普氏立克次体120×103表面抗原的N端和C端重组蛋白免疫原性的研究

目的:评价普氏立克次体120×103表面抗原的N端和C端重组蛋白的免疫原性。方法:将纯化的N端和C端重组蛋白分别免疫小鼠,采用酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光试验分析免疫小鼠的体液免疫应答水平;用MTT法评价小鼠脾淋巴细胞的增殖情况,分析免疫小鼠的细胞免疫应答水平,并采用RT-PCR方法检测免疫小鼠脾淋巴细胞被重组蛋白刺激后细胞因子的表达。结果:N端和C端重组蛋白均诱导小鼠产生较高水平的特异性IgG抗体,诱导高水平的小鼠脾淋巴细胞增殖;经两种重组蛋白刺激的小鼠脾淋巴细胞均表达了IFN-γ和IL-2。结论:普氏立克次体120×103表面抗原的N端和C端重组蛋白具有良好的免疫原性,能够诱导机体产生高水平的体液免疫和细胞免疫应答,可作为流行性斑疹伤寒亚单位疫苗的候选蛋白。     

流行性出血热灭活疫苗免疫小鼠细胞免疫应答状况的研究

为阐明流行性出血热灭活疫苗的细胞免疫保护性机制，对地鼠肾细胞培养灭活疫苗免疫小鼠的脾细胞增殖，产生白细胞介素－２（ＩＬ－２）和γ干扰素（ＩＦＮγ）的能力进行了研究，结果表明，疫苗免疫小鼠脾细胞对Ｃｏｎ Ａ及ＥＨＦ毒抗原的刺激指数均显著高于正常小鼠，两组小鼠脾细胞在ＣｏｎＡ刺激下产生ＩＬ－２和ＩＦＮγ的水平无显著差异，但免疫小鼠受ＥＨＦ病抗原刺激后产生的ＩＬ－２水平明显高于正常对照组；１５只免疫小鼠     

柘木多糖和枸杞多糖对尾吊小鼠免疫功能的防护效应

目的 研究柘木多糖和枸杞多糖对尾吊小鼠细胞免疫功能的防护作用.方法 分别以柘木多糖、枸杞多糖的高、低剂量经口给予尾吊小鼠,MTS比色法测定脾T淋巴细胞增殖,ELISA法测定培养上清中细胞因子分泌评价免疫功能.结果 尾吊7 d后,小鼠脾T淋巴细胞增殖明显降低,细胞因子IL-2和IFN-γ分泌减少,柘木多糖能提高尾吊小鼠的脾T淋巴细胞增殖及IL-2和IFN-γ分泌.结论 柘木多糖对尾吊模拟微重力小鼠细胞免疫功能有一定的防护作用.     

热休克蛋白65增强小鼠对HBV DNA 疫苗免疫反应的研究

目的:观察热休克蛋白65的真核表达载体(pHSP65)对HBV DNA疫苗诱导BALB/c小鼠(H-2d)免疫应答的调节作用。方法:肌内注射空载体pcDNA3,HBV DNA疫苗加HSP65佐剂(pHBVS2S pHSP65)或不加佐剂(pHBVS2S);ELISA法测定血清抗HBs抗体;ELISPOT检测分泌IFN-γ的脾淋巴细胞;4 h51Cr释放法检测小鼠脾细胞CTLs活性。结果:HBV DNA佐剂组免疫小鼠抗HBsAg抗体滴度虽高于不加佐剂组,但无显著性差异;其IgG1/IgG2 a的比例不同于多肽免疫组,二者分别为0.395与10。佐剂组小鼠分泌IFN-γ的脾淋巴细胞量是不加佐剂组的2~3倍。CTLs细胞杀伤活性(E∶T=100)佐剂组与不加佐剂组分别为:(53.68±7.5)%、(42.81±7.7)%,差异显著(P<0.05)。结论:HBV DNA疫苗具有较强的免疫原性,能够诱导机体产生特异性的抗体及CTLs反应;HSP65佐剂能够有效提高小鼠对DNA疫苗的细胞免疫应答,有望成为DNA疫苗的免疫佐剂。     

结核分枝杆菌Mtb8.4基因疫苗与人白细胞介素12表达质粒联合免疫的细胞免疫应答观察

目的 观察结核分枝杆菌Mtb8.4基因疫苗与人白细胞介素12(hIL-12)联合免疫小鼠所诱导的细胞免疫应答.方法 15只C57BL/6N小鼠随机分为Mtb8.4基因疫苗 hIL-12质粒组(联合免疫组)、Mtb8.4基因疫苗组、卡介苗(BCG)组、空载体组和PBS组,基因疫苗、空载体和PBS经肌内注射法免疫各组小鼠,每隔3周免疫1次,共免疫3次,BCG组经尾部皮下注射1×106 CFU BCG免疫1次.ELISA法检测小鼠脾细胞培养上清中细胞因子水平;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测免疫小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性.结果 联合免疫组能诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,免疫小鼠脾细胞培养上清液IFN-γ和IL-2水平(分别为1 493.340±8.128pg/ml、747.489±48.676pg/ml)显著高于Mtb8.4基因疫苗组,与BCG组相当,IL-4分泌减少,特异性CTL杀伤活性增强.结论 hIL-12表达质粒能够增强Mtb8.4基因疫苗所诱导的细胞免疫应答.     

哮喘模型小鼠脾脏和肺脏CD8~+T细胞的作用机制研究

目的建立哮喘小鼠模型,探讨CD8+T细胞在哮喘中的作用。方法将32只BALB/c小鼠随机均分为对照组和哮喘组,哮喘组小鼠建立哮喘模型。测定两组小鼠的气道反应性,对肺泡灌洗液(BALF)行细胞学分类和计数,观察肺组织的病理变化。用免疫磁珠纯化柱纯化两组小鼠脾、肺组织的CD8+T细胞,加入卵蛋白(OVA)刺激,用ELISA法检测培养96h后CD8+T细胞上清中IL-4、IL-10及IFN-γ的水平。结果哮喘组小鼠存在气道高反应性,证明模型构建成功。哮喘组BALF中的细胞总数和中性粒细胞、嗜酸性粒细胞的比例均较对照组明显增加(P<0.05),巨噬细胞比例明显降低(P<0.05)。哮喘组肺间质中有大量炎性细胞浸润,气道上皮损伤,杯状细胞肥大增生,有大量黏液分泌,黏膜下胶原纤维沉积。对照组无明显的炎症改变。哮喘组肺CD8+T细胞分泌的IL-4(203.20±16.59pg/ml)较对照组(3.29±1.61pg/ml)明显增加(P<0.05),IL-4在两组脾CD8+T细胞培养上清中均未检出。哮喘组脾CD8+T细胞分泌IFN-γ水平(4997.05±189.07pg/ml)较对照组(4509.73±378.10pg/m...     

白藜芦醇对辐射诱导调节T细胞紊乱的调节作用

目的观察电离辐射及白藜芦醇对调节T细胞的影响,探讨其对细胞因子TGF-β及IFN-γ的影响,阐明白藜芦醇对辐射诱导免疫抑制的改善作用。方法将24只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、照射组和照射给药组,每组8只。照射组和照射给药组接受137Cs源γ射线全身照射(6.0 Gy),对照组小鼠接受伪照射。照射前7 d及照射后28 d,每日予白藜芦醇(20 mg/kg)灌胃。末次给药后1 d,检测各组小鼠外周血CD4+CD25+细胞数量,CD4+CD25+细胞内Fox P3表达水平,脾淋巴细胞TGF-β分泌水平,以及CD8+细胞及脾淋巴细胞TNF-γ表达水平。采用单因素方差分析对3组间的细胞比例及细胞因子表达水平进行比较,组间多重比较采用LSD-t检验。结果与正常小鼠比较,电离辐射可以增高CD4+CD25+细胞在外周血单核细胞和CD4+中的比例125.0%和57.2%,增高脾细胞TGF-β水平31.4%,降低脾细胞IFN-γ表达水平26.9%,组间差异均具有统计学意义(均P0.05);白藜芦醇干预可以降低单纯照射组小鼠调节T细胞在外周血单核细胞和CD4+中的比例32.3%和27.8%,降低CD4+CD25+细胞的Fox P3阳性比例26.6%,以及脾淋巴细胞TGF-β水平62.9%,增加CD8+T细胞及脾淋巴细胞生成的IFN-γ水平133.0%和87.4%,组间差异均具有统计学意义(均P0.05)。结论白藜芦醇可以抑制调节T细胞,改善受照小鼠的免疫功能。     

贝氏柯克斯体34×103重组外膜蛋白的免疫保护性

目的原核细胞表达贝氏柯克斯体34×103外膜蛋白基因,评价34×103重组外膜蛋白的免疫保护性.方法用PCR从我国贝氏柯克斯体分离株的基因组中扩增34×103外膜蛋白基因,用该基因与原核表达质粒重组,构建重组表达质粒;用IPTG诱导重组质粒在大肠杆菌细胞内表达重组蛋白.用重组蛋白皮下接种免疫BALB/c小鼠2次,在加强免疫后的第28天,用ELISA法检测小鼠的血清特异性抗体水平以及作体外脾淋巴细胞增殖试验检查小鼠的特异性细胞免疫水平;用10 ID50贝氏柯克斯体腹腔注射攻击免疫小鼠,攻击后第7天病理学检查小鼠脏器的组织病变和染色镜检脾脏的贝氏柯克斯体.结果SDS-PAGE和免疫印迹分析证明重组质粒转化的大肠杆菌产生了34×103重组蛋白,重组蛋白能与贝氏柯克斯体感染小鼠血清发生特异性反应.ELISA法检测出免疫小鼠血清中有高滴度的抗重组蛋白抗体,免疫小鼠的体外淋巴细胞增殖水平显著高于非免疫小鼠.组织病理学检查发现免疫小鼠的肺、肝、脾无明显病变,仅个别小鼠脾脏存在少量柯克斯体,而非免疫小鼠的肺、肝、脾病变十分明显,脾脏肿大并含有大量的柯克斯体.结论重组34×103外膜蛋白具有的免疫保护性,能够诱导机体产生有效的抗贝氏柯克斯体的体液和细胞免疫应答.     

人近端肾小管上皮细胞诱导表达吲哚胺2,3-加双氧酶的实验研究

目的 了解培养的人近端肾小管上皮HK2细胞株吲哚胺2,3-加双氧酶(IDO)的诱导表达情况及其影响因素.方法 实验分为不同浓度(0、500、1 000、2 000U/ml)γ-干扰素(IFN-γ)刺激培养组和IFN-γ2 000U/ml刺激12、24、48、72h不同时点培养组,以10%胎牛血清DMEM培养基作为正常对照组.RT-PCR检测不同培养条件下HK2细胞IDO mRNA的表达,免疫细胞化学染色检测24h后HK2细胞IDO的表达,高效液相色谱法检测培养基中犬尿氨酸、色氨酸浓度.结果 正常HK2细胞不表达IDO mRNA和IDO蛋白.不同浓度IFN-γ刺激后,HK2细胞IDO mRNA 的表达呈剂量依赖性升高,与正常对照组相比差异显著(P＜0.05),同时IDO mRNA表达还呈时间依赖性地增高,以48h为最佳刺激时间.免疫组化染色显示,经IFN-γ刺激24h后,HK2细胞IDO蛋白表达增强,高效液相色谱检测显示刺激组培养基上清中犬尿氨酸特异性代谢率升高,表明表达的IDO具有生物活性,并且其活性呈IFN-γ剂量依赖性地升高.结论 IFN-γ刺激培养的HK2细胞IDO表达升高并具有活性,推测病理状态下人肾小管上皮细胞诱导表达的IDO有可能参与了肾小管-间质的病理损害过程.     

HCV HVR1相关基因诱导小鼠免疫反应的比较

目的 对小鼠进行两种基因免疫方法的比较:分别以真核质粒pcDN3.1( )为载体和以伤寒减毒活菌苗为载体,携带丙肝病毒高变区1(HVRI)相关模拟表位的DNA序列,诱导细胞免疫应答,以寻找较好的疫苗免疫途径.方法 根据HCV HVR1模拟表位的肽序列合成DNA序列,并将其连接到pcDN3.1( )(pcDN3.1-SP)真核质粒上,然后用重组质粒转化伤寒减毒活菌苗Ty21a(Ty21a-SP).Ty21a-SP和peDN3.1-SP分别经口服和肌注免疫小鼠后,杀鼠、分离脾细胞,脾细胞经混合肽刺激后,用流式细胞仪检测CD8 IFN-γ 细胞;用非放射性MTS法检测细胞增殖反应;以非放射性LDH法检测CTL反应.结果 对小鼠用pcDN3.1-SP和Tyr21a-SP免疫后,取脾淋巴细胞经混合肽刺激后,明显增殖,CD8 IFN-γ 淋巴细胞比例增高,并诱导较强的CTL反应,但pcDN3.1-SP免疫后的上述反应较Ty21a-SP免疫弱.结论 使用伤寒减毒活菌苗作为载体进行基因免疫有利于产生细胞免疫反应.     

补体受体1型的结构功能及sCR1基因克隆表达的策略

补体受体1型（Complement receptor type 1,CR1）具有外源性及内源性活性,既可灭活组装于非自身细胞膜上的C3/C5转化酶,也可灭活自身细胞膜上形成的C3/C5转化酶。CR1是唯一既对经典,替代及植物凝集素（MBL）3个补体激活途径的,对C3/C5转化酶拥有衰变加速活性,又有辅助1因子裂解C3b和C4b作用的补体调节蛋白。对补体分子的过度活化具有抑制和调节作用,在防治补体介导的缺血再灌注损伤以及异种器官移植超急性排斥反应等疾病具有广阔的应用前景。本文主要综述CR1的结构功能及生物学活性,sCR1基因的克隆与表达及在创伤、缺血再灌注损伤中的应用研究现状。     

Possibilities and limitations of radiology--CT and MRT in cases of tumors of the uterus and ovary

The author describes the present possibilities of computed tomography (CT) and of magnetic resonance (MR) tomography. MR is superior to CT in the visualisation of carcinomas of the cervix and endometrium, especially in the initial stages, whereas in the diagnosis of the spread of tumours (especially the advanced ones) CT yields results similar to those of MR. In carcinoma of the ovary, however, MR has so far not proved to be definitely superior to CT despite the multiplanar visualisation possibilities it offers. It is in fact inferior to CT especially in clarifying the extent of extrapelvic spread. In posttherapeutic diagnostics MR explores new avenues in respect of delineation between scar and recurrence, as initial investigations have shown.     

闭合性喉气管断裂伤的诊断与治疗

目的 提高对闭合性喉气管断裂伤的诊治水平.方法 报告38例闭合性喉气管断裂伤病例的临床资料,其中急性外伤16例,陈旧性外伤22例.对临床易发生的问题进行分析.结果 38例中16例急性喉外伤在24～48小时之间行手术治疗,22例陈旧性喉外伤因其它原因在32～129天后行手术治疗.35例手术成功拔管,3例因喉气管狭窄手术失败不能拔管,均为陈旧期手术患者.结论 对于急性闭合性喉气管断裂伤应根据其病情轻重程度进行早期处理,尽快恢复喉和气管通气功能,预防后遗症及并发症的发生,提高治愈率.     

Science and medicine of canoeing and kayaking

Canoeing and kayaking are upper-body sports that make varying demands on the body, depending on the type of contest and the distance covered. The shorter events (500 m) are primarily anaerobic (2 minutes of exercise), calling for powerful shoulder muscles with a high proportion of fast-twitch fibres. In contrast, 10,000 m events call for aerobic work to be performed by the arms. Such contestants need a high proportion of slow-twitch fibres, and an ability to develop close to 100% of their leg maximum oxygen intake when paddling. In slalom and whitewater contests, the value of physiological testing is somewhat limited, since performance is strongly influenced by experience and the ability to make precisely judged rapid paddling efforts under considerable emotional stress. Paddlers face dangers from their hostile cold water environment; causes of fatalities (drowning, cardiac arrest, ventricular fibrillation and hypothermia) are briefly reviewed. Medical problems include provision of adequate nutrition and a clean water supply, effects of repeated immersion (softening of the skin, blistering, paronychial infections, sinusitis, otitis), varicose veins (secondary to thoracic fixation) and hazards of exposure to fibreglass and polystyrene in the home workshop. Surgical problems include muscle sprains and mechanical injuries (haemotomas, lacerations, contusions, concussion, and fractures).     

Accuracy of digital and film panoramic radiographs for assessment of position and morphology of mandibular third molars and prevalence of dental anomalies and pathologies

OBJECTIVES: To compare the accuracy of digital and film panoramic radiographs for determining (1) the position and morphology of mandibular third molars before surgical removal and (2) the prevalence of dental anomalies and pathologies. METHODS: Three hundred and eighty-eight third mandibular molars were available for examination. Position and morphology of third molars observed on film radiographs and on digital panoramic images from five systems (DenOptix, DigiDent, Digora, Dimax2 and Orthophos Plus) were recorded by two observers and were compared with surgeons' findings at the time of the operation (gold standard). One observer further recorded the prevalence of dental anomalies and pathologies on both imaging modalities. RESULTS: Few differences were found between the digital and film-based panoramic systems in the assessment of accuracy of position and morphology of mandibular third molars. The prevalence of dental anomalies and pathologies determined with the two modalities was roughly similar. CONCLUSION: The five digital panoramic systems evaluated in this study were equally as useful for third molar treatment planning and diagnosis of dental anomalies and pathologies as conventional film-based panoramic radiographs.     

快餐消费者的消费行为心理及对营养的认知调查

 目的 调查分析快餐消费者对快餐的营养认知、消费行为和消费心理情况,引导消费者正确处理快餐与日常正餐的关系。方法 采用随机抽样的方法,选择北京地区中、西式快餐各3个品牌,每个品牌选择4家分店,采用入店访问式现场调查方法,数据处理采用频数分析法。结果 共调查1722名,问卷合格率98.6%,选择中西式快餐的人群多为20～39岁者(68%),大多数消费者因为“口味喜欢”(66.4%)而选择快餐,且优选“优惠套餐”(48.2%),为了“省事方便”(64.3%)。消费快餐的频率多数是每月就餐1～2次(35.1%),多数优选“西式快餐店的中式食品”(60.3%),对中西式快餐店中的健康宣传语 “偶尔看看”(55.9%),但多数认为起到了“警示和营养宣教的作用”(64.1%)。大多数消费者认为,媒体对西式快餐的报道未影响他们对西式快餐的正常消费(44.9%);但中式快餐的负面报道却影响了消费者的正常消费(43.9%),理由多数是“影响健康”(37.9%)。快餐消费人群中体型正常者居多,但40岁以上者超重百分比大于20～39岁者。结论 中西式快餐消费人群为20～39岁者,消费频率不高,多数因为“口味喜欢”而选择中式或西式快餐,基本不存在对中式或西式快餐食品安全误解的问题,对快餐店的营养健康宣传语持赞同态度,但如何处理快餐与正常餐的搭配问题,存在误区。