食管癌患者外周血Th1/Th2及细胞因子表达的变化

目的 观察食管癌患者机体免疫状态的变化.方法 采用流式细胞技术检测65例哈族患者T淋巴细胞亚群(Th1、Th2、CD3+、CD4+、CD8+细胞),采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中自细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ、IL-4、IL10、sIL-2R和肿瘤坏死因子(TNF)-β水平.结果 食管癌患者外周血Th1/Th2细胞比值降低(P<0.05),其中Th1细胞表达的IL-2、IFN-γ等细胞因子水平低于正常对照组;Th2细胞表达的IL-4、IL10细胞因子水平高于正常对照组(P<0.05).T细胞介导的细胞免疫及血清sIL-2R和TNF-β水平存在改变和紊乱,其程度与肿瘤TNM分期相关,其特征为:CD3+、CD4+细胞减少(P<0.05),而CD8+细胞增加(P<0.01);CD4+/CD8+细胞比值下降(P<0.01),血清sIL-2R和TNF-β水平升高(P<0.05).食管癌根治术后1个月CD3+、CD4+细胞回升,CD8+细胞回降,同时血清sIL-2R和TNF-β水平降低(P<0.01).结论 食管癌患者外周血Th1/Th2细胞比值降低,细胞因子表达失衡,患者存在免疫功能抑制.     

下调LSD1表达对于外周血Th1/Th2分化格局的影响

目的 探讨shLSD1转染人外周血CD4+T细胞后,LSD1的脱甲基酶活性对辅助性T细胞亚群1和亚群2(Th1/Th2)分化格局的影响.方法 收集并利用磁珠分离纯化人外周血CD4+T细胞,PHA刺激活化48 h后,shLSD1和化学抑制剂TCP抑制2种方法抑制LSD1的表达,采用流式细胞术和RT-PCR对人外周血T淋巴细胞亚群及CD4+T细胞功能亚型Th1、Th2的代表细胞因子IFN-γ、IL-4进行检测.结果 体外分离培养外周血CD4+T细胞并用转染shLSD1或TCP处理48 h后,流式细胞对胞内基因表达检测显示,shLSD1和TCP组细胞IFN-γ+T细胞比例(26.13±1.89)％和(27.01±1.18)％明显高于对照组(14.67±0.65) ％(P ＜0.05),而IL-4+T细胞比例与对照组无显著差异(P＞0.05);RT-PCR检测显示,shLSD1和TCP组IFN-γ mRNA表达明显高于对照组(P＜0.05),IL-4基因表达则没有改变(P＞0.05).结论 LSD1可以引起CD4+T细胞向Th1/Th2分化方向改变,促进Th1方向分化,对Th2方向无明显影响.     

晚期肺癌患者化疗前后细胞免疫功能及T细胞分泌细胞因子的变化

目的:探讨晚期肺癌患者化疗前后外周血中T细胞免疫功能及其分泌细胞因子水平的变化.方法:通过流式细胞仪检测57例晚期肺癌患者和22例健康体检者CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞在外周血单核细胞(PBMC)中所占比例以及外周血CD4+T细胞分泌细胞因子水平的变化.结果:晚期肺癌患者化疗前CD4+T细胞在PBMC中所占比例、CD4+T细胞与CD8+T细胞比值均低于健康人(P＜0.001),化疗后均较化疗前明显升高(P＜0.01或P＜0.001):化疗前CD8+T细胞在PBMC中所占比例高于健康人(P＜0.001),而于化疗后较化疗前明显下降(P＜0.05).治疗前后患者血清中CD4+T细胞分泌Th1细胞因子(IFN-y、TNF-α、IL-2)和Th2细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)水平均无明显变化(P＞0.05).结论:化疗能够增加肺癌患者外周血中CD4+T细胞所占比例,但对Th1、Th2所分泌的相关细胞因子水平影响不大.     

贲门癌患者外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子表达的变化

目的 观察贲门癌手术患者机体免疫状态的变化.方法 采用流式细胞术检测97例贲门癌患者T淋巴细胞亚群(Th1、Th2、CD3+、CD4+、CD8+细胞),采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验( ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ、IL-4、IL-10、可溶性白细胞介素-2受体R(sIL-2R)和肿瘤坏死因子(TNF)-β水平.结果 贲门癌患者术前外周血Th1/Th2细胞比值(0.43±0.13)较正常对照组(0.58±0.12)降低(P＜0.05),其Th1细胞表达的IL-2、IFN-γ等细胞因子水平低于正常对照组;Th2细胞表达的IL-4、IL-10细胞因子水平高于正常对照组(P＜0.05).T细胞介导的细胞免疫及血清sIL-2R和TNF-β水平与肿瘤TNM分期相关,其特征为:CD3+、CD4+细胞减少(P＜0.05),而CD8+细胞增加(P＜ 0.01);CD4 +/CD8+细胞比值下降(P＜0.01),血清sIL-2R和TNF-β水平升高(p＜0.05) 贲门癌根治术后1个月CD3+、CD4+细胞回升,CD8+细胞回降,同时血清sIL-2R和TNF-β水平降低(P＜0.01).结论 贲门癌患者外周血Th1/Th2细胞比值降低,细胞因子表达失衡,患者存在免疫功能抑制.     

1,25(OH)2D3体外抑制小鼠Th17细胞分化的用研究

目的 探讨1,25(OH)2D3对Th17细胞分化的体外抑制作用.方法 通过对分离出的脾淋巴细胞进行CD4+T细胞分选,将不同浓度的1,25(OH)2D3加入到CD4+T细胞中并在诱导因子的作用下诱导其分化.通过ELISA检测培养上清中IL-17A和IL-22的浓度;流式细胞仪分析Th17细胞的比例及RT-PCR检测Th17细胞分化的转录因子的表达.结果 培养上清ELISA检测显示:与对照组相比,1,25(OH)2D3组的IL-17A和IL-22浓度随着加入1,25(OH)2D3浓度的增大而呈现逐渐降低的现象,差异且具有统计学意义(P＜0.01);流式结果显示:诱导分化后对照组Th17细胞比例最多,1,25(OH)2D3组处理后Th17细胞比例降低,且呈剂量依赖性;RT-PCR检测显示:与对照组相比,1,25(OH)2D3组IL-17A、IL-22,RORγt和RORα 表达量随着剂量的增加而逐渐降低,并具有统计学意义(P＜ 0.01).结论 体外实验表明,1,25(OH)2D3具有抑制Th17细胞分化的作用,表现为Th17细胞比例、分泌的细胞因子及特异的转录因子表达均减少.     

Th1/Th17细胞在肺部感染中的作用

目的：观察Th1、Th17型细胞因子在肺部感染性疾病中的动态变化,深入探讨机体抵抗肺部感染的免疫机制,为肺部感染性疾病的特异性诊治提供实验依据。方法：收集临床肺部感染患者血清、外周血淋巴细胞样本,分别用ELISA方法检测血清中Th1型细胞因子（IFN-γ）及Th17型细胞因子白细胞介素-17（IL-17）的表达水平,用FACS检测外周血中CD4＋IFN-γ＋Th1及CD4＋IL-17＋Th17细胞的比例变化,同时用Realtime-PCR方法检测外周血中Th17型细胞因子IL-17在基因水平的表达变化。以上指标的检测均以临床公认的CRP水平的变化作为参考。结果：ELISA结果显示,肺部感染患者血清IFN-γ的水平较健康对照组显著升高,动态检测结果显示IFN-γ变化水平与反映临床疾病状态的CRP出现显著的相关性。而IL-17的表达在不同的疾病过程未出现显著的变化。FACS及Real-time-PCR结果均显示CD4＋IFN-γ＋Th1的活性变化与疾病状态相关,而CD4＋IL-17＋Th17细胞在肺部感染不同阶段未出现显著的变化。结论：相对于Th17细胞而言,Th1细胞在机体防御肺部感染的过程中发挥更为关键的作用。Th17细胞在该类感染性疾病中的作用尚需进一步探讨。     

FOLFOX方案化疗对晚期结直肠癌患者免疫功能的影响

目的 研究FOLFOX方案化疗对晚期结直肠癌患者免疫功能的影响.方法 43例晚期结直肠癌患者中22例接受了FOLFOX方案化疗（化疗组）,21例未接受化疗（对照组）.分别于化疗前、化疗结束时和化疗结束3个月后,取患者外周静脉血,采用抗体标记流式细胞仪检测外周血CD4＋T细胞中CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞所占比例;并通过ELISA法检测外周血中Th1/Th2细胞因子（IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10）水平.结果 化疗结束时,相对于化疗前和对照组,化疗组CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比例显著降低 [（4.15±0.56）%比（5.60±0.88）%和（5.38±0.92）%,均P＜0.01];外周血IL-4和IL-10水平亦显著降低,IFN-γ和IL-2水平则明显升高（均P＜0.01）.化疗结束后3个月,CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比例略微升高 [（4.53±0.58）%],但仍低于化疗前和对照组（P＜0.01）;而IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10则恢复到化疗前和对照组同期水平（均P＜0.01）.结论 FOLFOX化疗可降低晚期结直肠癌患者的调节性T细胞的比例,引起Th1/Th2细胞因子平衡向Th1漂移,从而有利于患者肿瘤免疫抑制的解除.     

中药调节Th1/Th2免疫平衡在下肢深静脉血栓形成治疗中的作用

目的:探讨Th1/Th2亚群在DVT发病中的变化规律及中药复方消栓通脉颗粒调节Th1/Th2亚群平衡的作用机制。方法:60例急性DVT患者分为中西医结合组(结合组)和西药组,并设30例健康查体者为正常组,采用流式细胞术及ELISA法观察DVT患者外周血Th1、Th2细胞比例变化及血浆中TNF-α、IFN-γ、IL-4和IL-10水平。结果:消栓通脉颗粒作用后,结合组TNF-α、IFN-γ水平低于西药组(P<0.05);结合组IL-4和IL-10水平高于西药组(P<0.05);结合组治疗后肢围改善优于西药组(P<0.05)。结论:消栓通脉颗粒可以抑制TNF-α、IFN-γ转录,促进IL-4、IL-10表达,升高Th2亚群比例,优势诱导T细胞向Th2亚群偏移,减轻炎症反应,保护血管内皮细胞,促进血栓再通,改善肢体肿胀。     

Th22细胞在人类常见病毒感染中的研究进展

初始CD4 +T淋巴细胞在接受抗原刺激后可分化为不同的辅助性T细胞亚群,并分泌相应的细胞因子发挥生物学效应。Th22细胞是近年被发现的新型CD4 +T淋巴细胞亚群,不同于Th1、Th2和Th17细胞等亚群,Th22细胞分泌白细胞介素(IL)-22、IL-13和肿瘤坏死因子(TNF)-α等因子,不分泌...     

慢性非细菌性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征患者外周血Th1/Th2细胞的检测

目的:探讨慢性非细菌性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征(CAP/CPPS)患者外周血Th1/Th2细胞分布的变化情况及其在CAP/CPPS临床分型中的意义。方法:采用流式细胞术检测35例CAP/CPPS患者和12例健康体检者外周血CD3+CD8-T细胞胞内细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的表达。结果:与正常对照组相比,ⅢA型、ⅢB型CAP/CPPS患者的Th1细胞数均升高,Th1/Th2比值升高,差异有显著性(P<0.05),Th2细胞数差异无统计学意义(P>0.05);ⅢA型与ⅢB型患者比较,Th1、Th2细胞数与Th1/Th2比值差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CAP/CPPS患者Th1型反应模式占优势状态,Th1/Th2平衡失调,Th1/Th2平衡向Th1方向变化,提示Th1细胞在CAP/CPPS的病理发生中可能起重要作用。     

干预协同刺激信号诱导不明原因早期复发性流产患者外周血Th1/Th2转换的体外研究

目的观察体外干预细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4)对不明原因早期复发性流产(URSA)患者外周血辅助性T细胞(Th)1/Th2转换的影响。方法用人绒毛膜癌细胞株JEG-3制备的滋养细胞抗原刺激30例URSA患者外周血单核细胞,分为实验组A:加重组蛋白CTLA-4Ig(10和1 mg/L)组,实验组B:加CTLA-4抗体(10和1 mg/L)组;对照组:加IgG(10和1 mg/L)组。采用酶联免疫吸附试验(ELISIA)测上清液中白细胞介素(IL)-2、干扰素γ(IFN-γ)和IL-4水平。结果与相应浓度的对照组相比,CTLA-4Ig组IL-4水平显著升高(P<0.05),IL-2显著降低(P<0.05),IFN-γ两组间无显著性差异(P>0.05);而CTLA-4抗体组IL-4水平均显著低于对照组(P<0.01),而IFN-γ、IL-2水平均明显高于对照组(P<0.05)。CTLA-4Ig 10 mg/L组与CTLA-4Ig 1mg/L组比较,IL-4显著升高(P<0.05),IL-2显著降低(P<0.05),IFN-γ两组间无显著性差异(P>0.05)。与同浓度的对照组及CTLA-4抗体1 mg/L组相比,CTLA-4抗体10 mg/L组IL-4较低,而IFN-γ和IL-2稍高,但两组间亦无显著性差异(P>0.05)。结论CTLA-4Ig使URSA患者Th1/Th2型细胞因子向Th2型细胞因子偏移,有利于URSA的治疗;而CTLA-4抗体可以上调Th1型细胞因子,下调Th2型细胞因子,不利于妊娠。     

凝血酶对狼疮肾炎末梢血单个核细胞分泌Th1/Th2细胞因子的影响

目的探讨狼疮肾炎(LN)患者凝血活性对其Th1/Th2平衡的影响。方法LN患者20例,按红斑狼疮病情活动指数(SLEDAI)分为稳定组11例(SLEDAI<9分),活动组9例(SLEDAI≥9分)。健康对照组8例。采集末梢血单个核细胞(PBMC),进行高、低浓度凝血酶刺激下体外培养。ELISA法检测培养液上清IL-10、IFN-γ水平。RT-PCR检测IL-10和IFN-γmRNA表达。结果凝血酶呈浓度依赖性上调LN患者PBMCIL-10表达,但不影响IFN-γ表达,故增加IL-10/IFN-γ比值。结论凝血酶加重狼疮肾炎患者PBMC分泌Th1/Th2细胞因子的平衡紊乱。     

Th2 subset dominance among peripheral blood T lymphocytes in patients with digestive cancers

BACKGROUND: Two types of helper T cells (Th), which are categorized as Th1 and Th2 on the basis of cytokine production, have been reported. Th1 cells produce interleukin (IL)-2 and interferon (IFN)-gamma, while Th2 cells secrete IL-4, IL-6, and IL-10. We assessed the intracellular cytokine profiles of CD3/CD4 positive lymphocytes (CD4+ T-cells) in peripheral blood in patients with digestive cancers. METHODS: Peripheral blood samples were collected from 50 patients with digestive cancers and 35 healthy volunteers. The proportions of CD4+ T-cells producing intracellular cytokines were determined using flow cytometry. RESULTS: The percentages (mean +/- SD) of CD4+ T-cells producing IL-4, IL-6, and IL-10 in the cancer group (73.9% +/- 13.0%, 73.0% +/- 16.6%, and 58.0% +/- 21.0%, respectively) were significantly higher than in the healthy group (37.4% +/- 12.4%, 37.8% +/- 13.5%, and 34.0% +/- 14.1%, respectively; P <0.01). Proportions of CD4+ T-cells producing IL-4, IL-6, and IL-10 in 10 patients undergoing curative resection had decreased significantly 1 month after surgery (P <0.01). No significant difference was noted between groups in the percentages of CD4+ T-cells producing IFN-gamma. CONCLUSIONS: Th2-dominant status develops in cancer patients. Such lymphocyte evaluations could find applications in diagnosis and therapeutic monitoring of cancer patients.     

308nm准分子激光治疗对白癜风患者外周血Th1/Th2细胞因子的影响

目的：研究308nm准分子激光治疗前后白癜风患者外周血Th1型细胞因子（IFN-γ）和Th2型细胞因子（IL-10）水平,探讨308nm准分子激光治疗白癜风的免疫机制。方法：采用ELISA方法检测25例白癜风患者治疗前后和20例正常对照组外周血IFN-γ和IL-10的水平。结果：IFN-γ水平在各组之间均无统计学差异（P〉0.05）。治疗前白癜风患者外周血IL-10水平与正常对照组相比明显增加,差异有统计学意义（P〈0.05）,治疗后白癜风患者外周血IL-10水平与正常对照组相比明显增加,但是差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：白癜风患者体内Th2型细胞因子占优势,308nm准分子激光可恢复白癜风患者Th1/Th2的平衡状态。     

T-cell activation follows Th1 rather than Th2 pattern in haemodialysis patients.

BACKGROUND: Patients on chronic intermittent haemodialysis (HD) show an impaired cellular and humoral immune response that clinically appears with frequent infectious complications and low vaccination responses. This immune defect strongly correlates with reduced in vitro proliferative responses of T cells. The defect is localized in antigen presenting cells, which show a decreased co-stimulatory activity. Furthermore, the impaired immune response correlates with an increased production of pro-inflammatory cytokines. In response to primary activation, CD4 positive T helper (Th) cells mainly differentiate into either Th1 or Th2 cells. Th1 cells support cell mediated immunity whereas Th2 cells enhance humoral immune responses. Since both types of responses mutually inhibit each other, the impaired humoral immune response seen in HD patients could either be due to a reduced number of Th2 cells or to a predominant Th1 response. METHODS: We analysed the Th cell profile in HD patients using flow cytometry. Monocytic cytokine expression was analysed using both flow cytometry and enzyme linked immunoadsorbant assays. RESULTS: Our data demonstrate that the cytokine differentiation profile in circulating T cells from HD patients is dysregulated and characterized by an increase in Th1 cells, but a normal amount of Th2 cells. Moreover, the skewed helper cell responses correlate with a higher percentage of monocytes capable of secreting the Th1 promoting cytokine interleukin 12 (IL-12). CONCLUSIONS: Our findings contribute to a better understanding of the pathogenesis of impaired cellular immune functions in dialysis patients and, in particular, the decreased antibody production after vaccination. They provide a link between overproduction of pro-inflammatory cytokines (IL-12) and imbalanced T-cell activation.     

重症腹腔结核患者外周血和腹水中Th17细胞及其相关因子的水平和意义

目的：通过检测重症腹腔结核患者外周血和腹水中Th17细胞及其相关因子的水平，探讨Th17细胞在重症腹腔结核疾病发展过程中的变化。方法：使用流式细胞术检测腹腔结核患者重症期、恢复期以及健康对照组外周血Th17的表达率，ELSIA法检测血清以及腹腔结核重症期、恢复期患者腹水IL-6、IL-17、IL-23水平，分析各组上述指标之间的差异以及各指标间的相关性。结果：腹腔结核重症期组患者Th17细胞所占CD4＋T细胞比率和外周血IL-6、IL-17和IL-23水平显著高于恢复期组和健康对照组，患者恢复期组和健康对照组Th17细胞比率和外周血IL-6、IL-17和IL-23水平无统计学差异；腹腔结核患者重症期腹水中的IL-6、IL-17和IL-23均高于其恢复期时腹水中的IL-6、IL-17和IL-23浓度，差异有统计学意义；重症腹腔结核患者Th17细胞和外周血IL-6、IL-17和IL-23呈正相关。结论：Th17细胞及相关细胞因子在腹腔结核重症患者的疾病发展过程中起着一定的调节作用，探索其分化与调控有助于认识它在疾病进展过程中的作用，也有利于生物学治疗靶点的发现。     

ATG induction therapy: long-term effects on Th1 but not on Th2 responses

Antithymocyte globulin (ATG) induction therapy is associated with an increased long-term risk of infection- and cancer-related death. To analyze long-term effects of ATG induction on lymphocyte function, we prospectively assessed CD4 helper function, B-cell/monocyte and cytokine responses in 84 renal transplant recipients (ATG, n = 44) up to 1 year post-transplant. A PWM-driven allogeneic coculture system was used to assess helper function of CD4+ T cells and T-cell-dependent B-cell responses. SAC I was used for T-cell-independent stimulation of B-cell cultures. In vitro cytokine secretion and serum soluble CD30 (sCD30) were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). ATG induced a persistent decrease of peripheral blood lymphocyte counts compared with non-ATG treatment because of a predominant decrease of CD4+ T cells (4 months, 1 year; P < 0.0005) which was associated with a decreased CD28 expression (1 year, P = 0.02) and CD4 cell interleukin 2 (IL-2) response (4 months, P < 0.0005). However, Th2 responses (CD4 help, CD4 cell IL-4 and IL-10 responses, sCD30), which proved to be predictive of graft outcome, were not affected, and neither was the secretion of the lymphoma growth factors IL-6 and IL-10 by B cells and monocytes. Our data show that ATG induction therapy in immunological high-risk patients induces a profound long-term decrease in cell counts and Th1 but not Th2 responses of CD4+ T cells which may explain long-term effects on infection and post-transplant lymphoproliferative disease (PTLD) incidence because of inadequate T-cell control.