角膜溃疡胶原酶潜酶氧化活化的动物实验研究

目的观察角膜溃疡氧自由基的产生与胶原酶活化的关系。方法以兔角膜溃疡为模型，用ＳＯＤ＋ＣＡＴ联合滴眼治疗和生理盐水滴眼对照１０天后测定角膜组织ＭＤＡ和胶原酶活性。结果治疗组角膜组织中ＭＤＡ及胶原酶活性均显著低于对照组，并在角膜组织匀浆上清中加入胶原酶潜酶活化剂（ＡＰＭＡ）后，对照组胶原酶活性无变化，而治疗组则显著提高，但总酶活力仍低于对照组。结论在体内氧自由基参与胶原酶潜酶活化；也表明氧自由基的清除可减少释放的胶原酶总量。     

抗氧化剂治疗角膜溃疡后高能物质变化的研究

目的观察不同抗氧化剂治疗细菌性角膜溃疡后角膜组织中高能物质的变化，旨在探讨抗氧化治疗对角膜溃疡高能物质代谢的影响及其意义。方法以兔细菌性角膜溃疡为模型，用不同抗氧化剂治疗１０ｄ，测定角膜组织中ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ的含量。结果角膜溃疡后角膜组织中ＡＴＰ、ＡＤＰ显著下降；抗氧化剂治疗后ＡＤＰ恢复达正常水平；ＡＴＰ有不同程度的提高，并且提高的程度与抗氧化剂的抗氧化效能一致。结论抗氧化治疗能提高角膜溃疡组织中高能物质的含量，促进组织的修复，从另一个侧面证明抗氧化剂是治疗角膜溃疡的有效用药。     

转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶构建三维角膜基质

目的检测转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶对三维培养的角膜基质细胞的影响,探讨可提高机械性能的组织工程角膜基质层新途径。方法胶原酶消化法获取原代兔角膜基质细胞,以加入转谷氨酰胺酶与胶原凝胶交联为实验组,不加酶交联为对照组。倒置显微镜下每日观察细胞生长情况、Alamar-Blue试剂检测细胞增生、免疫荧光法检测凝胶内细胞波形蛋白、检测透光度、酶消化法检测胶原凝胶抗消化能力。结果实验组细胞胶原凝胶内附着和生长优于对照组,细胞在凝胶内呈树枝状生长。2组细胞均随培养时间延长明显增生（P=0.000）。共焦显微镜下见2组细胞胞浆波形蛋白均阳性表达,实验组细胞伪足更丰富。实验组透光度稍差于对照组。实验组抵抗胶原酶消化的能力显著增强。结论酶交联的胶原凝胶对角膜基质细胞无毒性作用,重构的基质层结构更加稳定,有利于组织工程角膜基质层的构建。     

角膜上皮细胞培养的研究

角膜上皮细胞的重要性已逐渐为人们所重视,对角膜上皮细胞的基础和临床研究亦日渐深入。角膜上皮细胞的组织培养作为研究角膜上皮细胞的一种很好的技术方法,已被很多实验室广泛应用于角膜上皮细胞的胶原、胶原酶代谢产物,粘蛋白代谢产物,病毒感染的影响,细胞分化,各种生长促进因子和药物对上皮细胞生长的影响,基底膜胶原     

胶原酶活性的测定方法介绍——氨基酸分析法

胶原酶活性的测定方法介绍——氨基酸分析法王一徐毅孙伟（第三军医大学西南医院眼科，重庆６３００３８）胶原酶在结缔组织的正常代谢及病理损害中起着重要作用，对于胶原酶的研究国内报道很少。而在国外，对于胶原酶活性的测定已报道众多的方法，如粘度法、同位素法、荧...     

抗环血酸抑制胶原酶活性的实验研究

本研究首次在体外观察了抗坏血酸对胶原酶活性的抑制作用。结果表明：抗坏血酸浓度达56．7mmol／L有明显抑制胶原酶活性作用；浓度至85mmoll／L在本反应体系中完全抑制胶原酶活性，加热破坏抗坏血酸则失去抑制作用。这将进一步理解抗坏血酸在治疗角膜碱烧伤及角膜溃疡中的作用。     

四环素抑制胶原酶活性

对常用四种抗生素的抑活胶原酶作用进行了体外实验观察，结果表明，氯霉素，庆大霉素，青霉素对胶原酶活性无抑制作用，而四环素则显著抑制胶原酶活性，且抑活作用与浓度成正比。     

胶原交联对兔角膜碱烧伤后基质融解的影响

目的研究角膜胶原交联治疗对兔角膜碱烧伤后基质融解的影响。方法选取25只新西兰大白兔随机分为正常对照组(5只10眼)、模型对照组(10只10眼)、胶原交联治疗组(10只10眼)。正常对照组不做处理,模型对照组和胶原交联治疗组右眼制备角膜中度碱烧伤模型。造模成功后,胶原交联治疗组采用胶原交联治疗后涂红霉素眼膏,模型对照组滴核黄素眼液30min后涂红霉素眼膏;三组均应用抗生素眼液滴眼。观察角膜融解及混浊等情况,28d后处死动物,对兔角膜进行组织病理学检查和免疫组织化学检测。结果正常对照组未发生变化,模型对照组6眼造模后(14±4)d角膜融解,2眼角膜穿孔;胶原交联治疗组1眼造模后23d角膜融解,无角膜穿孔发生;两组角膜融解发生率间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。病理检查结果显示胶原交联治疗组角膜水肿程度轻,角膜胶原纤维破坏轻,炎性细胞浸润明显少于模型对照组。免疫组织化学结果显示胶原交联治疗组角膜胶原纤维较模型对照组排列整齐,深层角膜组织影响小。结论胶原交联治疗可抑制和延迟兔角膜碱烧伤后角膜融解的发生和发展,减轻角膜胶原纤维的破坏及减少角膜组织中炎性细胞的浸润。     

胶原酶及胶原酶抑制剂

1962年Gross及Lapiere首先在蝌蚪皮肤中发现胶原酶。在此以前有详细记述的只有细菌的胶原酶。角膜胶原酶的大量研究始于60年代后期,但大多限于动物实验及实验室研究,且绝大部份资料仅阐述了胶原酶在碱性烧伤角膜溃疡中所起的作用。胶原酶抑制剂的临床应用,也只限局于防治碱性烧伤所致的角膜溃疡,而对其他原因引起的角膜溃疡是否有效尚无定论。为进一步探讨胶原酶抑制剂对各种角膜溃疡的防治作用,特综合国外有关资料,以供参考。实验研究一、胶原酶 (一)碱性烧伤角膜组织产生胶原酶:由于角膜碱性燃伤后2周才会发生溃疡,因而认为溃     

角膜硷烧伤的治疗

作者根据以往动物试验证明:严重的兔角膜硷烧伤性溃疡和穿孔是由于角膜所产生的分解胶原的酶(Collagenolytic enzyme)而引起。角膜细胞接触硷之后立即被破坏,7—10天后,重新生长的上皮细胞和再次组成基质的细胞产生一种能使角膜发生溃疡的胶原酶(Collagenase)。用胶原酶抑制剂来治疗急性兔角膜硷烧伤可避免溃疡形成。Brawn等用胶原酶抑制剂、半胱氨酸(Cystein)治疗局部硷烧伤或有溃疡形成的角膜硷烧伤21只限获得良好疗效。因为硷烧伤后