当归四逆汤联合薄芝糖肽注射液治疗局限性硬皮病疗效及对CTGF、TGF-β_1水平的影响

目的观察当归四逆汤联合薄芝糖肽注射液治疗局限性硬皮病疗效及对结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平的影响。方法将100例局限性硬皮病患者随机分为2组,对照组50例给予D-青霉胺口服,观察组50例在此基础上给予当归四逆汤口服和薄芝糖肽注射液皮损部位点状注射,2组治疗时间均为12周。观察2组治疗前后中医证候积分、Rodnan积分及CTGF、TGF-β1水平变化情况,统计2组近期疗效、自身抗体转阴率及不良反应发生情况。结果 2组治疗后各项中医证候积分和Rodnan积分均显著降低(P均<0.05),且观察组治疗后各项积分均显著低于对照组(P均<0.05);2组治疗后CTGF、TGF-β1水平均显著降低(P<0.05),且观察组治疗后各项指标水平均显著低于对照组(P<0.05);观察组近期治疗总有效率和自身抗体转阴率均显著高于对照组(P均<0.05),2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论当归四逆汤联合薄芝糖肽注射液治疗局限性硬皮病可显著减轻临床症状体征,促进自身抗体转阴,调节CTGF和TGF-β1水平,且安全。     

当归多糖及小分子提取物对TGF-β1诱导的HELF表达α-SMA、CTGF的影响

目的:观察当归多糖及小分子提取物对TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞HELF的增殖及α-SMA、CTGF影响的作用。方法:建立肺纤维化细胞模型,分为空白组、模型组、12.5μg/ml当归多糖组、25μg/ml当归多糖组、50μg/ml当归多糖组、25μg/ml当归小分子提取物组、50μg/ml当归小分子提取物组、100μg/ml当归小分子提取物组。结合形态观察,检测细胞增殖、羟脯氨酸、MMP-9、TIMP-1含量及α-SMA、CTGF蛋白表达的变化。结果:与空白组比较,各组细胞吸光度值、羟脯氨酸、MMP-9、TIMP-1含量、CTGF、α-SMA蛋白表达均明显增高。与模型组比较,25μg/ml当归多糖组、50μg/ml当归小分子提取物组细胞吸光度值、羟脯氨酸含量、CTGF、α-SMA蛋白表达均降低,50μg/ml当归小分子提取物组MMP-9含量下降,25μg/ml当归多糖组、50μg/ml当归小分子提取物组TIMP-1含量均增高。形态学观察,模型组细胞数量增多,体积增大,生长旺盛。25μg/ml当归多糖组、50μg/ml当归小分子提取物组细胞数量较少,体积较小。结论:当归多糖及小分子提取物能抑制TGF-β1诱导的HELF增殖,减少羟脯氨酸的合成,其作用可能与下调α-SMA、CTGF表达,调节维持MMP-9/TIMP-1之间的平衡有关。     

抗纤灵对5/6肾切除小鼠转化生长因子-β及其下游因子表达的影响

目的观察抗纤灵对5/6肾切除小鼠肾组织转化生长因子-β(TGF-β)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法随机从50只C57小鼠中取40只建立5/6肾切除慢性肾衰肾纤维化模型,术后2周根据肌酐值将40只小鼠分为抗纤灵低、中、高剂量治疗组和模型组,每组10只。另10只小鼠为假手术组。治疗12周后,用western blot法、RT-q PCR法分别测定各组小鼠肾组织TGF-β、CTGF蛋白及mRNA表达水平。结果模型组小鼠肾组织TGF-β、CTGF蛋白及mRNA表达较假手术组升高(P0.01);与模型组比较,抗纤灵中、高剂量组小鼠肾组织TGF-β及CTGF蛋白、mRNA表达下调(P0.01),两剂量组间TGF-β、CTGF的蛋白及mRNA表达差异无统计学意义(P0.05)。结论抗纤灵中、高剂量治疗组均能下调5/6肾切除小鼠肾组织TGF-β、CTGF蛋白及mRNA表达,两剂量治疗组间尚不存在量效相关性。提示抗纤灵可能通过调控TGF-β及其下游因子延缓肾纤维化,保护残肾功能。     

桃红四物汤对巨噬细胞TGF-β1和 TNF-α mRNA转录的影响

目的:观察桃红四物汤含药血清对体外模拟骨坏死环境下的巨噬细胞的转化生长因子(TGF-β1)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的mRNA转录水平的影响。进一步明确巨噬细胞在骨坏死修复中的机制。方法:普通级新西兰兔,雌雄各半,随机分为3组,每日ig 1 g.mL-1的桃红四物汤药液,高剂量组15 g.kg-1、低剂量组7.5 g.kg-1,对照组15 mL.kg-1的生理盐水,每日1次,连续ig 2周。U937经佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯(PMA)诱导后的巨噬细胞以5×105接种于6孔板中,以坏死骨微粒制备模型组,并予以30%的含药血清干预48 h后收集细胞,RT-PCR检测各组巨噬细胞TGF-β1和TNF-αmRNA转录水平的变化。结果:桃红四物汤低、高剂量含药血清组TGF-β1mRNA的转录水平较空白血清组均趋呈现增高的趋势,组间差异具有统计学意义(P<0.05),其中低剂量为3.366 7,高剂量为4.186 7;TNF-αmRNA的转录水平较空白血清组则呈现减弱的趋势,组间差异具有统计学意义(P<0.05),其中低剂量为1.603 3,高剂量为1.356 7。结论:桃红四物汤可以提高坏死骨微粒刺激下的巨噬细胞TGF-β1mRNA水平,降低TNF-αmRNA水平,影响巨噬细胞的功能是其促进坏死骨修复的作用机制之一。     

慢性乙型肝炎肝组织TGF-β1及CTGF与肝纤维化的相关性研究

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)在慢性乙型肝炎肝纤维化不同进展阶段的表达及定位情况,探讨其与肝纤维化的相关性。方法对150例慢性乙肝患者肝组织TGF-β1、CTGF行免疫组化定量分析,并与肝脏纤维化分期相关性进行统计学分析。结果肝组织TGF-β1和CTGF表达随肝脏纤维化加重而增加,组间比较均具有显著性差异(P均<0.05);且TGF-β1与CTGF表达呈正相关(r=0.793,P<0.05)。结论肝组织TGF-β1和CTGF表达与肝纤维化程度呈正相关,二者可作为评价肝纤维化严重程度的重要指标,同时也为今后以其为靶点的肝纤维化治疗提供理论依据。     

糖耐康对TGF-β1诱导的HK-2细胞Smads通路的影响

目的:探讨糖耐康(TNK)含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化Smad信号通路的影响。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养;实验分为6组:空白对照组、单纯TGF-β1诱导组(TGF-β110μg·L-1)、空白血清对照组(TGF-β110μg·L-1+10%空白血清)、TNK高浓度组(TGF-β110μg·L-1+20%糖耐康含药血清)、TNK中浓度组(TGF-β110μg·L-1+10%糖耐康含药血清)、TNK低浓度组(TGF-β110μg·L-1+5%糖耐康含药血清)。药物干预24 h后,荧光定量PCR检测TGF-β1及其Ⅰ,Ⅱ受体(TβRI,TβRⅡ)的mRNA表达,Western blot检测Smad 2、Smad 3的蛋白表达。结果:HK-2细胞经TGF-β1诱导后,TβRⅠ,TβRⅡ的mRNA表达和Smad 2,Smad 3的蛋白表达显著上升,与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05),但经TNK含药血清干预后,其表达逐步下降,与单纯TGF-β1诱导组及TGF-β1+空白血清对照组相比有显著性差异(P<0.05)。而空白血清无此作用。结论:TNK能够调控TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化Smad信号通路,在一定程度上具有抑制肾间质纤维化的作用。     

抵当汤及其拆方对糖尿病大鼠心肌TGF-β1,TGF-β RⅡ及Smad7蛋白表达的影响

目的:探讨糖尿病对大鼠心肌转化生长因子-β1(TGF-β1),转化生长因子-β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)及人信号转导分子7(Smad7)蛋白表达的影响及抵当汤及其拆方的干预作用。方法:105只SD雄性大鼠单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型。成模后分为模型组、抵当汤干预组、水蛭虻虫组、桃仁大黄组和缬沙坦组,以12只正常SD雄性大鼠作为正常组,分别给予相应处理。8周末,利用全自动生化仪检测空腹血糖(FBG),HE染色观察心肌病理形态学变化,Western blot法检测TGF-β1,TGF-βRⅡ及Smad7蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌组织细胞肥大,炎症细胞浸润较明显,心肌TGF-β1及TGF-βRⅡ蛋白表达明显升高,Smad7蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,抵当汤可以明显减轻糖尿病大鼠心肌组织的病理改变,抵当汤明显下调大鼠心肌TGF-β1蛋白及TGF-βRⅡ蛋白表达,明显上调Smad7蛋白表达(P0.05,P0.01)。拆方组大鼠与糖尿病模型大鼠组比较,TGF-β1蛋白下调,心肌组织损伤也有好转,但均不如全方明显。结论:抵当汤可减缓糖尿病大鼠心肌纤维化病变,其机制可能与下调糖尿病大鼠心肌中TGF-β1和TGF-βRⅡ蛋白表达,上调Smad7蛋白的表达有关,同时表明,抵当汤全方对DCM病变的防治作用优于拆方,"泻热化瘀通络"治法与抑制TGF-β1/Smad7信号转导通路有关。     

镰形棘豆总黄酮对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞纤维化因子的影响

目的:研究镰形棘豆总黄酮防治肾间质纤维化作用及其机制.方法:大鼠按300 mg·kg-1 ig镰形棘豆总黄酮,连续给药3d后制备含药血清,空白组大鼠ig同体积生理盐水制备空白血清.将人肾小管上皮细胞(HK-2)用含10％胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养,分为4组:空白对照组、单纯转化生长因子母1(TGF-β1 10 μg·L-1)诱导组、空白血清对照组(TGF-β110 μg·L-1 +10％空白血清)、干预组(TGF-β110 μg·L-1+10％镰形棘豆总黄酮含药血清).药物干预24 h后,荧光定量PCR检测结缔组织生长因子(CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9) mRNA的表达.结果:HK-2细胞经TGF-β1诱导后,CTGF,PAI-1 mRNA的表达显著上升,而MMP-9 mRNA的表达减弱,与空白对照组相比有统计学意义(P＜0.05),经镰形棘豆总黄酮药物血清干预后,CTGF、PAI-1 mRNA的表达逐步下降,而MMP-9 mRNA的表达逐步上升,与单纯TGF-β1诱导组相比有统计学意义(P＜0.05).结论:镰形棘豆总黄酮在一定程度上能够抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞纤维化,其机制可能与调节纤维化细胞因子CTGF,PAI-1和MMP-9的mRNA表达有关.     

金欣口服液对RSV感染BALB/c小鼠IFN-α表达的影响

目的:探讨金欣口服液对呼吸道合胞病毒(RSV)感染BALB/c小鼠干扰素-α(IFN-α)表达的影响.方法:将BALB/c小鼠按RSV首次滴鼻至取标本时间分为三大组,每大组分别在RSV首次滴鼻后24,72,144 h后取支气管肺泡灌洗液(BALF),用ELISA法检测BALF中所含IFN-α浓度,观察金欣口服液对IFN-α表达的影响,利巴韦林为阳性对照.结果:RSV感染24 h后小鼠BALF中IFN-α的表达显著增高,其中金欣预防组(385.38±16.54) ng·L-1能上调IFN-α的表达(P＜0.01);RSV感染72 h后小鼠BALF中IFN-α上调作用仍较显著,但是较之于24 h时IFN-α的表达明显有所下降,其中金欣治疗组(131.41±6.96)ng·L-1和金欣预防组(32.83 ±4.77) ng·L-1组均能上调IFN-α的表达(P＜0.01),且金欣治疗组上调作用更为明显(P ＜0.01);RSV感染144 h后小鼠BALF中IFN-α的表达量显著减少(P＜0.01),金欣治疗组(14.21 0.80) ng·L-1下调IFN-α表达(P＜0.01).结论:在RSV感染早期,金欣口服液预防组和治疗组能显著上调BALB/c小鼠IFN-α的表达;随着感染时间延长,IFN-α表达下降,金欣口服液能进一步下调其表达水平,以促进机体恢复.     

当归挥发油对哮喘BALB/c小鼠的平喘作用及对Treg细胞活性的影响

目的:探讨当归挥发油对哮喘BALB/c小鼠的平喘作用及对IL-10、Foxp3等Treg细胞活性因子的影响。方法:通过注射卵清白蛋白(OVA)致敏、吸入OVA激发的方法来复制哮喘BALB/c小鼠模型,在当归挥发油的防治下,考察当归挥发油对哮喘行为学、肺功能、肺组织病理学、血清IL-10及肺组织Foxp3表达的影响。结果:60、120、240mg/kg当归挥发油可维持哮喘小鼠体重的正常增长,改善哮喘行为学、肺功能及肺组织病理学变化,促进IL-10与Foxp3的表达而提高Treg细胞的免疫活性。结论:当归挥发油具有明显的平喘作用,促进IL-10、Foxp3的表达而提高Treg细胞免疫活性是其作用机制之一。     

沙参麦冬汤对放射性肺炎大鼠血浆IL-6，TNF-α，TGF-β1的影响

目的:观察沙参麦冬汤对放射性肺炎大鼠血浆白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)含量的变化,评价沙参麦冬汤对放射性肺炎的防治效果。方法:将141只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、沙参麦冬汤预防组(中预组,10.3 g·kg-1)、沙参麦冬汤治疗组(中治组,10.3 g·kg-1)、地塞米松治疗组(西治组,10.4×10-3g·kg-1)。除正常对照组外,其余各组均给予造模。各组药物均用生理盐水稀释成等容积。除中预组于照射前1周起开始ig沙参麦冬汤外,其余各组于造模后第2天起,正常对照组、模型组ig等容积的生理盐水,中治组ig沙参麦冬汤,西治组ig地塞米松混悬液,每日1次,直至照射后第6周。大鼠饲养期间每周称体重1次,每周按体重变化调整1次剂量。于照射后2,4,6周,正常对照组取7只,其余各组随机取10只大鼠。10%水合氯醛溶液ip麻醉大鼠,心脏采血约5 mL,置肝素抗凝管中,4℃3 000 r·min-1离心10 min,分离血浆,置-20℃冰箱保存待查。采用ELISA法检测血浆中TGF-β1,TNF-α,IL-6的含量。结果:与正常对照组比较,2,4,6周模型组大鼠血浆中IL-6,TNF-α,TGF-β1含量均有显著升高(P<0.01)。与模型组比较,2,4,6周中预组、中治组、西治组大鼠血浆中IL-6,TNF-α,TGF-β1显著降低(P<0.01或P<0.05)。中预组低于中治组、西治组(P<0.01),中治组低于西治组(P<0.01)。结论:沙参麦冬汤可能通过降低血浆中IL-6,TNF-α,TGF-β1含量,抑制放射性肺炎肺泡炎性反应,减轻肺纤维化进程。     

潜阳育阴颗粒对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞-间充质转化的影响

目的：通过观察潜阳育阴颗粒对肾小管上皮细胞表型的影响，探讨其对肾间质纤维化的干预作用。方法：将肾小管上皮细胞(HK-2)用不同质量浓度的转化生长因子(TGF)-β₁(0、5、10、15、20、25μg·L^-1)刺激24 h，用倒置相差显微镜观察细胞形态及生长状态，结合蛋白免疫印迹法(Western blot)结果选取最合适的TGF-β₁质量浓度20μg·L^-1用于后续实验。将HK-2细胞分为6组，分别为空白组、TGF-β₁组(质量浓度为20μg·L^-1)、潜阳育阴颗粒低、中、高剂量组(0.5、1、2 g·L^-1)、缬沙坦组(1×10-5 mol·L^-1)。细胞增殖与活性检测(CCK-8)试剂盒检测各组细胞活性；划痕实验检测细胞迁移能力；Transwell法检测细胞侵袭能力；Western blot检测纤维黏连蛋白(FN)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimen...     

葛根素对酒精性肝损伤大鼠肝组织TGF-β1和α-SMA表达的影响

目的：研究葛根素对酒精性肝损伤大鼠肝组织转化生长因子-β₁(TGF-β₁)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的调控作用，探讨葛根素对酒精性肝损伤的防治机制。方法：将75只SD大鼠随机分成5组：正常组10只、模型组20只(乙醇等混合液，2次/d)、阳性对照组15只(乙醇等混合液＋复方鳖甲软肝片，1 g·kg^-1·d^-1)、葛根素大剂量组15只(乙醇等混合液＋葛根素片1.5 g·kg^-1·d^-1 )、葛根素小剂量组15只(乙醇等混合液＋葛根素片0.75 g·kg^-1·d^-1 )，8周后抽取股静脉血并处死，观察肝脏组织病理变化，检测肝组织TGF-β₁和α-SMA的表达。结果：模型组大鼠肝组织病理变化和肝纤维化积分与其他各组相比都有显著性改变(P<0.05)；葛根素大、小剂量组肝组织TGF-β₁和α-SMA表达水平明显低于模型组(P<0.01)；且葛根素大剂量组α-SMA水平明显低于对照组(P<0.05)，小剂量组与模型组相比无显著性差异。结论：酒精性肝损伤大鼠肝脏组织TGF-β₁和α-SMA有不同程度的升高，葛根素对其有调控作用，葛根素对酒精性肝损伤有保护作用。     

养肝益水颗粒对自发性高血压大鼠血浆AngⅡ、TGF-β1、CTGF含量和肾皮质AngⅡ、TGF-β1、CTGF mRNA表达的影响

目的观察养肝益水颗粒对12周龄自发性高血压大鼠(SHR)血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)含量和肾皮质AngⅡ、TGF-β1、CTGF mRNA表达的影响,以进一步探讨养肝益水颗粒发挥肾脏保护的可能作用机制。方法将40只12周龄雄性SHR大鼠随机分为模型组、贝拉普利组[1.8mg/(kg·d)]、养肝益水颗粒低剂量组[5.4g/(kg·d),简称低剂量组]、养肝益水颗粒高剂量组[27g/(kg·d),简称高剂量组],每组10只;并设Wistar-Kyoto大鼠(WKY)10只作为正常对照组;模型组和正常对照组给予等量生理盐水灌胃,每天1次,共6周。检测各组大鼠血浆AngⅡ、TGF-β1、CTGF浓度和肾皮质AngⅡ、TGF-β1、CTGF mRNA的表达。结果模型组,低、高剂量组血浆AngⅡ、TGF-β1、CTGF含量显著高于正常对照组(P<0.01),贝拉普利组与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);贝拉普利组与高剂量组血浆AngⅡ、TGF-β1、CTGF含量显著低于模型组(P<0.01,P<0.05),低剂量组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05);贝拉普利组及高、低剂量组肾皮质AngⅡ、TGF-β1、CTGFmRNA的表达显著低于模型组(P<0.01,P<0.05);高剂量组优于贝拉普利组和低剂量组(P<0.01,P<0.05)。结论养肝益水颗粒主要通过降低肾脏局部AngⅡ、TGF-β1及CTGF的表达而发挥肾脏保护作用。     

益肾活血法对慢性肾衰竭大鼠TGF-β_1、CTGF的影响

目的探讨益肾活血法对慢性肾衰竭大鼠肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）的作用。方法采用腺嘌呤制备慢性肾衰竭动物模型,对模型大鼠灌胃益肾活血复方中药或尿毒清颗粒;运用免疫组化法观察肾组织TGF-β1、CTGF蛋白表达。结果益肾活血复方中药能降低肾间质中TGF-β1、CTGF蛋白的表达。结论益肾活血复方中药可通过抑制TGF-β1、CTGF的表达,干预肾间质纤维化,进而延缓慢性肾衰竭。     

益肾降浊化瘀方对肾间质纤维化大鼠肾组织HGF、TGF-β_1、CTGF表达的影响

目的:观察益肾降浊化瘀方及其拆方对肾间质纤维化大鼠肾组织中肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:采用腺嘌呤灌胃的方法建立肾间质纤维化大鼠模型,分空白组、模型组、尿毒清组、益肾降浊化瘀方组、补肾健脾组、益气活血组、化湿祛浊组。造模8周后,检测各组大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)指标;HE染色观察肾组织病理变化,Masson染色观察肾组织胶原沉积;免疫组化技术检测肾组织中HGF、TGF-β1及CTGF的表达。结果:1益肾降浊化瘀方组Scr、BUN水平明显低于补肾健脾组、益气活血组、化湿祛浊组、模型组;益肾降浊化瘀方组与尿毒清组无明显差别;2益肾降浊化瘀方组HGF表达明显高于补肾健脾组、益气活血组、化湿祛浊组、模型组;益肾降浊化瘀方组TGF-β1及CTGF表达明显低于补肾健脾组、益气活血组、化湿祛浊组、模型组;益肾降浊化瘀方组HGF、TGF-β1及CTGF表达与尿毒清组均无明显差别;3各组TP、ALB水平与空白组相比均无明显差别。结论:益肾降浊化瘀方可能通过调节HGF、TGF-β1及CTGF在肾组织的表达,减轻肾间质纤维化,从而延缓慢性肾衰竭的进展。     

金三莪对实验性肝纤维化大鼠TGF-β1、Smad3、Smad7及CTGF表达的影响

[目的]观察中药金三莪抗四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的疗效及作用机制。[方法]将50只Wistar大鼠分为正常对照组、模型对照组、中药治疗1组及2组 ,于造模第1周及第4周开始用金三莪治疗。免疫组化技术检测转化生长因子β1(TGF - β1)、Smad3、Smad7及结缔组织生长因子(CTGF)在肝内表达及其在细胞中的定位 ,肝组织电镜检查 ,放射免疫法检测血清透明质酸 (HA)含量。[结果]经中药金三莪治疗后肝纤维化大鼠肝组织内TGF - β1、Smad3及CTGF表达降低 ,而Smad7的表达增加 ,TGF - β1、Smad3及CTGF的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆 ,Smad7则主要在肝细胞浆表达。电镜检查中药治疗组大鼠肝细胞结构趋于正常 ,纤维组织变薄。模型组血清HA含量明显高于正常组 (P<0.01) ,中药治疗1、2组血清HA含量明显低于模型组 (P<0.05)。[结论]中药金三莪能有效地减轻四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的损伤及纤维化程度 ,其机制可能是抑制肝内TGF - β1、Smad3及CTGF并促进Smad7表达     

益肾泄浊法对糖尿病肾病大鼠TGF-β1、CTGF蛋白及基因表达的影响

目的:以转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白为基础,探讨益肾泄浊法对糖尿病肾病大鼠的影响.方法:采用链脲佐菌素(STZ)建立大鼠糖尿病(Diabetes mellitus,DM)模型并给予不同剂量益肾泄浊法干预,进行生化检查、蛋白免疫印迹试验(Western blot)和实时荧光定量聚合...     

甲基阿魏酸对TGF-β1激活人肝星状细胞增殖与α-SMA表达的影响

目的:研究甲基阿魏酸(MFA)对转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的人肝星状细胞(HSC-LX2)增殖与α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法:将5×107个/L HSC-LX2进行体外培养,以不同剂量MFA(终质量浓度为5,10,20 mg·L-1)干预TGF-β1刺激的HSC-LX248 h,用MTT法检测MFA对TGF-β1刺激的HSC-LX2细胞增殖的影响;应用RT-PCR方法及Western blotting技术检测对HSC-LX2的α-SMA表达的影响。结果:MFA可抑制TGF-β1诱导的HSC-LX2的增殖,以5 mg·L-1时抑制作用最为明显,与TGF-β1诱导的模型组比较有显著性差异(P<0.05);与模型组比较,MFA各剂量组作用于HSC-LX248h后,HSC-LX2细胞中α-SMA mRNA与蛋白表达的水平降低,且5 mg·L-1时作用最明显(P<0.05)。结论:MFA预处理人肝星状细胞可下调α-SMA的mRNA及蛋白水平,从而推断MFA可以抑制HSC增殖及活化,抑制肝纤维化的发生和发展。     

温阳化浊通络方含药血清对硬皮病成纤维细胞 胶原分泌和TGF-β1表达的影响

目的:运用血清药理学方法,探讨温阳化浊通络方对系统性硬皮病(SSc)皮肤成纤维细胞胶原分泌和转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法:对SSc患者分别采用强的松(每日20 mg)和青霉胺(每日0.25 g)(西药组),温阳化浊通络方每日1剂,分早晚2次服用(中药组),西药加中药(中西药结合组)治疗1个月后,制备含药血清,加入皮肤成纤维细胞培养体系中。培养72 h后,采用比色法和ELISA法分别测定成纤维细胞培养基中羟脯氨酸(Hyp)和TGF-β1含量。结果:与对照组相比,浓度为5%,10%,20%的西药组、中药组、中西药结合组含药血清均能明显抑制正常人和SSc皮肤成纤维细胞胶原分泌(P<0.05或P<0.01);与西药组相比,中西药结合组抑制作用更加明显(P<0.01)。浓度为5%,10%,20%的西药组、中药组、中西药结合组含药血清能显著抑制SSc皮肤成纤维细胞TGF-β1的表达(P<0.01),且中西药结合组比西药组的抑制作用更强(P<0.01)。同时,对照组SSc皮肤成纤维细胞培养基中胶原含量与TGF-β1呈直线正相关性(r=0.895,P<0.05)。结论:温阳化浊通络方能有效减少体外培养的SSc皮肤成纤维细胞胶原和TGF-β1的分泌,可能是其治疗SSc的药理作用机制之一。