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相似文献
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1.
视网膜神经节细胞体外培养、纯化及生物学特性研究   总被引:23,自引:4,他引:19  
Wu Y  Ge J  Qiu P  Li Y  Lin M  Guo Y 《中华眼科杂志》1999,35(3):190-193,10
目的 建立体外视网膜神经节细胞(retinalganglincells,RGCs)培养和纯化模型。方法 出生后1-3天Sprague-Dawley(SD)乳鼠,RGCs在basalmediumeagle(BME)培养基中培养,相差显微镜下观察细胞生长规律。羊抗鼠单克隆抗体FITC-Thy-1,1鉴定RGCs并通过Thy1.1单抗进行RGCs的分离纯化,四唑盐(monotetrazolium,MTT  相似文献   

2.
着重介绍视网膜神经节细胞(RGCs)的培养、分离、鉴定及影响因素等方面的新进展。PGCs的培养分为视网膜外植块培养、分离的PGCs细胞培养。培养基人含血清及无血清两种。在作PGCs培养前,需对培养皿、培养瓶等进行处理。在细胞鉴定方面,采用活细胞观察、Thy-1抗体标记、荧光素标记、免疫组化标记等方法。影响RGCs培养的因素有上丘提取液、温度、胶质细胞层及缺氧、兴奋性毒素等。  相似文献   

3.
目的 探讨表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)抑制剂抑制大胶质细胞活化对实验性急性高眼压大鼠视网膜神经节细胞(retinalganglioncells, RGCs)丢失的影响。方法 用健康成年SD大鼠18只,随机分为3组:空白对照组,不做任何处理;实验组采用前房灌注法制造急性高眼压模型,造模成功后,按6mg?kg-1?d-1用量给予大鼠口服EGFR抑制剂AG1478;实验对照组造模成功后给予大鼠口服等量生理盐水。3组均于7d处死大鼠,观察各组视网膜结构的变化及采用免疫组织化学法观察阳性节细胞的表达。结果 通过免疫组化法发现,随着造模时间的延长,视网膜结构变得模糊不清,RGCs阳性染色细胞逐渐减少。空白对照组、实验组、实验对照组RGCsThy-1阳性表达光密度值分别是:143.6667±4.0415、139.0322±1.7340和101.1023±2.0001。实验组和空白对照组相比,视网膜Thy-1阳性表达差异无统计学意义(P>0.05),实验对照组和空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),实验组与实验对照组视网膜Thy-1阳性表达,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论 EGFR抑制剂通过抑制大胶质细胞的活化对实验性急性高眼压大鼠模型的RGCs有保护作用。  相似文献   

4.
Sun Z  Yao K  Wu R  Shentu X  Xu W 《中华眼科杂志》1999,35(6):462-464
目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)及二者的共同作用对体外牛晶体上皮细胞(bovine lensepithelial cell,BLEC)增殖的影响。方法 BLEC原代培养,取第4例细胞种入24孔板,加入不同浓度的bFGF、IGF-1,  相似文献   

5.
近年来发现生长因子参与视网膜疾病的发生及发展,其中胰岛素样生长因子-1(insulin-likegrowthfactor1,IGF-1)、表皮生长因子(epidermalgrowthfac-tor,EGF)可能是与增殖性视网膜疾病密切有关的重要因子[...  相似文献   

6.
大鼠视网膜神经细胞的培养   总被引:7,自引:0,他引:7  
钟一声  思芹 《中华眼科杂志》1999,35(2):137-139,I007
建立视网膜神经节细胞(retinalganglioncells,RGCs)的体外培养方法,为RGCs的体外实验研究奠定基础。方法采用胰酶消化将16只生后2-3天的Spague-Dawley大鼠视网膜制成细胞悬液后,接种于涂以鼠尾胶原的24孔培养板,预先置入1cm*1cm的载玻片。  相似文献   

7.
大鼠视网膜神经节细胞的培养   总被引:16,自引:0,他引:16  
目的建立视网膜神经节细胞(retinalganglioncels,RGCs)的体外培养方法,为RGCs的体外实验研究奠定基础。方法采用胰酶消化法将16只生后2~3天的SpragueDawley大鼠视网膜制成细胞悬液后,接种于涂以鼠尾胶原的24孔培养板,预先置入1cm×1cm的载玻片。细胞数约4×105个/孔,在37℃、体积分数为5%的CO2培养箱中培养。于第1、3及5天行抗大鼠THY1单克隆抗体免疫细胞化学检查以鉴定RGCs,镜下计算每10个高倍镜下(highpower,HP)RGCs的细胞数和其轴突生长率。结果在鼠尾胶原上培养的RGCs生长良好,部分细胞伸出突起,且有些突起相互连接成网。培养第1天,RGCs数和轴突生长百分率分别为(401±9)个/10HP和(25.34±0.72)%,第3天为(351±6)个/10HP和(35.16±2.22)%,第5天为(109±8)个/10HP和(69.84±0.97)%。结论RGCs的体外培养能获成功,鼠尾胶原是RGCs体外生长的良好支持物。  相似文献   

8.
陈明  蓝平 《中华眼科杂志》1999,35(2):134-136,I006
定量观察表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)及5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对人视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium,RPE)细胞迁移与增殖能力的影响,探讨EGF,BFGF及5-Fu在增殖玻璃体视网膜病变(proliferat  相似文献   

9.
生长因子对培养人眼视网膜色素上皮细胞增殖的调控作用   总被引:7,自引:0,他引:7  
目的探讨生长因子对人眼视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium,RPE)细胞增殖的调控作用。方法建立人眼RPE细胞培养体系,利用3H-TdR掺入法和细胞计数观察表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic-fibroblastgrowthfactor,b-FGF)、胰岛素样生长因子(insulin-likegrowthfactor,IGF-I)对培养RPE细胞的作用。结果(1)EGF,b-FGF,IGF-Ⅰ与对照组比较,可明显增强人眼RPE细胞DNA合成6.6~12.2倍,增强能力为EGF>b-FGF>IGF-Ⅰ。(2)当生长因子联合作用时,可数倍明显增强3H-TdR掺入,能较单一因子更有效地刺激人眼RPE增殖。结论结果提示,生长因子的协同作用可能是增殖性视网膜病变发生的重要机理之一。  相似文献   

10.
荧光金逆行标记大鼠视网膜节细胞   总被引:9,自引:2,他引:7  
视网膜节细胞(retinalganglioncells,RGC)的准确计数是研究正常及病理状态下RGC分布和死亡的关键指标。传统的Nissel法等组织化学技术无法将RGC与视网膜内其它神经元彻底区分,尤其是与“移位”的无长突细胞鉴别。我们将荧光金(flurogold,FG)注射于SD大鼠RGC的主要靶核团[1],观察投射于这些核团的RGC能否被FG逆行标记,荧光染料能否在RGC胞体中长期存留,以及成年SD大鼠RGC的数目及分布。1 材料与方法11 试剂与实验动物 FG购自Flurochrome…  相似文献   

11.
生长因子与视网膜神经节细胞   总被引:1,自引:0,他引:1  
视网膜神经节细胞(RGCs)是青光眼的主要损伤细胞,RGCs的死亡常导致视功能发生不可逆性损害。新近研究的某些生长因子能促进RGCs的存活和轴突再生。本文着重介绍了神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养蛋白-3(NT-3)、NT-4/5、睫状神经营养因子(CNTF)、成纤维细胞生长因子(FGF)及靶源性生长因子等对RGCs的作用,为RGCs的实验研究和临床研究提供基础  相似文献   

12.
姜发纲  魏厚仁 《眼科研究》1997,15(2):104-106
目的研究酸性成纤维细胞生长因子(acidicfibroblastgrowthfactor,aFGF)对睫状体色素上皮(pigmentedepithelial,PE)细胞的影响。方法将体外培养的牛眼PE细胞置于含不同浓度aFGF的培养液内,用倒置相差显微镜观察细胞的形态结构,通过细胞计数及MTT比色分析测定细胞的增殖。结果在aFGF作用下,PE细胞形态良好、增殖旺盛,而以10ngml-1的浓度效力最佳。结论aFGF有助于在PE细胞体外培养中获得更多的实验材料,或在临床用以治疗房水分泌减少的眼科疾病。  相似文献   

13.
生长因子与视网膜神经节细胞   总被引:2,自引:0,他引:2  
视网膜神经节细胞(RGCs)是青光眼的主要损伤细胞,RGCs的死亡常导致视功能发生不可逆性损害。新近研究的某些生长因子能促进RGCs的存活和轴突再生。本文着重介绍了神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养蛋白-3(NT-3)、NT-4/5、睫状神经营养因子(CNTF)、成纤维细胞生长因子(FGF)及靶源性生长因子等对RGCs的作用,为RGCs的实验研究和临床研究提供基础。  相似文献   

14.
目前,表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)是否以Ca2+及cAMP为第二信使尚存在分歧。本研究分别以Ca2+结合荧光染料(Fur...  相似文献   

15.
视网膜脱离复位术前后血浆及视网膜下液的检测   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨视网膜脱离手术前后血浆及视网膜下液(subretinalfluid,SRF)中人表皮生长因子(humanepithelialgrowthfactor,h-EGF)、肿瘤坏死困子(tumornecrosisfactor,TNF)含量与增殖性玻璃体视网膜病变(proliferativevitreoretinopathy,PVR)形成的关系。方法采集51例视网膜脱离伴PVR者手术前、后血浆及SRF,采用放射免疫方法测定其中h-EGF及TNF含量。结果PVR患者血浆h-EGp、TNF值较正常人升高,但差异无显著性;与病怀轻重程度无关。SRF中h-EGF、TNF含量随病情加重而升高;SRF中h-EGF与TNF浓度呈正相关(P<0.05)。视网膜脱离复位术后5天,血浆中h-EGF、TNF显著升高(P<0.01),术后15、30天二者浓度下降,但未降至正常。结论SRF中h-EGF、TNF二者有助同作用,并与PVR的发生和发展有密切关系;血浆中一定浓度的h-EGF、TNF参与视网膜脱离复位术中的创伤修复与炎症反应,但高浓度则影响手术效果。  相似文献   

16.
目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)、胰岛素样生长因子I(insulinlike growth factorI,IGFⅠ) 及二者的共同作用对体外牛晶体上皮细胞(bovine lensepithelialcell,BLEC)增殖的影响。方法 BLEC原代培养,取第4 代细胞种入24 孔板,加入不同浓度的bFGF、IGFⅠ、bFGF+ 20 μg/LIGFⅠ,20 h 后加入3HTDR,16 h 后作液闪计数。结果 一定浓度的bFGF(1~100 μg/L) 、IGFⅠ(20~100 μg/L) 在体外有促进BLEC 增殖的作用( P< 0-01 ) ,20 μg/L的IGFⅠ可增加bFGF的促BLEC增殖作用。结论 生长因子及它们之间的协同作用在促进晶体上皮细胞异常增殖的过程中起重要作用。  相似文献   

17.
王方  颜永碧 《中华眼科杂志》2000,36(5):369-371,I024
目的 观察及评估血小板源生长因子(plateler-derived growth factor,PDGF)和转化生长因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)及其相应受体在视风原分布特征及临床意义。方法对9例孔源性视网脱离患者行玻璃体切除术同时获得25声视网膜表面膜的分布特征及临床意义。方法 对9例孔源性视网膜脱离中层得行玻璃体切除术同时获得25块视网膜表面膜  相似文献   

18.
目的 探讨生长激素(growth hormone,GH)、胰岛素样生长因子(insulin-like growth factorⅠIGF-I)水平与非胰岛素依赖型糖尿病(noninsulin-dependent diabetes mellitus,NIDDM)患者糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系。方法 用直接放射免疫法测定61例无DR的NIDDM患者、77例  相似文献   

19.
目的 检测组织激肽释放酶(tissuekallikrein,TKLK)、血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和可溶性细胞间黏附分子-1(solubleintracellularadhensionmolecul-1,sICAM-1)在糖尿病视网膜病变(diabeticretinopathy,DR)患者血清中的变化,观察TKLK在低氧条件下对人视网膜微血管内皮细胞(humanretinalmicrovascularendothelialcells,HRMECs)中VEGF和ICAM-1表达的影响。方法 收集2型糖尿病患者60例,按照DR分期标准将患者分为糖尿病无DR组(DM组)、非增生性DR组(NPDR组)和增生性DR组(PDR组),收集同期在本院体检的志愿者作为对照组,每组20例。ELISA法检测血清中TKLK、VEGF和sICAM-1的水平。体外HRMECs分别进行常氧和低氧培养,不同浓度重组TKLK处理后,检测细胞增殖、凋亡以及VEGF和ICAM-1的表达。结果 DM、NPDR和PDR组患者血清中TKLK、VEGF和sICAM-1水平明显高于对照组,4组总体差异有统计学意义(F=28.805,P=0.002;F=32.041,P=0.002;F=26.169,P=0.001);PDR患者血清中TKLK、VEGF和sICAM-1水平显著高于DM和NPDR组(均为P<0.001)。TKLK与VEGF(r=0.623,P<0.01)和sICAM-1水平(r=0.598,P<0.01)均呈正相关。10μg?mL-1rhTKLK可显著抑制低氧诱导的HRMECs增殖以及VEGF和ICAM-1的表达,并可促进细胞凋亡(P<0.05)。结论 TKLK通过与VEGF和ICAM-1相互作用而影响DR的进展。  相似文献   

20.
目的 检测并分析同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)及视黄醇结合蛋白4(reti-nolbindingprotein4,RBP4)与糖尿病视网膜病变(diabeticretinopathy,DR)的关系,以探讨对特定人群DR的诊断方法。方法 选取2014年6月到2015年6月桂林医学院附属医院内分泌科就诊的2型糖尿病患者200例,所有患者进行眼底检查必要时行眼底荧光血管造影(fundusfluoresceinangiography,FFA),根据眼底情况分为增殖期糖尿病视网膜病变(proliferativediabeticretinopathy,PDR)组、非增殖期糖尿病视网膜病变(non-proliferativedi-abeticretinopathy,NPDR)组,以及非糖尿病视网膜病变(non-diabeticretinopathy,NDR)组;检测各组空腹血糖(fastingpostprandialglucose,FPG)、餐后2h血糖(2-hourpostprandialglucose,2hPG)、糖化血红蛋白(glycosylatedhemoglobin,HbA1c)、血脂、Hcy、RBP4水平。结果 PDR组的Hcy(17.60±4.47)μmol·L-1、RBP4(16.32±3.57)μg·mL-1及NPDR组的Hcy(13.01±2.80)μmol·L-1、RBP4(12.25±2.45)μg·mL-1水平明显高于NDR组的Hcy(6.99±2.33)μmol·L-1、RBP4(8.89±1.90)μg·mL-1,且随着DR病情的进展逐渐升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);PDR组病程、2hPG、HbA1c、TG、LDL-C、Hcy、RBP4水平明显高于NPDR组、NDR组(均为P<0.05)。相关分析显示,2型糖尿病患者的RBP4与病程、年龄、HbA1c、FPG、2hPG、TC、TG、LDL-C、Hcy呈显著正相关,与HDL-C呈负相关。对DR的危险因素进行多元回归分析结果显示,病程、HbA1c、RBP4、Hcy是影响DR的主要危险因素。结论 测定Hcy及RBP4可及早发现DR,为早期筛查及治疗提供一定的方向。  相似文献   

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