宫颈癌前病变和宫颈癌组织中凋亡相关基因survivin的表达及其与人乳头状瘤病毒感染的关系

目的探讨凋亡相关基因survivin在宫颈癌前病变和宫颈癌组织中的表达及其与人乳头状瘤病毒（HPV）感染的相关性.方法选取76例宫颈癌前病变或宫颈癌患者,另取10例正常宫颈组织作为对照.应用免疫组织化学SP法检测各组宫颈组织中凋亡相关基因survivin的表达;设计高危型HPV（HPV16,18,31,33,58等）通用引物,以touch-down PCR法检测各组宫颈组织中高危型HPV的感染率.结果（1）从正常宫颈→癌前病变→宫颈癌,survivin表达逐渐增强（P＜0.05）;（2）survivin表达与宫颈癌组织学分级有关（P＜0.05）,而与年龄、临床分期及组织学分型无关（P＞0.05）;（3）从正常宫颈→癌前病变→宫颈癌,高危型HPV阳性率逐渐升高（P＜0.05）;（4）高危型HPV感染率在不同年龄、临床分期、组织学分级及组织学分型中,均无统计学差异（P＞0.05）;（5）survivin与高危型HPV在宫颈癌组织中的表达呈正相关（P＜0.05）.结论survivin表达及高危型HPV感染可能与宫颈癌的发生、发展密切相关,两者在宫颈癌的发病机制中可能起着协同作用.     

SALL3甲基化与宫颈癌的相关性

目的 检测正常宫颈组织、宫颈癌组织及宫颈癌细胞系中SALL3基因启动子区的甲基化状态,探讨其甲基化状态与SALL3基因表达的关系。方法 采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)分析正常宫颈、宫颈癌组织及宫颈癌细胞系中SALL3基因启动子区DNA的甲基化状态,RT-PCR检测宫颈癌细胞系、宫颈癌组织及正常宫颈组织中SALL3基因mRNA表达。 结果 宫颈癌和癌旁组织中的SALL3基因启动子区甲基化水平分别为0.60(IQR:0.73,秩均值:16.70)(P=0.046)和0.82(IQR:0.50,秩均值:17.15)(P=0.039),均显著高于正常宫颈组织的0.03(IQR:0.39,秩均值:8.44)。宫颈癌及癌旁组织中SALL3蛋白的表达分别为0.10(IQR:0.17,秩均值:8.40)(P=0.012)和0.26(IQR:0.21,秩均值:15.6)(P=0.000),均显著低于正常宫颈组织的0.57(IQR:0.73,秩均值:20.75)。给予0、5、10 μmol/L 5-Azacytidine去甲基化处理HeLa及SiHa细胞后,HeLa(F=28.704,P=0.001)和SiHa细胞(F=29.783,P=0.002)中SALL3 mRNA的表达水平均随5-Azacytidine作用浓度的升高而升高。与高危型人乳头瘤病毒(HPV)阳性组织相比,HPV阴性宫颈组织中SALL3基因启动子区的甲基化水平明显降低(P=0.014),蛋白表达水平明显升高(P=0.021)。结论 宫颈癌组织中SALL3基因启动子区的DNA高甲基化使其表达沉默,高危型HPV感染可能通过增加SALL3启动子区甲基化使其沉默促进宫颈癌的发生。     

DNA定量分析联合hMSH6检测在宫颈癌筛查中的意义

目的 探讨DNA异倍体分析与hMSH6及HPV在宫颈癌变过程中的相关性及临床意义。方法 采用高危型HPV-DNA检测及免疫组化hMSH6染色,分析不同病变宫颈组织中hMSH6表达、HPV感染情况及相关性。结果 以DNA异倍体出现和中量DNA异倍体出现为活检标准,宫颈病变的特异性和敏感性分别为25.86%和77.59%。提示中量以上DNA异倍体出现对宫颈病变筛查具有较高的诊断价值。多量、中量异倍体组hMSH6阳性率分别为75％和85.71%,与对照组间比较,P＜0.05。多量、中量DNA异倍体组HPV感染率分别为92.86%和76.19%,与对照组间比较,P＜0.05。HPV感染多量倍体异常组hMSH6阳性率为90.38%,与无HPV感染多量倍体异常组MSH6阳性率25%比较,P＜0.05。结论 HPV联合hMSH6检测是针对病因的检测,敏感性高。HPV感染导致hMSH6蛋白高表达,有望为宫颈癌的防治提供参考依据。     

人类白细胞抗原-E在宫颈癌中的表达及意义

目的 探讨人类白细胞抗原(HLA-E)蛋白在宫颈癌、宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)中的表达,及其与宫颈癌临床病理特点的关系。 方法 采用免疫组织化学染色检测HLA-E蛋白在18例HSIL病变宫颈组织、74例宫颈癌癌灶及其对应的20例癌旁正常宫颈组织中的表达,并评价其表达水平与宫颈癌的临床病理特点(临床分期、组织学类型、肿瘤分化程度、肿瘤直径大小、淋巴结转移、肌层浸润深度)的相关性。 结果 免疫组织化学染色结果显示,HLA-E蛋白在HSIL及宫颈癌患者病变组织中的表达水平明显高于癌旁正常宫颈组织(P=0.00),HLA-E蛋白在宫颈癌患者中的表达亦高于HSIL患者(P<0.01)。HLA-E蛋白的表达水平与宫颈癌的临床分期、肿瘤直径大小以及肌层浸润深度密切相关(P均<0.05),而与组织学类型、组织分化程度及淋巴结转移与否无关(P均>0.05)。 结论 高表达的HLA-E参与宫颈癌的免疫逃逸机制,通过改变患者的免疫状态可为宫颈癌的治疗提供新的方向和思路。     

妊娠高血压患者胎盘组织基质金属蛋白酶-9与肿瘤坏死因子-α的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在妊娠期高血压疾病(简称妊高征)发病机制中的作用。方法 采用免疫组化法检测57例妊高征患者和24例正常妊娠产妇胎盘绒毛上皮组织中MMP-9、TNF-α的表达。结果 轻度妊高征组MMP-9的阳性表达与对照组相比,差异无显著性(P>0.05),而中、重度妊高征组阳性表达明显弱于正常妊娠组(P<0.01),且中、重度妊高征组间比较差异也有显著性(P<0.05)。对照组与轻、中、重度妊高征患者胎盘组织TNF-α表达水平比较,差异有显著性,(分别为P<0.05、P<0.01、P<0.01),且妊高征组中不同程度组间比较,差异也有极显著性(P<0.01)。对照组和轻度妊高征组,MMP-9与TNF-α表达无相关性(r=0.287、P>0.05及r=0.382、P>0.05),但中、重度妊高征患者,MMP-9与TNF-α表达水平存在显著的负相关性(r=-0.563、P<0.05及r=-0.681、P<0.01)。结论 妊高征患者MMP-9表达下降,胎盘不完全侵入,胎盘局部缺血、缺氧,TNF-α表达增多,可能是引发妊高征的原因之一。     

宫颈脱落细胞学阴性生殖道高危型人乳头瘤病毒阳性患者的临床病理特征

目的 探讨宫颈脱落细胞学阴性（pap smear negative,Pap-）、人乳头瘤病毒阳性（high risk human papilloma virus positive,HPV+）女性的临床病理特征。方法 纳入1 128例Pap-/HPV+女性,阴道镜下可疑部位活检。分析Pap-/HPV+状态下HPV的流行病学特征及宫颈病变的临床病理特征。结果 Pap-/HPV+女性HPV的流行特征,HPV-16所占比例较高（χ²=16.81,P=0.000）,患者年龄偏大（χ²=20.72,P=0.000）,单一病毒感染比例较高（χ²=8.93,P=0.01）。506例患者接受阴道镜下活检,高度鳞状上皮病变（high grade squamous intraepithelial lesion,HSIL）病例254例（50.19%）,其中7例宫颈浸润癌。HSIL的发生率与年龄有关,年轻患者HSIL比例更高,与年龄呈负相关（r=-0.254,P=0.000）。各HPV亚型发生HSIL的比例不同,HPV-16型发生HSIL的比例最高（64.7%）。与对照组比较,Pap-/HPV+女性感染HPV-16、18、31、33、52、58型显著增加HSIL病变的危险。结论 Pap-/HPV+女性HPV的流行病学特征不同,具有宫颈高级别病变的危险。     

妇科门诊女性人乳头瘤病毒感染型别分布特征及临床分析

目的 分析妇科门诊女性人乳头瘤病毒(HPV)感染率、HPV型别分布及不同人群、不同年龄组HPV感染特征,探讨其与宫颈病变的关系.方法 采用导流杂交基因芯片法对妇科门诊5 869名女性进行HPV分型检测.结果 5 869例样本中,HPV总感染率为23.6%,HPV高危型检出率占19.6%,低危型为6.7%,HPV感染率较高型别依次为HPV16、52、11、58、6、18、53、33;1385例HPV阳性中,存在HPV亚型单一感染(72.1%)、双重感染(21.3%)及三重以上感染(6.6%).宫颈癌患者HPV感染率(91.7%)明显高于宫颈炎患者(χ²=207.426, P<0.001)和健康体检者(χ²=252.211, P<0.001),宫颈癌患者HPV感染率较高亚型为HPV16、18、31、33、58、45.不同年龄女性HPV的感染率差异有统计学意义(χ²=36.486, P<0.01),≤25岁HPV感染率最高(32.5%),其次是>50岁(28.4%).结论 妇科门诊女性HPV感染以高危型为主,低危型为次,同时存在HPV高、低危亚型混合感染以及多重感染,HPV感染型别分布具有人群特点和地域差异;不同人群HPV感染率存在差异,宫颈癌患者HPV感染率最高,除HPV16、18外,其他HPV高危亚型也与宫颈病变及宫颈癌密切相关;≤25岁和>50岁是HPV感染高危人群.     

HPV感染与宫颈癌及癌前病变相关性临床分析

目的:探讨宫颈组织高危型HPV(16/18型)感染与宫颈癌及癌前病变发生的相关性临床分析。方法:运用现代宫颈癌及癌前病变的筛查方法检测宫颈组织HPV16/18型的表达水平及病变情况,判定HPV16/18型感染对宫颈癌及癌前病变的筛查价值。结果:HPV分型检测在诊断宫颈癌前病变中具有重要的指导作用。结论:积极防治HPV感染对于预防宫颈癌发生有重要意义。     

宫颈癌患者盆腔淋巴结HPV-DNA检测的临床意义

目的 探讨宫颈癌患者盆腔淋巴结人类乳头瘤病毒(HPV)-DNA检测的临床意义。方法 采用GP-PCR方法扩增宫颈癌患者盆腔淋巴结组织HPV-DNAL1区基因序列,通过序列分析对HPV进行型别鉴定,分析淋巴结HPV阳性率与淋巴转移组织病理学结果之间的关系。结果 40例宫颈癌患者盆腔淋巴结HPV-DNA的检出率为40%;组织病理学发现淋巴转移的10例患者淋巴结HPV-DNA检测均为阳性;宫颈癌病灶中检测到HPV18型的患者盆腔淋巴结也都可检测到HPV18型。结论 盆腔淋巴结中检出HPV-DNA阳性早于组织病理学出现转移,因此检测盆腔淋巴结中HPV-DNA对早期的淋巴结转移具有提示作用,有助于发现组织病理学不易发现的淋巴结隐匿性转移,提示预后不良。宫颈检测到HPV18型的患者更易发生淋巴转移,是预后不良的一种高危类型。     

脑特异性血管抑制因子-1在宫颈鳞癌中的表达及其与人乳头瘤病毒感染的关系

目的 观察脑特异性血管抑制因子-1（brain-specific angiogenesis inhibitor-1,BAI-1）在宫颈病变组织中的表达差异,分析其在宫颈鳞癌发生发展中存在的意义及与人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）感染的关系。方法 分别通过SP法和PCR反向点杂交法对BAI-1和HPV在30例正常宫颈组织、61例宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）组织（CIN Ⅰ27例,CIN Ⅱ~Ⅲ34例）以及54例宫颈鳞癌组织（Ⅰ~Ⅱ期34例,Ⅲ~Ⅳ期20例）中的表达和感染情况进行总结分析,从而探讨其与宫颈鳞癌发生发展的关系及与HPV感染的相关性。结果 BAI-1在不同宫颈组织中的阳性表达率分别为96.67%、74.07%、44.11%、18.52%,而HPV的阳性感染率为6.67%、37.04%、76.47%、100%。分析数据得出,随着宫颈病变的进展,BAI-1的阳性表达率逐渐在下降,而HPV的阳性感染率在上升,组间差异均有统计学意义（P<0.01）;且BAI-1与宫颈鳞癌的临床分期有关（χ²=7.219,P=0.007）,与年龄、分化程度及有无淋巴结转移无关;在不同宫颈组织中BAI-1的阳性表达与HPV的阳性感染呈负相关（r_s=-0.486,P<0.01）。结论 BAI-1可能参与HPV感染导致的宫颈鳞癌的早期发生发展过程,为宫颈鳞癌的诊治及预后提供了新的方向。     

Survivin在宫颈癌中的表达及临床意义

目的研究凋亡抑制因子survivin在早期宫颈癌组织中的表达和意义。方法用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP法)检测53例早期宫颈癌(ICC)和10例癌旁正常宫颈上皮(NEC)中survivin表达情况。结果(1)宫颈癌组织survivin阳性表达率67.9%。在癌旁正常宫颈组织未发现阳性表达。(2)survivin的表达与年龄、FIGO分期、病理分级、淋巴结转移、术前治疗及预后密切相关(P<0.05),与组织学类型无相关性(P>0.05)。结论survivin可能在宫颈癌的发生发展过程中起关键作用,检测其表达水平,对于宫颈癌的诊断、恶性程度及预后的判断有一定价值。     

Survivin、HPV 16-E7蛋白、VEGF在宫颈鳞癌及癌前病变中的表达及临床意义

目的探讨Survivin、HPV16-E7蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤样病变组织中的表达及在宫颈癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化SP法检测50例宫颈鳞癌、90例宫颈上皮内瘤变(其中CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ各为30例)中Survivin、HPV16-E7蛋白及VEGF的表达,另取正常宫颈者20例为对照组。结果 Survivin、HPV16-E7蛋白及VEGF在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变(CINⅡ、CINⅢ)中的表达均随宫颈病变而呈递增趋势(P<0.05);Survivin的高表达与分化程度、临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05);VEGF的高表达与分化程度、临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05);HPV16-E7蛋白的高表达与分化程度、临床分期及淋巴结转移无关(P>0.05)。Survivin与HPV16-E7蛋白和VEGF的表达间存在正相关(r=0.417,P<0.01;r=0.378,P<0.01)。结论 Survivin、HPV16-E7蛋白及VEGF与宫颈癌的发生、发展密切相关。     

精神分裂症患者与正常人自尊水平的对照研究

目的 比较精神分裂症患者与正常人群自尊水平的差异,探讨精神分裂症患者自尊水平与症状的关系。方法 采用Rosenberg自尊量表(Rosenberg Self-esteem Scale, RSES)及阳性和阴性症状量表(Positive and Negative Syndrome Scale, PANSS),对90例精神分裂症患者及30例正常对照人群的自尊水平及症状进行评估。结果 精神分裂症患者与正常对照人群进行组间的比较,两组间在总分和正性因子得分比较,差异无统计学意义(总分P>0.05,正因子得分P>0.05),两组间在负性因子得分比较,差异有统计学意义(P<0.05);Rosenberg量表总分与精神分裂症的概念紊乱症状有显著相关性(P<0.05),正性因子分与概念紊乱、兴奋、夸大症状评分有显著相关性(P<0.05),负性因子分与兴奋及刻板思维症状评分有显著的相关性(P<0.05)。结论 精神分裂症患者与正常人群的自尊总体水平差异无统计学意义,但是自尊成分与正常人群差异有统计学意义,体现在负性自尊水平高于正常人。精神分裂症患者自尊水平与概念紊乱症状有显著的相关性。     

同期放化疗治疗中晚期鼻咽癌临床研究

目的 观察及评价同期放化疗治疗中晚期鼻咽癌(Ⅲ或Ⅳa期)的疗效。方法 80例确诊为Ⅲ、Ⅳa期的中晚期鼻咽癌患者随机分为同期放化疗组(A组)和单纯放疗组(B组),每组40例。A组给予甲酰四氢叶酸+5-氟脲嘧啶+顺铂联合化疗,4周后给予第二程化疗;B组只给单纯放射治疗。两组放疗方法相同,为常规分割剂量,鼻咽放疗剂量为66~76 Gy/6.6~7.6周,颈淋巴结放疗剂量为60~72 Gy/6.0~7.2周。结果 所有病人均顺利完成既定治疗方案。A组同B组治疗结束时鼻咽原发灶和颈淋巴结消退率分别是77.5% vs 60.0%(P>0.05)和92.5% vs 70.0%(P<0.05);治疗后3个月,两组鼻咽原发灶和颈淋巴结消退率分别为92.5% vs 72.5%(P<0.05)和100% vs 85.0%(P<0.05)。毒副作用:A组胃肠道反应、骨髓毒性高于B组(P<0.01);两组口腔粘膜及皮肤反应程度相当。结论 同期放化疗可以提高中晚期(Ⅲ或Ⅳa期)鼻咽癌患者的肿瘤消退率,其毒性反应可以耐受,不影响放疗的顺利完成。放疗前诱导化疗能缩短治疗时间,是鼻咽癌综合治疗的可行性方法。     

应用生物信息学方法分析肾透明细胞癌中FKBP11的表达

目的 探讨FK506结合蛋白11(FKBP11)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达,并分析FKBP11表达水平与患者临床病理特征之间的相关性。 方法 利用Ualcan、GEPIA 数据库和HPA数据库分析FKBP11在ccRCC 组织中mRNA和蛋白表达水平的变化、FKBP11表达与ccRCC 临床及病理特征的相关性及其对患者预后的影响,通过这几个维度分析FKBP11在ccRCC中的作用。 结果 FKBP11在ccRCC中mRNA的表达较正常肾组织升高,通过Ualcan数据库检测发现FKBP11在ccRCC病理分级中正常肾组织与Grade1、Grade2、Grade3、Grade4中表达差异分别为P=5.78E-05、P=1.62E-12、P=1.11E-16、P=1.63E-12,在ccRCC亚型(ccA和ccB)中正常与ccA及ccB中表达差异均为P=1.62E-12, TNM分期中正常与N0及N1分期各亚组之间的表达有差异(P<1E-12、P=8.26E-05),以上差异均具有统计学意义(P<0.05),且随着ccRCC病理分级的升高,FKBP11的表达存在上调趋势,其表达水平与ccRCC的进展相关,而FKBP11的表达水平与年龄、性别、人种各亚组之间相互比较差异均无统计学意义(P>0.05)。FKBP11高表达患者的总生存率较低表达组患者差异有统计学意义(P<0.01)。 结论 通过检索分析数据库信息发现FKBP11在ccRCC中呈高表达,其在ccRCC的不同分期、病理分级及亚型各亚组之间存在表达差异,较差的病理分级及分期FKBP11的表达较高,且高表达的FKBP11的ccRCC患者预后较差。     

survivin、bcl-2在宫颈癌和癌前病变组织中的表达及与人乳头瘤病毒16/18感染的相关性

目的 探讨宫颈癌中survivin、bcl-2、人乳头瘤病毒(HPV)16/18的表达及其相关性.方法 采用原位杂交法检测74例宫颈上皮内瘤变(CIN)、81例宫颈癌及20名正常宫颈组织(对照组)中survivin mRNA及HPV16/18 DNA的表达.采用免疫组织化学法检测各组中bcl-2蛋白的表达.结果 survivin mRNA、bcl-2蛋白及HPV16/18在CIN中的表达率分别为44.6%、39.2%和41.0%,在宫颈痛中的表达率分别为77.8%、70.4%和81.2%.3者在正常宫颈组织、CIN及宫颈癌中的表达呈逐渐增强(P＜0.01).survivin mRNA、bcl-2蛋白在CINⅢ级的阳性表达率高于CIN I～Ⅱ级,在宫颈癌中,Ⅱb～Ⅲ期的阳性表达率高于Ⅰ～Ⅱ a期,低分化组的阳性表达率高于中至高分化组,差异均有统计学意义(均P分别＜0.05,＜0.01).survivin在有淋巴结转移组的阳性率显著高于无转移组(P＜0.01),而bcl-2的表达则与淋巴结转移无关.两者均与宫颈癌的病理类型、肿块类型无关,HPV16/18感染与宫颈癌临床分期、组织学分级及肿块类型无关(P＞0.05).在宫颈癌中survivin与bcl-2的表达与生存率均呈负相关,survivin与bcl-2及survivin与HPV16/18的表达呈正相关.结论 survivin、bcl-2及HPV16/18的异常表达参与了宫颈癌的发生发展,联合survivin、bcl-2、HPV16/18有望为宫颈恶性肿瘤的早期诊断、手术及化疗疗效的评价、预后的判断提供有力的临床指导.     

IL-17在高危型HPV阳性宫颈癌中的表达

目的： 通过检测高危型人乳头瘤病毒（HPV）阳性宫颈癌患者体内IL-17的表达水平,探讨IL-17所介导的特异性免疫反应在高危型HPV感染的宫颈癌发生、发展中可能发挥的作用。 方法： 选取高危型HPV阳性的宫颈浸润性鳞癌患者（宫颈癌组）28例、宫颈高危型HPV感染者（HPV感染组）25例以及对照组30例。 采用ELISA法检测各组患者外周血清及宫颈局部组织匀浆上清液中IL-17 的表达水平。 结果： ①宫颈癌组患者外周血清中IL-17水平较对照组明显升高（ P＜0.05）,与HPV感染组比差异无统计学意义（均P＞0.05）,HPV感染组与对照组间差异无统计学意义（ P＞0.05）;②各组宫颈局部组织匀浆上清液中IL-17的表达水平均明显高于外周血清表达水平,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;③宫颈局部组织匀浆上清液中IL-17表达水平各组间的差异均有统计学意义（均P＜0.05）,且宫颈癌组局部组织匀浆上清液中IL-17的表达水平高于HPV感染组,HPV感染组高于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。 结论：IL-17所介导的免疫反应可能参与并促进了高危型HPV的持续性感染,与宫颈癌的发生、发展进程相关。