端粒酶活性调控的研究进展

端粒酶是一种ＲＮＡ－蛋白质复合物,它通过逆转录过程将富含Ｇ的单链ＤＮＡ重复序列合成至染色体末端。端粒酶的激活和抑制影响到端粒长度的改变,进而对衰老和肿瘤发展有所贡献。建立其活性调控模型,讨论细胞内外因子及其自身组分对它活性的影响,将能够给予关于端粒酶的应用性研究奠定重要基础。     

人端粒酶与肿瘤的关系及测定方法

端粒酶是维持染色体端粒长度和功能稳定的重要物质。依照人们掌握的端粒酶表达活性的测定方法,近年来大量资料表明,肿瘤细胞中有端粒酶的表达,并在不同时期有不同程度的表达。人们试图将端粒酶的表达水平作为肿瘤的诊断和愈后指标,并有可能将对端粒酶表达的抑制作为下世纪肿瘤基因治疗的一个新手段。     

端粒酶与细胞周期及细胞凋亡关系的研究进展

端粒酶是一种依赖RNA的逆转录酶 ,能够延长染色体末端的端粒长度。它由端粒酶RNA亚单位 ,端粒酶蛋白催化亚单位及连接二者的端粒酶相关蛋白组成。端粒酶活化是细胞永生化和肿瘤形成的关键步骤 ,而端粒酶的活性表达及其调控机制与细胞周期及细胞凋亡基因密切相关 ,阐明端粒酶与细胞周期及细胞凋亡的关系 ,对深入了解恶性肿瘤的发病机制及肿瘤的预防、诊断和治疗均有重要意义。     

端粒酶的应用研究

端粒酶具有逆转录酶特性和维持端粒长度的功能,其活性与肿瘤防治、诊断、延缓衰老密切相关。目前,对端粒酶研究的重要进展可概括为:端粒酶的结构与功能;端粒酶的活性研究;端粒酶的应用价值三个方面。     

国外窗口

国外窗口抑制端粒酶可阻止癌扩散《医学邮报》报道分子生物学研究生Ｃｏｕｎｔｅｒ指出，一种叫作端粒酶（ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ）的酶只在癌细胞中有活性，如果将它抑制可能防止癌扩散或同时将癌细胞杀死。分子病毒学家Ｂａｃｃｈｅｔｔｉ、生物化学家Ｈａｒｌｅｙ、肿瘤...     

端粒酶蛋白质亚单位的研究进展

端粒酶在肿瘤发生的过程中具有重要作用,端粒酶由蛋白质及RNA两种组分构成。四膜虫的端粒酶有p80和p95蛋白,哺乳动物中p80的同源物为TP1/TLP1,近来发现的hEST2/TP2/hTRT结构上具有逆转录酶的结构域单元,其在多种肿瘤组织及细胞系中的表达与端粒酶的活性一致。提示它是端粒酶的蛋白催化亚单位,针对该亚单位的治疗可能成为端粒酶治疗的新靶点。     

端粒、端粒酶和肿瘤发生的关系

端粒是真核生物染色体的天然末端 ,它对染色体的稳定起重要作用。其长度缩短或丢失可导致细胞死亡或恶变。端粒酶是一种特殊的核糖核蛋白逆转录酶 ,它的活性可以自身 RNA为模板合成端粒 DNA加到染色体末端 ,以维持端粒长度 ,使细胞永生。端粒及端粒酶与肿瘤发生的关系成为近年来的研究热点。端粒酶可望成为肿瘤治疗领域的新的靶分子。本文就这一领域里的新进展作一综述     

端粒,端粒酶和肿瘤发生的关系

端粒是真核生物染色体的天然末端,它对染色体的稳定起重要作用。其长度缩短或丢失可导致细胞死亡或恶变。端粒酶是一种特殊的核糖核蛋白逆转录酶,它的活性可以自身ＲＮＡ为模板合成端粒ＤＮＡ加到染色体末端,以维持端粒长度,使细胞永生。端粒及端粒酶与肿瘤发生的关系成为近年来的研究热点。端粒酶可望成为肿瘤治疗领域的新的靶分子。本就这一领域里的新进展作一综述。     

川芎嗪对博莱霉素致肺间质纤维化大鼠端粒酶表达的影响

目的:研究川芎嗪对博莱霉素致肺间质纤维化大鼠端粒酶表达的影响.方法:SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药物对照组及川芎嗪组.分别于给药14、28 d后取肺组织,冷冻切片,原位杂交法检测端粒酶的表达.结果:与模型组相比,川芎嗪在14d和28 d均可下调端粒酶的表达,而且川芎嗪组端粒酶的表达14d较28 d高.结论:川芎嗪通过抑制端粒酶的活性,对特发性肺纤维化起到防治作用.     

TNF相关凋亡诱导配体对肝癌细胞系生物学活性的影响

 目的：探讨新型凋亡分子TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人肝癌细胞系的作用及生物学活性的影响。 方法： 免疫细胞化学法检测HepG2细胞表面膜结合型TRAIL的表达，ELISA法检测HepG2细胞分泌型TRAIL的表达。MTT和TUNEL法分别进行细胞毒实验和凋亡的检测。HepG2细胞内端粒酶的活性由TRAP-PCR法检测，端粒酶催化亚单位hTERT的表达由流式细胞术进行检测。 结果： HepG2肝癌细胞系表面组成性表达TRAIL分子，并有适量的sTRAIL呈分泌表达。细胞毒实验显示TRAIL能够显著抑制肝癌细胞的生长，TUNEL检测结果显示TRAIL具有诱导肝癌细胞凋亡的效应。端粒酶的活性检测显示，TRAIL能够有效抑制肝癌细胞系内端粒酶的活性以及端粒酶催化亚单位的表达。 结论： TRAIL是一个有效的抑癌分子，能够通过诱导细胞凋亡、抑制端粒酶活性等途径控制肿瘤细胞的生长和进一步杀伤肿瘤细胞。     

端粒酶与细胞因子

端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的核糖核蛋白复合体,具有逆转录酶的活性能使细胞获得无限增殖的能力.近年有关细胞因子与端粒酶关系的研究发现,IL-2、IL-6、IL-7、IL-15及TNF、成纤维细胞生长因子(FGF)、集落刺激因子(CSF)可上调端粒酶的活性,而IL-4、IFN、表皮生长因子(EGF)、转换生长因子-β(TGF-β)却抑制端粒酶的活性,端粒酶也可促进某些细胞因子的表达,但目前细胞因子与端粒酶相互作用的机制仍不清楚.     

端粒及端粒酶研究的新进展

端粒是染色体末端高度保守的重复核苷酸序列，对染色体具有保护作用，随着细胞分裂的不断进行，端粒逐渐缩短，减少到一定程度，细胞就趋向衰亡，被认为是细胞有丝分裂的“生物钟”。端粒酶是影响端粒长度的主要因素，以其ＲＮＡ为模板，向端粒末端添加（ＴＴＡＧＧＧ）ｎ序列，使端粒延长，从而延长细胞的寿命甚至使其永生。端粒酶的功能区主要在ｈＴＲ的４４－２０３核苷酸区，３ｐ和１０ｐ上存在着编码调整端粒酶的基因，Ｅｓｔｌ可能是端粒末端结合蛋白，是端粒酶的识别位点。正常情况下，此酶活性较低或无活性，但在干细胞、永生型细胞或肿瘤细胞此酶活性较强。端粒酶的活性主要与细胞分裂速度、细胞周期因素及细胞分化程度有关，细胞分化程度低、细胞增生活跃及肿瘤细胞在Ｓ期时活性较高。在恶性肿瘤中端粒酶活性较高，但在良性肿瘤和非肿瘤中活性较低，因而可利用ＴＲＡＰ技术对端粒酶活性进行检测来进行肿瘤诊断及良恶性鉴别。同时可利用端粒酶抑制剂能抑制端粒酶的活性，缩短端粒，使恶化细胞良转，达到治疗肿瘤的作用，而且还可利用检测端粒酶作为治疗效果好坏的指标。     

正常人淋巴细胞端粒酶活性的观察

目的：探讨正常人外周血淋巴细胞端粒酶活性表达情况。方法：采用聚合酶链反应－酶联免疫吸附（ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ）法测定正常人淋巴细胞经植物血凝素（ＰＨＡ）刺激前后端粒酶的活性水平及重组人白细胞介素１２（ｒｈＩＬ－１２）对端粒酶活性的影响。结果：正常人外周血静息淋巴细胞有低水平的端粒酶活性表达,但经ＰＨＡ刺激后活性明显升高,没有发现ｒｈＩＬ－１２对端粒酶活性的影响。结论：正常人外周血淋巴细胞可表达端粒酶     

端粒酶结构与功能的研究进展

端粒和端粒酶对于细胞生存和肿瘤发生具有非常重要的意义 ,端粒酶各个组分的结构、功能及其调控已成为肿瘤学的研究热点。端粒酶的活性有赖于其结构的完整 ,但活性变化的限速步骤是由催化亚基决定的。另外值得注意的是 ,在无端粒酶活性的永生化细胞中也有端粒长度维持现象     

端粒酶结构与功能的研究进展

端粒和端粒酶对于细胞生存和肿瘤发生具有非常重要的意义,端粒酶各个组分的结构、功能及其调控已成为肿瘤学的研究热点。端粒酶的活性有赖于其结构的完整,但活性变化的限速步骤是由催化亚基决定的。另外值得注意的是,在无端粒酶活性的永生化细胞中也有端粒长度维持现象。     

端粒、端粒酶和肿瘤发生

端粒是真核生物染色体末端的DNA序列 ,对染色体的稳定起重要作用。其长度缩短或丢失可导致细胞的死亡或恶变。端粒酶是一种特殊的核糖核蛋白逆转录酶 ,它的活性可以自身RNA为模板合成端粒DNA ,加到染色体的末端 ,以维持端粒的长度 ,使细胞永生。端粒和端粒酶对于细胞的生存和肿瘤的发生具有非常重要的意义 ,它们之间的关系已成为近年来研究的热点     

反义端粒酶RNA对SMMC7721细胞P16、P21表达的增强作用

目的 观察反义端粒酶RNA对SMMC7721细胞周期的影响,检测P16和P21的表达,探讨端粒酶与细胞期调控间的关系及反义端粒酶RNA在肝癌基因治疗中的意义。方法 经脂质体介导,将反义端粒RNA真核表达载体pBBS212－hTR导入SMMC7721细胞中。细胞克隆转移扩大培养后,采用流式细胞仪、TRAP－PCR－ELISA及免疫组化技术,结合图像分析,在检测SMMC7721／pBBS212－hTR细胞端粒酶活性的同时,检测P16和P21的表达。结果 与对照组相比较,反义端粒酶RNA在抑制SMMC7721／pBBS212－hTR细胞端粒酶活性的同时,检测P16和P21的表达。结果 与对照组相比较,反义端粒酶RNA在抑制SMMC7721细胞端粒酶活性的同时,P16和P21蛋白的表达水平显著增高。结论 转染反义端粒酶RNA在封闭细胞端粒活性表达的同时,伴发P21与P16表达水平的升高。本实验研究为探讨肝癌发病机制及治疗提供了一定的依据。     

口虾蛄提取物对人鼻咽癌细胞端粒酶活性的影响

目的:研究口虾蛄提取物(EOS)对人低分化鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)端粒酶活性的抑制作用及其可能机制。方法:MTT法检测不同浓度的EOS对CNE-2Z细胞增殖能力的影响;端粒酶重复序列扩增-酶联免疫吸附法(TRAP-ELISA)检测各组细胞端粒酶活性,RT-PCR法检测端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达,Western blotting检测c-Myc蛋白表达。结果:EOS对CNE-2Z细胞增殖具有抑制作用,且呈剂量依赖性(P0.01);EOS处理组CNE-2Z细胞端粒酶的活性、hTERT mRNA和c-Myc蛋白的表达水平均低于对照组(P0.01),也呈剂量依赖性,并且hTERT mRNA的下调与c-Myc的抑制存在相关性(P0.05)。结论:EOS可能通过下调细胞c-Myc表达而抑制了hTERT mRNA的转录,以致端粒酶的活性降低而抑制CNE-2Z细胞增殖。     

端锚酶和端粒酶反义寡核苷酸联合作用对人肺腺癌细胞 A549 端粒的影响

目的探讨端锚酶及端粒酶反义寡核苷酸联合作用对A549细胞端粒相关蛋白表达和翻译及对端粒缩短和细胞周期的作用。方法将A549细胞随机分组为空白对照、sTANKS、shTERT、asTANKS、ashTERT和asTANKS ashTERT组,经不同处理,检测hTERTmRNA、端粒酶及端锚酶活性、端粒平均长度及A549细胞寿命。结果ashTERT能抑制hTERTmRNA表达及蛋白质活性;asTANKS不影响hTERTmRNA表达,却能抑制端锚酶活性。asTANKS或ashTERT均可致A549端粒长度缩短,asTANKS ashTERT则缩短更为明显,其减少A549细胞平均传代数的作用也明显大于asTANKS或ashTERT。结论asTANKS对A549端粒长度的抑制有别于端粒酶途径,不仅能通过影响端锚酶活性缩短肿瘤细胞A549端粒的平均长度,而且可与端粒酶抑制剂协同作用明显缩短肿瘤细胞的生存周期,这可能成为抗癌作用的新靶点。     

阻断泛素-蛋白酶体通路对食管癌细胞生长及端粒酶活性的影响

目的:研究阻断泛素-蛋白酶体通路对食管癌细胞生长及端粒酶活性的影响。方法: 将不同浓度的MG-132加入食管癌细胞株Eca9706,特异性阻断其泛素-蛋白酶体通路,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长抑制效应,显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及凋亡,DNA片段分析进一步证实凋亡的存在,并对端粒酶的活性进行检测。结果: MG-132对食管癌细胞株Eca9706有显著的生长抑制作用,且呈现剂量与时间的依赖性,显微镜下可见明显的细胞病变,细胞变圆、变小、脱落,FCM显示MG-132作用于食管癌细胞后,G₁期比例增加,并有明显的亚二倍体凋亡峰,细胞DNA抽提电泳后发现凋亡特征性梯状条带,端粒酶的活性显著受抑制。结论: MG-132能显著抑制食管癌细胞株Eca9706的生长,并抑制端粒酶的活性,表明阻断泛素-蛋白酶体通路可能是治疗食管癌的新途径。