风疹病毒IgG抗体检测方法的研究及应用

目的:建立一个以最低保护力的抗体水平(15IU/ml)为临界值的风疹病毒特异性IgG抗体的检测方法。方法:用优选的抗原和具有变色功能的标本稀释液,用世界卫生组织提供的标准品标定标准曲线,以常规间接ELISA方法进行检测。结果:对检测方法的各个环节进行了比较研究,确定了检测方法的最佳工艺流程。对1005例育龄妇女血清标本进行检测,并与意大利Sorin公司的试剂检测结果进行比较,两种方法呈高度相关(Kappa值为0.85)。结论:本文建立的方法具有敏感、特异、简便、快速、可重复性好等特点,适用于育龄妇女风疹病毒抗体水平的筛查。     

7种检测风疹IgG抗体的试剂盒的比较

目的:比较7种检测风疹IgG抗体试剂盒的效果。方法:7种试剂盒中2种为本室自制,其余5种为国外市售。取262例育龄妇女血清标本按照试剂盒说明书用酶联免疫吸附法完成测定。结果:7种试剂盒Kappa值和方法的可用度分别为0.21～1和24.1%～100%,检测世界卫生组织提供的风疹抗体标准品时,曲线有很好的相关性(γ>0.85);试剂盒检测血清样本时诊断敏感性和特异性范围分别为57.3%～93.3%,53.1%～96.1%。结论:7种试剂盒检测血清标本时有较大的差异,急需进行试剂盒的标准化研究,进一步提高检测的敏感性和特异性。     

不同年龄人群麻疹IgG抗体水平分析

[目的]检测幼儿园儿童、小学、初中、高中学生中的麻疹IgG水平,探讨麻疹疫苗强化免疫的必要性。[方法]采集我市幼儿园儿童、小学生、初中生共889份血样(其中初二45位学生在麻疹疫苗加强接种前后采双份血样),用ELISA试剂盒测定麻疹IgG抗体。[结果]不同年龄段人群抗体水平差异明显,随着年龄增长抗体水平逐渐下降,在初、高中学生阴性率4.7%和6.8%;初二学生麻疹疫苗加强接种后抗体增长迅速。[结论]麻疹IgG抗体水平随年龄的增加逐渐下降,初、高中学生中抗体阴性结果逐渐增多,初中学生麻疹疫苗强化免疫很有必要。     

A群脑膜炎奈瑟菌多糖IgG抗体检测试剂研制

目的 研制检测A群脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖IgG抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂.方法 以CTAB、酚、乙醇从A群脑膜炎奈瑟菌培养上清中提取荚膜多糖(MenA PS),将多糖与卵清蛋白(EA)以还原氨基法偶联,并以Sepharose CL-4B纯化.优化反应条件,建立以偶联物MenA PS-EA为包被抗原检测A群脑膜炎奈瑟菌多糖IgG抗体的间接ELISA法,并与血清杀菌力试验(SBA)比较.结果 高效液相色谱检测MenA PS-EA结合物纯度为81.50%.试剂具有良好重复性(变异系数 CV=4.26%～5.30%);37℃放置7d、4℃放置12个月,试剂的灵敏度不变,具有优良的稳定性;分别用该试剂和SBA法检测192份血清,试剂相对于血清杀菌力试验的灵敏度为96.91%,特异度为90.00%,一致性为95.83%,统计学分析表明,2种检测方法之间差异无统计学意义.结论 以纯化MenA PS-EA作为包被抗原建立的A群脑膜炎奈瑟菌多糖特异性IgG抗体间接ELISA检测试剂具有可行性,为进一步研究及开发细菌多糖类抗体诊断试剂提供了可借鉴的方法.     

龙岩市城区少儿人群麻疹IgG抗体监测

目的 通过对少儿人群麻疹IgG抗体水平监测,为控制或消灭麻疹提供实验室依据。方法 于2000年6月采用捕获的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法利用麻疹全抗原对128份少儿血清进行检测。结果 所检测人群麻疹IgG抗体滴度均在1:100以上,几何平均滴度(GMT)为1:714,阳性率为85.16％,其中高年龄组人群抗体GMT与阳性率均较低,差异具有显著性意义。结论 龙岩市城区少儿人群中大部分具有较高的抗体保护水平,但其中的高年龄组人群抗体保护水平较低。     

人群中麻疹IgG抗体水平分析

自从麻疹疫苗纳入计划免疫后,麻疹的发病率显著下降。但近年来,麻疹的发病率有所上升,并且具有15岁左右大年龄组和1周岁以下小年龄组两端高发的特征。酶联免疫吸附试验（ELISA）是检测麻疹IgG抗体最常用的实验室检测方法,传统的ELISA通过将血清稀释成1：200、1：800、1：3200等不同的稀释度后再进行检测,方法繁琐、工作量大,也只能进行半定量。     

ELISA法检测放射工作人员风疹病毒感染的研究

目的 用一种快速检测抗风疹病毒抗体的诊断方法,了解放射工作人员风疹感染情况。方法 应用改良的间接ELISA法,对放射工作人员进行风疹病毒特异性抗体IgG和IgM检测。结果 济南地区514名放射工作人员中90.47%对风疹病毒具有抵抗力,6.42%为易感者,2.33%为原发感染,0.78%为再次感染风疹病毒。结论 放射工作人员的风疹抗体还存在一定的免疫空白,建议对他们开展疫苗免疫,消除风疹感染的危险性。     

993例女性巨细胞病毒抗体检测分析

目的了解孕前、死胎和胎儿畸形妇女人巨细胞病毒(HCMV)既往感染及近期感染状况。方法采用酶联免疫吸附试验(EL1SA)对920例孕前妇女、51例死胎妇女和22例胎儿畸形妇女共993例妇女的静脉血标本进行了HCMV-IgG抗体、HCMV-IgM抗体检测,同时以80名孕前检查的健康妇女为对照。结果发现人巨细胞病毒IgG、IgM抗体阳性率分别为97.18%和2.22%。提示妇女HCMV既往感染极为普遍,在孕前妇女、51例死胎妇女和23例胎儿畸形妇女中,分别检测出HCMV-IgM阳性标本15例、4例、3例,阳性率分别为1.51%、7.84%和13.64%,巨细胞病毒近期感染率,在上述各组妇女中,以胎儿畸形组最高,死胎组次之,在80名健康妇女中未检测出HCMV-IgM阳性标本,感染率为0。结论在妇女中巨细胞病毒有一定的近期感染率,巨细胞病毒既往感染可能会被危险因素激活为近期感染,孕妇感染HCMV是导致胎儿畸形和死胎的原因之一,酶免法检测巨细胞病毒抗体(CMV-IgM)是当前迅速、简便、经济的优生检测筛选方法。     

定量与半定量酶联免疫吸附试验在麻疹IgG抗体检测中的比较

[目的]通过对麻疹病毒IgG抗体定量酶联免疫吸附试验(ELISA)与传统半定量酶联免疫吸附试验(ELISA)进行比较,评价传统半定量ELISA法的实用价值.[方法]随机抽取2008年的180份云南省保山市两所边远小学小学生血清,用德国维润公司定量ELISA试剂盒测定麻疹IgG抗体.这180血清已经用半定量方法将抗体滴度测出,之后将两种方法测定的结果进行比较.[结果]定性结果分析发现,180份血清标本中,8份阴性,3份可疑,162份阳性,与传统半定量ELISA方法的一致率为96.05%,统计分析两实验结果差异无统计学意义(P>0.05),Kappa检验得两法存在高度一致性(Kappa值=0.677,P<0.001).同时得出传统半定量法的灵敏度为95.86%,特异度为100%,阴性似然比为0.04,正确指数为95.86%,阳性预测值为98.18%,阴性预测值为53.33%.定量测定方面,随着抗体滴度的增高,该组血清抗体国际单位(IU)也随之上升,抗体滴度分组与抗体IU明显的正相关,相关系数(rs)为0.41,P<0.001.[结论]通过本次定量与半定量EHSA法在麻疹IgG抗体检测中的比较发现,半定量法的定性、定量结果一定程度上已经能够较好反映人群麻疹抗体水平,对麻疹的监测仍具有重要的实用意义.     

实时荧光定量RT—PCR和血清学方法联合应用检测风疹病毒

目的探讨实时荧光定量RT-PCR和血清学方法联合应用检测风疹病毒。方法采用实时荧光定量RT—PCR及酶联免疫吸附试验对临床标本进行检测。结果在58份临床标本中,实时荧光定量RT—PCR法检测阳性率为100％,酶联免疫吸附试验风疹IgM抗体阳性率为82．8％。结论实时荧光定量PCR法适合用于疾病的早期诊断和鉴别诊断,可作为酶联免疫吸附试验的一个补充诊断方法。     

毕节市人群乙肝感染状况及血氟含量检测

目的 了解贵州省毕节地区燃煤污染型地方性氟中毒非干预区-鸭池镇下坝村与干预区-长春镇长春乡人群的乙型肝炎病毒(HBV)感染状况与流行趋势以及血氟含量。方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法进行HBV血清学标志物检测,酶标仪分析HBV血清学结果;采用氟离子选择电极法测定血氟含量。结果 共调查汉族人群532人,检出HBV感染403例,感染率高达75.75%;其中高血氟人群检出HBV感染326例,感染率为68.78%;正常血氟人群检出HBV感染42例,感染率为65.63%。结论 贵州毕节鸭池镇下坝村与长春镇长春乡均具有较高的HBV感染率及血氟含量。     

食品兽药残留免疫学技术检测

关于食品兽药残留检测方法除传统的薄层色谱、气相色谱、质谱及微生物学等方法外,近十多年来在免疫学方法检测方面取得了长足的发展,现已成功地用于多种兽药残留的定性筛选及定量检测。该方法与传统的检验方法相比具有不需复杂昂贵的设备、操作简单、前处理简化、检验快速、检测容量大等特点,因此具有潜在的广泛应用价值。其中研究和应用最多的是酶联免疫吸附检测技术和固相放射免疫技术。本文综述了国外报道的有关食品兽药残留免疫学检测技术研究的有关情况(包括方法类型、检出限、抗体类型、检测食品范围、检测兽药种类和免疫学检测技术的特点等)和国外研制开发出来的部分磺胺类兽药残留检测商品试剂盒的性能。     

风疹病毒山东地方株的分离与鉴定

目的 了解山东省风疹病毒流行情况，进行风疹野病毒山东地方株的分离、鉴定。方法 2001～2002年，从我省的济宁、淄博、济南、德州市风疹爆发流行中，采集53份具有风疹典型症状患者的咽拭子，经Vero，RK-13，BHK-21，MK2细胞分离培养，选出有明显的细胞病变株。结果 在Vero细胞上对HSV-1病毒攻击呈干扰现象；风疹免疫荧光阳性者；共分离出9株风疹病毒山东地方野毒株(SDRV)，代码为SDRV1、2、3、4、5、6、7、8、9。结论 细胞用于风疹病毒的分离培养，免疫荧光实验可作为风疹病毒鉴定、诊断的重要方法。     

建立固相酶联免疫吸附试验技术诊断社区糖尿病患者人巨细胞病毒活动性感染

目的建立检测人巨细胞病毒(HCMV)抗原特异性IgM的抗体捕捉酶联免疫吸附试验(Capture-ELISA),并分析糖尿病患者HCMV活动性感染状态。方法利用抗人IgM(μ链特异性)抗体包被固相载体,作为捕捉抗体吸附待检血清中的IgM,经过洗涤除去血清中IgG及其他成分,再加入特异性抗原与捕捉到的相应IgM抗体结合,然后加入酶标抗体和底物显色进行测定;同时,应用建立的酶联免疫捕获法诊断糖尿病患者HCMV近期感染状态,并与常用的间接酶联免疫吸附试验(In-ELISA)及RT-PCR进行比较。结果 Capture-ELISA的特异性及敏感性均高于间接法,且不受RF因子的影响。结论 Capture-ELISA操作简单、快速,且具有较高的特异性和灵敏度,是检测IgM抗体理想的方法之一。     

Detection by enzyme-linked immunosorbent assay of antibodies to West Nile virus in birds

We adapted an indirect immunoglobulin G enzyme-linked immunosorbent assay to facilitate studies of West Nile virus (WNV) and evaluated its application to taxonomically diverse avian species. Anti-WNV antibodies were detected in 23 bird species, including many exotic species, demonstrating its value in studies of WNV epizootiology.     

多种单抗联合检测HIV抗原

目的对人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体筛查有反应样本与HIV-1抗体确证阳性结果进行对比分析,探讨筛查检测与确证检测结果的符合性。方法根据中国疾病预防控制中心《全国艾滋病检测技术规范》(2015版),对2017年12月—2018年12月上海市宝山区289份酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫渗透/层析试验HIV筛查有反应标本(其中ELISA试验286份,免疫渗透/层析试验276份)和70份化学发光法筛查有反应,但ELISA、免疫渗透/层析试验均为阴性标本,采用免疫蛋白印迹试验(WB)进行确证,并对筛查和确证结果进行对比分析。结果经WB确证试验显示,289份ELISA、免疫渗透/层析试验初筛有反应样品中,HIV-1抗体阳性245份(84.78%),不确定34份(11.76%),阴性10份(3.46%)。ELISA、免疫渗透/层析试验与WB确证试验结果的符合率分别为85.66%(245/286)和88.77% (245/276),二者差异无统计学意义(χ²=1.211,P=0.271)。WB确证试验HIV-1抗体阳性、不确定及阴性的平均S/c.o值分别为(24.66±1.37)、(20.15±8.06)和(7.96±8.40),三组间差异有统计学意义(F=137.96,P=0.000)。289份筛查有反应样本中,9份样本的S/c.o值在1~6之间,确证阳性1份,阳性符合率为11.11%;3份样本的S/c.o值7~10之间,确证阳性2份,阳性符合率为66.67%;277份样本的S/c.o值均大于10,确证阳性242份,阳性符合率为87.36%。HIV-1抗体确证阳性的样本中,gp160、gp120、gp41、p66、p24条带同时出现的概率为95%。70份化学发光法HIV筛查有反应,ELISA、免疫渗透/层析试验阴性标本中,WB确证结果阴性无条带36份,占51.43%(36/70),出现1条带27份,占38.57%(27/70),出现2条带7份,占10%(7/70)。结论HIV筛查采用敏感性、特异性高的试剂,即抗原抗体同时检测,即可减少感染早期漏检,也可提高与确证结果的符合性。筛查试验因样本或某些疾病的影响,存在假阳性可能,必须以抗体确证或核酸补充试验结果为准。HIV抗体确证试验,因其检测的抗体出现较晚,对早期感染者存在漏检风险,建议对初筛有反应S/c.o值较低(1~6之间),抗体确证试验阴性或不确定者,以及化学发光法HIV筛查有反应,ELISA、免疫渗透/层析试验阴性者,采用核酸补充试验检测或结合流行病学资料进行进一步随访。     

测定巨细胞病毒特异性抗体亲和指数的诊断价值

目的以快速、简便的人巨细胞病毒特异性抗体亲和指数（CMV—IgGAI）检测方法作为有效的诊断工具，用于区分孕妇CMV原发感染与非原发感染。方法以标准的间接ELISA方法，8．0mol／L尿素作为温和蛋白变性剂，用标准曲线方法定量测定标本中的CMV—IgG含量。结果共检测218例标本，其中187例为CMV既往感染标本，31例为继发或再感染、可疑原发感染和原发感染标本。以抗体亲和指数〈35．0％作为阳性判断标准，此时方法的灵敏度为75．0％，特异度为91．4％，可用度为67．2％。既往感染、继发或再感染、可疑原发感染、原发感染4组的平均AI值分别是（61．42&#177;25．69）％，（70．38&#177;21．88）％，（66．73&#177;23．62）％，（29．78&#177;25．93）％，原发感染组与其它3组非原发感染比较，差异有统计学意义（P〈0．01））。结论以8．0mol／L尿素作为温和蛋白变性剂，用标准曲线方法定量测定标本中CMV—IgG含量适用于检测巨细胞病毒IgG抗体亲和指数（CMV—IgGAI），认为CMV—IgM联合CMV—IgGAI检测是区分原发与非原发感染的血清学方法之一。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者卵泡抑素样蛋白1测定及临床意义

目的 研究卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)在不同程度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血清中的变化及其意义。方法 随机抽样选取本院2019年2月—2020年5月70例OSAHS 患者,分为轻度24例、中度26例、重度20例,同时选取22名健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸测定(ELISA)患者血清FSTL1的水平,分析其与病情轻重的相关性。采用SPSS 16.0软件对结果进行统计分析。结果 轻、中、重度OSAHS 患者血清FSTL1分别(122.6±26.5)ng/mL、(182.1±39.5)ng/mL、(249.8±52.3)ng/mL,均高于对照组的(95.3±5.2)ng/mL (P<0.05),且随病情的加重逐渐升高, 不同程度OSAHS患者血清FSTL1水平的差异有统计学意义(P<0.05)。并且,患者血清FSTL1水平与其呼吸暂停低通气指数(AHI)呈正相关(r=0.526,P<0.001),与夜间最低血氧饱和度(LSaO2)呈负相关(r=-0.687,P<0.001)。结论 FSTL1在OSAHS患者血清中显著升高,并与疾病严重程度呈正相关,提示它们与OSAHS的发生和发展密切相关,可反映病情的严重程度。     

溃疡性结肠炎患者血浆白介素-13检测和临床价值

目的　探讨溃疡性结肠炎 (UC)患者血浆白介素 - 13(IL - 13)临床价值。方法　采用ELISA法检测UC患者和正常健康人血浆IL - 13浓度。结果　 31例UC患者 (16 .6 5± 3.38)pg/ml和 30例健康人 (2 5 .83± 3.5 9)pg/ml血浆IL - 13浓度比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。活动期 (2 1例 )和静止期 (10例 )UC患者血浆IL - 13浓度分别为(12 .0 3± 3.72 )pg/ml和 (18.6 7± 4 .2 2 )pg/ml,两者比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。轻、中、重度活动期UC血浆IL -13浓度相互比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。UC患者血浆IL - 13和血清C -反应蛋白浓度呈负相关 (r=- 0 .5 98,P <0 .0 1)。结论　IL - 13参与UC的炎症过程 ,检测血浆IL - 13可作为判断UC患者病变严重程度和复发的指标之一。     

狼疮性肾炎患儿血清总IgE水平变化及临床意义

目的 探讨血清总IgE变化水平在儿童狼疮性肾炎病情活动中的临床意义.方法 采用ELISA法测定狼疮性肾炎患儿和对照组患儿血清中总IgE含量,并检测其24小时尿蛋白定量、尿蛋白/肌酐、血肌酐、血尿素氮,计算肾小球滤过率.结果 狼疮性肾炎组患儿血清总IgE水平较对照组显著升高,差异有高度统计学意义(t=3.889,P<0.01),高IgE亚组患儿公斤体重24小时尿蛋白定量和尿蛋白/尿肌酐水平均明显高于低IgE亚组,差异有统计学意义(t值分别为2.233、2.125,均P<0.05),但两亚组的血肌酐、血尿素氮和肾小球滤过率均无显著统计学差异(t值分别为0.808、1.194、0.522,均P>0.05).结论 血清IgE对判断狼疮性肾炎病情活动有意义,调节IgE表达可能有助于改善狼疮性肾炎患儿的病情.