核酶在基因治疗中的研究进展

8 0年代初 ,由美国科学家Cech和Altman发现了核酶 (Ribozyme) ,随着人类基因工程研究的深入 ,部分临床实验室工作者和基础科学研究人员开始注意到Ribozym在基因治疗中的应用潜力。近几年来 ,人们利用Ribozyme可以特异性地切割靶RNA序列的特点 ,设计适合的Ribozyme阻断特定基因的表达 ,相继对艾滋病、肿瘤、生殖系统疾病、肝炎、白血病、移植排斥反应等疾病进行了大量研究。试验结果表明Ribozyme作为基因治疗的一种方法有着广阔的应用前景和极大的临床实用价值。     

核酶抗肿瘤/抗病毒研究进展

核酶作为一种新型的靶向基因药物。主要针对基因表达发挥作用,为抗肿瘤和抗病毒治疗提供了新的方法。它具有特异性高的特点,目前对于它的研究还刚刚起步。现将核酶在抗肿瘤、抗病毒中的研究状况作一综述。     

锤头状核酶在白血病基因治疗中的应用

核酶 (ｒｉｂｏｚｙｍｅ)是一类具有生物催化功能的ＲＮＡ ,1 981年Ｃｅｃｈ等[1]在研究四膜虫时发现其大核ｒＲＮＡ的前体具有自我催化和剪切去除内含子的能力 ,从而改变了长期以来“酶是蛋白质”的传统概念。核酶最主要的功能是可以序列特异性的方式切割ＲＮＡ。利用这种特性 ,人们可以人工设计合成具有催化活性的核酶 ,针对特定的ＲＮＡ序列进行剪切 ,使其失活从而抑制有害基因的表达。已经发现的核酶包括Ｉ类内含子、Ⅱ类内含子、ＲＮＡａｓｅＰ、锤头状核酶、发夹状核酶和斧头状核酶。其中对锤头状核酶的研究最为深入 ,其原因是锤头状…     

核酶技术在白血病基因治疗中作用的研究进展

核酶是具有酶催化活性的RNA分子，可以特异性地结合和切割靶序列，从而在分子水平和细胞水平真正实现对失控基因苛有害基因表达的有效阻断，已大量用于人类疾病诊断治疗方面的研究。本文概述核酶技术在白血病基因治疗中作用的研究进展和应用前景。     

核酶技术在白血病基因治疗中作用的研究进展

核酶是具有酶催化活性的RNA分子,可以特异性地结合和切割靶序列,从而在分子水平和细胞水平真正实现对失控基因或有害基因表达的有效阻断,已大量用于人类疾病诊断治疗方面的研究。本文概述核酶技术在白血病基因治疗中作用的研究进展和应用前景。     

锤头状核酶在抗白血病基因治疗中的作用

锤头状核酶是一类具有酶活性的RNA,可以序列特异性地定点切割靶RNA,从而阻断有害基因的表达.在基因调控、抗病毒复制、抑制癌基因方面有较大进展.本文主要阐述锤头状核酶在抗白血病基因治疗中的作用.     

锤头状核酶在抗白血病基因治疗中的作用

锤头状核酶是一类具有酶活性的RNA，可以序列特异性地定点切割靶RNA，从而阻断有害基因的表达。在基因调控、抗病毒复制、抑制癌基因方面有较大进展。本文主要阐述锤头状核酶在抗白血病基因治疗中的作用。     

抗HBV核酶的研究进展

抗ＨＢＶ核酶的研究进展李谨革连建奇综述周永兴审校（第四军医大学唐都医院，西安７１００３８）ＡｄｖａｎｃｅｓｏｆＳｔｕｄｙｏｎＡｎｔｉ ＨＢＶＲｉｂｏｚｙｍｅｓＬｉＪｉｎｇｅ，ＬｉａｎＪｉａｎｑｉ（ＴａｎｇｄｕＨｏｓｐｉｔａｌ，ＦｏｕｒｔｈＭｉｌｉｔａ...     

核酶抗白血病作用的研究进展

核酶是具有有酶催化活性的ＲＮＡ分子，可以特异地结合和切割靶序列抑制基因表达，用于人类疾病诊断治疗方面研究。本文概述了核酶对白血病抑制作用的研究进展和应用前景。     

核酶抗白血病作用的研究进展

核酶是具有酶催化活性的RNA分子,可以特异性地结合和切割靶序列抑制基因表达,用于人类疾病诊断治疗方面研究。本文概述了核酶对白血病抑制作用的研究进展和应用前景。     

抗bcl－2核酶在HL－60细胞中的表达及促进其凋亡的研究

为消除白血病细胞中ｂｃｌ－２基因对细胞凋亡的抑制作用，开辟白血病基因治疗的途径。将合成的针对ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的“锤头型”核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ，ＲＺ）基因定向克隆于真核表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ，构成ｐＤＯＲ－ＲＺ重组体。通过脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导的ＤＮＡ转染法，把ｐＤＯＲ－ＲＺ导入ＨＬ－６０细胞。用Ｓｏｕｔｈ－ｅｒｎ印迹，ＲＮＡ斑点杂交法观察ＲＺ基因在ＨＬ－６０细胞内表达，并通过电镜、流式细胞仪（ＦＣＭ），光镜和ＤＮＡ电泳观察ＲＺ对ＨＬ－６０细胞的影响。结果：①ＲＺ在转染ＨＬ－６０后７２小时得以表达，细胞内ｂｃｌ－２蛋白合成受到抑制。②在ＦＣＭ图谱上可见到明显的凋亡峰，形态观察ＲＺ处理的ＨＬ－６０细胞呈典型的凋亡形态。③足叶乙甙（促凋亡）敏感性试验表明，与未转染的细胞和转染空载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ的细胞相比，转染ｐＤＯＲ－ＲＺ的细胞ＤＮＡ电泳易出现梯状条带。结果说明ＲＺ基因通过逆转录病毒表达载体导入ＨＬ－６０细胞后可成功地表达并抑制ＨＬ－６０细胞ｂｃｌ－２蛋白的合成，并促进ＨＬ－６０细胞凋亡     

脱氧核酶对肝癌细胞AFPmRNA表达的影响

目的 本研究针对AFPmRNA(甲胎蛋白mRNA)设计脱氧核酶,观察其切割AFPmRNA的有效性,探索脱氧核酶在肝癌基因治疗的可能性.方法 体外转录AFPmRNA底物,设计并合成DZ(脱氧核酶)、DZs(硫代修饰脱氧核酶,序列同DZ,但两侧各有两个脱氧核苷酸进行了硫代修饰)、ASO(反义寡聚脱氧核苷酸)、无关DZ对照.体外切割AF-PmRNA;经转染试剂将脱氧核酶转染入肝癌细胞HepG2,利用RT-PCR法检测AFPmRNA水平的变化;免疫细胞化学及图像分析系统检测AFP蛋白质表达情况;MTT法初步估计肝癌细胞的生长效应.结果 DZ与DZs在体外均可切割AFPmRNA底物;经转染DZ、DZs的细胞均下降AFPmRNA的水平,而且DZs的作用更强;经转染DZ与DZs的细胞均下降AFP的表达,ASO也略下降AFP的表达;DZ、DZs有抑制细胞生长的作用.结论 本实验设计的脱氧核酶能在细胞外有效切割AFPmRNA;在细胞内也能切割AFPmRNA、抑制AFP的表达、抑制肝癌细胞的生长,为肝癌的基因治疗提供可能性.     

基因治疗乳腺癌

乳腺癌的基因治疗是继手术、放疗、化疗和内分泌治疗之后发展的一种新的治疗手段。近年来，由于对肿瘤分子病理学的认识、重组DNA技术的快速发展，针对肿瘤的基因治疗应用于临床已有可行性。目前对乳腺癌的基因治疗主要集中在免疫基因治疗、肿瘤抑癌基因治疗、凋亡基因治疗、化学基因治疗、基因敲除基因治疗和抗血管生成基因治疗。     

基因诊断与基因治疗进展

１　引言 疾病是由于人体或生物体自身的遗传因素,或由于环境因素的影响,或由于遗传因素与环境因素共同作用,引起机体生理生化过程的异常,轻则表现出一时性的病理生理过程,重则发展成不可逆的病理变化,甚至导致个体生命的终结。如能及早查明引起病理生理变化的原因,明确疾病的性质,就能及早防治。２０世纪７０年代开始,由于分子生物学的飞速发展,人们能够在分子水平上认识人类的遗传与变异的本质和病原生物的基因结构,使对疾病的诊断和治疗进入到基因水平。本文就这方面的进展作一介绍。２　基因诊断技术及其临床应用 基因诊断是…     

基因治疗与心力衰竭

目的:探讨基因治疗方案的有效性和安全性。资料来源:应用计算机检索PUBMED1980-01/2006-10和EMCC 1994-10/2006-10与心力衰竭的基因治疗相关文章,检索词“Gen Therapy,Heart Failure”,并限定文章语言种类为“English”;同时计算机检索CMCC 1994-01/2006-10的相关文章,限定文章语言种类为中文,检索词“基因治疗、心力衰竭”。资料选择:对资料进行初审,选取试验包括上述治疗组和对照组的文献,然后筛除明显不随机临床试验的研究,对剩余的文献开始查找全文,进一步判断是否为RCT。纳入标准为:①试验包含平行对照组,即一般药物治疗。②治疗组为转基因治疗。资料提炼:共收集到49篇相关的随机和未随机试验,31个试验符合纳入标准。其余的排除。资料综合:31个试验包括478例动物模型,分别对应用不同靶点的转基因或基因敲除等方案进行治疗者予以评价。31篇文章中有10篇未达到预期的治疗目标,主要是在目的基因的选择及转染载体的选择方面出现了偏差。结论:虽动物试验取得了一定的成果,但尚无人体基因治疗的文献报道,随着基因技术的进步,基因治疗有望成为治疗心力衰竭的新途径。     

心血管疾病的基因治疗

心血管疾病的基因治疗朱大明综述陈在嘉审校（中国医学科学院阜外心血管病医院，北京１０００３７）ＧｅｎｅＴｈｅｒａｐｙｆｏｒＣａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒＤｉｓｅａｓｅｓＺｈｕＤａｍｉｎｇ（ＦｕｗａｉＣａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｉｎｅ...     

介入医学与肝癌基因治疗

近年来 ,随着肿瘤分子生物学研究的快速发展 ,在一定程度上阐明了恶性肿瘤的发生、发展的癌变演进过程。目前研究表明肝癌的发生是一个多步骤的复杂过程 ,在这个过程中 ,有多种癌基因和抑癌基因的改变 ,肝癌的癌基因谱已逐渐明朗。肝癌的基因治疗是目前学术界研究的热点 ,已取得了很大的进展。本文综述肝癌基因治疗的研究进展并对介入医学在肝癌基因治疗中的地位和作用作一展望。1　癌基因治疗策略肝癌是多基因突变引起的 ,基因治疗的原则和目的基因的选择较复杂 ,常用的肝癌基因治疗策略可概括为以下几类 :1.1免疫性基因治疗　现代肿瘤免疫…     

造血干细胞与基因治疗

国际上临床基因治疗从1991年开始,至今有关的基础研究已取得很大进展,但一些重大难题尚未解决。例如:基因转染的载体、目的基因体内转染的靶向性、目的基因在体内表达的水平和时间的调控以及有治疗效果基因的选择和寻找等。美国几例ADA基因治疗病例,其带有目的基因的细胞在病人体内维持时间太短。为了使目的基因能在病人体内长期或永久地表达,必须选一种能在体内自我更新和自我维持的永不消亡的细胞,作为目的基因的宿主细胞。于是,造血干细胞便成为最理想的目的基     

超声造影剂与基因治疗

近年来随着分子生物学、肿瘤免疫学等相关学科的迅速发展和基因工程技术的不断改进提高，基因治疗的研究日新月异。超声医学近年发展迅猛，尤其超声造影剂的应用使超声医学在诊断方面进入了一个崭新的时代。目前众多的研究表明超声造影剂在基因治疗方面具有潜在的应用价值，已展现出广阔的应用前景。     

β地中海贫血的基因治疗

β地中海贫血（地贫）是一种常见的单基因遗传病,迄今已发现１００多种突变类型,致使β珠蛋白合成减少或完全不能合成,从而导致过剩的不稳定的α链形成。β地贫临床表现程度各异,但大多数重型β地贫都要靠输血维持生命,一方面给家庭和社会带来巨大的经济负担,另一方面长期输血不能根本治愈患者,并造成一系列与输血有关的疾病,如铁贮积、免疫反应、病毒感染等,最终威胁患者的生命。所以人们寄希望于基因治疗。β珠蛋白基因定位、结构明确,对相应的调控基因了解较清楚,因此β地贫是最早被尝试用于基因治疗的疾病之一。但由于珠蛋…