三氧化二砷诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡及对NF-κB表达的影响

目的:观察三氧化二砷(As2O3)诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡及对NF-κB表达的影响。方法:流式细胞仪(FCM)检测不同浓度As2O3作用后48 hSGC-7901的凋亡率,凝胶电泳迁移改变分析法(EMSA)及免疫组织化学法检测As2O3处理48 h后NF-κB活性及表达。结果:As2O3可诱导SGC-7901凋亡(P<0.05)并降低NF-kB的活性及表达(P<0.05),有浓度依赖性。结论:As2O3能诱导SGC-7901凋亡,并降低NF-κB活性及表达,这可能是As2O3抗肿瘤的机制之一。     

硼替佐米对伯基特淋巴瘤Raji细胞凋亡的影响

目的 探究硼替佐米对伯基特淋巴瘤Raji细胞体外抑制作用及其可能机制.方法 MTT实验检测硼替佐米对伯基特淋巴瘤Raji细胞活力的影响;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测硼替佐米对伯基特淋巴瘤Raji细胞凋亡的影响;Western blotting实验检测硼替佐米对伯基特淋巴瘤Raji细胞中cleaved caspase-3和p-NF-κB p65表达的影响.结果 硼替佐米浓度和时间依赖性抑制Raji细胞活力(P＜0.05)和促进细胞凋亡(P＜0.05);Western blotting实验显示硼替佐米浓度和时间依赖性抑制Raji细胞NF-κB p65表达并促进caspase-3的剪切(P＜0.05).结论 硼替佐米促进Raji细胞凋亡,其机制可能与抑制p-NF-κB p65和上调cleaved-caspase-3表达有关.     

硼替佐米对伯基特淋巴瘤的治疗作用及其机制研究

【目的】探究硼替佐米对伯基特淋巴瘤的治疗作用及其机制。【方法】MTT实验检测硼替佐米对淋巴瘤Raji细胞增殖的影响;Western blotting实验和RT-PCR实验检测硼替佐米对Raji细胞中NF-κB和Caspase-3的影响。【结果】MTT实验表明硼替佐米抑制Raji细胞增殖,并且其抑制作用呈剂量、时间依赖性（P<0.05）;Western blotting实验和RT-PCR实验显示硼替佐米显著抑制Raji细胞NF-κB表达并且促进Caspase-3的表达（P<0.05）。【结论】硼替佐米通过下调NF-κB并且上调Caspase-3,最终导致Raji细胞增殖减少。硼替佐米治疗淋巴瘤可能涉及NF-κB和Caspase-3基因。     

硼替佐米对骨髓移植清髓照射小鼠肝及小肠内NF-κB表达的影响

目的研究硼替佐米对骨髓移植照射预处理小鼠肝及小肠内NF-κB表达的影响,进一步探讨硼替佐米防治小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)的作用机制。方法骨髓移植预处理方法为BALB/c小鼠接受7.0 Gy X射线全身照射。实验分为:A组为空白对照组:未作任何处理;B组:单纯全身照射组;C组:全身照射加用硼替佐米组。观察各组小鼠的外周血白细胞计数及生存时间,Western blot法检测肝及小肠组织总蛋白及细胞核内NF-κB的表达。结果 B、C组中用于白细胞计数及生存时间观察的8只小鼠均在10 d内全部死于骨髓衰竭。照射后+1、+3、+5 d,B组肝及小肠组织总蛋白及细胞核蛋白中NF-κBp65表达均高于A组(P0.05),而C组均明显低于B组(P0.05)。结论硼替佐米可能通过一定程度上抑制照射预处理损伤所致肝脏及小肠组织中NF-κB的表达与激活,起到减轻aGVHD的作用。     

硼替佐米对人急性淋巴细胞白血病B细胞株细胞的生长抑制作用分析

目的 探讨硼替佐米对人急性淋巴细胞白血病B细胞株(Nalm-6)细胞的生长抑制作用.方法 将体外培养Nalm-6细胞分为细胞对照组和硼替佐米组,细胞对照组加RPMI 1640培养液,硼替佐米组加不同浓度的硼替佐米(浓度分别为100、200、400、800、1 600 nmol/L).采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同时间不同浓度硼替佐米对Nalm-6细胞的生长抑制作用;采用流式细胞仪检测400 nmol/L硼替佐米作用12 h后对Nalm-6细胞周期的影响.结果 ①硼替佐米对Nalm-6生长抑制情况:100、200、400、800、1 600 nmol/L细胞作用12 h后其抑制率分别为(8.0±6.1)％、(18.3±7.5)％、(30.3±7.5)％、(37.8±2.6)％、(41.1±2.1)％;作用24h后其抑制率分别为(13.5±5.2)％、(43.3±6.5)％、(68.7±2.1)％、(81.6±1.6)％、(87.4±1.4)％;作用48 h后其抑制率分别为(5.21±3.71)％、(9.33±2.53)％、(49.32±7.12)％、(97.71±1.1 1)％、(99.9±0.1)％;作用72 h后其抑制率分别为(4.00±3.62)％、(4.32±5.61)％、(8.32±4.42)％、(79.52±8.61)％、(99.94±0.13)％.细胞对照组抑制率为0,各浓度硼替佐米组与细胞对照组之间两两比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).②400 nmol/L硼替佐米作用Nalm-6细胞12h后,G2/M期细胞比例为(18.6±2.4)％,细胞对照组G2/M期细胞比例为(3.8±2.1)％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 硼替佐米能抑制Nalm-6细胞的增殖,并将Nalm-6细胞周期阻滞在G2/M期.     

硼替佐米对胃癌细胞的抗肿瘤作用及其机制

目的:观察硼替佐米对胃癌细胞的抗肿瘤作用,并探讨其相关的作用机制.方法:MTT生长抑制实验检测硼替佐米对胃癌SGC-7901细胞的细胞毒作用;PI和Annexin V-FITC双染流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot实验检测蛋白的表达变化.结果:硼替佐米对胃癌SGC-7901细胞的IC50值为(54.6±4.1) nmol/L.0、50、100 nmol/L硼替佐米作用于SGC-7901细胞48 h后,细胞的凋亡率分别为(1.8±0.7)％、(26.5±4.6)％、(41.7±5.8)％,各组之间具有统计学差异(P＜0.01).50和100 nmol/L的硼替佐米作用SGC-7901细胞48 h后,细胞出现了Parp和caspase-3蛋白的裂解带.50和100 nmol/L的硼替佐米作用SGC-7901细胞48 h后,细胞Bmi-1蛋白的表达出现了显著的降低.结论:硼替佐米对胃癌SGC-7901细胞具有显著的抗肿瘤活性,下调Bmi-1蛋白可能是其诱导胃癌细胞凋亡的主要作用机制.     

胃癌组织中细胞凋亡与survivin、NF-κB表达关系的研究

目的探讨胃癌组织中细胞凋亡情况,以及survivin、NF-κB在胃癌组织中表达,了解三者在胃癌发生、发展的作用和关系。方法共分为胃癌组织、癌旁组织、慢性胃炎组织、正常胃黏膜组织4组,分别采用TUNEL法检测组织中细胞凋亡情况,采取免疫组织化学法检测survivin、NF-κB表达情况。结果胃癌组织中survivin与NF-κB p65表达情况均较其他组高,而凋亡指数(AI)则最低(P<0.05)。survivin与NF-κB p65表达,凋亡指数与胃癌的临床分期、分化程度、淋巴结是否转移等密切相关。survivin与NF-κB p65在胃癌组织中表达情况呈正相关(r=0.289,P=0.01),survivin与NF-κB p65阳性表达的胃癌标本中凋亡指数均低于阴性表达的胃癌组织(P值均<0.01)。结论 survivin及NF-κB p65在胃癌组织中特异性高表达,对胃癌的发生、发展起促进作用,两者相互协同抑制肿瘤细胞凋亡可能是其中机制之一。联合检测survivin及NF-κB p65可能有助于评估胃癌的转移及预后。     

硼替佐米对混合淋巴细胞培养体系细胞活性影响的研究

目的：探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米对混合淋巴细胞（MLC）培养体系细胞活性、细胞凋亡率的影响。方法：体外建立单向混合淋巴细胞培养体系,分别用0、2、4、8nmol/L的硼替佐米干预培养体系,在不同的时间点收集细胞,采用CCK-8法检测细胞活性、流式细胞术检测细胞凋亡率、Western印迹法检测胞内NF-κBP65表达。结果：（1）硼替佐米可明显抑制MLC体系细胞增殖（P＆lt;0.05）,对MLC体系细胞活性的抑制作用表现为剂量依赖关系,8nmol/L硼替佐米作用24h后细胞活性抑制率为41.35%。（2）硼替佐米作用于细胞后细胞凋亡率增加（P＆lt;0.05）,8nmol/L硼替佐米作用36h细胞凋亡率为（61.67±3.21）%。（3）硼替佐米作用后胞内NF-κBP65的表达下降（P＆lt;0.05）。结论：硼替佐米能通过阻断NF-κB的活化而抑制MLC体系细胞活性,诱导细胞凋亡。     

硼替佐米对K562细胞株DNA甲基转移酶表达的影响

目的探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib,商品名:万珂)对K562细胞株DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMTs)表达、细胞凋亡的影响。方法常规体外培养白血病K562细胞株,随机将处于对数生长期的细胞分为12h、24h、36h 3个作用时间组,予以不同浓度的硼替佐米:0,6,20,60nmol·L-1,Western印迹法检测胞内DNMT1的表达,流式细胞术检测细胞凋亡。结果与阴性对照组相比,硼替佐米可显著抑制DNMT1表达。硼替佐米作用于细胞12、24、36h后细胞凋亡率逐渐增加,60nmol·L-1硼替佐米作用36h后细胞凋亡率为(61.68±3.20)%;结论硼替佐米抑制K562细胞株DNMT1表达,诱导细胞凋亡,该作用呈浓度依赖性。     

硼替佐米对K562细胞株DNA甲基转移酶表达的影响

目的探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib,商品名:万珂)对K562细胞株DNA甲基转移酶(DNMTs)表达、细胞凋亡的影响。方法常规体外培养白血病K562细胞株,随机将处于对数生长期的细胞分为12、24、36h3个作用时间组,予以不同浓度的硼替佐米:0,6,20,60nmol/L,蛋白印迹法检测胞内DNMT1的表达,流式细胞术检测细胞凋亡。结果与阴性对照组相比,硼替佐米可显著抑制DNMT1表达。硼替佐米作用于细胞12、24、36h后细胞凋亡率逐渐增加,60nmol/L硼替佐米作用36h后细胞凋亡率为(61.68±3.20)%。结论硼替佐米抑制K562细胞株DNMT1表达,诱导细胞凋亡,该作用呈浓度依赖性。     

硼替佐米对骨髓间充质干细胞VEGF表达的影响

目的研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米对骨髓间充质干细胞(BMMSC)生长增殖能力及其对血管内皮生长因子(VEGF)基因表达水平的影响。方法通过密度梯度离心法分离体外培养BMMSC,运用MTT法检测硼替佐米对体外培养的BMMSC的生长抑制作用,RT-PCR方法检测BMMSC经硼替佐米(2.5nmol/L)处理后VEGF mRNA表达水平的变化。结果硼替佐米对BMMSC的生长抑制作用呈时间、剂量依赖性,VEGF mRNA相对表达量在硼替佐米处理后减少(P<0.05)。结论硼替佐米可抑制BMMSC的生长,降低其VEGF的表达。     

硼替佐米对多发性骨髓瘤患者止凝血功能的影响

目的：观察硼替佐米对多发性骨髓瘤患者止凝血功能的影响。方法：选取我院在2012年8月～2016年4月收治的38例多发性骨髓瘤患者作为本文研究对象,动态检测多发性骨髓瘤患者静脉滴注硼替佐米的前后血浆ET-1、TM、血小板MAR及患者的Fbg含量、抗凝因子、凝血因子的活性状况。结果：检测后发现,滴注硼替佐米1h后,患者凝血酶蛋白调节水平明显升高,输注前后差异明显,具有统计学意义（P<0.05）;静脉滴注硼替佐米血小板的聚集效率虽降低,但无显著变化,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：针对多发性骨髓瘤采取静脉滴注硼替佐米进行治疗能够有效控制血小板的聚集,并改变血管内皮细胞抗凝血的活性,使多发性骨髓瘤患者能够减少静脉血栓等并发症,降低其他并发症的发病风险。     

血根碱抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移和细胞周期的研究

目的探究血根碱对胃癌细胞增殖、侵袭及细胞周期的影响机制。方法采用MTT法检测血根碱(3、6、9μmol·L~(-1))对胃癌SGC-7901细胞活性的抑制作用;划痕法和流式细胞术检测血根碱对细胞的迁移和周期的影响; Western blot法检测迁移及细胞周期相关蛋白MMP-2、MMP-9、cyclin D1、CDK4及p16的蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,不同浓度的血根碱作用24 h后,随着药物浓度的增加,细胞活性明显降低,分别为82. 6%、63. 1%、46. 5%,有显著性差异(P <0. 05);流式细胞术结果显示,与空白对照组相比,血根碱(3、6、9μmol·L~(-1))处理胃癌细胞后,处于G1期的细胞比例明显升高(P <0. 05);划痕结果显示,与空白对照组相比,血根碱处理后胃癌细胞的迁移能力明显降低;血根碱作用后,MMP-2、MMP-9、cyclin D1、CDK4的蛋白表达量明显下调(P <0. 05),p16的蛋白表达量明显上调(P <0. 05)。结论血根碱在体外明显抑制SGC-7901细胞增殖,降低细胞的迁移能力,诱导细胞在G1期阻滞,其抗胃癌作用与其调控MMP-2、MMP-9、cyclin D1、CDK4及p16的蛋白表达有关。     

硼替佐米对复发、难治性多发性骨髓瘤患者生存质量的影响

目的 探讨硼替佐米对复发、难治性多发性骨髓瘤患者生存质量的影响及相关不良反应.方法 将40例复发、难治性多发性骨髓瘤患者分为治疗组、对照组,每组20例,分别予相应的治疗后,采用世界卫生组织生存质量测定量表简表( WHO QOL-BREF)、世界卫生组织(WHO)化疗药物不良反应标准判断对患者的生存质量、治疗相关不良反应...     

硼替佐米治疗多发性骨髓瘤疗效及影响因素分析

目的观察硼替佐米治疗多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)的疗效及影响因素。方法初治MM患者18例,复发、难治MM患者13例,均接受硼替佐米联合地塞米松(VD)方案治疗,21 d为1个疗程。结果平均随访14(6～36)个月,总反应率77.6%,完全缓解率(CR)6.45%、非常好的部分缓解率(VGPR)22.6%、部分缓解率(PR)48.4%。初治组疗效优于复发难治组;轻链型患者总反应率和CR率均明显高于非轻链型患者。发病或治疗过程中出现严重贫血、血β2微球蛋白(β2-MG)增高、高钙血症和肾功损害者,多数出现疾病进展,是死亡的主要原因。不良反应主要为胃肠道症状、周围神经病变、血小板减少、感染等,经对症治疗或推迟化疗后均可恢复。结论硼替佐米对初发及难治复发多发性骨髓瘤的疗效较好,对治疗相关不良反应患者可耐受,在轻链型患者疗效更加显著。有严重贫血、β2-MG升高、肾功能损害、高钙血症的患者治疗效果不理想,其远期疗效有待进一步观察评价。     

低氧状态下As_2O_3对人胃癌细胞SGC-7901抑制作用研究

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)在低氧状态下对体外培养的人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制及凋亡的影响。方法:用氯化钴建立低氧模型,将细胞分为常氧组、低氧组、低氧加药(0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μmol·L-1 As2O3)组,作用于胃癌细胞24、48、72h后用MTT法检测细胞光密度并计算抑制率,染色法检测细胞凋亡率。结果:作用24、48、72h后,低氧加药组中10.0μmol·L-1浓度抑制率分别为31.99%、55.98%和72.40%,凋亡率分别为(42.88±1.72)%、(56.48±1.48)%和(65.52±1.00)%,而低氧组则分别为4.04%、6.65%和8.11%,(2.08±0.28)%、(2.44±0.51)%和(2.76±0.67)%,两组比较差异具有显著性(P<0.05)。结论:低氧状态下As2O3对人胃癌细胞SGC-7901生长具有抑制和诱导凋亡作用,该作用可能是As2O3产生抗肿瘤效果的生物学基础。     

硼替佐米治疗多发性骨髓瘤的临床观察及护理

目的:观察硼替佐米联合地塞米松及沙利度胺治疗多发性骨髓瘤的疗效与安全性。方法:回顾性分析15例接受硼替佐米联合地塞米松及沙利度胺方案治疗的多发性骨髓瘤患者的临床资料。结果:15例患者接受治疗2～6个疗程。总有效率为80%,其中完全缓解(CR)6例(40%),非常好的部分缓解(VGPR)2例(13%),部分缓解(PR)2例(13%),轻微反应(MR)1例(7%),疾病稳定(SD)1例(7%)。治疗后骨髓瘤细胞、血清M蛋白量、血沉(ESR)均较治疗前下降,经统计学分析差异有统计学意义(P<0.01)。治疗的主要不良反应是感染、乏力、血小板减少和肢体麻木等,但可以耐受。结论:硼替佐米联合地塞米松及沙利度胺方案治疗多发性骨髓瘤安全有效,症状护理、饮食护理、口腔及肛周护理,有助于化疗取得较好的效果。     

左金方及其组方成分对人胃癌细胞SGC-7901凋亡及膜电位的影响

目的比较左金方及其组方成分(黄连、吴茱萸及巴马汀、小檗碱、药根碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱)对人胃癌细胞SGC-7901生长的活性抑制、凋亡诱导和膜电位的影响。方法采用MTT比色法观察受试药物对SGC-7901的生长抑制情况;流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析细胞凋亡率;以及JC-1试剂盒测定细胞膜电位。结果左金方、黄连、巴马汀和小檗碱分别作用SGC-7901细胞后,均能抑制细胞活性,且呈时间依赖性;1.0 mg·m L-1左金方和对应浓度的黄连(0.857 mg·m L-1)、巴马汀(9.19μg·m L-1)、小檗碱(39.85μg·m L-1)作用于SGC-7901细胞48 h,细胞凋亡率分别为(36.40±1.59)%,(21.90±0.27)%,(9.32±2.58)%和(13.89±3.56)%,与对照组(1.69±1.91)%比较差异均有统计学意义(P<0.01),左金方与黄连、巴马汀、小檗碱组间比较差异亦具有统计学意义(P<0.01)。对应浓度的吴茱萸(0.143mg·m L-1)、药根碱(4.86μg·m L-1)、吴茱萸碱(0.17μg·m L-1)与吴茱萸次碱(0.19μg·m L-1)几乎无作用。JC-1染色检测结果显示,左金方及相应浓度的黄连、巴马汀和小檗碱作用SGC-790l细胞4 h后,可以明显引起细胞线粒体膜电位的下降,实验结果与凋亡检测结果相一致。结论左金方、黄连、巴马汀和小檗碱均能通过降低细胞线粒体膜电位,诱导胃癌细胞的凋亡,且左金方的作用优于黄连、小檗碱和巴马汀,但吴茱萸及其有效成分几乎无作用。     

减低剂量硼替佐米治疗多发性骨髓瘤对预后的影响

目的探讨减低剂量硼替佐米治疗多发性骨髓瘤是否影响患者预后。方法 41例MM患者,分成减低硼替佐米剂量组与常规剂量组,予硼替佐米联合化疗4疗程,检测近期的有效率与完全缓解率;随访3年,观察疾病早期复发率、3年无病生存率、病死率及化疗后的神经毒性反应发生率。结果 1减低剂量组有效率为81.82%,完全缓解率36.36%;常规剂量组,有效率与完全缓解率分别为84.21%与36.84%,两组相比近期疗效无显著性差异(P>0.05)。2低剂量组疾病早期复发率为18.18%,3年无病生存率为59.10%、病死率为13.64%;常规剂量组疾病早期复发率13.64%,3年无病生存率为63.16%,病死率为10.53%,二者相比远期疗效亦无显著性差异(P>0.05)。3减低剂量组周围神经损害发生率为9.09%;常规剂量组为36.84%,明显高于低硼替佐米剂量组(P<0.05)。结论适当降低硼替佐米剂量,并不影响近期疗效,3年远期疗效指标亦无显著差异,还能减轻硼替佐米剂量组周围神经损害。