外周血细胞DNA、RNA及血红蛋白同时提取法

采用淋巴细胞分离液分离外周血中的有核细胞。经细胞裂解液处理，上清提取RNA，沉淀提取DNA，用分离液分离所得红细胞沉淀制备血红蛋白溶液，经对抽提物质量进行评价，发现3种提取物质量均高，本法能从少量外周血中同时分离DNA、RNA及血红蛋白，高效易操作，值得推广。     

外周血细胞DNA、RNA及血红蛋白同时提取法

采用淋巴细胞分离液分离外周血中的有核细胞,经细胞裂解液处理,上清提取RNA,沉淀提取DNA,用分离液分离所得红细胞沉淀制备血红蛋白溶液。经对抽提物质量进行评价,发现3种提取物质量均高。本法能从少量外周血中同时分离DNA、RNA及血红蛋白,高效易操作,值得推广。     

从培养细胞中快速提取总RNA的简便方法

在分子生物学实验中 ,RNA提取常常是令研究人员尤其是初学者头疼的项目 ,因为 RNA酶在自然环境中广泛存在 ,且不易失活 ,所以 ,很难方便地提取纯度和完整性均满足分子生物学实验需要的 RNA分子。尽管目前已有异硫氰酸胍 - Cs Cl超速离心法 [1 ]、TRIzol试剂法 [2 ]等各种各样提取RNA的方法 ,但是 ,这些方法中有些方法步骤繁琐 ,耗时长 ,有些方法所需试剂昂贵 ,消耗大。笔者在实验中使用肝素作为 RNase抑制剂 ,结合 L i Cl特异沉淀 RNA,摸索一种新的从培养细胞中提取总 RNA的快速简便方法。1　材料与方法1.1　试剂1.1.1　 TEL　 …     

简便快速提取心肌组织总RNA

利用高浓度尿素变性蛋白质抑制RNA酶，氯化锂（LiC1)选择性沉淀RNA，酚／氯仿抽提除去变性的蛋白质，脂类及DNA。结果表明：该法适合大量样品少量组织细胞的RNA提取。     

提取致病丝状真菌的DNA的简便方法

目的找到一种合适简便的致病丝状真菌的DNA提取方法。方法用3种DNA提取方法分别提取2种致病的丝状真菌的DNA，比较提取的DNA的产物质量和纯度，找出简便合适的方法。结果改进的氯化苄法提取的2种真菌的DNA的质量在3种方法中都是最高的，分别达到2．925mg／mL和2．763mg／mL，改进的氯化苄法提取的DNA没有降解，质量和产量较高，纯度也是较好的。提取产物可适用于各种分子生物学实验。结论改进的氯化苄法是一种适用于致病丝状真菌DNA提取的简便方法。     

一种快速,简便的提取细菌DNA的方法

细菌分子遗传学研究都涉及到细菌染色体DNA的提取与纯化。过去常采用的方法是Marmur和Brenner的方法。近年来则为苯酚-氯仿方法来纯化细菌DNA。本文介绍一种使用阳离子去垢剂:溴代十六烷基三甲胺cetyl-trimethyl ammonium bromide, CTAB)纯化细菌DNA的方法。其优点是快速、简便且安全。通过此法纯化的DNA可很容易地被限制性内切酶酶解。 1 材料与方法 1.1 菌株:埃尔托生物型霍乱弧菌为1984年地方流行株,由蚌埠巾防疫站赠给。副溶血弧菌由上海市食品卫生监督检验所夏     

一种较好的RNA分离制备方法及其在人胚RNA提取中的应用

以钒基核苷酸复合物为核酸酶抑制剂,从人胚组织中制备总RNA,所得产品几乎不含DNA和蛋白质,经过分离Poly(A)~ mRNA,证明制品有合成cDNA的完整功能,方法比较简捷,适于大量制备以满足分离mRNA 之需,并讨论了此法的优缺点。     

慢性氟中毒大鼠所生仔鼠大脑DNA、RNA含量的研究

为了解慢性氟中毒大鼠所生仔鼠大脑核酸含量的变化,选择慢性氟中毒母鼠所生仔鼠56只,与正常母鼠所生仔鼠36只对照,两组仔鼠于新生和生后28天分两批处死后进行检查。结果表明:实验组新生及28天龄仔鼠大脑组织氟含量增多,重量减轻,大脑内 DNA 及 RNA 含量均降低。     

用改良的盐洗法与酚-氯仿法提取基因组DNA效果比较

目的:探索更为安全可靠的基因组DNA提取方法.方法:采用改良盐洗法提取人外周血白细胞基因组DNA,与传统的酚-氯仿抽提法在提取效果、DNA纯度等方面加以比较.结果:通过对15份不同静脉血标本与酚-氯仿抽提法同步对比研究显示:改良盐洗法提取模板DNA无污染、无害,所提DNA质量好、纯度高,达到酚-氯仿抽提法所获DNA的水平;操作简单、快速,方法稳定可靠,无一例失败.结论:该方法提取的DNA可用于实验以及临床上DNA分型等研究.     

DNA引物酶的提取分离与引物合成活性的研究

以小鼠艾氏腹水癌细胞经超声破碎的提取液为材料，依次用ＤＥ５２和Ｐ１１层析柱进行离子线性洗脱，分别在ＫＣｌ浓度为０．１７～０．２ｍｏｌ／Ｌ和０．２５～０．２７ｍｏｌ／Ｌ处ＤＮＡ引物酶被洗脱下来。用大肠杆菌大片段ＤＮＡ多聚酶Ⅰ延长引物法检测ＤＮＡ引物酶比活性为８７５３Ｕ／ｍｇ，酶总获得为２２．１％。放射自显影法检测引物合成活性显示引物酶合成了不同长度的引物     

一种简便快速的DNA序列分析法

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）进行了ＤＮＡ序列分析。该分析法在进行ＰＣＲ产物和ＧＣ含量较高的ＤＮＡ模板测序时，能防止模板的ＤＮＡ片段迅速复性，消除ＰＣＲ产物中剩余的扩增引物和脱氧核苷酸（ｄＮＴＰ）的影响，促使ＴａｑＤＮＡ聚合酶有效地通过模板中ＧＣ富含区和二级结构区域。本法系一简便、快速、准确的ＤＮＡ序列分析法。     

酪氨酸蛋白激酶研究中磷酰酪氨酸的快速分离与鉴定

酪氨酸蛋白激酶是与生长调控有关的重要酶类。分离磷酰酪氨酸与其它磷酰氨基酸(磷酰丝氨酸、磷酰苏氨酸)是测定酪氨酸蛋白激酶的关键之一。本研究用醋酸纤维素薄膜电泳法与放射自显影法相结合以快速分离、并鉴定磷酰酪氨酸,获得了理想的效果。     

葡萄胎DNA和RNA含量与恶变的关系

①目的　探讨葡萄胎DNA和RNA含量与恶变的关系 ,寻求一种预测葡萄胎恶变的方法。②方法采用图像分析技术测定 10 0例葡萄胎标本的DNA ,RNA含量 ,同时选择恶性葡萄胎及绒毛膜癌标本 2 0例作对照。③结果　恶性对照组DNA ,RNA含量明显高于葡萄胎组 (t’ =4.6 8,t=8.39,P <0 .0 1) ,完全性与部分性葡萄胎之间DNA ,RNA含量差异有极显著性 (t’ =3.0 8,4.48,P <0 .0 1) ,完全性葡萄胎中恶变组DNA ,RNA含量明显高于非恶变组 (t’ =4.77,5 .0 6 ,P <0 .0 1)。④结论　应用图像分析技术检测葡萄胎组织的DNA ,RNA含量 ,可以预测葡萄胎是否发生恶变。     

环孢霉素A对游离肝细胞核酸及蛋白质合成的影响

用ＳＤ大鼠肝细胞原代培养研究了环孢霉素Ａ对肝细胞蛋白质及核酸合成的影响，不同浓度的环孢霉素Ａ加入培养液、培养４ｈ后加＾３Ｈ－ＴｄＲ，＾３Ｈ－Ｕｒｄ，＾３Ｈ－Ｌｅｕ入培养继续培养１２，２４及３６ｈ，测肝细胞放射性强度，发现环孢霉素Ａ可抑制ＲＮＡＲＮＡ，蛋白质合成，对ＤＮＡ无明显影响。     

冷酚法提取RNA及质量鉴定

用改良的冷酚法从大鼠心房中提取总RNA,经紫外分光光谱、变性琼脂糖凝胶电泳及分子杂交放射自显影检测表明,RNA制备物纯度高、未降解。此方法简便不需特殊试剂和设备。     

吐温80对RNA聚合酶及DNA的作用

吐温80是药物常用的助溶剂。我们用体外试验证实0.5％(w/v)吐温80对大肠杆菌RNA聚合酶有一定抑制作用。吐温80溶液加热时,也存在与DNA类似的热变性融解曲线。吐温80的融点(Tm)为94.3℃,加入DNA缓冲溶液后融点下降1℃。吐温80溶液加入DNA后可以产生较强的荧光。