白鲜皮不同极性部位的抗氧化活性及对酪氨酸酶活性的影响

目的:研究白鲜皮不同极性部位的抗氧化活性及对酪氨酸酶活性的影响。方法:白鲜皮通过95%乙醇提取得醇提物,用水溶解后分别用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取,得到不同极性部位。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法考察其抗氧化活性[以半数抑制浓度(IC_(50))表示],酪氨酸酶法考察不同极性部位活性。结果:白鲜皮石油醚、三氯甲烷和乙酸乙酯部位清除DPPH自由基的IC_(50)分别为0.875、0.824、0.407 mg/mL。当各极性部位质量浓度分别为25.0、50.0、100、200、300、400、500μg/mL时,石油醚部位对酪氨酸酶的抑制率依次为-3.18%、-4.98%、0.160%、0.044%、2.31%、3.89%、4.29%,三氯甲烷部位对酪氨酸酶的抑制率依次为-33.39%、-31.48%、-10.14%、-5.42%、-9.70%、-4.06%、-0.42%,乙酸乙酯部位对酪氨酸酶的抑制率依次为-17.63%、-17.89%、-18.42%、-21.84%、-20.26%、-22.13%、-32.36%。结论:白鲜皮乙酸乙酯部位清除DPPH自由基的能力明显强于其他两个萃取部位,且与浓度呈正相关;乙酸乙酯、三氯甲烷部位对酪氨酸酶有激活作用,三氯甲烷部位对酪氨酸酶的激活作用与浓度呈负相关;石油醚部位对酪氨酸酶的活性具有双向调节作用。     

棉酚类似物的合成研究

在寻找高效低毒副作用的男性生育调节剂的过程中,经过重排、缩合和甲酰化等九步反应合成了棉酚类似物(Ⅲ)。其中棉酚(Ⅰ)中的有效基团如羟基和醛基等保持不变,而一些非必须基团或其结构被简化,或位置被改变。另外,由于甲酰化反应未能发生在萘环的8-位,所以未能获得另一棉酚类似物(Ⅱ)。化合物(Ⅲ)除了将进行杀精效果试验外还进行了抗肿瘤效果试验(见Tab.1)。     

四种含药血清对小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成及酪氨酸酶活性的影响

目的研究传统医学文献中专治白癜风的常用药物诃子、余甘子、柴胡及药群组合(含木香、胡椒、干姜等)的药物血清对小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成及酪氨酸酶活性的影响。方法采用"通法"制备上述药物高、低不同剂量的大鼠含药血清及不含药物的空白血清,以体外培养的小鼠B16黑素瘤细胞为模型,采用MTT法测定各组受试血清对B16细胞增殖活性的影响;NaOH细胞裂解法测定黑素合成量,L-DOPA氧化法测定对酪氨酸酶活性的影响。结果与正常对照组(含10%小牛血清)相比,除组合低剂量组外,其他受试血清均不影响小鼠B16细胞的增殖活性(P>0.05);与空白血清组相比,柴胡和药群组的高、低剂量组含药血清均对B16黑素瘤细胞黑素合成有促进作用(P<0.05,P<0.01),而诃子低剂量、牛柑子高剂量组含药血清具有促进黑素合成的作用(P<0.05,P<0.01);与空白血清组相比,四种受试药物的高低剂量组含药血清对小鼠B16细胞酪氨酸酶活性均有激活作用(P<0.05,P<0.01)。结论四种受试药物含药血清除组合低剂量组外,均在不影响小鼠B16细胞增殖活性的基础上,表现出不同程度的促进其黑素合成的作用,此作用与提高酪氨酸酶活性有一定关系。     

甲氧滴滴涕及其代谢产物2,2-二(4-羟基苯基)-1,1,1-三氯乙烷在大鼠体内的毒代动力学

目的探讨甲氧滴滴涕(MXC)及其代谢产物2,2-二(4-羟基苯基)-1,1,1-三氯乙烷(HPTE)在大鼠体内的毒代动力学。方法雄性SD大鼠单次ig给予MXC 500 mg.kg-1染毒后,于不同时间点收集血液样本。应用高效液相色谱-紫外法测定大鼠血浆中MXC和HPTE的含量,用DAS 2.0软件的房室模型进行拟合,计算代谢动力学参数。结果 MXC的毒代动力学参数血浆最大浓度(cmax)为(5.52±1.21)mg.L-1;分布半衰期(t1/2α)为(4.12±1.21)h;消除半衰期(t1/2β)为(22.54±6.31)h;曲线下面积〔AUC(0-t)〕为(65.97±17.94)mg.h.L-1;AUC(0-∞)为(69.06±18.61)mg.h.L-1;清除率(Cl)为(7.94±2.31)L.h-1.kg-1;和表观分布容积(V)为(66.16±20.21)L.kg-1。代谢产物HPTE的毒代动力学参数cmax为(1.32±0.37)mg.L-1,t1/2α为(3.13±0.91)h;t1/2β为(31.12±10.91)h,AUC(0-t)为(14.69±2.99)mg.h.L-1,AUC(0-∞)为(17.23±3.66)mg.h.L-1,Cl为(30.14±6.09)L.h-1.kg-1,V为(232.55±36.44)L.kg-1。结论 MXC及其代谢产物HPTE的毒代动力学均符合二室模型。MXC和HPTE的清除半衰期均较长,易发生体内蓄积。     

6′-羟基爵床定A对肿瘤细胞的抑制活性及其对肿瘤细胞氧化还原系统的影响

目的筛选对6′-羟基爵床定A(JR6)敏感的肿瘤细胞株并探讨其对细胞氧化还原功能的影响。方法将人膀胱癌细胞株EJ、肝癌细胞Bel、肺癌细胞A549、结肠癌细胞HCT-8和HT-29、胃癌细胞BGC、大肠癌细胞LS180、宫颈癌细胞HeLa、肝癌细胞HepG2以及乳腺癌细胞MCF-7分为正常对照组、阳性药对照顺铂、多柔比星、替尼泊苷、依托泊苷和5-氟尿嘧啶组及JR6组,细胞加入相应的药物培养48h后,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞存活率并计算IC50值。选用对JR6与多柔比星作用敏感的人膀胱癌细胞EJ,加入相应的药物培养48h后,分别检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量。EJ细胞分为外源性SOD+多柔比星9.19μmol.L-1组和外源性SOD+JR63.02,9.07,27.2,81.7和245μmol.L-1处理组,其中SOD分别为0,1.9,5.6,16.7,50和150kU.L-1,MTT法检测细胞存活率。多柔比星9.19μmo.lL-1,JR612.3,49.0和196μmo.lL-1加入EJ细胞,24h后用激光共聚焦显微镜检测EJ细胞内活性氧类的含量。结果 EJ细胞对JR6较为敏感,IC50为57.1μmol.L-1,多柔比星对EJ细胞的IC50为4.08μmol.L-1。其余9种肿瘤细胞对JR6的IC50值为71.3～123μmol.L-1。与正常对照组比较,多柔比星9.19μmo.lL-1能明显降低EJ细胞内SOD,GSH-Px和CAT活性,分别降低了(64.3±2.1)%,(66.5±3.5)%和(49.6±1.9)%,而MDA的含量明显升高了(432.0±5.4)%(P<0.01);JR63.02,9.07,27.2,81.7和245μmo.lL-1使EJ细胞内SOD的活性分别降低了(7.28±0.3)%,(57.1±3.2)%,(66.5±4.7)%,(72.1±5.5)%和(77.8±2.4)%;GSH-Px活性分别降低了(20.3±1.6)%,(32.8±2.3)%,(45.3±3.6)%,(59.3±4.5)%和(71.9±4.2)%,CAT活性分别降低了(10.1±0.6)%,(15.9±0.7)%,(25.9±2.3)%,(38.8±3.5)%和(52.4±3.9)%;同时MDA含量分别升高了(24.4±1.3)%,(90.2±8.70)%,(217.0±19.0)%,(356.0±24.0)%和(539.0±32.0)%(P<0.05,P<0.01)。与无外源性SOD组比较,在外源性SOD存在时,多柔比星与JR6对EJ细胞的生长抑制率明显下降(P<0.05)。与正常对照组相比,多柔比星9.19μmol.L-1使EJ细胞活性氧类水平升高了(43.0±2.1)%,JR612.3,49.0和196μmol.L-1使EJ细胞ROS水平分别升高了(40.7±0.7)%,(84.1±6.3)%和(151.0±2.9)%(P<0.01)。结论人膀胱癌细胞株EJ对JR6最敏感;JR6通过干预细胞内氧化还原系统平衡抑制细胞的增殖,外源性SOD可以拮抗JR6对敏感细胞增殖的抑制作用。     

含3-羟基-4-吡啶酮片段的EGFR酪氨酸激酶抑制剂的合成及抗肿瘤活性研究

目的设计合成含具备铁离子螯合功能的3-羟基-4-吡啶酮片段的4-芳胺基喹唑啉类衍生物,并评价其体外抑制肿瘤增殖活性。方法 4-芳胺基-6-硝基-7-氟喹唑啉与3-苄氧基吡啶-4-酮脂肪醇发生取代反应,再经过硝基还原得到4-芳胺基-6-氨基-7-(3-苄氧基-4-吡啶酮)烷氧基喹唑啉中间体,该中间体与各种酰氯或者酸缩合后再脱去苄基得到目标化合物1~6;4-芳胺基-6-氨基-7-烷氧基喹唑啉与3-苄氧基吡啶-4-酮-1-乙酸经缩合后脱苄基得到目标化合物7~12。采用MTT法,以吉非替尼(gefitinib)为阳性对照药,测定目标化合物对人表皮癌细胞系A431、人肺腺癌细胞系H1975和人宫颈癌细胞系HeLa的增殖抑制活性。结果与结论合成了12个未见文献报道的新化合物,其结构经~1H-NM R、MS谱确证;初步体外生物活性筛选结果显示,该类化合物具有较好的抗肿瘤细胞增殖活性,其中化合物1~4、7~10在人表皮癌A431细胞株上的抗增殖活性与阳性对照吉非替尼相当。     

Δ5-3β,7β-二羟基甾醇和Δ5-3β,7α-二羟基甾醇的立体选择合成及其对胆碱酯酶的抑制活性

目的研究不同支链结构的Δ5-3β,7β-二羟基甾醇和Δ5-3β,7α-二羟基甾醇对胆碱酯酶的抑制活性.方法以3个不同支链结构的Δ5-3β-羟基甾醇为起始物,先乙酰化保护3β-羟基,再烯丙位氧化引入7-羰基,该羰基分别用NaBH4-CeCl3和L-selectride还原成不同取向的羟基,最后水解除去保护基得到6个不同支链结构的Δ5-3β,7β-二羟基甾醇和Δ5-3β,7α-二羟基甾醇,进而对目标化合物进行乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性实验.结果合成的6个化合物对乙酰胆碱酯酶无明显的抑制活性(IC50>100 μmol·L-1),对丁酰胆碱酯酶则有较强的抑制活性(IC50< 32 μmol·L-1),其中24-亚甲基胆甾-5-烯-3β,7α-二醇的抑制活性最强(IC50=9.5 μmol·L-1).结论 7位羟基的取向和不同的支链结构对化合物1～6发挥丁酰胆碱酯酶体外抑制活性有一定的影响.     

炮制对手参中3种活性成分含量的影响

目的通过考察炮制工艺参数对手参制品中3种活性成分含量的影响,为手参炮制工艺优化提供依据。方法采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-质量分数为0.1%的磷酸溶液,流速为1.0 m L·min-1进行梯度洗脱,检测波长为220 nm,柱温为25℃。结果炮制温度和时间均对手参制品中的3种活性成分含量有较大影响,随着炮制温度的升高和炒制时间的延长,天麻素、loroglossin、militarine 3种成分的含量呈现明显曲线变化。结论手参奶制的干燥工艺以140℃条件下炒制6 min为宜。     

1,25-二羟基维生素D_3对环磷酰胺处理的NOD小鼠糖尿病的影响

目的　探讨 1,2 5 -二羟基维生素 D3 对环磷酰胺促发的 NOD鼠 1型糖尿病的预防作用。方法　N OD鼠从离乳后隔日接受 1,2 5 -二羟基维生素 D3 治疗 ,第 10周龄给予环磷酰胺 30 0 m g/ kg,观察 1,2 5 -二羟基维生素 D3 对环磷酰胺处理的 NOD鼠糖尿病发病率和胰岛炎的影响 ,及对 Th1、Th2细胞因子 m RNA表达的影响。结果　 1,2 5 -二羟基维生素 D3 处理组糖尿病发病率为 17% ,明显低于对照组 6 7% (P<0 .0 5 ) ,且胰岛炎严重程度也明显减轻。处理组胰腺 TNT- α、IFN- γ m RNA的表达较对照组明显降低 ,而 IL- 10 m RNA的表达无明显改变。结论　 1,2 5 -二羟基维生素 D3 可以预防 NOD鼠环磷酰胺诱发的糖尿病的发生 ,其机制可能与纠正 Th1型细胞因子与 Th2型细胞因子比例失衡有关     

辐状肋柱花2种主要活性成分在大鼠血浆中的药代动力学研究

目的 探究大鼠灌胃辐状肋柱花后体内当药黄素和1,3,5,8-四羟基-5,6,7,8-4H-口山酮的药代动力学(PK)特征。方法 将SD大鼠随机分为高、中、低剂量组,分别灌胃0.60、0.30和0.15 g·kg^-1的辐状肋柱花L-50浸膏粉的蒸馏水溶混悬液,于给药后不同时间点眼底静脉丛取血,用高效液相质谱联用(LC-MS/MS)测定大鼠血浆中当药黄素和1,3,5,8-四羟基-5,6,7,8-4H-口山酮的血药浓度,计算PK参数。结果 低、中、高剂量组中当药黄素的主要PK参数：C_max分别为(57.31±4.12)、(134.81±25.73)和(183.43±28.38)ng·mL^-1;AUC_0-t分别为(209.12±15.07)、(3 051.51±232.73)和(2 544.67±341.10)μg·L^-1·h;t_1/2 分别为(1.42±0.11)、(11.57±1.52)和(12.96±4.63)h。中、高剂量组与低剂量组比较,AUC_...     

Stimulation of Erythrocyte Cell Membrane Scrambling by Mushroom Tyrosinase

Background: Mushroom tyrosinase, a copper containing enzyme, modifies growth and survival of tumor cells. Mushroom tyrosinase may foster apoptosis, an effect in part due to interference with mitochondrial function. Erythrocytes lack mitochondria but are able to undergo apoptosis-like suicidal cell death or eryptosis, which is characterized by cell shrinkage and cell membrane scrambling leading to phosphatidylserine-exposure at the erythrocyte surface. Signaling involved in the triggering of eryptosis include increase of cytosolic Ca²⁺-activity ([Ca²⁺]_i) and activation of sphingomyelinase with subsequent formation of ceramide. The present study explored, whether tyrosinase stimulates eryptosis. Methods: Cell volume has been estimated from forward scatter, phosphatidylserine-exposure from annexin V binding, [Ca²⁺]_i from Fluo3-fluorescence, and ceramide abundance from binding of fluorescent antibodies in flow cytometry. Results: A 24 h exposure to mushroom tyrosinase (7 U/mL) was followed by a significant increase of [Ca²⁺]_i, a significant increase of ceramide abundance, and a significant increase of annexin-V-binding. The annexin-V-binding following tyrosinase treatment was significantly blunted but not abrogated in the nominal absence of extracellular Ca²⁺. Tyrosinase did not significantly modify forward scatter. Conclusions: Tyrosinase triggers cell membrane scrambling, an effect, at least partially, due to entry of extracellular Ca²⁺ and ceramide formation.     

姜黄素酚羟基衍生物的合成

目的:对姜黄素酚羟基进行结构修饰,以期得到优于其先导化合物的衍生物。方法:首先在以阿司匹林为起始原料,以吡啶为催化剂条件下与氯化亚砜反应合成乙酰水杨酰氯;再以所得的乙酰水杨酰氯为原料,对姜黄素进行结构修饰,合成得预期的姜黄素酚羟基衍生物。通过反复试验优化工艺条件,并通过高效液相色谱、核磁共振谱进行结构确认。结果:合成了新的姜黄素酚羟基衍生物,经过高效液相色谱、核磁共振谱的结构确定,其最佳的反应溶剂为二氯甲烷,最佳催化剂为吡啶,最适宜的反应温度为35℃,最佳反应时间为3 h,最佳展开剂为石油醚-乙酸乙酯(3∶2,V/V)。结论:该试验可为进一步对姜黄素的结构修饰奠定基础。     

HPLC Analysis of Phenolic Compounds in Field Violet

HPLC analyses revealed 40 compounds of phenolic nature in field violet (Viola arvensis L.), which belong for the most part to the classes of flavonoids, coumarins, and phenolcarboxylic acid derivatives. Eleven compounds (luteolin, apigenin, quercetin, hyperoside, hesperidin, isoferulic acid, ferulic acid, ellagic acid, dicoumarin, catechol, and arbutin) have been identified in this plant for the first time.__________Translated from Khimiko-Farmatsevticheskii Zhurnal, Vol. 39, No. 3, pp. 31 – 32, March, 2005.     

HPLC Analysis of Phenolic Compounds in Yellow Sweet-Clover

Pharmaceutical Chemistry Journal -     

Metabolic Activation of N-Hydroxy Compounds by Conjugation

Abstract

1. Conjugation of N-hydroxy-N-arylacetamides results in the metabolic activation of this class of compounds.

2. This paper reviews current knowledge of these reactions with emphasis on the involvement of conjugates of N-hydroxy compounds in the mechanism of action of carcinogenic N-arylacetamides.

3. The glucuronide and sulphate conjugates of the carcinogen N-hydroxy-2-acetylaminofluorene react in vitro with protein, RNA and DNA, leading to the covalent attachment of 2-acetylaminofluorene and 2-aminofluorene residues to these macromolecules.

4. The most reactive groups in proteins and nucleic acids are methionine, cysteine, tryptophan, tyrosine and guanine or deoxyguanine.

5. There are major differences in the reactions of the glucuronide and the sulphate conjugates of N-hydroxy-N-arylacetamides with tissue nucleophiles, mainly in the rate of reaction and in the kind of products formed.

6. The structure of the aryl group in a conjugate of an N-hydroxy-N-arylacetamide also has a marked effect on the nature and extent of reactivity, with the fluorenyl derivatives generally being most reactive.     

新型铂类抗癌配合物斑蝥酸铂的水合动力学研究

用电导法研究了 3种新型铂类抗癌配合物斑蝥酸铂〔A2 Pt(C8H8O5) :A =NH3,(CH3) 2 CH2 NH2 ,CH3NH2 〕的水合动力学 ,结果表明 ,斑蝥酸铂配合物在水溶液中会发生水合反应 ,该反应近似符合一级反应速率方程 .它们的水合动力学常数分别为 :1 42× 10 -5,5 34× 10 -6,7 11× 10 -6min-1.     

HPCE同时测定蒲公英3种有机酸的含量

目的建立蒲公英中主要有效成分咖啡酸、绿原酸和阿魏酸的高效毛细管电泳含量测定方法。方法电泳条件：未涂层的弹性石英毛细管柱（75μm×57 cm）,电解质为20 mmol.L-1硼砂溶液（pH 9.55）,分离电压18 kV,柱温25℃,压力进样5 s,检测波长325 nm。结果咖啡酸、绿原酸、阿魏酸分别在0.010 2～0.081 8 mg.mL-1,0.008 1～0.065 0 mg.mL-1,0.000 6～0.004 5 mg.mL-1内呈良好线性关系,平均回收率分别98.8%,98.9%,97.8%,RSD分别为1.12%,1.21%,1.46%。结论本法专属性强,简便快速,准确度高,重复性好,适用于检测蒲公英中咖啡酸、绿原酸和阿魏酸的含量。     

Activity of the Phenolic Compounds of Plant Extracts in Reactions with Diphenylpicrylhydrazyl

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