宫颈癌组织miR-574-5p的表达及其下调后对宫颈癌SiHa细胞的影响

目的探讨宫颈癌患者组织中miR-574-5p的表达及其下调时对宫颈癌Si Ha细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法用实时荧光定量PCR测定80例宫颈癌组织中miR-574-5p水平。将miR-574-5p抑制物转染宫颈癌Si Ha细胞,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Tanswell迁移实验检测细胞侵袭能力。结果宫颈癌组织中miR-574-5p相对表达水平高于正常宫颈组织(P0.05);高表达的miR-574-5p与肿块大小、临床分期、病理分级和淋巴结转移有关(P0.05);转染miR-574-5p抑制物组与空白组及阴性对照组相比,Si Ha细胞增殖能力下降(P0.05);细胞凋亡率明显增加(P0.05);转染后细胞穿膜能力明显减弱(P0.05)。结论 miR-574-5p的高表达与宫颈癌的进展有关,下调miR-574-5p的表达抑制了宫颈癌Si Ha细胞的增殖和迁移,促进其凋亡,有望成为宫颈癌基因治疗的靶点。     

过表达miR-139-5p对胶质母细胞瘤U87MG细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨过表达miR-139-5p对胶质瘤U87MG细胞增殖和侵袭的影响,并初步分析其可能机制.方法 在胶质瘤U87MG细胞中瞬时转染miR-139-5p并用real-time PCR方法验证其转染效率,CCK-8法检测转染后各组U87MG细胞的增殖能力,Transwell实验检测转染后各组U87MG细胞的侵袭能力,...     

miR-129-5p靶向KLK7对卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭的影响及分子机制

目的 探讨高表达miR-129-5p对卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭的影响及分子机制。方法 采用实时荧光定量PCR方法检测卵巢癌SKOV3细胞与人正常卵巢上皮细胞株中miR-129-5p的表达。在卵巢癌SKOV3细胞中瞬时转染miR-129-5p模拟物及无意义序列,采用CCK8法及Transwell实验检测各组细胞的增殖能力和侵袭能力;实时荧光定量PCR检测miR-129-5p和KLK7的相对表达水平;Western blot检测各组细胞中KLK7蛋白表达;Targetscan 7.2和双荧光素酶实验分析miR-129-5p与KLK7的靶向关系。结果 miR-129-5p在卵巢癌SKOV3细胞中的表达低于人正常卵巢上皮细胞(P<0.05),过表达miR-129-5p降低SKOV3细胞中KLK7 mRNA和蛋白的表达,Targetscan 7.2网站分析及双荧光素酶实验证实KLK7为miR-129-5p的靶基因,过表达miR-129-5p抑制SKOV3细胞增殖和侵袭能力(P<0.05)。结论 过表达miR-129-5p可通过靶向调控KLK7抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭。     

miR-212-5p在肝癌组织中的表达及对HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的影响

目的 探讨miR-212-5p在肝癌组织中的表达及对HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法应用qRT-PCR法检测96例肝癌组织及癌旁组织中miR-212-5p表达水平,同时设HepG2细胞组、miR-212-5pmimics组与miR-212-5pinhibitor组。培养72h后,采用MTT法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭与迁移水平;qRT-PCR法检测细胞miR-212-5p表达水平。结果 肝癌组织中miR-212-5p表达水平升高,肿瘤最大径≥2cm、TNM分期越高、浸润深度越深、病理级别越低、有淋巴结转移、有复发的肝癌患者miR-212-5p高表达率更高（P<0.05）。miR-212-5p模拟物能增强HepG2细胞增殖、侵袭及迁移能力,抑制HepG2细胞凋亡（P<0.05）;miR-212-5p抑制剂能抑制HepG2细胞活力、增殖、侵袭及迁移能力,促进HepG2细胞凋亡（P<0.05）。结论 miR-212-5p在肝癌组织中高表达,miR-212-5p可促进HepG2细胞增殖、侵袭及迁移能力,抑制...     

长链非编码RNA GAS5在卵巢癌中的表达及对SKOV-3细胞增殖与侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA GAS5在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV-3增殖与侵袭能力的影响。方法 qRT-PCR检测39例卵巢癌组织及对应癌旁正常卵巢组织lncRNA-GAS5的表达;通过重组质粒过表达SKOV-3细胞lncRNA-GAS5,采用CCK8法与Transwell侵袭实验分别检测过表达lncRNA-GAS5后SKOV-3细胞增殖与侵袭能力的变化;qRT-PCR及Western blot检测PTEN表达变化。结果 lncRNA-GAS5在卵巢癌组织表达水平低于对应癌旁正常卵巢组织,P0.01。lncRNA-GAS5重组质粒转染SKOV-3细胞后可抑制细胞的增殖与侵袭能力;qRT-PCR与Western blot结果证实,过表达lncRNA-GAS5后,SKOV-3细胞PTEN的表达上调,P0.01。结论 lncRNA-GAS5在卵巢癌组织中表达降低,lncRNA-GAS5可能通过上调PTEN的表达来抑制SKOV-3细胞的增殖与侵袭。     

miR-219-5p对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡与侵袭的影响及其机制

目的:探索miR-219-5p对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、凋亡及侵袭的影响,并探讨其机制.方法:采用RT-PCR检测miR-219-5p在NSCLC细胞系H1299,A549,H1975及正常肺上皮细胞系BEAS-2B中的表达.将NSCLC细胞系H1299分成对照组和miR-219-5p组,用Lipofectamine 2000分别转染miR-219-5p scramble和miR-219-5p mimics,采用MTT法、流式细胞术及Transwell实验分别检测比较两组细胞增殖、凋亡及侵袭能力,Western印迹测定表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及裂解型多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP ribose polymerase,PARP)在两组细胞中的表达.结果:miR-219-5p在H1299,A549和H1975细胞系中的表达量均低于BEAS-2B,差异有统计学意义(P<0.05);MTT实验显示在48,72,96及120 h,miR-219-5p组OD490 nm值显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-219-5p组细胞凋亡率显著高于对照组(13.33%±1.20%vs 3.43%±0.12%),差异有统计学意义(P<0.01);miR-219-5p组侵袭细胞数显著少于对照组(67.5±9.9 vs 189.5±16.7),差异有统计学意义(P<0.05);miR-219-5p组EGFR蛋白相对表达量为0.35±0.07,miR-219-5p组EGFR蛋白相对表达量显著低于对照组(1.0),差异有统计学意义(P<0.01);miR-219-5p组裂解型PARP蛋白相对表达量显著高于对照组(2.74±0.17 vs 1.0),差异有统计学意义(P<0.01).结论:miR-219-5p可抑制NSCLC的细胞增殖和侵袭并促进其凋亡,其机制可能与下调EGFR及上调PARP的表达有关.     

miR-129-5p靶向HMGB1对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及分子机制

为探讨miR-129-5p对卵巢癌(ovarian cancer,OC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响及分子机制,qRT-PCR检测不同OC细胞株和正常人卵巢上皮细胞株中miR-129-5p的表达水平;在SKOV3细胞中分别转染miR-129-5p模拟物或无关序列,qRT-PCR检测转染后细胞中miR-129-5p的表达情况。生物信息学软件TargetScan预测miR-129-5p与高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein, HMGB1)基因靶向结合位点,qRT-PCR、Western blotting和双荧光素酶报告基因实验分析miR-129-5p对HMGB1的靶向调控作用。分别采用MTT和Transwell实验检测SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移能力。将miR-129-5p模拟物和HMGB1 siRNA或siRNA Control共转染至SKOV3细胞,MTT和Transwell实验检测其对细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。结果显示,SKOV3细胞中miR-129-5p的表达量显著低于正常人卵巢上皮细胞(P0.05)。在SKOV3细胞中转染miR-129-5p模拟物可显著提高miR-129-5p的表达量(P0.05)。miR-129-5p与HMGB1 3’非翻译区存在靶向结合位点,且过表达miR-129-5p可抑制HMGB1的表达,miR-129-5p模拟物转染后相对荧光素酶活性显著下降(P0.05)。过表达miR-129-5p后,SKOV3细胞增殖能力明显减弱,侵袭和迁移能力明显受到抑制(P0.05)。而转染HMGB1 siRNA后,miR-129-5p模拟物对SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用明显减弱(P0.05)。以上结果表明miR-129-5p通过靶向调控HMGB1的表达抑制SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移。     

miR-299-5p在前列腺癌中的表达及对细胞生物行为学的影响

目的:探讨微小RNA-299-5p(miR-299-5p)在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞生物学行为的影响.方法:收集2016年8月至2018年10月期间本院手术后存档的前列腺癌组织及对应癌旁组织标本各42例,qRT-PCR法检测miR-299-5p表达水平.体外培养人前列腺癌PC-3细胞,通过Lipofect...     

miR-204-5p抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及对上皮-间质转化的影响

目的 探索miRNA-204-5p在乳腺癌组织和细胞中的表达,探讨miR-204-5p对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响.方法 qRT-PCR检测乳腺癌患者癌和癌旁组织,乳腺癌细胞和正常乳腺上皮细胞中miR-204-5p的表达;将miR-204-5p模拟物和阴性对照分别转染MCF-7细胞,并检...     

miR-361-5p对脑胶质瘤迁移和侵袭的影响

目的 探讨miR-361-5p对脑胶质瘤迁移和侵袭的影响。方法 应用miR-361-5p mimics转染人脑胶质瘤U251细胞,CCK-8法检测细胞增殖能力;采用Transwell实验检测U251细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的蛋白表达。结果 与对照组和NC组相比,mimics组U251细胞的增殖能力显著降低（P<0.01）,mimics组迁移和侵袭的细胞个数明显减少（P<0.05）;与对照组和NC组相比,mimics组MMP-2、MMP-9以及VEGF表达明显减少（P<0.05）。结论miR-361-5p能抑制胶质瘤U251细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并且降低MMP-2、MMP-9以及VEGF蛋白表达,从而能够控制胶质瘤的生长和转移。     

miR-17-5p通过靶向调控PTEN表达抑制乳腺癌的增殖、侵袭及迁移

目的 探讨miR-17-5p在乳腺癌中的表达和对乳腺癌细胞的调控作用及其作用机制。方法 采用RT-qPCR和Western blot方法检测乳腺癌组织和细胞中miR-17-5p和PTEN的表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测凋亡,Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和转移。Western blot检测PTEN蛋白表达变化;采用荧光素酶活性检测miR-17-5p与PTEN的相互作用。结果 与对照组相比,乳腺癌组织和细胞中miR-17-5p表达升高,同时PTEN水平降低。体外实验发现,miR-17-5p的敲减能够抑制乳腺癌细胞增殖和转移。荧光素酶报告基因实验发现PTEN是miR-17-5p的靶点。miR-17-5p下调促进乳腺癌细胞PTEN蛋白的表达。结论 miR-17-5p与乳腺癌患者预后相关,同时miR-17-5p下调能显著抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭转移。     

lncRNA SNHG8调控miR-335-5p表达影响膀胱癌增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的:探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因8(SNHG8)对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法:用脂质体将si-con、si-SNHG8、pcDNA、pcDNA-SNHG8、miR-con、miR-335-5p模拟物、si-SNHG8+anti-miR-con、si-SNHG8+anti-miR-33...     

miR-24-3p在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及其对ACC-M细胞增殖、侵袭的影响

目的探讨miR-24-3p在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及其对腺样囊性癌细胞系ACC-M增殖以及侵袭能力的影响。方法通过实时PCR检测5例涎腺腺样囊性涎组织及癌旁正常组织miR-24-3p的表达水平;将miR-24-3p模拟物瞬时转入高转移腺样囊性癌细胞系(ACC-M)使miR-24-3p过表达,并通过实时PCR方法验证;流式细胞仪分析转染后ACC-M细胞周期的改变,甲基噻唑基四唑比色法检测转染后ACC-M细胞的增殖,Transwell实验检测转染后ACC-M细胞的侵袭能力,蛋白质免疫印迹法检测转染后ACC-M细胞血小板源性生长因子受体B(PDGFRB)的表达变化。结果 miR-24-3p在涎腺腺样囊性癌组织中的表达水平显著低于癌旁正常组织。转染miR-24-3p mimics能够显著上调ACC-M细胞miR-24-3p的表达水平,ACC-M细胞的S期比例明显下降,而G_0/G_1期的细胞明显增多,增殖受到明显抑制,侵袭能力下降,显著降低ACC-M细胞PDGFRB的蛋白表达。结论 miR-24-3p在涎腺腺样囊性癌中低表达,过表达miR-24-3p能够抑制涎腺腺样囊性癌细胞的增殖与侵袭能力。     

miR-194-5p通过FOXP2影响骨肉瘤SAOS-2细胞增殖和侵袭的研究

目的 探讨高表达miR-194-5p对骨肉瘤SAOS-2细胞增殖和侵袭的影响及机制。方法 实时荧光定量PCR方法检测骨肉瘤SAOS-2细胞与人成骨hFOB1.19细胞中miR-194-5p的表达水平,应用瞬时转染将miR-194-5p模拟物转染至骨肉瘤SAOS-2细胞,实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-194-5p、FOXP2 mRNA的相对表达水平,Western blot检测各组细胞中FOXP2蛋白表达,Targetscan7.2和双荧光素酶实验分析FOXP2与miR-194-5p的靶向关系,采用CCK8法检测各组细胞的增殖能力,transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 miR-194-5p在骨肉瘤SAOS-2细胞中的表达低于人成骨hFOB1.19细胞（P<0.05）;过表达miR-194-5p使SAOS-2细胞中FOXP2mRNA和蛋白表达下降;Targetscan7.2网站分析及双荧光素酶实验证实FOXP2为miR-194-5p的靶基因;过表达miR-194-5p使SAOS-2细胞增殖、侵袭能力下降。结论 过表达miR-194-5p可以抑制骨肉瘤SAOS-2细胞...     

miR-210-3p通过靶向调控SMAD4基因对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨miR-210-3p对宫颈癌细胞增殖、侵袭的影响及作用机制.方法 通过OncomiR和GEPIA网站分析TCGA数据库宫颈癌病例中miR-210-3p和SMAD4的表达.采用miR-210-3p抑制物转染宫颈癌Hela细胞,实验设置空白组、miR-210-3p阴性对照组和miR-210-3p抑制物组,采用CC...     

LncRNA TUG1靶向miR-141-3p影响甲状腺癌细胞的增殖和侵袭

目的 检测LncRNA TUG1在甲状腺癌细胞中的表达,初步探讨LncRNA TUG1对甲状腺癌细胞增殖和侵袭的影响及机制。方法 采用qRT-PCR法检测甲状腺癌B-CPAP、TPC-1细胞株中LncRNA TUG1和miR-141-3p的表达水平,应用生物信息学预测lncRNA TUG1和miR-141-3p的靶向关系,双荧光素酶报告基因实验进行验证。将lncRNA TUG1干扰序列转染TPC-1细胞,应用qRT-PCR法检测lncRNA TUG1和miR-141-3p的表达,MTT法检测各组TPC-1细胞增殖能力,Transwell实验检测各组TPC-1细胞的侵袭能力。结果 与正常甲状腺上皮细胞相比,BCPAP、TPC-1中LncRNA TUG1表达水平明显升高（P<0.05）,miR-141-3p表达水平明显下降（P<0.05）,生物信息学分析及双荧光素酶实验结果显示,lncRNA TUG1可以靶向调控miR-141-3p。转染TUG1干扰序列能够降低TPC-1细胞lncRNA TUG1的表达,上调miR-141-3p的表达（P<0.05）;沉默lncRNA T...     

过表达miR-136-5p对子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖、侵袭以及凋亡的影响

目的 探讨miR-136-5p和E2F1在子宫内膜癌中的表达以及过表达miR-136-5p对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 通过生物信息学网站分析TCGA数据库中子宫内膜癌miR-136-5p以及E2F1 mRNA和蛋白的表达.采用miR-136-5p模拟物转染子宫内膜癌HEC-1A细胞,设置空白组(未进行转染)、miR-136-5p阴性对照组(转染无义序列)、miR-136-5p模拟物转染组(转染miR-136-5p模拟物),采用CCK-8方法检测各组HEC-1A细胞的增殖能力,Transwell实验检测各组HEC-1A细胞的侵袭能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot检测HEC-1A细胞E2F1蛋白表达,应用Targetscan软件预测E2F1是否为miR-136-5p的靶基因,应用双荧光素酶报告基因实验验证.结果 生物信息学分析显示,与正常组相比,子宫内膜癌组织中miR-136-5p表达下调,E2F1的mRNA和蛋白表达上升.miR-136-5p模拟物转染组HEC-1A细胞中miR-136-5p表达上升,细胞增殖能力下降、侵袭能力下降,细胞凋亡率上升.miR-136-5p过表达组HEC-1A细胞中E2F1蛋白表达下降,生物信息学分析结果显示,E2F1是miR-136-5p的靶基因,双荧光素酶实验证实E2F1为miR-136-5p的靶基因.结论 过表达miR-136-5p可以抑制HEC-1A细胞增殖与侵袭,促进凋亡,其机制可能与调控E2F1的表达相关.     

miR-141-3p对卵巢癌的作用及其机制

目的:探究miR-141-3p在卵巢癌中的作用及其相关的分子机制.方法:实时荧光定量PCR检测30例卵巢囊肿和30例卵巢癌组织中miR-141-3p和表皮生长因子受体(EGFR)的表达水平.将SKOV3细胞分为NC组(无转染的SKOV3细胞),miR-141-3p组(SKOV3细胞转染miR-141-3p),LV-EG...