儿茶素类抗乙型肝炎病毒的效果观察

目的观察儿茶素类抗乙肝病毒和保肝降酶作用.方法用1日龄北京雏鸭制备鸭乙型肝炎病毒(DHBV)模型,设儿茶素类给药组(60、120和240 mg/kg)、阳性药物对照组(Are-AMP)、模型组和阴性对照组.取血清用斑点杂交法(dig标记探针)测DHBV*DNA,用单抗夹心ELISA法测定DHBsAg;检测丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性观察肝功能变化,并作肝组织病理切片观察形态学改变.结果儿茶素类各给药组鸭血清DHBV*DNA和DHBsAg含量均有降低,与给药前和模型组相比差异有显著性;给药25 d及停药后14 d,鸭血清ALT与AST活性均降低;给药后的肝组织病理变化有明显改善. 结论儿茶素类有抗乙肝病毒、降低转氨酶活性、减轻肝脏病理损伤作用.     

青蒿琥酯对鸭乙型肝炎病毒抑制作用的实验研究

目的用原代鸭肝细胞的培养模型,研究青蒿琥酯(ART)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的抑制作用。方法制取雏鸭原代肝细胞(500000个/ml)于37℃、5%CO2培养24h存活后,除对照组外,给药组每48h换药1次,连续加药6d,收集细胞并测定DHBV DNA的含量。结果①在肝细胞毒性实验中,ART对鸭肝细胞无毒性,各药物组细胞存活率均在95%以上。②15、30、60μg/mlART对DHBV DNA均有明显的抑制作用,且浓度越大抑制作用越明显。结论实验结果提示,ART对DHBV有一定的抑制作用,且存在量效关系。     

免疫无应答麻鸭抵抗鸭乙肝病毒攻击的能力评价

目的 通过病毒感染实验,观察乙肝疫苗免疫无应答的麻鸭是否能抵抗鸭乙肝病毒(DHBV)攻击。方法 将82只DHBV DNA阴性的1日龄麻鸭随机分为实验组(65只)和空白组(17只)。实验组肌肉注射乙肝疫苗,空白组注射生理盐水。65只实验组动物接种疫苗后,16只未检测出乙肝表面抗体(抗-HBs)的动物全部纳入无应答组;另外从49只检测出抗-HBs的动物中随机选取16只作为应答组。应答组、无应答组及空白组均静脉注射DHBV强阳性血清0.2ml/只,观察4周。最后抽血检测DHBV DNA、鸭乙肝表面抗原(DHBsAg)、鸭乙肝e抗原(DHBeAg)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT);同时取肝脏组织进行病理学检查。结果 病毒攻击后,免疫无应答组DHBV DNA阳性率为12.5%(2/16),低于空白组(53.5%,8/15),与免疫应答组(18.75%,3/16)相比无统计学差异。 无应答组乙肝表面抗原阳性率(18.75%,3/16)明显低于空白组(60%,9/15),与应答组(25%,4/16)无统计学差异。无应答组、应答组和空白组的乙肝e抗原阳性率分别为18.75%(3/16)、12.5%(2/16)和26.7%(4/15),无统计学差别。三个观察组在接受病毒攻击前后的ALT及AST变化值均无统计学差异。肝脏病理学检查结果未见三组之间有明显差异。结论 麻鸭接种乙肝疫苗后,即使没有产生抗-HBs抗体,仍然能够抵抗DHBV的攻击。免疫无应答组麻鸭在接受DHBV攻击后其病毒感染率与免疫应答组便没有明显差异。     

感染鸭乙型肝炎病毒动物模型的应用研究

鸭乙型肝炎病毒(DHBV)与人HBV同属嗜肝DNA病毒科。通过对DHBV感染鸭模型的实验,可使我们进一步了解病毒生命周期中各种病毒基因的作用。因此,DHBV感染鸭模型是研究HBV合适的动物模型。文中就近年来利用该模型所开展的相关研究作一简要综述。     

灵芝多糖治疗鸭乙型肝炎的实验研究

目的研究泰山赤灵芝提取物灵芝多糖抗鸭乙型肝炎病毒(duck hepatitis Bvirus,DHBV)的作用。方法采用实时定量荧光PCR技术筛选DHBV阳性麻鸭雏鸭60只。将实验动物随机分为模型组,灵芝多糖高、中、低剂量组和阿昔洛韦组。取用药前、用药第7、14天及停药第5天各组麻鸭静脉血,以RT-PCR检测血清DHBV DNA含量,并检测血清中AST、ALT含量。结果灵芝多糖高、中、低剂量组的病毒载量与模型组比较差异均无统计学意义(均P>0.05);灵芝多糖各剂量组AST和ALT含量与模型组比较,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论灵芝多糖高、中、低3个剂量组未见明显抑制DHBV复制的作用,但对肝细胞具有一定的保护作用。     

四川麻鸭DHBV感染情况的研究

鸭乙型肝炎病毒(DHBV)与人乙型肝炎病毒(HBV)同属嗜肝DNA病毒科,在病毒的结构、复制、分子生物学特征及感染特点等方面与HBV相似。鸣分布广泛,来源丰富,已被作为研究人HBV的重要动物模型。研究表明,不同区域、不同种类的鸭感染DHBV存在明显地理分布差异。为了解四川麻鸭的自然感染情况,我们于1989年1～5月对300只四川麻鸭及71只其他鸭种血清进行DHBsAg及DHBV DNA检测,并对其肝组织作病理学观察,现将结果报告如下。材料与方法一、鸭血清和肝脏标本采集从成都宏济路综合市场及大学路农贸市场采集四川麻鸭(成鸭)280只、雏鸭20只、北京鸭25只(本地喂养)、鹅55只、鸡54只,四川邛崃肉鸭联合加工公司采集狄高鸭(澳     

青蒿琥酯抗鸭乙型肝炎病毒的体内实验

目的观察青蒿琥酯体内抗鸭乙型肝炎病毒(duck hepatitis B virus,DHBV)的作用。方法将DHBV DNA阳性麻鸭随机分为青蒿琥酯大、中、小剂量组、拉米夫定组和空白对照组,分别给予相应药物进行干预。用药前、用药第71、4、21、28天,及停药第7天,取静脉血用实时荧光定量PCR法检测血清DHBVDNA含量。治疗前后取肝脏组织作病理学检查。结果拉米夫定组于用药后,血清DHBV DNA水平迅速降低,停药后立即反跳。青蒿琥酯大剂量组第21、28天DHBV DNA抑制率与拉米夫定组相似,停药后仍有一定的抑制作用。中、小剂量组与空白对照组比较有一定的病毒抑制作用。病理改变各组在统计学上无明显差异。结论大剂量青蒿琥酯对DHBV DNA的抑制率与拉米夫定相似,维持时间长,安全,但其抗HBV作用尚需进一步研究。     

广西南宁地区麻鸭乙型肝炎病毒携带状况调查

鸭乙型肝炎病毒(DHBV)与人类乙型肝炎病毒(HBV)同属嗜肝DNA病毒科,并在形态结构、基因序列、病毒复制及致病机制等方面均较为相似[1].DHBV感染率有明显的种属及地区差异.为了解广西南宁地区成年麻鸭DHBV自然携带情况,探讨广西麻鸭作为HBV动物模型的可能性,采用PCR法对广西南宁地区成年麻鸭自然感染DHBV情况进行检测.     

鸭乙型肝炎病毒分子生物学研究若干进展

鸭乙型肝炎病毒(DHBV)属于嗜肝DNA病毒,其病毒结构、核酸组成以及分子生物学性状同人乙型肝炎病毒相似。近年来,对DHBV的基因结构及其表达产物的研究有较快进展。本文就DHBV的前S/S基因,C基因以及P基因的功能及其所编码的蛋白作简要阐述。     

长沙麻鸭携带鸭乙型肝炎病毒调查研究

目的 了解长沙地区成年麻鸭携带鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的情况并探讨PCR用于DHBV检测的可能性。方法 采用常规聚合酶链反应(PCR)法检测长沙地区麻鸭血清中的DHBV。结果 共检查62份鸭血清，DHBV阳性15份，阳性率24．19％。结论 长沙地区成年麻鸭自然携带DHBV率为24．19％，提示其对DHBV易感，是较为理想的动物模型；PCR法检测DHBV敏感性较高，重复性好，可用于DHBV的检测。     

六月青乙醇提取物对鸭乙型肝炎病毒抑制作用

目的 观察六月青乙醇提取物(EELYQ)对鸭乙型肝炎病毒乙型肝炎表面抗原(DHBsAg)和乙型肝炎E抗原(DHBeAg)的抑制作用.方法 采用1日龄雏鸭接种广西麻鸭乙型肝炎病毒(DHBV)强阳性血清,13 d后用PCR法筛选出DHBV强阳性鸭.随机分成5组:EELYQ高剂量组、中剂量组、低剂量组、模型组和阳性对照组,每组10只,各组雏鸭均灌胃给药14 d.于用药前(T0)、用药7 d(T7)、14 d(T14)及停药后3 d(P3)分别采血,采用ELISA法测定上清液DHBsAg和DHBeAg的滴度.结果 EELYQ中、高剂量组给药后血清DHBsAg和DHBeAg的滴度显著降低(P<0.01),停药3 d后,EELYO高剂量组血清DHBsAg和DHBeAg滴度无反跳现象.EELYQ高剂量组给药14 d(T14)和停药3 d(P3)后,DHBsAg抑制率分别达到51.85%和59.04%.EELYQ高剂量组给药14 d(T14)和停药3 d(P3)后,DHBeAg抑制率分别达到34.27%和39.96%.EELYQ抑制DHBsAg和DHBeAg作用有明显的量效和时效反应关系.结论 EELYQ可有效抑制DHBsAg和DHBeAg的表达.     

母亲乙肝病毒感染状况对其子代疫苗接种效果影响的分析

目的探究母亲乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染状况对其子代乙肝疫苗接种效果的影响。方法选取2017—2019年大连市第六人民医院接受治疗的86对HBV感染母亲和新生儿为研究对象,按照乙肝疫苗应答反应强弱将所有患者分为两组,其中观察组为无/弱应答,对照组为强应答,比较两组母亲的乙肝病毒感染情况,使用多因素Logisitic回归分析子代疫苗接种效果的影响因素。结果观察组母亲HBV DNA阳性率高于对照组,HBV DNA以高载量为主,HBeAg以低水平为主,对照组母亲HBV DNA以低载量为主,HBeAg水平分布平均,差异有统计学意义(P<0.05);观察组HBV感染模式为“HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)”共14例(51.85%),“HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)”共11例(40.74%),对照组分别有27例(45.76%)、25例(42.37%)、7例(11.86%),差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logisitic回归分析显示,HBV DNA阳性、HBV DNA高载量、HBeAg阳性、HBeAg低水平是子代疫苗应答反应弱的危险因素。结论乙肝病毒感染母亲HBV DNA阳性、HBV DNA高载量、HBeAg阳性、HBeAg低水平是子代疫苗应答反应弱的危险因素,临床上应该加以重视。     

HBV肝外复制的意义

HBV及类似的动物DNA病毒属嗜肝病毒,即病毒的复制和所引起的细胞损害主要限于肝脏。然而,最近的研究提示,HBV可以在肝细胞以外的组织中复制,但肝外复制的意义尚未阐明。哺乳动物和鸟类嗜肝病毒的发现为体内研究HBV感染提供了优良而经济的模型。在肝外嗜肝病毒复制的最初报道之后,又有许多有关病毒感染部位的研究。Hal-pern等发现在感染鸭的胰和肾中有鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA的复制中间体,即聚腺苷酸化DHBV RNA和病毒抗原。复制中间体的存在提示,DNA并不是因血源污染所致,而是细胞内活跃复制产生。聚腺     

最近报告的与人类乙型肝炎病毒有关的三种动物病毒模型

近年发现了三种与人类乙型肝类病毒(HBV)有关的动物病毒模型,它们是土拨鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)和鸭乙型肝炎病毒(DHBV),它们与HBV组成乙型肝炎病毒科。新发现的动物病毒提供了在实验室研究乙型肝炎病毒复制和致癌作用的可能性。HBV的基因组为由3,000对碱基所组成的环状双链DNA,它比任何已知的病毒     

老鼠簕醇提物抗鸭乙型肝炎病毒及护肝作用的实验研究

摘要:目的　观察老鼠簕醇提物（Elcohol Extract of Acanthus ilicifolius L.,EEA）治疗鸭乙型肝炎的疗效。方法　将60只感染鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的麻鸭随机分为5组:EEA低、中、高剂量组、阿昔洛韦（ACV）组和模型对照组。另设1组正常对照组。每组12只,连续给药14 d。用FQ-PCR法检测治疗前（T0）、用药后d 7（T7）、d 14（T14）及停止治疗后d 5（P5）血清中DHBV DNA的水平,ELISA法测定血清中DHBsAg、DHBeAg的OD值,同时检测血清AST、ALT,最后取肝脏做病理检查。结果　老鼠簕（Acanthus Ilicifolius L.,AIL）各剂量组血清DHBV DNA水平、DHBsAg及DHBeAg OD值均未显著降低（P＞0.05）。高、中剂量EEA能显著降低ALT活性（P＜0.05）;高剂量EEA显著降低AST活性（P＜0.01）及显著改善肝脏病理作用（P＜0.001）。结论　高剂量EEA对肝功能及肝组织有明显的保护作用,但未发现EEA有抗鸭乙肝病毒作用。     

满天星积雪草苷抗鸭乙肝病毒作用

目的 研究满天星积雪草苷抗鸭乙肝病毒的作用.方法 将鸭乙型肝炎病毒DNA(DHBV-DNA)阳性麻鸭随机分为5组:模型组,阳性对照组(拉米夫定,3TC),满天星积雪草苷高、中、低剂量组,每组10只,各组麻鸭灌胃给药14 d,于用药前、用药7、14 d及停药后3d采血,检测血清鸭乙肝病毒表面抗原/e抗原(DHBsAg/DHBeAg)、DHBV-DNA和谷丙转氨酶/谷草转氨酶(ALT/AST)给药前后的变化,并观察肝组织病理改变.结果 与模型组比较,满天星积雪草皂苷高、中剂量组,阳性对照组用药后血清中DHBV-DNA、HBsAg、HBeAg、ALT、AST水平均明显降低(均P＜0.05);停药后3d,满天星积雪草皂苷高剂量组的DHBV DNA、HBsAg、HBeAg、ALT、AST水平为(1.21 ±0.11)、(0.12±0.01)、(0.11 ±0.01)、(122.4 ±15.5)、(85.2±9.4),模型组为(3.05±0.15)、(0.22±0.01)、(0.17 ±0.02)、(270.4 ±16.4)、(141.9±9.8),均低于模型组(均P＜0.05),阳性对照组为(2.36±0.13)、(0.18±0.01)、(0.15 ±0.01)、(233.5±13.8)、(121.3 ±10.2),出现明显反跳现象;病理分析表明,满天星积雪草苷对肝损伤有明显改善作用.结论 积雪草苷能有效抑制HBV在体内复制,可能是满天星中一个主要的生物活性成分.     

鸭乙型肝炎病毒全基因重组质粒构建及表达

目的构建鸭乙型肝炎病毒（DHBV）感染性克隆,通过体外细胞转染获得单一来源、基因序列清楚的体内实验的感染毒种。方法以湖北麻鸭DHBV分离株（DQ276978）为模板,用PCR法从该DHBV全基因组克隆质粒（pMD-DHBV）和DHBV阳性血清中获取3部分基因片段,总长4.4kb,克隆至载体PCR2.1的SacI和NotI酶切位点,构建含1.5倍鸭乙型肝炎病毒全基因的重组质粒,并酶切鉴定其插入方向。将构建的重组质粒经脂质体Lipo-fectineTM 2000导入鸡肝癌细胞系（LMH）细胞中转染表达,收集纯化后的转染细胞培养上清液作为体内实验感染的标准毒种。结果PCR鉴定、酶切鉴定及序列测定,证实成功获得正向插入的1.5倍鸭乙型肝炎病毒全基因重组质粒PCR2.1-DHBV1.5。Southernblot检测表明,该重组质粒在LMH细胞内存在各种病毒复制中间体;通过电镜观察,转染细胞上清液中存在DHBV完整病毒颗粒。结论经体外重组,构建出携带1.5倍加长DHBV基因组片段的重组质粒PCR2.1-DHBV1.5,并可在鸡肝癌细胞LMH中介导高水平病毒复制,从而获得含可自我复制病毒颗粒的转染细胞上清液作为动物体内感染接种物。     

拉米夫定治疗鸭乙肝停药后肝脏病理研究

目的　用鸭乙肝模型研究拉米夫定对鸭乙肝病毒的抑制效率以及停药后肝脏病理变化。方法　DHBV阳性血清感染 1日龄樱桃谷鸭 ,制备鸭乙肝模型。感染后第 2周选DHBV阳性鸭进行拉米夫定治疗 ,以生理盐水为对照组 ,连续治疗 3个月 ,于治疗前、治疗后、停药后 1个月、 2个月、 3个月每组杀 10只樱桃谷鸭 ,取肝脏及血清 ,观察血清中病毒滴度变化、肝细胞变性程度及肝脏炎性程度的动态变化。结果　治疗结束时拉米夫定治疗组鸭血清中乙肝病毒滴度 (8847 0± 5 3 71 9)、肝细胞变性程度 (1 3± 0 5 )及肝脏炎性程度 (3 6± 1 5 )均明显低于对照组 (13 661 8± 70 3 5 8,3 8± 0 8,7 7± 2 9) ,但与正常组 (2 72 7 4± 995 4)相比 ,病毒滴度仍然显著升高。停药后 1个月病毒滴度有所回升 ,其后下降。肝细胞变性程度及肝脏炎性程度仍维持较低水平。结论　拉米夫定治疗鸭乙肝病毒感染具有较为明显的、迅速的效果 ,停药后第一个月反跳明显 ,提示停用拉米夫定的第一个月应加强其他抗病毒治疗。     

嗜肝DNA病毒的分子生物学研究进展及其临床意义

人类乙型肝炎病毒(HBV)、土拨鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)和鸭肝炎病毒(DHBV)同属嗜肝DNA病毒族,并具有独特的超微结构和生物学特征。嗜肝DNA病毒的分子生物学是研究病毒基因表达与复制,即病毒DNA、RNA和蛋白质的结构与功能。近年来该领域的研究进展很快,本文拟就近期,尤其今年元月召开的上海国际肝癌与肝炎会上有关的报道综述如下。嗜肝DNA病毒的基因组结构如图1,嗜肝DNA病毒基因组属环状DNA分子,部分区域呈单链结构,病毒DNA分子由一约3,000～3,300个碱基对(bp)     

地石榴全草水提物抗鸭乙肝病毒及护肝作用的实验研究

目的 探究地石榴全草水提物的抗鸭乙型肝炎病毒(Duck Hepatitis B Virus,DHBV)效果及护肝作用.方法 建立鸭乙型肝炎动物模型,将其分为6组:模型组、拉米夫定组、地石榴全草水提物高、中、低剂量组、空白组,每组10只,持续给药28 d.采用实时荧光定量PCR法测定给药前(T0)、给药后d7(T7)、d...