UHPLC-MS/MS法同时测定人血浆中氨氯地平和缬沙坦的质量浓度

目的建立快速、灵敏的UHPLC-MS/MS法同时测定人血浆中氨氯地平和缬沙坦的质量浓度,并将此方法应用于缬沙坦氨氯地平单片复方制剂的人体药物动力学研究。方法采用氘代同位素双内标(缬沙坦-d3和氨氯地平-d4),血浆样品采用乙腈沉淀蛋白结合样品稀释的方法进行预处理,色谱柱为Waters Xbridge-C_(18)柱(50 mm×2.1 mm,2.5μm),流动相为水(含体积分数为0.1%的甲酸)-甲醇(含体积分数为0.1%的甲酸),梯度洗脱,流速为0.4 mL·min~(-1)。离子源为电喷雾电离(ESI)源,正离子化方式,扫描方式为多反应离子监测(MRM)。结果血浆中氨氯地平和缬沙坦的质量浓度分别在0.1～20.0μg·L~(-1)和2.0～5 000μg·L~(-1)内线性关系良好,提取回收率分别为89.1%～92.8%和95.5%～103.1%,方法的专属性、精密度和准确度均符合测定要求。结论该方法适用于缬沙坦氨氯地平单片复方制剂在人体内的药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中依那普利和依那普利拉的浓度

目的建立人血浆中依那普利和依那普利拉含量测定的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/M S)方法。方法血浆样品加入内标(贝那普利拉),以含0.1%甲酸的甲醇沉淀蛋白后,进行HPLC-M S/M S分析。色谱柱为Hedera ODS-2 C18(150 mm×2.1 mm,5μm),流动相为甲醇-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱,流速为0.4 m L/min,柱温为30℃,采用多反应监测(M RM)方式进行定量分析,用于监测的离子质荷比分别为m/z377.2→m/z 234.3(依那普利)、m/z 349.3→m/z 206.2(依那普利拉)和m/z 397.4→m/z 351.4(内标,贝那普利拉)。结果人血浆中依那普利和依那普利拉的线性范围分别为0.2~200 ng/m L(r=0.999 9)、0.5~120 ng/m L(r=0.999 3);批内、批间精密度均<11.3%。结论该方法快速、灵敏、专属性强,可用于人血浆中依那普利和依那普利拉浓度的测定。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀酸

目的 采用LC-MS/MS法同时测定人血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀酸.方法 采用BEH C18色谱柱(50 mm ×2.1mm,1.7 μm),流动相为乙腈-0.01 mol·L-1醋酸铵(72∶28),流速0.15 mL·min-1,柱温40℃,进样量8μL.辛伐他汀、辛伐他汀酸及内标洛伐他汀的检测离子对分别为:m/z 419.43→199.12、437.38→303.26、405.45→199.14.结果 辛伐他汀、辛伐他汀酸的线性范围分别为0.241 ～61.76 ng·mL-1(r =0.999)、0.344 ～ 88.16 ng·mL-1(r =0.997).在人血浆基质中,高、中、低浓度(0.482、3.86、30.88 ng· mL-1)的日内、日间RSD均小于15％,方法回收率分别为95％～104％、97％ ～108％.样品预处理方法对血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀酸测定无干扰.结论 所用方法处理简单、灵敏、特异性高,定量准确,可为辛伐他汀制剂的药动学研究提供方法.     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸的浓度

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸的浓度。方法:血浆样品用甲基叔丁基醚提取,离心后取上清液氮气吹干,流动相复溶后进行UPLC-MS/MS测定。色谱柱:BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相:乙腈-0.01 mol.L-1醋酸铵(72∶28);流速:0.15 mL.min-1;柱温:40℃,进样量:8μL。电喷雾离子化(ESI),正离子模式多重反应选择离子检测(MRM),辛伐他汀、辛伐他汀羟基酸及内标洛伐他汀的检测离子对分别为:m/z 419→199,437→303,405→199。结果:血浆样品中辛伐他汀、辛伐他汀羟基酸线性范围分别为0.241～61.76 ng.mL-1(r=0.999,n=5)和0.344～88.16 ng.mL-1(r=0.997,n=5),日内、日间精密度(RSD)均小于15%,方法的平均回收率分别为100.6%和106.0%,血浆基质对血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸测定无干扰。结论:建立的UPLC-MS/MS法处理简单、灵敏、特异性高,定量准确,为辛伐他汀制剂的临床药代动力学研究提供了简便、准确的分析测定方法。     

LC-MS/MS法测定人血浆中白藜芦醇的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中白藜芦醇浓度的方法。方法:血浆样品经四硼酸钠溶液碱化后,经甲基叔丁基醚提取处理。分析柱为RestekC1(82.1mm×150mm,5.0μm),保护柱为GminiC1(84mm×3.0mm,10.0μm),流动相为乙腈-水(85∶15,V/V,其中含0.2mmol·L-1乙酸铵),流速为0.3mL·min-1,进样量为5μL,内标为3,5-二羟基-4-异丙基二苯乙烯,使用电喷雾离子源,以负离子多重反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量白藜芦醇和内标的MRM扫描离子通道分别为m/z227.0→143.0、253.2→211.0。每个样品的分析时间为5min。结果:白藜芦醇和内标的保留时间分别为1.43、2.55min。血浆中内源性物质对测定无干扰,白藜芦醇检测浓度在0.1～50.0ng·mL-1范围内同其与峰面积之比呈良好线性关系(r=0.9969),定量下限为0.1ng·mL-1。日内、日间RSD均低于11.25%,方法回收率为(91.70±3.81)%～(99.00±3.29)%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于白藜芦醇的血药浓度测定。     

人血浆中辛伐他汀的HPLC-MS/MS测定

建立了HPLC-MS／MS法测定人血浆中辛伐他汀的浓度，并以24名健康志愿者进行了两种辛伐他汀片的生物等效性研究。采用C18柱，流动相为0．5％甲酸溶液和乙腈，梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子化，定量分析离子分别为m/z482．0-441．0（辛伐他汀）和m／z468．0→427．0（洛伐他汀，内标）。辛伐他汀在0．2-50ng／ml范围内线性关系良好。方差分析和双单侧t检验表明两制剂生物等效。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中氯吡格雷及其代谢物的浓度

目的:建立同时测定人血浆中氯吡格雷(CLO)及其活性代谢产物(CATM)、非活性代谢产物(CCAM)浓度的方法,并用于药动学研究。方法:取烷化剂2-溴-3′-甲氧基苯乙酮(MPB)保护的血浆样品,经乙腈沉淀蛋白后,以卡马西平为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3,流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速为0.50 ml/min。采用电喷雾电离源(ESI),多反应监测(MRM)方式进行正离子监测,用于定量分析的离子对分别为m/z 322.1→211.8(CLO)、m/z 504.1→155.0(CATM烷化衍生物,CATMD)、m/z 308.3→198.0(CCAM)、m/z 273.2→194.3(内标)。结果:CLO、CATMD、CCAM血药浓度分别在0.03~20.00、0.30~200.00、10.00~10 000.00 ng/ml范围内线性关系良好;日内、日间RSD<15%,相对误差(RE)为-3.5%~5.7。5名健康受试者单剂量口服CLO 300 mg后,CLO、CATM、CCAM的cmax分别为(7.89±5.46)、(15.58±8.08)、(8 023.33±1 047.39)ng/ml,tmax分别为(1.25±0.43)、(1.25±0.43)、(1.67±0.29)h,t1/2分别为(2.31±0.61)、(0.64±0.08)、(6.53±2.55)h,AUC0-t分别为(17.19±14.59)、(21.39±9.58)、(30 648.85±8 026.63)ng·h/ml。结论:该方法操作简便、灵敏度高、分析时间短,适用于CLO及其代谢物血药浓度测定及药动学研究。     

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中6种抗抑郁药的浓度

目的:建立HPLC-MS/MS同时测定人血浆中西酞普兰、米氮平、曲唑酮、氟伏沙明、氯米帕明、文拉法辛血药浓度的方法。方法:血浆经含内标(伏立康唑)乙腈沉淀蛋白后进样测定,采用Kinetex C18柱(50 mm×2.1 mm,2.6μm)进行色谱分离,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min……-1,柱温40℃,进样量2μL;采用电喷雾离子源,正离子模式,多反应监测进行测定。结果:西酞普兰和米氮平质量浓度范围为4~400 ng·mLmL-1(r>0.9986),曲唑酮、氟伏沙明、氯米帕明和文拉法辛质量浓度范围为10~1000 ng·mL-1(r>0.9984);所有分析物日内、日间精密度(n=6)RSD<11.52%,准确度RE在-3.89%~8.14%,符合生物样品分析要求。氯米帕明在高脂血基质及溶血基质中有明显基质效应,其余待测物无明显基质效应。结论:经方法学考察,该方法灵敏、简便、准确、快速,可用于6种抗抑郁药的临床血药浓度检测。     

UPLC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平浓度

目的:建立UPLC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平浓度并进行方法验证,应用于室间质评的样品测定。方法:采用UPLC-MS/MS法,以卡马西平-d8为内标,XSelect CSH C18柱(2.1 mm×75 mm,2.5μm)为分析柱,流动相A为含0.05%甲酸的水溶液,流动相B为含0.05%甲酸的乙腈溶液,流速为0.3 mL·min^-1,梯度洗脱;采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)正离子模式进行检测,用于定量分析的离子对为m/z 237.1→194.1(卡马西平)、m/z 245.0→202.1(卡马西平-d8)。结果:卡马西平在5~1000 ng·mL^-1范围内线性关系良好(r≥0.9993),批内批间精密度和准确度、回收率和基质效应以及稳定性均符合生物样品测定要求。应用该方法测定的室间质评样品结果全部通过。结论:该方法准确、灵敏、选择性好、重现性高,适用于血浆中卡马西平浓度测定及室间质评。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中黄芩苷和绿原酸

建立UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中黄芩苷和绿原酸的浓度，研究注射用银黄在健康人体的药代动力学。色谱柱为BEH C₁₈(50 mm×2.1 mm ID，1.7 μm)；流动相：A(水，0.1%甲酸)，B(甲醇，0.1%甲酸)，梯度洗脱；流速：0.35 mL·min^-1。电喷雾离子源，多反应监测。黄芩苷：［M+H］⁺，m/z 447→271；绿原酸：［M-H］^-，m/z 353→191；山柰素：［M+H］⁺，m/z 287→287。结果表明，黄芩苷和绿原酸血药浓度的线性范围分别为9.6～1 540和7.5～1 200 ng·mL^-1，日内、日间精密度均小于10.2%。志愿者静脉滴注注射用银黄后，黄芩苷和绿原酸的药时曲线分别符合二房室和三房室模型。该法简便、灵敏、特异，适用于血浆中黄芩苷和绿原酸浓度的测定。     

高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的方法。方法血浆样品中加入内标,用乙醚提取,浓缩后采用高效液相色谱-质谱联用进行测定。结果血浆样品中辛伐他汀线性范围为0.1～20ng·mL-1(r=0.9999);萃取回收率为94.3%。结论本方法灵敏度高、专属性强、重现性好、准确,可用于辛伐他汀片人体药动学及生物等效性研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆苯磺酸氨氯地平与阿托伐他汀钙浓度

［摘要］目的建立同时测定人血浆苯磺酸氨氯地平与阿托伐他汀钙的液相色谱 串联质谱（LC MS/MS）检测方法。方法以尼莫地平为内标,血浆样品采用甲基叔丁基醚提取,色谱柱为Agilent TC C18 柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈：5.0 mmol&#8226;L 1醋酸铵缓冲液（pH值=4.0）（25：75,V/V）;流速0.25 mL&#8226;min 1;苯磺酸氨氯地平、阿托伐他汀钙和内标尼莫地平分别选择m/z 409.1→238.0,559.2→440.2,419.1→343.1。结果苯磺酸氨氯地平与阿托伐他汀钙在0.05～20.00 μg&#8226;L 1范围内均线性关系良好,加样浓度分别为0.1, 2.0 ,18.0 μg&#8226;L 1时,样品提取回收率分别为76.78%,77.08%,76.27%与80.16%,79.69%,81.82%,日内和日间RSD均＜15%。结论该方法灵敏度高,操作简便、快速,适用于苯磺酸氨氯地平与阿托伐他汀钙临床药动学的研究。     

LC-MS/MS测定人血浆中的辛伐他汀

目的建立测定人血浆中辛伐他汀的方法。方法采用LC-MS/MS法,血浆样品中加入内标洛伐他汀,经乙腈沉淀蛋白后,以正离子多反应监测(MRM)方式测试,用于定量的离子为m/z441.2→325.2(辛伐他汀)和m/z427.2→325.2(洛伐他汀)。色谱柱为Restek Allure C18(50 mm×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液(70:30)。结果血浆中辛伐他汀的线性范围为0.1-50.0 ng.ml-1,定量限为0.1 ng.ml-1,方法回收率为98%~102%,日内RSD<3.6%,日间RSD<5.6%。结论所建方法专属性好、灵敏度高,符合血浆样品测定的要求,适用于辛伐他汀的临床药物动力学研究。     

高效液相-串联质谱联用法测定人血浆中阿昔洛韦的浓度

目的：建立高效液相-串联质谱联用（LC-MS／MS）法测定人血浆中阿昔洛韦的浓度。方法：采用Waters公司SYMMETRY^TM C18（3．9mm×150mm,5gm）谱柱;流动相为甲醇－水（15：85）;流速为0．6mL／min。串联质谱条件：采用多反应离子监测（MRM）检测,每个样品分析时间为2min。结果：阿昔洛韦在20．0～1000．0ng／mL浓度范围内有良好的线性关系;最低检测浓度为20．0ng／mL;日内、目间RSD均〈15％;准确度RE均在±15％范围内。结论：本法简单、快速、灵敏、准确,可用于人血浆中阿昔洛韦浓度的检测。     

LC-MS/MS测定人血浆中的辛伐他汀

目的 建立测定人血浆中辛伐他汀的LC-MS/MS方法.方法 血浆样品经乙酸乙酯提取后,以乙腈-水(含0.1%乙酸和2.5 mmol·L-1甲酸胺)(90:10)为流动相,通过Agilent1100 VL型离子阱质谱仪,电喷雾离子源正离子模式,采用多反应离子监测方式测定辛伐他汀的浓度(MRM,m/z 441→325).结果 血浆中辛伐他汀的线性范围为0.5～10.0 ng·ml-1.定量下限为0.5 ng·ml-1.平均回收率85%～115%,日内、日间精密度在±15%之内.结论 所用方法高效、准确,特异性强,可用于辛伐他汀的药物动力学研究.     

LC-MS/MS法测定人血浆中拉莫三嗪浓度的不确定度评定

摘 要 目的：评定液质联用法(LC MS/MS)测定人血浆中拉莫三嗪(LTG)浓度的不确定度。方法: 分析LC-MS/MS法测定人血浆中LTG浓度过程中的不确定度来源,计算其大小并进行合成。结果: 人血浆中LTG低浓度(0.050 4 μg· mL^-1)和高浓度(1.27 μg· mL^-1)的扩展不确定度分别为0.005 18 μg· mL^-1和0.066 4 μg· mL^-1 (P = 95%,k = 2)。结论:LC-MS/MS法测定人血浆中LTG浓度的不确定度在低浓度时主要由蛋白沉淀回收率、基质效应和生物样品配制引入,在高浓度时主要由基质效应、生物样品配制和重复性引入。     

LC-MS/MS法测定人血浆中沙丙蝶呤的浓度

目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中沙丙蝶呤的浓度.方法:经抗氧化剂(抗坏血酸,VC)预处理过的血浆样品,通过甲醇蛋白沉淀等一系列操作后进行LC-MS/MS分析.以沙丙蝶呤-13C 15N3为内标,使用的色谱柱为Kinetex?EVO C18100?(4.6 mm×100 mm,5μm),流动相为含0.1％1 mo...     

LC-MS/MS法测定人血浆中替米沙坦的浓度及其人体生物等效性研究

目的:建立以高效液相色谱串联质谱电喷雾(LC-MS/MS)法测定人血浆中替米沙坦浓度的方法,并考察2种替米沙坦片的生物等效性。方法:人血浆样本以乙腈沉淀蛋白后,选用Zorbax SB-C_(18) Narrow Bore色谱柱,以甲醇-10mmol.L~(-1)乙酸铵(含0.5%甲酸)(80∶20)为流动相,流速为0.4mL.min~(-1);选用API3200型三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,电喷雾离子化源,正离子方式,选择监测离子反应分别为m/z515.2→276.2(替米沙坦)和m/z748.5→m/z158.2(克拉霉素,内标)。结果:替米沙坦和克拉霉素的保留时间分别为1.51、1.25min。替米沙坦血药浓度在1.00～1500ng·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=0.9985),定量下限为1.00ng·mL~(-1);日内、日间RSD均≤6%,相对偏差(RE)均在±7%的范围以内;平均提取回收率为(93.0±3.9)%。替米沙坦片受试制剂与参比制剂平均药动学参数分别为:t_(1/2)(25.5±12.5)、(26.5±11.8)h,t_(max)(1.50±0.78)、(1.59±1.16)h,c_(max)(358±212)、(389±298)ng·mL~(-1),AUC_(0～96h)(2383±1146)、(2411±1192)ng.h.mL~(-1)。替米沙坦片受试制剂的平均生物利用度为(101.3±22.6)%。结论:该方法高效、灵敏、专属性强;2种替米沙坦片等效。     

LC-MS/MS同时测定人血浆中6种抗真菌药物浓度

目的 建立LC-MS/MS方法同时测定人血浆中氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、羟基伊曲康唑、卡泊芬净6种抗真菌药物的浓度。方法 向50 μL血浆样本中加入含同位素内标的甲醇沉淀蛋白后稀释进样分析。色谱柱为Kinetex C₁₈（3 mm×100 mm,2.6 μm）,流动相为0.1%甲酸-水（含5 mmol·L^-1乙酸铵）和0.1%甲酸-甲醇,梯度洗脱,流速为0.6 mL·min^-1,进样量为5 μL,分析时间为5 min。采用电喷雾离子源,正离子多反应监测模式扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 307.0→220.2（氟康唑）、m/z 350.1→224.1（伏立康唑）、m/z 701.4→683.2（泊沙康唑）、m/z 705.2→392.2（伊曲康唑）、m/z 721.5→408.3（羟基伊曲康唑）、m/z 547.4→131.1（卡泊芬净）。结果 6种抗真菌药物在0.1~20 μg·mL^-1内线性良好（r≥0.995 0）,准确度为90.35%~114.94%,仪器精密度RSD均<15%（定量下限处<20%）。提取回收率和基质效应分别为71.99%~90.38%和96.78%~134.17%。稳定性符合生物样本分析方法验证要求。应用本方法测定25例侵袭性真菌感染患者的血浆谷浓度,其中伏立康唑谷浓度0.70~12.94μg·mL^-1,氟康唑4.57~12.64 μg·mL^-1,个体间差异较大。结论 本方法操作简单快捷,准确度和灵敏度高,重现性良好,适用于临床治疗药物监测。     

人血浆卡马西平浓度测定的LC-MS/MS方法开发、验证及在室间质评中的应用

摘 要 目的：建立并验证人血浆中卡马西平（CBZ）浓度测定的液质联用方法,并应用于室间质评样品的测定。方法: 使用含0.1%甲酸溶液和乙腈进行梯度洗脱,色谱柱：Kromasil C₁₈柱（50 mm×2.1 mm,5 μm）,流速：0.6 ml·min^-1,进样量：1 μl,柱温：40 ℃。在ESI⁺电离模式下,CBZ和内标噻氯匹定（IS）的监测离子对分别为m/z237.1>194.0和m/z264.1>125.0。结果: 卡马西平在5~1 000 ng·ml^-1范围内线性良好。低、中和高浓度的基质效应范围为93.23%~96.30%,回收率范围为101.27%~105.00%。结论:建立的测定CBZ血浆浓度的液质联用方法灵敏、准确、稳定,可用于CBZ的室间质评及药动学研究。