布鲁氏菌特异性抗原BSAg—ELISA试验检测病人血清抗体的研究

以布鲁氏菌特异性抗原ＢＳＡｇ进行ＥＬＩＳＡ试验，检查经常规血清学试验确诊的布鲁氏菌病人血清１５５份，全部阳性，阳性率为１００％。检查常规实验室视为疑似布鲁氏菌病人血清８０份，ＥＬＩＳＡ试验阳性２４份，阳性率３０％，检查布鲁氏菌病疫区内健康人血清１００份、ＥＬＩＳＡ试验均为阴性，但有１２份血清ＥＬＩＳＡ滴度达１：１００。因此认为ＢＳＡｇ－ＥＬＩＳＡ试验特异性强，敏感性高，可用于布鲁氏菌病血清学诊断。     

布鲁氏菌特异性抗原BSAg─ELISA试验检测病人血清抗体的研究

以布鲁氏菌特异性抗原ＢＳＡｇ进行ＥＬＩＳＡ试验，检查经常规血清学试验确诊的布鲁氏菌病人血清１５５份（其中急性５１份，慢性１０４份），全部阳性（滴度≥１：４００），阳性率为１００％。检查常规实验室视为疑似布鲁氏菌病人血清８０份，ＥＬＩＳＡ试验阳性２４份，阳性率３０％，检查布鲁氏菌病疫区内健康人血清１００份、ＥＬＩＳＡ试验均为阴性，但有１２份血清ＥＬＩＳＡ滴度达１：１００。因此认为ＢＳＡｇ─ＥＬＩＳＡ试验特异性强，敏感性高，可用于布鲁氏菌病血清学诊断。     

特异性乙型肝炎病毒X基因反义核酸体外抗病毒作用

为了观察互补于乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｘ基因的三段硫代反义核酸（ＡＳＯＮ）体外抗病毒作用，采用ＥＬＩＳＡ和ＰＡＰ－ＥＬＩＳＡ法检测ＡＳＯＮ作用前后２，２，１５细胞上清中乙型肝炎病毒表面抗原、ｅ抗原及Ｘ抗原（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｘＡｇ）含量变化及细胞原位杂交检测细胞内ＨＢＶＤＮＡ含量变化。结果表明，三段ＡＳＯＮ均可抑制ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢｘＡｇ的表达，其抑制率分别为８０．６５％、６２．７６％和７８．０７％；细胞内ＨＢＶＤＮＡ也明显减少。据此认为，ＨＢｘＡｇ表达量下降可能系ＡＳＯＮ序列特异性封闭作用所致，而ＨＢ－ｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ表达量以及ＨＢＶＤＮＡ含量降低，可能是通过ＨＢｘＡｇ对ＨＢＶＤＮＡ启动子的反式激活功能降低而实现的。     

反义乙肝病毒S基因真核载体构建及体外抗乙肝病毒作用

目的：探讨反义ＲＮＡ抗乙肝病毒（ＨＢＶ）作用。方法：构建了正，反义ＨＢＶＳ基因重组ＥＢ病毒载体ｐＭＥＰ４ｓ，ｐＭＥＰ４Ｓａｓ，ＤＮＡ－磷酸钙共沉淀法将重组载体ＤＮＡ转染２．２．１５细胞，潮霉素筛选１个月得到抗性细胞克隆，ＥＬＩＳＡ，斑点杂交法分别检测抗性细胞上清ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇＨＢＶＤＮＡ水平，结果：转染后１，２月，反义载体ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ的抑制率分别达７５％，５１．６％，７０％，４６     

恒河猴人工感染Brucella后血清学应答及血液病原培养

选用健康公恒河猴６只每组２只,以Ｂｒ．ｏｖｉｓ进行１、０．１、０．０１亿菌初感染后３５天,分别再以１０、５、１亿菌重复感染。各组分别在初感染１５天,再感染０．５、１、２、３、６、８、１０个月时测定血清中各种抗体。结果Ｒ－ＳＡＴ、Ｒ－ＧＤＴ、Ｒ－ＲＢＰＴ在初感染０．５个月开始转阳,再感染１个月Ｒ－２ＭＥ（１、２组）转阳;再感染０．５个月Ｒ－ＳＡＴ达峰值后下降,８个月时又达峰值且与Ｒ－２ＭＥ同步;在再感染６个月至８个月时,１、２号猴从血液中分离到类Ｂｒ．ｏｖｉｓ培养物。此结果与绵羊人工感染Ｂｒ．ｏｖｉｓ结果相似。     

应用特异性单克隆抗体测定脑囊虫病患者血清及脑脊液中循…

应用特异单克隆抗体作ＤＯＴ－ＥＬＩＳ和竞争ＥＬＩＳＡ检测６５例脑囊虫病患者血清和脑脊液中前淳离循环Ａｇ（ＦＣＡｇ）和循环免疫复合物抗原（ＣＩＣＡｇ）。血清ＦＣＡｇ阳性率分别为８１．３％和８１．５％，ＣＩＣＡｇ阳性率为９５．４％和９２．３％（０．１９－１２０．０ｇ／ｍｌ）脑脊液测定ＦＣＡｇ阳性率为７８．５％和８６．２％，ＣＩＣＡｇ阳率率为９０．８％和９３．８％。结果表明检测总循环抗的有利于提高脑囊虫     

布鲁氏菌BsAg抗原的免疫电镜观察

利用免疫电镜包埋前包埋后染色法，分别观察６种布鲁氏菌及耶尔森氏０：９型菌中ＢｓＡｇ的分布情况，发现ＢｓＡｇ主要分布在布鲁氏菌外膜，菌体细胞质内很少，以１６Ｍ羊种布鲁氏菌株中ＢｓＡｇ抗原最多，其余５种布鲁氏菌株中ＢｓＡｇ较少。用包埋前染色法未发现耶尔森氏０：９型菌外膜表面有ＢｓＡｇ存在，而用包埋后染色法观察到布鲁氏菌体细胞质内及耶尔森氏０：９型菌外膜内侧和菌体细胞质内有微量的ＢｓＡｇ。提示布鲁氏菌细     

慢性肝炎和肝硬变内HBV的前S1和S2抗原的表达及意义

１１５例慢性炎和１３２例肝硬变标本，１０％福尔马林固定，石蜡包埋，ＨＥ染色，用ＨＢＣ法检测前Ｓ１和前Ｓ２抗原，ＰＡＰ法检测ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ。在１１５例慢性肝炎中，６０（５２．２％）例显示前Ｓ１抗原阳性和５４（４７．０％）例前Ｓ２抗原阳性。前Ｓ１和Ｓ２抗原伴有ＨＢｓＡｇ分别为９０．０％和８３．３％，伴有ＨＢｃＡｇ分别为５１．７％和５５．６％。在１３２例肝硬变中，８５（６４．４％）例显示前Ｓ１抗     

BALB／C小鼠感染卫氏并殖吸虫后血清中循环抗原的动态

用滤纸血以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠血中循环抗原（ＣＡｇ），结果显示：小鼠感染卫氏并殖吸虫囊蚴后第３天检出ＣＡｇ，其阳性率为３８％，第１５天起ＣＡｇ达高峰，阳性率１００％，２６～５６天ＣＡｇ维持高水平，第７１天ＣＡｇ滴度下降，以后维持在一定水平，说明滤纸血可以代替血清作ＣＡｇ检测。以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫小鼠血中ＣＡｇ时，具有简便，敏感和特异的优点，可试用于肺吸虫感染的早期诊断和流行病学调查。     

硫代磷酸反义寡核苷酸对乙型肝炎病毒抗原表达的体外抑制作用

目的 研究硫代磷酸反义寡核苷酸（Ｓ－ＡＳＯＮ）的抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）作用。方法 作者以２．２．１５细胞作为研究对象，在ＨＢＶ基因Ｓ区和Ｃ区的翻译起始位点设计合成了２段１６聚Ｓ－ＡＳＯＮｓ，采用酶联免疫吸附试验检测了培养细胞上清中表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）的分泌情况。结果 当Ｓ－ＡＳＯＮ浓度为每天２μｍｏｌ／Ｌ时，对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的抑制率可分别达到８８％和７５％，而无关     

庚型肝炎病毒在慢性肝炎肝硬化中致病性及病理特征

探讨ＨＢＶ在慢性肝炎肼硬化当中感染率、临床脑病理特征,应用ＥＬＩＳＡ法检测血清抗－ＨＧＶ,用ＨＧＶＮＳ５抗原制备ＭＣＡｂ,检测５４例慢笥肝炎硬化患者肝组织中ＨＧＶ抗原,同时应用ＳＰ法分别对肝组织进行ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＣＶ ＮＳ３Ａｇ肝脏免疫组化检测。结果提示５４例肝病患者肝组织检出２７．７８％ＨＧＶ抗原阳性。其中２４例慢性肝炎轻度中５例;１６例慢性肝炎中度中５２称;１５例肝硬中５例。ＨＧＶ     

鼠疫菌弱毒株粗制鼠毒素含量及其SDS—PAGE电泳图形比较

鼠疫菌ＥＶｐａｒｉｓ的湿菌体和等湿菌体帛的菌粉，用２．５％ＮａＣｌ浸洗可溶性蛋白质，硫酸 铵分段沉淀法制备粗制鼠毒素，收获量及其ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳形基本相同。用ＬＢ固体培养基增殖鼠疫菌弱毒株，每株培养面积３００ｃｍ＾２，收获湿功和体ＥＶｐａｒｉｓ株０．６ｇ，ＭⅡ４０株、Ｏｔｔｅｎ株、Ａ１１２２株１．２ｇ，１７５株１．４ｇ。不同菌株每克湿菌 体收获粗制鼠毒素的量分别为：ＭⅡ４０ｓｒｉ９．３４ｍｇ，     

乙型肝炎病毒前C／C基因区硫代和脂肪链—硫代反义寡核苷酸的体外抗…

为了研究修饰的反义寡核苷酸（ＡＳＯＮ）的抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）作用。以２．２．１５细胞为靶细胞，在ＨＢＶ前Ｃ／Ｃ基因区设计合成了１６聚硫代和脂肪链－硫代两种修饰的ＡＳＯＮ，用酶联免疫吸附和斑点杂交技术分别检测作用细胞的乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）以及ＨＢＶ ＤＮＡ的分泌情况。结果显示，ＡＳＯＮ在浓度为１０μｍｏｌ／Ｌ时能特异性抑制细胞９２％￣９５％ＨＢｓＡｇ和８４％￣     

洞庭湖区东方田鼠天然抗日本血吸虫抗体水平的初步研究

目的：探讨洞庭湖区东方田鼠天然抗日本血吸虫尾蚴（ Ｃ Ａ）、童虫（ Ｊ Ａ）、成虫（ Ａ Ｗ Ａ）及虫卵抗原（ Ｓ Ｅ Ａ）的抗体检出率及其水平。方法：应用间接 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 对未感染野生东方田鼠（ Ｗ Ｍ Ｆ）、室内繁殖东方田鼠（ Ｂ Ｍ Ｆ）和感染日本血吸虫尾蚴１５ ｄ 的室内繁殖东方田鼠（ Ｂ Ｍ Ｆｉ１５ ）的抗日本血吸虫 ４ 种不同阶段抗原的抗体进行了检测,并与昆明小鼠感染尾蚴１５ ｄ（ Ａ Ｍｉ１５ ）、４２ ｄ（ Ａ Ｍｉ４２）和未感染组（ Ａ Ｍ）作了对比。结果： Ｗ Ｍ Ｆ和 Ｂ Ｍ Ｆ的抗日本血吸虫抗体检出率以抗 Ｊ Ａ Ａｂ 最高（９４． ６％ 和 ９４． ４％ ）, 抗 Ａ Ｗ Ａ Ａｂ 其次（８５． ５％ 和 ８３． ３％ ）, 抗 Ｓ Ｅ Ａ Ａｂ （５８． １％ 和５９．４％ ）,抗 Ｃ Ａ Ａｂ（１４．３％ 和１３．９％ ）最低。 Ｂ Ｍ Ｆｉ１５ 的４ 种抗体水平较未感染组显著升高, 抗 Ｊ Ａ Ａｂ 和抗 Ａ Ｗ Ａ Ａｂ 的检出率为 １００％ ,抗 Ｓ Ｅ Ａ Ａｂ 为８４．４％ ,抗 Ｃ Ａ Ａｂ 为６５．６％ ; Ｗ Ｍ Ｆ、 Ｂ Ｍ Ｆ和 Ｂ Ｍ Ｆｉ１５ 的４ 种抗体水平呈相同趋势（ Ｊ Ａ＞ Ａ Ｗ Ａ＞ Ｓ Ｅ Ａ＞ Ｃ Ａ）, Ｂ Ｍ Ｆｉ１５     

HCV NS5和核心抗原在肝细胞癌及癌旁肝组织的表达及意义

采用ＳＰ法检测４６例肝细胞癌及其３８例癌旁肝组织中ＨＣＶ ＮＳ５抗原，ＨＣＶ核心抗原和ＨＢｓＡｇ。结果在癌组织中的检出率分别为１５．２％，２１．７％和１９．６％，癌旁组织中的检出率分别为３１．６％、３６．８％和７８．９％；ＮＳ５抗原、核心抗原伴ＨＢｓＡｇ者分别为２１．７％和２３．９％，不伴ＨＣＶ核心抗原、ＮＳ５抗原者分别为４７．８％和５０％。两种ＨＣＶ抗原和ＨＢｓＡｇ均定位于肝细胞和肝癌细胞的胞浆     

用Sepharose 4B提纯猪囊尾蚴尿素溶性抗原和水溶性抗原的应用

本实验用Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ分别提纯猪囊尾蚴尿素溶性抗原和水溶性抗原，各自分别分离出两组蛋白质：Ｓ１Ａｇ－ｕ，Ｓ２Ａｇ－ｕ和Ｓ１Ａｇ－Ｗ，Ｓ２Ａｇ－ｗ，用ＥＬＩＳＡ方法检测囊尾蚴病人，包虫病人和肝吸虫病人血清。显示：血清１：４００稀释时，囊尾蚴病人血清（６０例），Ｓ１Ａｇ－ｕ，Ｓ２Ａｇ－ｕ和Ｓ１Ａｇ－ｗ，Ｓ２Ａｇ－ｗ的阳性率分别为９８．３％，８８．３％和８１．６％，７６．７％，包虫病人血清（３     

汉滩病毒截短核蛋白在大肠杆菌中表达及其抗原分析

目的　体外克隆表达肾综合征出血热病毒部分核蛋白编码基因,筛选病毒核蛋白在人体体液应答中的主要抗原决定簇区,以期获得高质量核蛋白抗原,为研制新型ＨＦＲＳ基因工程诊断试剂奠定基础。方法　利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性内切酶酶切的方法分离汉滩病毒７６－ １１８ Ｓ片段部分编码基因（ＳＡ、ＳＢ和ＳＣ）,并分别克隆入Ｔ７ 原核表达载体,在大肠杆菌中表达;免疫印迹试验和酶联免疫吸附反应分析重组抗原活性。结果　截短核蛋白得到有效表达,分子量分别约为４．５ＫＤ（ｒＳＡ）、２５ｋＤ（ｒＳＢ）和１５．５ｋＤ（ｒＳＣ）,Ｗｅｓｔｅｒｎ－ ｂｌｏｔ分析表明２５ｋＤ截短核蛋白具有较好的抗原活性;粗提抗原Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ 方法检测ＨＦＲＳ患者血清结果与ＩＦＡ 法一致;２５ｋＤ重组小片段抗原与抗ＨＦＲＳＶ单克隆抗体５Ｈ５、Ｂ１１ 及Ｈ７可发生特异性反应。结论　汉滩病毒核蛋白的主要抗原决定簇主要集中在氨基端;原核表达的截短核蛋白在ＨＦＲＳＶ感染的血清学诊断中具有一定的价值     

海藻硫酸多糖抗乙型肝炎病毒的实验研究

１．材料与方法：海藻硫酸多糖（ＳＰＳ）是自制的一种天然硫酸酯多糖。在ＨＢＶ基因转染的人肝癌细胞系 ２．２．１５细胞中，观察ＳＰＳ在对ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ的抑制作用，以齐多夫定和灵芝多糖作为对照药物。选用鸭肝炎动物模型，以阿昔洛韦为阳性对照，观察ＳＰＳ对ＤＨＢＶ感染鸭血清ＤＨＢＶ ＤＮＡ水平的抑制作用。 ２．结果：ＳＰＳ在 ２．２．１５细胞培养中对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的分泌有明显抑制作用，随着ＳＰＳ浓度的增高，对ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ表达的抑制作用增强，最高抑制率分别为７０．１％±４．２％（ＩＣ５…     

一氧化氮在肝损伤中作用的实验研究

材料与方法：１．动物模型的复制及分组：雄性ｗｉｓｔａｒ大鼠,随机分成六组。除正常对照组外,各组均给予１０％Ｄ－半乳糖胺（Ｄ－Ｇａ１Ｎ）０．６ｇ／ｋｇ及大肠杆菌Ｏ１１１Ｂ４脂多糖（ＬＰＳ）０．１ｍｇ／ｋｇ腹腔注射,造成大鼠急性肝损伤模型。并分别于给Ｄ－ＧａｌＮ前２０分钟及后６小时、１１小时,精氨酸（Ａｒｓ）组给子Ｌ－Ａｒｇ０．５ｇ／ｋｇ腹腔注射;Ａｒｇ一硝基精氨酸甲酯（ＮＡＭＥ）组给予Ｌ－Ａｒｇ０．５ｇ／ｋｇ加Ｌ一ＮＡＭＥ５０ｍｇ／ｋｇ;ＮＡＭＥ组给予Ｌ－ＮＡＭＥ１０ｍｇ／ｋｇ;地塞米松（Ｄｅｘ）…     

丙型肝炎病毒E1，E2/NS1，NS5蛋白基因在大肠杆菌内的表达及其产物的初步应用

目的在体外表达及纯化ＨＣＶ不同功能区的病毒蛋白，用于研究ＨＣＶ各功能区抗体的临床意义。方法将ＨＣＶＥ１，Ｅ２／ＮＳ１，ＮＳ５区的部分基因片段克隆到表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲＩ中ＭＢＰ编码基因的下游，在大肠杆菌中进行表达。结果表达的融合蛋白ＭＢＰ－Ｅ１，ＭＢＰ－Ｅ２／ＮＳ１，ＭＢＰ－ＮＳ５的分子量分别为５７０００、６５０００、６２０００，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析表明这些融合蛋白具有ＨＣＶ的抗原活性。将这三种融合蛋白纯化后作为抗原检测了丙型肝炎患者血清９５份，其中抗－ＨＣＶＥ１阳性率为１０．５％，抗－ＨＣＶＥ２／ＮＳ１为６３．２％，抗－ＨＣＶＮＳ５为５３．７％。结论本实验表达的ＨＣＶ融合蛋白在ＨＣＶ感染的血清学诊断中具有一定的价值。