香加皮羽扇豆烷乙酸酯对人外周血淋巴细胞免疫调节功能的影响

目的 研究香加皮中提取的羽扇豆烷乙酸酯(CPLA)对正常人外周血淋巴细胞和吞噬细胞免疫调节功能的影响.方法 无菌分离人外周血淋巴细胞和巨噬细胞,加入PHA和不同质量浓度的CPLA,MTT法检测其对淋巴细胞增殖及巨噬细.胞对食管癌细胞株ECA-109生长的影响;RT-PCR法检测CPLA对γ-干扰素(INF-γ)mRNA表达的影响;ELISA法检测CPLA作用后淋巴细胞和巨噬细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)等细胞因子分泌的变化.结果 5～40μg/mL CPLA能明显增强PHA活化的人外周血淋巴细胞的增殖(P<0.01);20、40 μg/mL的CPLA能使淋巴细胞IFN-γ mRNA的表达水平明显升高(P<0.01);用CPLA处理后的巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤功能明显增强(P<0.01),并证实了该作用可能与CPLA促进巨噬细胞分泌TNF-α增多有关;CPLA能促进淋巴细胞产生IL-2和TNF-α,并呈现浓度依赖性(P<0.01).结论 CPLA能增强人外周血淋巴细胞和巨噬细胞的免疫功能,发挥抗肿瘤作用.     

清肺口服液诱生IL—2作用的研究

目的；观察清肺口服液对机体免疫功能的影响。方法：采用依赖细胞株法，分别检测了清肺口服液单独诱生IL-2和协同PHA诱生IL-2的作用。结果：清肺口服液有明显协同PHA诱导单个淋巴细胞产生IL-2，以及单独诱导单个淋巴细胞产生IL-2的作用。结论：提示清肺口服液有一定的调节机体免疫力的作用。     

瑞香素对B淋巴细胞TLR1～10mRNA及IL-12 mRNA表达的影响

目的观察瑞香素对人外周血B淋巴细胞TLR1～10 mRNA及IL-12 mRNA表达的影响,研究瑞香素对B淋巴细胞作用的可能机制。方法尼龙毛柱分离法分离T、B淋巴细胞;MTT法探讨瑞香素作用B淋巴细胞的适宜浓度;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测瑞香素对B细胞TLR1～10 mRNA及IL-12 mRNA表达影响,同时检测用抗TLR4单抗封闭B细胞TLR4后TLR mRNA及IL-12 mRNA表达的变化。结果瑞香素浓度为6.25～25.00μg/ml时对B细胞增殖有明显增强作用(P<0.05),与SPA有较好协同作用,以浓度为12.50μg/ml瑞香素作用最强;瑞香素作用的未封闭组与封闭组的B细胞TLR4 mRNA、TLR9 mRNA、IL-12 mRNA表达均明显高于对照组(P<0.05);未封闭组B细胞TLR4 mR-NA、TLR9 mRNA、IL-12 mRNA表达量明显高于封闭组(P<0.05)。结论天然免疫途径中TLR4、TLR9参与瑞香素从基因转录水平增加IL-12的分泌,从而增强B淋巴细胞免疫功能。     

枸杞多糖对淋巴细胞功能的影响

目的研究枸杞多糖(LBP)对正常人外周血淋巴细胞免疫调节功能的影响。方法无菌分离人外周血淋巴细胞,加入植物凝集素(PHA)和不同质量浓度的LBP,MTT法检测其对淋巴细胞增殖的影响;ELISA法检测LBP作用后淋巴细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况。结果 50~100 mg/L LBP能明显增强PHA活化的人外周血淋巴细胞的增殖;LBP能促进淋巴细胞产生TNF-α,并呈现浓度依赖性。结论 LBP能增强人外周血淋巴细胞的免疫功能,发挥抗肿瘤作用。     

云芝糖肽对健康人外周血淋巴细胞的体外免疫调节作用

目的探讨云芝糖肽在体外对细胞免疫和体液免疫功能调节的可能机制。方法分离健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),分为PBMCs空白组、云芝糖肽20μL与PBMCs共培养组和云芝糖肽40μL与PBMCs共培养组,3组分别于培养24 h、48 h、72 h采用流式细胞仪检测淋巴细胞亚群的比例变化及T淋巴细胞表面CD3+/HLA-DR+、B淋巴细胞表面CD19+/CD69+表达情况,ELISA方法检测上清液中Ig G水平。结果云芝糖肽与PBMCs共培养组CD4+T细胞比例明显上升(P0.05),CD4+/CD8+细胞比值明显增高(P0.05);云芝糖肽20μL与PBMCs共培养组T细胞表面CD3+/HLA-DR+,72 h时表达水平高于24 h(P0.05);B细胞表面CD19+/CD69+的表达显示从培养24 h到48 h表达升高而在72 h表达减少的趋势;PBMCs与云芝糖肽共培养2组上清Ig G水平均明显高于PBMCs空白组(P均0.05)。结论云芝糖肽在体外能促进CD4+T细胞比例上升及CD8+T细胞比例下降,提高CD4+/CD8+比值,并增加Ig G分泌,具有一定的免疫调节作用。     

人参三醇皂甙对人白细胞介素4基因表达的促进效应

 应用川mRNA麦胚无细胞体外转译体系，动态地观察了人参三醇皂甙(PTGS)对人淋巴结细胞白细胞介素4(IL-4)基因表达的促进效应。结果表明，PTGS可以明显促进PHA(植物血凝素）活化人淋巴细胞分泌IL-4，最大促进效应可达63.33%。PTGS+PHA共剌激后人淋巴细胞胞浆11-4mRNA转译IL-4的量明显高于单纯PHA组，最大促进效应达95%。从而首次证实PTGS促IL-4分泌与PTGS促IL-4基因表达密切相关。     

中药清热利湿饮对HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA及分泌IL-8、IL-10的影响

目的:揭示中药清热利湿饮对人永生化角质形成细胞HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA和分泌IL-8、IL-10的作用机制。方法:以HaCaT细胞为研究对象,分别采用RT-PCR技术及ELISA方法观察中药清热利湿饮提取液对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA和分泌IL-8、IL-10的影响。结果:清热利湿饮对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞IL-6mRNA和IL-8mRNA的表达有下调作用,在药物浓度为10g/L和12.5g/L时,HaCaT细胞IL-10mRNA的表达量增强较为明显,与TNF-α诱导活化组相比,有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。清热利湿饮对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞IL-8的分泌有不同程度的抑制作用,但对IL-10的影响不明显。结论:清热利湿饮可下调IL-6mRNA、IL-8mRNA的表达,上调IL-10mRNA的表达,且此作用随药物浓度的升高而增强;同时可降低细胞IL-8的分泌,但对IL-10的分泌无明显的作用。     

云芝黄芪有效组分对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:应用云芝黄芪有效组分单方及复方治疗肿瘤小鼠,以此来验证云芝黄芪有效组分单方及复方抗肿瘤的免疫调节活性。方法:建立艾氏腹水癌(EAC)实体型荷瘤小鼠动物模型,随机分为6组,每组10只:生理盐水组(NS,0.1 mL.kg^-1.d^-1)、阿霉素单纯化疗组(AMD,4 mg.kg^-1.d^-1,0.2 mL,连续3 d)、云芝糖肽组(PSP,250 mg.kg^-1.d^-1,0.2 mL)、黄芪多糖组(APS,250 mg.kg^-1.d^-1,0.2 mL)、云芝黄芪复方组(PSP+APS,250 mg.kg^-1.d^-1,0.1 mL)和阿霉素云芝黄芪综合治疗组(AMD+PSP+APS,用量同上)。分别治疗30 d后采用免疫细胞化学法检测荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞亚群的变化情况,计算脏器指数、抑瘤率,并与对照组及化疗组进行比较。结果:云芝糖肽组和云芝黄芪复方组小鼠的CD3⁺,CD4⁺T细胞百分率以及CD4⁺/CD8⁺均显著高于对照组(P<0.05),CD8⁺T细胞的百分率较阿霉素化疗组显著降低(P<0.05);综合治疗组CD3⁺,CD4⁺T细胞百分率显著高于单纯化疗组(P<0.05);单纯化疗组小鼠胸腺指数较对照组明显降低(P<0.05),而综合治疗组的胸腺指数显著高于单纯化疗组(P<0.01);并且各给药组肿瘤质量均显著低于NS对照组(P<0.05)。结论:云芝糖肽、云芝黄芪复方对荷瘤小鼠及经化疗后的荷瘤小鼠均具有免疫增强作用。     

加味玉屏风散对创伤应激小鼠IL-2与IL-2R基因表达的影响

目的：探讨加味玉屏风散对创伤应激小鼠脾淋巴细胞IL-2与IL-2R基因表达的影响。方法：应用体外细胞培养和Northern印迹法检测加味玉屏风散对刀豆蛋白A诱导的小鼠脾淋巴细胞IL-2与IL-2R基因表达的影响。结果：发现加味玉屏风散体内应用对创伤应激小鼠IL-2 mRNA及IL-2R mRNA水平具有明显的升高作用。结论：加味玉屏风散可通过促进创伤应激小鼠脾淋巴细胞IL-2及IL-2R的基因转录表达进而逆转IL-2及IL-2R的抑制状态。     

原花青素对斑秃患者外周血单核细胞中IFN-γ、IL-12及转录因子T-bet基因表达的调节作用

目的 探讨原花青素对斑秃患者外周血单核细胞（PBMC）中Th1型细胞因子（IFN γ、IL 12）及转录因子T-bet 基因表达的调节作用。 方法 用逆转录－聚合酶链反应(RT PCR) 法,分别检测8例轻型斑秃、12例重型斑秃患者及10例健康人外周血PBMC 经原花青素（PC）刺激后IFN-γ、IL-12及T-bet mRNA的表达状况。 结果　植物血凝素（phytoaemagglutinin, PHA）及PC＋PHA共同刺激重型斑秃患者PBMC后,转录因子T bet mRNA分别为0.581±0.148、0.419±0.113;IFN-γmRNA分别为0.689±0.219、0.430±0.162;IL-12 mRNA分别为0.198±0.056、0.136±0.035;与自身对照比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论 PC可抑制重型斑秃患者PBMC中转录因子T bet及Th1型细胞因子基因表达,逆转Th1型反应,含PC的中药松针治疗斑秃有效的机制可能部分与此相关。     

大黄中4种蒽醌类化合物抑幽门螺杆菌效果比较

 目的:对4种大黄蒽醌化合物抑制幽门螺杆菌( Helicobacter pylori )进行实验研究。方法:用梯度碱提取法，将大黄中的4种蒽醌类化合物提取，然后用试管稀释法和纸片扩散法，分别观察其对幽门螺杆菌的抑菌效果。结果:4种大黄蒽醌，最低抑菌浓度及抑制幽门螺杆菌环分别为:大黄素(emodin) 0.40μg· ml^{-1(30mm,强)、大黄酸(rhein)0.60μg·ml-1(28mm,强)、大黄酚(chrysophanol ) 0.78μg·ml-1(24mm,强)、芦荟大黄素(aloe-emodin)0.85μg·ml-1(23mm,强)。衬照品大黄提取物(Rheum officinale extracts)仅为17.24μg·ml-1(15mm，中)。空白对照为灭菌注射用水，无抑菌环，幽门螺杆菌生长正常。结论:4种大黄蒽醌类化合物对幽门螺杆菌均有较强的抑制生长作用。}     

冬虫夏草对巨噬细胞免疫活性的增强作用

 目的:检测冬虫夏草对巨噬细胞免疫活性的影响，探讨其滋补强身作用机理。方法:未用不同浓度虫草水提液与J774巨噬细胞一起作细胞培养，观察细胞吞噬活性的变异情况。结果:细胞吞噬活性明显增强。在药物浓度100μ g·ml^-1到3 000μg·ml^-1范围内都有显著增强效果(P<0.05)。分别增强1.27倍到2. 58倍，峰值在500μg·ml^-1结论:增强机体免疫功能，可能在虫草的滋补强身作用机制中起重要作用。     

布洛芬糖浆剂药动学及相对生物利用度

 目的：测定布洛芬糖浆剂的药动学及相对生物利用度。方法：8名健康男性志愿者单剂量随机交叉po400mg布洛芬后，采用HPLC测定血浆药物浓度。结果：口服糖浆剂及片剂后血药浓度达峰时间分别为（0．86±0．30）h和（1．78±0．34）h，峰浓度分别为（48．9±9．71）μg·ml^－1和（44．2±8．23）μg·ml^－1，药 时曲线下面积分别为（175．1±31．9）μg·h·ml^－1和（178．6±23．2）μg·h·ml^－1。结论：统计分析表明，糖浆剂较片剂达峰时间短，吸收快。布洛芬糖浆剂相对生物利用度为（98．3±14．5）％。     

氯化镁缓释片的释放度和生物利用度研究

 目的：研究氯化镁缓释片的释放度和相对生物利用度。方法：采用原子吸收分光光度法测定氯化镁缓释片和进口氯化镁缓释片（Slow-Mag）的体内外释放浓度，计算体内外参数，考察氯化镁缓释片的缓释效果，并与Slow-Mag进行对照。结果：氯化镁缓释片体外释放符合Higuchi模型；氯化镁缓释片和Slow-Mag的药 时曲线可用二室模型拟合，t_max分别为3.7967h和2.1367h，c_max分别为7.8257μg·ml^-1和8.0254μg·ml^-1，AUC分别为56.5172，34.1971μg·h·ml^-1。结论：氯化镁缓释片对Slow-Mag的相对生物利用度为165.26%，二者为生物不等效制剂。     

阿司匹林缓释片的研制及药代动力学

 目的：制备阿司匹林缓释片,评价人体内动力学、相对生物利用度及血药浓度。方法：以羟丙甲纤维素,聚丙烯酸树脂Ⅱ为释放阻滞剂制备缓释片,转篮法测释放度,高效液相色谱法测10名男性健康志愿者交叉po 50mg肠溶片和缓释片后的血药浓度,数据经3P87软件微机处理。结果：体外释药：肠溶片t₅₀=2.4h,缓释片t₅₀=4.5h。释药9h以上。单剂量 po 加肠溶片和缓释片c_max分别为(7.96士1.65)μg·ml^-1和(3.03士0.22)μg·ml^-1(P<0.01)。t_1/2R分别为(2.89士0.93)h和(7.81士2.16)h。(P<0.01)。AUC_o～２4h为(64.53土8.86)μg·h·ml^-1和(66.49士12.55)μg·h·ml^-1(P>0.05),相对生物利用度为(103.49士12.32)%。多剂量po加肠溶片和缓释片。C_min分别为(0.54士0.20)μg·ml^-1和(1.25士0.27)μg·ml^-1(P<0.01)0。分别为(6.86士1.09)μg·ml^-1和(3.29士0.41)μg·ml^-1(P<0.01)。FI分别为(1.73士0.16)和(0.86士0.23)(P<0.01)。结论：该缓释片处方合理,工艺简单,适合于工业化生产,为预防和治疗血栓形成提供一个新的剂型。     

高效液相色谱法检测米雅利桑爱儿A颗粒中B族维生素

 目的:测定米稚利桑爱儿A颗粒中维生素B₆、泛酸钙、维生素B_{2的含量。方法:米用高效液相色谱法，用Waters CLC-ODS柱，以乙睛-0. 25 mol· L^-1磷酸二氢钾(pH 3.2±0.4)为流动相梯度洗脱，对乙酰氨基酚为内标，泛酸钙检测波长为210 nm，维生素B6、内标和维生素B2的检测波长为280 nm。结果:维生素B6}、泛酸钙、维生素B₂ 分别在20～130μg·ml^-1( r = 0.999 3,n=6),20～130μg·ml^-1(r =0.998 6,n=6), 5～30μg · ml^-1(r = 0.999 3, n=6)浓度范围内呈线性关系。维生素B6、泛酸钙、维生素B₂平均回收率分别为99.7%,RSD=0.86%;100.0%,RSD=0.95% ;98.2%, RSD=1.02%。结论:方法简便、快速、准确、重现性好。     

反相高效液相色谱法测定来氟米特

 目的:建立反相高效液相色谱测定来氟米特的方法。方法:采用Hypersil ODS C₁₈柱,流动相为甲醇-水-磷酸,检测波长为260nm,流速为1.0ml·min^-1,进样量为20μl,以萘或联苯酚为内标。结果:两峰分离完全,以萘为内标:来氟米特线性范围0.0955～7.6400μg·ml^-1(r=0.9999),检测限为0.8ng,日内偏差和日间偏差分别为0.76%(n=5)和0.86%(n=5),平均回收率为99.66%(RSD=0.80%);以联苯酚为内标:来氟米特线性范围0.141～8.460μg·ml^-1(r=0.9997),检测限为0.8ng,日内偏差和日间偏差分别为0.86%(n=5)和1.06%(n=5),平均回收率为100.48%(RSD=1.60%)。结论:方法简便,结果准确。     

天竺葵花抗氧化作用的研究

 目的：研究天竺葵花的抗氧化作用。方法：用化学发光法研究天竺葵花粗提液对超氧阴离子自由基（O〈sub〉2〈/sub〉^-）和羟在自由基（·OH）的清除作用。用分光光度法研究它对1,1一二苯基-2-苦肼基自由基（DPPH·）的清除作用。结果：天竺葵花具有很强的清除自由基活性。其粗提液清除O〈sub〉2〈/sub〉^-的IC〈sub〉50〈/sub〉分别为3.5μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉（红花）,3.0μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(粉花),1.6μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(浅粉花);清除·OH 的IC〈sub〉50〈/sub〉分别为5.7μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(红花),4.2μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉（粉花）,3.8μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(浅粉花);清除DPPH.的IC〈sub〉50〈/sub〉分别为12μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(红花),8.3μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(粉花),5.7μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(浅粉花),均与市售茶多酚的清除能力相近（其IC〈sub〉50〈/sub〉。分别为：1.1,4.1,5.4μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉）。结论：天竺葵花可能成为一种新的高效天然杭氧化剂。     

健康志愿者口服大量剂量利福平的药动学

 目的 研究健康志愿者 po 利福平胶囊(0.6 g)的药动学。方法 高效液相色谱法测定人血清中利福平及其代谢物,薄层色谱分离代谢物,以二极管阵列检测器进行定性。结果 利福平的体内过程符合具有一级吸收的二房室模型,其主要药动学参数t_1/2β,t_max,c_max及AUC分别为(5.17±2.10)h,(1.84±0.68)h,(7.84±4.86)μg·ml^-1,(126.67±34.02)μg·h·ml^-1,利福平体内代谢物主要为21-脱乙酰利福平,血清中21-脱乙酰利福平浓度较长时间维持在4 μg·ml^-1以上。结论 为临床合理用药提供了参考资料。     

氢溴酸美沙芬含量及其杂质测定的研究

 目的:建立新的高效液相色谱测定氢溴酸美沙芬及其杂质含量的方法。方法:色谱条件以YWG C₁₈H₃₇为色谱柱;乙睛-0.1 mol·L^-1磷酸二氢钾(55:45)用磷酸调pH至4(含量)和2.5(杂质)为流动相；检测波长为280 nm；并以对乙酰氨基酚为内标测定含量。结果:含量线性范围为80～120μg·ml，回归方程Y=-0.059 6+0.131 9 X,r=0.9999(n=5),RSD=0.82%。 N,N-二甲基苯胺测定最低浓度为0.1μg·ml^-1。结论:含量测定方法简便、快速，结果准确。杂质测定灵教度高，优于药典方法。