芪附汤抑制阿霉素心脏毒性损伤大鼠心肌细胞凋亡的研究

目的:研究芪附汤对阿霉素(adriamycin,ADR)引起的心肌细胞凋亡的影响并探讨其作用机制。方法:SD大鼠56只,雄性,随机分为正常组、模型组、中药对照组、芪附汤组,每组各14只。正常组:不予特殊处理。模型组:每周1次ip ADR 2.5mg.kg-1,正常组与模型组分别于造模同时按10 mL.kg-1剂量ig蒸馏水。中药对照组:于造模同时按3.5 mL.kg-1剂量ig生脉饮。芪附汤组:于造模的同时按2.625 g.kg-1剂量ig芪附汤水煎液。每日1次,连续4周后称取大鼠体质量。处死大鼠,称取心脏质量,计算心脏指数(心脏质量/体质量),采用细胞流式检测术测定心肌细胞凋亡率,实时定量PCR法检测Bax,Bcl-2和Caspase-3的mRNA表达水平,计算Bcl-2/Bax。结果:与正常组相比,ADR可使大鼠心脏质量下降,且显著引起大鼠心肌细胞凋亡;Bax和Caspase-3的mRNA表达水平在ADR给药后明显上调,Bcl-2 mRNA表达水平则下调(P<0.05);而芪附汤抑制了Bax,Caspase-3的高表达,同时使Bcl-2 mRNA的表达水平上调,进而使Bcl-2/Bax显著增高(P<0.05)。结论:芪附汤可抑制ADR引起的心肌细胞凋亡,其作用机制与抑制Bax,Caspase-3的mRNA高表达和上调Bcl-2 mRNA表达水平有关。     

中药人参、附子及其小复方参附汤抑制阿霉素心脏毒性损伤大鼠细胞凋亡的研究

目的:探讨参附汤对阿霉素心脏毒性损伤大鼠细胞凋亡线粒体途径的影响。方法:采用ELISA法测定心肌细胞线粒体Bcl-2、Bax、cytc、Caspase-9、Caspase-3的含量。结果:阿霉素心脏毒性损伤模型大鼠心肌线粒体Bcl-2含量降低、Bax含量提高,有统计学意义(P<0.05);而Caspase-9、Caspase-3含量均提高,有统计学意义(P<0.05)。结论:阿霉素心脏毒性损伤与细胞凋亡线粒体途径有关,参附汤通过抑制线粒体途径的细胞凋亡,以防治阿霉素毒性损伤,进而保护心肌功能。     

人参、黄芪、附子、干姜对阿霉素心脏毒性损伤大鼠线粒体途径细胞凋亡的影响

目的:探讨人参、黄芪、附子、干姜对阿霉素心脏毒性损伤大鼠线粒体途径细胞凋亡的影响。方法:采用ELISA法测定心肌线粒体Bcl-2、Bax、cytc、Caspase-9、Caspase-3含量。结果:阿霉素心脏毒性损伤模型大鼠心肌线粒体Bcl-2含量降低、Bax、cytc、Caspase-9、Caspase-3含量均升高,有统计学意义(P<0.05)。结论:Bcl-2、Bax、cytc、Caspase-9、Caspase-3参与了阿霉素心脏毒性损伤的发生、发展过程,人参、黄芪、附子、干姜通过调节线粒体途径的细胞凋亡而达到保护心肌作用。     

姜附汤对阿霉素心脏毒性大鼠心肌细胞SOD、GPH—Px、MDA的影响

目的：探讨姜附汤对阿霉素心脏毒性损伤大鼠SOD、GPH—Px、MDA的影响。方法：采用生化法检测心肌细胞SOD、GSH—Px活性及MDA含量。结果：模型组SOD、GSH—Px活性下降,MDA含量上升,有统计学意义（P〈0．05）;生脉纽、姜附纽心肌细胞SOD上升,有统计学意义（P〈0．05）。结论：姜附汤对阿霉素心脏毒性具有一定保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

芪附汤对阿霉素心脏毒性损伤的保护作用及其抗氧化机制

目的:观察芪附汤对阿霉素心脏毒性损伤模型大鼠心脏功能的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用心电图仪测定心脏功能的相关参数,采用化学比色法检测心肌细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性及脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果:与正常组相比较,模型组大鼠心率显著减慢,QRS波群电压明显降低,Q-T间期明显延长,均有统计学意义(P<0.05),个别出现心律失常;与模型组相比较,芪附汤组、中药对照组心率增加,QRS波群电压和明显增高,Q-T间期显著缩短,均有统计学意义(P<0.05)。与正常组相比较,模型组、芪附汤组、中药对照组心肌细胞SOD和GSH-Px活性减弱,MDA含量上升,均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比较,芪附汤组、中药对照组心肌细胞SOD和GSH-Px活性增强,MDA含量下降,均有统计学意义(P<0.05)。结论:芪附汤对阿霉素诱导的大鼠心脏毒性损伤具有保护作用,作用机制与其抗氧化应激有关。     

六味地黄汤对慢性肾衰竭大鼠线粒体凋亡途径的影响

目的:观察六味地黄汤对慢性肾衰竭大鼠线粒体凋亡途径的影响。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为正常组(10只)、假手术组(10只)及手术组(25只),手术组进行5/6肾切除造模,造模成功后再随机分为模型组及治疗组。治疗组予以6.75 g·kg~(-1)六味地黄汤灌胃,其余3组予以等体积蒸馏水灌胃,各组均给药8周。检测各组大鼠血肌酐、血尿素氮及尿蛋白定量水平;苏木素-伊红(HE),马松(Masson)染色观察肾组织形态学变化;电镜观察肾小管上皮细胞中线粒体超微结构变化;原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测肾组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),细胞色素C(Cyt C),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白及mRNA的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血肌酐、尿素氮及尿蛋白定量水平显著升高(P0.01),治疗组较模型组上述指标得到改善(P0.05);正常组及假手术组大鼠肾脏未观察到明显病理变化及线粒体结构破坏,模型组存在不同程度的肾小管萎缩和扩张,间质性炎性细胞浸润和胶原沉积,以及线粒体肿胀和断裂,治疗组较模型组上述病灶明显减轻;与正常组比较,模型组细胞凋亡显著增多(P0.01),Bax,Caspase-3表达显著升高(P0.01),Bcl-2表达显著降低(P0.01);与模型组比较,治疗组细胞凋亡显著减少(P0.01),Bax,Caspase-3表达显著降低(P0.01),Bcl-2表达显著升高(P0.01);正常组及假手术组Cyt C主要定位在线粒体,模型组细胞质中Cyt C表达显著增加(P0.01),治疗组较模型组细胞质中Cyt C表达显著减少(P0.01)。结论:六味地黄汤可减轻肾纤维化,延缓肾功能进展,其机制可能是通过保护线粒体结构及调控线粒体凋亡途径相关蛋白的表达减少细胞凋亡。     

央芪汤对胃癌细胞凋亡影响的实验研究

目的：观察央芪汤对胃癌细胞凋亡的影响。方法：培养人胃癌细胞SGC-7901细胞株,用MTT法评价央芪汤对胃癌细胞增殖的抑制作用,确定央芪汤对胃癌细胞的IC50值,采用流式细胞术检测央芪汤对胃癌细胞凋亡的诱导作用,免疫细胞化学法检最4胃癌细胞中bel-2及caspase-3蛋白的表达情况。结果：央芪汤可以显著促进胃癌细胞SGC-7901的凋亡（P〈0．01）。明显增加胃癌细胞SGC-7901凋亡蛋白caspase-3的表达（P〈0．01）,并可明显抑制抗凋亡蛋白bel-2的表达（P〈0．01）。结论：央芪汤可以通过促进胃癌细胞的凋亡,达到抗肿瘤的目的。     

牛磺酸对阿霉素所致大鼠心肌线粒体损伤的影响

目的:研究牛磺酸(Tau)对阿霉素(Adr)所致大鼠心肌线粒体损伤的影响.方法:将Tau灌胃于Adr所致心肌线粒体损伤的40只大鼠,采用透射电镜对大鼠心肌线粒体的损伤情况进行观察;用激光共聚焦显微镜观测心肌细胞内的Ca23浓度;以Rhodamine 123为荧光探针,用荧光分光光度计测定心肌线粒体悬液的荧光强度反应线粒体膜电位变化.结果:Adr累积用量达到20 mg/kg可致大鼠心肌线粒体损伤,Ca2+浓度增加,线粒体膜电位降低.Tau高、中剂量组(400mg/kg、200 mg/kg)可减轻心肌细胞超微结构的损伤,减轻钙超载和升高线粒体膜电位.结论:Tau能明显改善Adr所致大鼠心肌线粒体损伤,对Adr心脏毒性具有保护作用.     

参附注射液对化疗中阿霉素心脏毒性的影响

目的：观察参附注射液对减少阿霉素所致心脏毒性的作用。方法：将住院患者205人随机分为常规化疗组（n1=98）,常规用含阿霉素的化疗方案;加用参附注射液组（n2=107）,于应用阿霉素前用参附注射液,两组病人均于用药后2小时作常规心电图检查。结果：常规用阿霉素化疗组心电图异常发生率为36．7％,加用参附注射液组为13．1％,两组比较,差异有极显著意义（P＜0．01）。结论;参附注射液可明显减少阿霉素引起的心脏毒性反应。     

温心炙草汤对乳腺癌阿霉素化疗相关心脏毒性的影响

目的：观察温心炙草汤对乳腺癌阿霉素化疗所致心脏毒性的影响。方法：将68例接受4周期阿霉素辅助化疗的早期浸润性乳腺癌心阳虚证患者依据随机数字表随机分为温心组(34例)和对照组(34)例，温心组脱落1例，对照组脱落2例，最终完成方案温心组33例，对照组32例。温心组从第2周期开始每周期化疗后口服温心炙草汤2周，对照组给予对应模拟剂，其他治疗两组相同。观察化疗前后两组患者KPS、MDASI-TCM评分和心脏毒副反应程度、心肌及心衰标志物(肌钙蛋白、肌酸激酶同工酶水平、前端脑钠肽及心电图改变率的变化情况。结果：两组化疗前KPS、MDASITCM、cTnI、CK-MB比较差异均无统计学意义(P>0.05)；对照组化疗后KPS评分低于化疗前(P<0.05),MDASI-TCM评分、cTnI、CK-MB高于化疗前(P<0.05)；温心组化疗后MDASI-TCM评分、CK-MB高于化疗前(P<0.05)；且化疗后，温心组KPS评分高于对照组(P<0.05),MDASITCM评分、cTnI、CK-MB低于对照组(P<0.05)。温心组心脏毒性发生率、NT-BNP和心电图改变率低于对照组(P<0.05)。结论：温心炙草汤可降低乳腺癌阿霉素化疗所致心脏毒性，改善心脏功能。     

补阳还五汤抗缺氧再给氧乳鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的：观察含补阳还五汤的大鼠血清对缺氧24h再给氧4h后新生乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及对一氧化氮（NO）含量的影响。方法：采用Annexin V-PI双标记方法（以流式细胞仪和ELISA法）检测细胞凋亡，以紫外分光光度法测定心肌细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放水平，采用改良Yu方法测定NO浓度，用Ohkawa法测定硫代巴比妥酸（TBARS）反应物质含量。结果：补阳还五汤药物血清能显著抑制心肌细胞的凋亡及LDH释放，降低培养细胞上清液中NO和TBARS水平，其效应呈剂量依赖关系。结论：补阳还五汤具有抗缺氧再给氧心肌细胞凋亡作用，其机制与清除氧自由基和NO特性有关。     

参附注射液对实验性心力衰竭大鼠血浆凋亡相关因子的影响

目的观察参附注射液对实验性心力衰竭大鼠血浆肿瘤坏死因子-Ⅱ（TNF—α）、白细胞介素-6（IL-6）及可溶性Fas（sFas）含量的影响,探讨参附注射液在心力衰竭治疗中抗凋亡作用机制。方法采用结扎冠状动脉左前降支近端的方法建立心肌梗死后心力衰竭大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组（14只,除不结扎冠状动脉左前降支外,余同手术组）CAF组（13只）和参附组（11只）。参附组腹腔注射参附注射液[6．2mL,（kg·d）]。CHF组和假手术组给予同等量生理盐水．每日1次腹腔注射,连续4周。给药4周后颈动脉取血,采用双抗体夹心ELISA法测定血浆中TNF—α、IL-6发sFas含量。结果与假手术组相比,CHF组大鼠血浆TNF—α、IL-6及sFas浓度明显增高（P〈0．01）,参附注射液能降低CHF大鼠血浆TNF—α、IL-6及sFas的水平（P〈0．05）。结论参附注射液改善梗死后心衰大鼠的心功能．可能与种制凋亡相关因子减少心肌细胞的凋亡,发挥心肌细胞的保护作用有关。     

心肌活力饮对阿霉素所致大鼠心肌损伤的影响

目的探讨心肌活力饮对阿霉素(ADM)诱导大鼠心肌损伤的保护作用和抗氧化作用。方法选用ADM诱导大鼠心肌损伤模型。SD大鼠80只,随机分为4个组,每组20只,分别为正常对照组、模型对照组、心肌活力饮组(10g原药材/kg)及阳性药黄芪生脉饮组(7mL/kg)。除正常对照组外,其余各组大鼠分别腹腔注射ADM(2.5mg/kg),每周3次,共4周。到期测定血、心肌丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并进行心肌病理检查。结果心肌活力饮组及黄芪生脉饮组血液及心肌的MDA水平明显低于模型对照组,SOD水平则显著高于模型对照组,心肌病理计分下降。结论心肌活力饮有抗氧化作用,对ADM所引起的心肌损伤具有保护作用。     

益气逐瘀方对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡及miR-24/Bim通路的影响

目的研究益气逐瘀方(参元丹)对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡及miR-24/Bim通路的影响。方法分离并培养乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞缺氧模型,Lipofectamine2000转染miR-24 mimic/inhibitor至心肌细胞,实验分为正常组、缺氧组、参元丹组、参元丹+miR-24 mimic组、参元丹+miR-24 inhibitor组,治疗组予参元丹含药血清干预。比色法检测心肌细胞培养基上清液LDH、CPK活性,MTT法检测心肌细胞存活率,Annexin V/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡,qRT-PCR检测心肌细胞miR-24、Bim mRNA表达。结果与低氧组相比,参元丹组、参元丹+miR-24 mimic组、参元丹+miR-24 inhibitor组均能显著降低细胞培养基上清液LDH、CPK活性(P<0.05),提高心肌细胞存活率(P<0.05),降低心肌细胞凋亡(P<0.05),升高心肌细胞miR-24 mRNA表达(P<0.05),降低Bim mRNA表达(P<0.05);治疗组之间比较,参元丹+miR-24 mimic组作用更显著(P<0.05)。结论益气逐瘀方参元丹能够减轻缺氧诱导乳鼠心肌细胞损伤及细胞凋亡,其作用机制可能与其上调miR-24表达,同时抑制其靶基因Bim mRNA表达有关。     

参附注射液对猪创伤性心脏骤停复苏后肾损伤的保护作用研究

目的探讨参附注射液对猪创伤性心脏骤停复苏后肾损伤的保护作用。方法国产健康雄性白猪21头,采用随机数字表法分为假手术组(Sham组,n=5)、创伤性心脏骤停复苏(TCA组,n=9)和参附组(SFI组,n=7)。Sham组只经历气管插管及动静脉置管,不经历放血、复苏等过程。TCA组匀速释放总血容量的40%,然后经电刺激法室颤5 min,心肺复苏5 min后常规液体复苏治疗。SFI组在TCA组基础上于复苏后5 min进行参附注射液的干预。于放血前10 min、复苏后1、3、6、24 h检测血清TNF-α、IL-6、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平。复苏后24 h经右侧耳缘静脉注射10%氯化钾液20 mL处死猪,迅速获取肾组织标本,应用原位末端标记法(TNUEL法)检测细胞凋亡情况,免疫组织化学法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白表达水平。结果TCA组中有8头猪复苏成功,SFI组和Sham组中所有猪复苏成功。与Sham组比较,TCA组血清Cr水平在复苏后24 h、BUN水平在复苏后1、3、6、24 h均明显增高(均P<0.05),TNF-α、IL-6水平在复苏后3、6、24 h明显增高(均P<0.05),复苏后24 h后肾组织细胞凋亡指数及Caspase-3表达增加(均P<0.05)。与TCA组比较,SFI组BUN水平复苏后3、6 h明显降低(均P<0.05),TNF-α、IL-6水平在复苏后3、6、24 h明显降低(均P<0.05),肾组织细胞凋亡指数和Caspase-3蛋白表达有所降低,但差异无统计学意义(均P>0.05)。结论在猪TCA复苏模型中,早期应用参附注射液能够明显减轻复苏后肾损伤。其机制可能与抑制系统炎症反应、减轻细胞凋亡有关。     

四逆汤抗缺血再灌注引起小鼠心肌细胞凋亡的作用观察及其机制研究

目的:探讨心肌缺血再灌注模型中细胞凋亡的发生及四逆汤的保护作用机制。方法:昆明种小鼠随机分为四逆汤组、模型组和正常组,观察心肌细胞 DNA ladder,检测超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、Bcl-2蛋白、Caspase-3活性和 Bcl-2、Caspase-3mRNA 转录情况。结果:模型组存在氧化损伤,出现 DNA lad-der,凋亡指数增加;四逆汤可减少凋亡对抗氧化损伤。模型组 Bcl-2蛋白表达增加,四逆汤组更为显著,与mRNA 转录结果一致;模型组明显升高的 Caspase-3活性在四逆汤组被显著抑制,mRNA 转录未见明显变化。结论:此缺血再灌注模型存在心肌细胞凋亡,四逆汤可能通过提高机体抗氧化能力,增加 Bcl-2蛋白表达,抑制 Caspase-3激活减少凋亡发生。     

参附注射液对大鼠肠缺血再灌注致急性肺损伤的影响

目的:观察参附注射液对大鼠肠缺血再灌注致急性肺损伤的影响。方法:建立肠缺血再灌注致急性肺损伤模型,将造模成功的40只大鼠随机分为对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、参附后处理组(SFPO组)、血晶素组(Hemin组)、锌原卟啉IX+SFPO组(Zn PPIX+SFPO组),每组各8只。C组分离肠系膜上动脉但不阻断;I/R组肠系膜上动脉阻断1 h后再灌注2 h,股静脉恒速泵入等量生理盐水;SFPO组肠系膜上动脉阻断1 h后将10 m L·kg-1的参附注射液从股静脉恒速泵入;Hemin组肠系膜上动脉阻断前24 h腹腔注射Hemin 75μmol·kg-1;ZnPPIX+SFPO组肠系膜上动脉阻断前24 h腹腔注射锌原卟啉IX(20 mg·kg-1),后续操作同SFPO组。术前无需给药的各组腹腔注射等剂量的生理盐水,于再灌注2 h后颈动脉放血处死动物。观察各组大鼠肺组织中血红素加氧酶1(HO-1)的表达,丙二醛(malonaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)含量和肺通透性指数、动脉血气和肺组织湿/干质量比值的影响。结果:与I/R组比较,SFPO组和Heim组肺组织HO-1表达增高;Zn PPIX+SFPO组表达降低(P0.05)。SFPO组和Heim组肺组织湿/干质量比、MDA和通透性指数均显著降低,而SOD值明显升高(P0.05或P0.01);与C组比较,缺血再灌注组肺组织湿/干质量比、MDA和通透性指数均明显增高,而SOD显著降低(P0.05);与C组比较,各组动物动脉血Pa O2、Pa CO2显著下降(P0.05),与I/R组比较,SFPO组和Heim组Pa O2、Pa CO2明显增高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:参附注射液可能通过直接诱导血红素加氧酶-1蛋白表达、一定程度上抑制脂质过氧化、拮抗氧自由基的损伤,提高抗氧化能力,改善肺部微循环,发挥IIR损伤所致的急性肺损伤的保护作用。