达率为71.67%(43/60),主要位于细胞质和(或)细胞核,具有明显的异质性;肿瘤边缘部份的瘤细胞表达明显增强;高级别胶质瘤(Ⅲ-Ⅳ级)中HIF-1α阳性表达率明显高于低级别者(Ⅰ～Ⅱ级)(x2=18.123,P＜0.01);表达强度与病理级别间呈正相关(rs=0.620,P＜0.01),HIF-1α阴性、弱阳性、中度阳性和强阳性表达者术后平均生存时间分别为46.11±3.54、37.99±3.72、23.27±2.76和16.96±4.32个月;组间比较有显著差异(x2=22.190,P＜0.01).结论 HIF-1α在胶质瘤组织中存在过度表达,胶质瘤HIF-1α的表达强弱与肿瘤病理分级具有关.HIF-1α表达与胶质瘤患者术后生存期呈负相关.     

大鼠脑挫伤DNA含量变化与损伤时间的关系

目的观察大鼠脑挫伤后DNA含量的时序变化规律。方法建立自由落体打击大鼠脑挫伤动物模型,采用Feulgen’s DNA染色方法,结合图像分析技术。结果损伤侧大脑皮质浅层和海马区平均积分光密度（IOD）变化呈：24h内迅速下降,24—96h有缓慢上升趋势;伤后24h内上述两区域平均积分光密度均与损伤时间呈线性关系,R^2分别为0．668和0．615。可导出直线回归方程。结论采用Feulgen’s DNA染色法结合图像分析技术观察伤后DNA含量变化,可以应用于脑损伤时间推断的研究,探索推断脑损伤时间的新方法。     

脑挫伤早期神经细胞凋亡和Caspase-3表达变化的观察

目的观察脑挫伤后早期神经细胞凋亡和调节因子Caspase-3表达的时序及空间变化规律。方法采用TUNEL染色和免疫组化染色方法,结合图像分析技术,对不同损伤时间组人脑挫伤组织进行染色观察。结果①TUNEL染色和Caspase-3免疫组化染色的阳性细胞主要分布在挫伤区和挫伤半影区,与远隔部位和对照组脑组织的阴性染色有显著差异,P<0.05;②脑挫伤后48 h内,在挫伤半影区TUNEL染色的阳性率和阳性细胞IOD逐渐增加,各时间组之间有显著差异,P<0.05,两参数与损伤时间均呈线性关系,r分别为0.89和0.93;③Caspase-3阳性表达与神经细胞凋亡变化呈平行关系,两参数与损伤时间也呈线性关系,r分别为0.92和0.90。结论①人脑挫伤后48 h内神经细胞凋亡和Caspase-3阳性表达的阳性率、IOD增加与损伤时间之间呈线性关系,可作为损伤时间推断的新依据;②TUNEL和Caspase-3免疫组化染色阳性细胞主要分布在挫伤半影区和挫伤区都提示可以用于判断脑挫伤部位,尤其是对轻度脑损伤大体和HE染色形态改变不明显的脑挫伤更有意义。     

胃癌细胞系幽门螺杆菌感染对HIF-1α、HIF-2α及VEGF表达的影响

目的研究幽门螺杆菌对人胃癌细胞株BGC-823中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将不同浓度的H.pylori悬液与BGC-823细胞共培养24h后收集细胞,应用MTT法检测细胞存活率,RT-PCR和Western blotting技术检测HIF-1α、HIF-2α及VEGF的表达。对照组加稀释用培养液。结果与对照组比较,H.pylori可显著促进BGC-823细胞的增殖(P<0.05)并能显著提高细胞HIF-1α、HIF-2α及VEGF mRNA和蛋白的表达(P<0.05),呈浓度依赖性。结论 H.pylori感染能够刺激BGC-823细胞VEGF的表达,其机制可能是通过HIF-1α、HIF-2α途径介导。这可能是其诱导胃癌血管生成和促进胃癌侵袭转移的机制之一。     

大黄对急性肝衰竭大鼠肝脏过氧化损伤及HIF-1α表达的影响

目的：观察大黄对急性肝衰竭模型大鼠肝脏过氧化损伤及HIF-1α表达影响。方法：雄性SD大鼠55只,随机分为健康对照组（15只）、肝衰竭组（20只）、大黄干预组（20只）。采用腹腔注射硫代乙酰胺（TAA）法复制急性肝衰竭模型,造模前一天,大黄干预组予大黄煎剂2mL/只灌胃,健康对照组和肝衰竭组予生理盐水2mL/只灌胃,均1天3次,连续3天。造模48h后对各组存活大鼠行门静脉采血,测定各组血清ALT、AST、TBiL、内毒素水平、肝脏组织MDA含量、SOD活性;免疫组化检测肝组织HIF-1α表达,常规HE染色观察肝脏病理学改变。结果：与健康对照组比较,肝衰竭组大鼠ALT、AST、TBiL升高（P〈0.01）,血清内毒素含量增高（P〈0.01）,肝脏内SOD活力降低（P〈0.01）,MDA含量升高（P〈0.01）,肝组织HIF-1α表达增加（χ2=11.49,P〈0.01）;与肝衰竭组比较,大黄干预组大鼠ALT、AST、TBiL下降（P〈0.01,P〈0.05）;血清内毒素含量降低（P〈0.05）;肝脏内SOD活力升高（P〈0.01）,MDA含量降低（P〈0.01）。肝衰竭组大鼠肝脏内HIF-1α表达增强（P〈0.01）,但与大黄干预组比较,两组差异无统计学意义（χ2=0.316,P〉0.05）。结论：肝衰竭大鼠肝脏存在过氧化损伤,HIF-1α表达增加。大黄能改善急性肝衰竭模型大鼠肝功能,减轻内毒素血症及过氧化损伤。     

不同时间电针预处理对大鼠心肌缺血损伤及HIF-1α表达的影响

目的?观察不同时间实施电针预处理对大鼠心肌缺血损伤的影响及该影响与心肌HIF-1α表达的相关性。方法?54只雄性SD大鼠随机分为模型组（MI）、电针1d组（EA-1d）、电针2d组（EA-2d）、电针3d组（EA-3d）、电针4d组（EA-4d）、电针5d组（EA-5d）,每组9只。选择大鼠双侧内关穴进行电针干预后,结扎心脏冠状动脉左前降支（LAD）建立急性心肌缺血模型,进行心电图检测,并于24h后取心脏,采用TTC染色评价效应差异,采用Western blot技术检测HIF-1α表达,并在明确最佳时间点后,增设假手术组（Sham）和假手术加电针组（Sham+EA）,每组3只,进一步观察HIF-1α表达情况。结果?MI组结扎LAD 30min后,ST段弓背抬高,结扎24h后出现病理性Q波,提示模型制作成功;与MI组比较,EA-1d、EA-2d组心肌梗死面积变化无统计学意义,HIF-1α蛋白表达无统计学意义;EA-3d、EA-4d和EA-5d组心脏梗死面积比明显减小（P<0.05）,HIF-1α蛋白表达水平增加（P<0.01）,但3组间变化无统计学意义;电针预处理4d的Western blot结果显示,与Sham组比较,MI组HIF-1α蛋白表达水平显著下降（P<0.05）,电针预处理能使MI下降的HIF-1α表达上升（P<0.05）。结论?电针预处理内关穴3~5d均能有效降低心肌梗死面积,其中以4d为佳,该保护效应与调控HIF-1α蛋白密切相关。      

人脑胶质瘤中HIF-1α、Ki-67的表达及其临床意义

目的：探讨缺氧诱导因子HIF-1α和细胞核内与细胞分裂增殖相关的蛋白抗原Ki-67在人脑胶质瘤的表达情况以及二者之间的相关性;揭示HIF-1α、Ki-67与脑胶质瘤预后的关系。方法：采用免疫组织化学S-P法检测HIF-1α、Ki-67在56例人脑胶质瘤中的表达情况。结果：HIF-1α在病理为Ⅲ~Ⅳ级的人脑胶质瘤中的表达显著高于病理为Ⅰ~Ⅱ级的表达,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。Ki-67在病理为Ⅲ~Ⅳ级的人脑胶质瘤中的表达显著高于病理为Ⅰ~Ⅱ级的表达,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。人脑胶质瘤中HIF-1α的表达与Ki-67的表达呈显著正相关（rs=0.513,P〈0.01）。结论：HIF-1α在人脑胶质瘤中呈阳性表达并与人脑胶质瘤的病理分级显著相关,在人脑胶质瘤血管生成和肿瘤的侵袭中起重要作用;Ki-67的阳性表达与人脑胶质瘤的病理分级显著相关,可以作为评价人脑胶质瘤增殖状态的指标,对判断人脑胶质瘤的恶性程度有重要价值;HIF-1α表达与Ki-67表达密切相关,HIF-1α、Ki-67两者联合检测可作为判断脑胶质瘤恶性程度及预后的指标。     

人参皂苷Rg1对脑挫伤后大鼠脑内胰岛素样生长因子1表达的影响

目的：探讨人参皂苷Rg1对脑组织挫伤后大鼠脑中胰岛素样生长因子1（insulin—like growth factor-1，IGF-1）表达的影响。方法：Wistar大鼠26只，分为正常对照组（2只），脑挫伤模型组（8只）及人参皂苷Rg1治疗组（16只），在损伤后不同时间点（损伤后6h、12h、2d及6d）分别处死大鼠，使用免疫组化方法观察并检测脑中IGF-1的表达。结果：与对照组相比，脑挫伤模型组损伤后各时间点脑组织中IGF-1的表达有所升高（P〈0．05）；与模型组比较，人参皂苷Rg1治疗组IGF-1的表达明显升高（P％0．05）。结论：人参皂苷Rg1可能通过促进脑挫伤后脑组织IGF-1的表达，促进脑组织的功能恢复。     

人参皂苷Rg1对脑挫伤后大鼠脑内胰岛素样生长因子1表达的影响

目的：探讨人参皂苷Rg1对脑组织挫伤后大鼠脑中胰岛素样生长因子1（insulin—like growth factor-1，IGF-1）表达的影响。方法：Wistar大鼠26只，分为正常对照组（2只），脑挫伤模型组（8只）及人参皂苷Rg1治疗组（16只），在损伤后不同时间点（损伤后6h、12h、2d及6d）分别处死大鼠，使用免疫组化方法观察并检测脑中IGF-1的表达。结果：与对照组相比，脑挫伤模型组损伤后各时间点脑组织中IGF-1的表达有所升高（P〈0．05）；与模型组比较，人参皂苷Rg1治疗组IGF-1的表达明显升高（P％0．05）。结论：人参皂苷Rg1可能通过促进脑挫伤后脑组织IGF-1的表达，促进脑组织的功能恢复。     

HIF-1α表达与宫颈癌的关系探讨

目的 :探讨宫颈癌组织中HIF-1α的表达与宫颈癌之间的关系。方法 :采用免疫组化法检测177例分期为pT1b的宫颈癌患者宫颈组织(观察组)及100例正常宫颈组织(对照组)中HIF-1α的表达。结果 :宫颈癌患者宫颈组织中HIF-1α的阳性率表达高达79.7%,对照组宫颈组织中HIF-1α的阳性率表达为0。提示HIF-1α可作为宫颈癌早期筛查和诊断的一个重要参考标准。结论 :在宫颈癌早期存在着HIF-1α的高表达,因此,HIF-1α可作为宫颈癌早期筛查和诊断的一个重要参考标准。     

不同持续时间低氧后运动对大鼠骨骼肌组织HIF-1α蛋白表达的影响

目的:探讨不同持续时间低氧后运动对大鼠骨骼肌组织HIF-1α蛋白表达的影响。方法:训练完后,将SD大鼠放入低氧仓中,将氧浓度控制为12.5%(相当于4000m海拔高度),分别在8h和12h后,将8h低氧组和12h低氧组动物取出。低氧刺激每天一次,每周5天,共持续4周。运用免疫组化方法检测大鼠骨骼肌组织HIF-1α蛋白表达。结果与结论:HIF-1α在低氧训练刺激下表达上调,HIF-1α蛋白表达随着低氧刺激的时间延长而增高。