γ—干扰素对人晶体上皮细胞增殖和胶原合成的影响

为研究干扰素γ（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎγ，ＩＦＮ－γ）对人晶体上皮细胞（ＨＬＥＣ）增殖及胶原合成的影响，采用ＭＴＴ比色法和３Ｈ－脯氨酸参入法研究了不同浓度的γ－干扰素对ＨＬＥＣ增殖活性及胶原合成的作用。结果ＩＦＮ－γ（１００—１０００ｕ）能明显抑制ＨＬＥＣ的增殖和胶原合成，１０００—１００００ｕ能显著对抗１０％小牛血清对ＨＬＥＣ的促增殖作用。结论ＩＦＮ－γ或许可以为临床筛选预防后发性白内障的药物提供依据     

LY294002联合奥曲肽对bFGF诱导的兔晶状体上皮细胞增殖的影响

目的　探讨ＬＹ２９４００２联合奥曲肽对碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）诱导的兔晶状体上皮细胞（ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＬＥＣｓ）增殖的影响。方法　兔眼ＬＥＣｓ经原代和传代培养后,共分为４组:空白对照组、增殖对照组、实验药物组、增殖药物组。空白对照组使用仅含无血清ＤＭＥＭ培养;增殖对照组使用加ｂＦＧＦ（１０ｍｇ·Ｌ－１）的无血清ＤＭＥＭ;实验药物组培养时在不加ｂＦＧＦ增殖的情况下分别单独应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２、单独应用１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽和联合应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２与１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽来培养;增殖药物组在加ｂＦＧＦ增殖的情况下分别单独应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２、单独应用１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽和联合应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２和１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽进行细胞培养,每组重复５次。各组分别培养４８ｈ。ＭＴＴ比色法测定吸光度（Ａ值）分析各组细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测各周期细胞的百分率。结果　增殖对照组与空白对照组相比,吸光度Ａ值升高（Ｐ＜０．０５）;实验药物组中各组分别与空白对照组相比,吸光度Ａ值均有不同程度下降（均为Ｐ＜０．０５）;增殖药物组中各组分别与增殖对照组相比,吸光度Ａ值明显下降（均为Ｐ＜０．０５）;生长抑制率与吸光度Ａ值趋势相同。经流式细胞仪分析,实验药物组中联合用药组与两个单独用药组相比Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增高,Ｓ期细胞比例降低（均为Ｐ＜０．０５）;增殖药物组中,联合用药组与两个单独用药组相比也出现Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增高,Ｓ期细胞比例降低（均为Ｐ＜０．０５）。结论　ＬＹ２９４００２联合奥曲肽较单独用药对ＬＥＣｓ的增殖抑制作用更强。这为临床筛选药物防治后发性白内障提供依据。     

MsrB1对ONOO－诱导的人晶状体上皮细胞周期的影响

目的　探讨蛋氨酸亚砜还原酶Ｂ１（ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅｓｕｌｆｏｘｉｄｅｒｅｄｕｃｔａｓｅＢ１,ＭｓｒＢ１）基因沉默对过氧亚硝酸根（ＯＮＯＯ－）诱导的人晶状体上皮细胞（ｈｕｍａｎｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＨＬＥＣ）细胞周期的影响和ＥＲＫ信号通路在其中的调节作用。方法　将培养的ＨＬＥＣ分为两组:正常组和ＭｓｒＢ１基因沉默组,分别用０μｍｏｌ·Ｌ－１、１００μｍｏｌ·Ｌ－１、２００μｍｏｌ·Ｌ－１和３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理２０ｍｉｎ后,继续培养１２ｈ。用ＲＴ-ＰＣＲ法检测ＭｓｒＢ１基因表达水平变化,流式细胞仪检测细胞周期水平变化,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测ＭｓｒＢ１基因沉默和ＯＮＯＯ－对ｐＥＲＫ表达水平的影响。结果　３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理ＨＬＥＣ会导致ＭｓｒＢ１表达水平显著下降（Ｐ＜０．０１）,当ＭｓｒＢ１基因沉默细胞经３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理后,ＭｓｒＢ１表达水平进一步显著下调（Ｐ＜０．０５）。经２００μｍｏｌ·Ｌ－１或３００μｍｏｌ·Ｌ－１ ＯＮＯＯ－处理,ＨＬＥＣ细胞周期分别阻滞在Ｇ２／Ｍ期和Ｓ期,当ＭｓｒＢ１基因沉默细胞经２００μｍｏｌ·Ｌ－１或３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理后,更多的细胞阻滞在Ｇ２／Ｍ期或Ｓ期（Ｐ＜０．０５）。ｐＥＲＫ检测结果表明,ＭｓｒＢ１基因沉默前后经ＯＮＯＯ－处理导致的细胞周期阻滞和ｐＥＲＫ表达水平显著下降有关（Ｐ＜０．０１）。结论　ＯＮＯＯ－可以下调ＨＬＥＣＭｓｒＢ１表达水平,ＭｓｒＢ１基因沉默细胞经ＯＮＯＯ－处理,ｐＥＲＫ表达水平显著下降,导致更多细胞阻滞在Ｇ２／Ｍ期和Ｓ期。     

碱性成纤维细胞生长因子对牛晶状体上皮细胞增殖的影响及其在牛晶 …

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子（bＦＧＦ）在体外对牛晶状体上皮细胞（ＢＬＥＣ） 增殖的影响及确定ＢＬＥＣ是否表达bＦＧＦ蛋白。方法 ＢＬＥＣ原代培养。用不同浓度的bＦＧＦ及＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴＤＲ）处理ＢＬＥＣ３６h后,液闪测定bＦＧＦ对ＢＬＥＣ＾３Ｈ－ＴＤＲ掺入率的。Ｗｅｓｔｅｎ印迹（Ｗｅｓｔｅｎ ｂｌｏｔ）法确 定ＢＬＥＣ是否表达bＦＧＦ蛋白。结果 bＦＧＦ在体外有促进ＢＬＥＣ增殖作用,Ｗｅｓ     

8—氯腺苷对生长因子诱导的视网膜色素上皮细胞增殖抑制作用的研究

目的探讨８氯腺苷（８ｃｈｌｏｒｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ,８ＣＬＡ）对生长因子诱导的视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ,ＲＰＥ）细胞增殖的抑制作用。方法通过ＲＰＥ细胞培养,采用３ＨＴｄＲ掺入测定８ＣＬＡ对肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ,ＴＮＦα）、白细胞介素１β（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ,ＩＬ１β）和碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）诱导的ＲＰＥ细胞ＤＮＡ合成的抑制作用。结果三种因子单独使用均可使ＲＰＥ细胞３ＨＴｄＲ掺入每分钟计数（ｃｏｕｎｔｐｅｒｍｉｎｕｔｅ,ＣＰＭ）值明显增高（Ｐ＜０．０５）,８ＣＬＡ在其终浓度为２～１６μｍｏｌ／Ｌ时可使三种因子刺激的ＲＰＥ细胞３ＨＴｄＲＣＰＭ值明显降低（Ｐ＜０．０５）。在ＴＮＦα、ＩＬ１β、ｂＦＧＦ和８ＣＬＡ组,分别于１６、８、２μｍｏｌ／Ｌ时,ＣＰＭ值与基础值相近（Ｐ＞０．０５）。结论８ＣＬＡ可抑制生长因子诱导的ＲＰＥ细胞增殖,为抗增殖药物提供了新的途径     

碱性成纤维细胞生长因子对牛晶状体上皮细胞增殖的影响及其在牛晶状体上皮细胞中的蛋白表达

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ） 在体外对牛晶状体上皮细胞（ＢＬＥＣ） 增殖的影响及确定ＢＬＥＣ 是否表达ｂＦＧＦ 蛋白。 方法　ＢＬＥＣ 原代培养。用不同浓度的ｂＦＧＦ 及３Ｈ胸腺嘧啶（３ＨＴＤＲ） 处理ＢＬＥＣ３６ ｈ 后，液闪测定ｂＦＧＦ 对ＢＬＥＣ３ＨＴＤＲ 掺入率的影响。Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹（ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ） 法确定ＢＬＥＣ 是否表达ｂＦＧＦ 蛋白。 结果　ｂＦＧＦ 在体外有促进ＢＬＥＣ 增殖作用，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 法表明ＢＬＥＣ 可表达低分子量（１８ ０００）ｂＦＧＦ 蛋白。 结论　ｂＦＧＦ 可能通过晶状体上皮细胞的自分泌，促进白内障术后残留晶状体上皮细胞的增殖，导致后发性白内障     

晶体上皮细胞在体外的分化规律及血清和眼组织对其增殖的影响

目的从细胞培养水平探讨后囊混浊形成机理和术后血－房水屏障破坏、晶体皮质残留等对其的影响。方法用考马斯亮蓝（ＣｏｏｍａｓｓｉｅＢＢ）染色、倒置显微镜和电镜观察培养的牛晶体上皮细胞（ｂｏｖｉｎｅｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｓ，ＢＬＥＣ）的增殖和分化规律，用Ｇｉｅｍｓａ染色比色法观察胎牛血清、房水、晶体皮质等对ＢＬＥＣ增殖的影响。结果在体外培养条件下ＢＬＥＣ可在第１～７代内分化为晶体纤维细胞，表现为细胞体积增大，形状渐趋长条形和梭形，细胞骨架逐渐增多；胎牛血清呈浓度依赖性促进ＢＬＥＣ增殖（Ｐ＜０．０５）；高浓度房水（占培养液１／３）抑制ＢＬＥＣ增殖（Ｐ＜０．０１），晶体皮质、晶体核、玻璃体均促进ＢＬＥＣ增殖（Ｐ＜０．０１）。结论晶体上皮细胞的分化在后囊混浊形成中起重要作用；术后血－房水屏障破坏、晶体皮质残留和玻璃体脱出可通过刺激晶体上皮细胞增殖促进后囊混浊形成。     

维甲酸对体外培养兔视网膜色素上皮细胞DNA合成的影响

目的：研究维甲酸（ｒｅｔｉｎｏｉｃ ａｃｉｄ,ＲＡ）对视网膜色素上ｒｅｔｉｎａｌ ｐｉｇｍｅｎｔ ｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ,ＲＰＥ）细胞生长,增殖的影响。方法：通过细胞生长曲线的测定,观察１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ ＲＡ对ＲＰＥ细胞生长的影响;通过＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入和液闪测定１０＾－５,１０＾－６,１０＾－７,１０＾－８,１０＾－９,１０＾－１９ｍｏｌ／Ｌ ＲＡ作用ＲＰＥ细胞５天,７天时每分钟脉冲值（ＣＰＭ     

Cyclophilin D在氧化应激下人视网膜色素上皮细胞中的表达

目的　检测氧化应激下人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ,ＲＰＥ）细胞内ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ的表达,初步探索ＲＰＥ细胞氧化损伤保护新靶点。方法　培养细胞系ＡＲＰＥ１９及人原代ＲＰＥ细胞,相差显微镜下观察细胞形态,应用激光共聚焦显微镜免疫荧光法鉴定细胞。不同浓度Ｈ２Ｏ２（０μｍｏｌ·Ｌ－１、１００μｍｏｌ·Ｌ－１、５００μｍｏｌ·Ｌ－１、１ｍｍｏｌ·Ｌ－１）处理细胞２４ｈ后,应用ＲＴ-ＰＣＲ检测ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ在细胞内的表达。随后预先在部分细胞中加入３μｍｏｌ·Ｌ－１环孢素Ａ（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ,ＣｓＡ）处理３０ｍｉｎ后再加入不同浓度Ｈ２Ｏ２（８０μｍｏｌ·Ｌ－１、１６０μｍｏｌ·Ｌ－１、３２０μｍｏ·Ｌ－１）２ｈ,即ＣｓＡ＋Ｈ２Ｏ２组,应用乳酸脱氢酶（ｌａｃｔｉｃｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ,ＬＤＨ）法检测细胞致死率,并与Ｈ２Ｏ２组的ＬＤＨ释放量相比较。结果　培养的ＡＲＰＥ１９和人原代ＲＰＥ细胞均表达ＲＰＥ细胞特异性抗体ＲＰＥ６５。１００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ２Ｏ２处理细胞２４ｈ后ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ表达量明显升高,当Ｈ２Ｏ２浓度增加到５００μｍｏｌ·Ｌ－１时,ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ表达量降低,１ｍｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ２Ｏ２处理时,ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ表达水平未见增加。在各Ｈ２Ｏ２ 组组间,ＬＤＨ的释放量随着Ｈ２Ｏ２ 浓度的升高而增加;与Ｈ２Ｏ２ 组相比,ＣｓＡ＋Ｈ２Ｏ２组ＬＤＨ的释放水平明显降低（Ｐ＜０．０５）。结论　氧化应激下ＲＰＥ细胞内ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ的表达升高,该蛋白表达的增加可能进一步导致氧化应激下细胞的死亡,ＣｓＡ可能成为ＲＰＥ细胞保护的新策略。     

表皮生长因子对晶体上皮细胞增殖影响的研究

目的 评价表皮生长因子对晶体上皮细胞增殖的影响。方法 在培养的牛和人晶体上皮细胞中添加ＥＧＦ,甲基噻唑基四唑法测定细胞增殖情况以及一抗体对ＥＧＦ作用的影响。结果ＥＧＦ浓度为１０＾－１－１０＾２μｇ／Ｌ对牛晶体上皮细胞增殖有促进作用,其中浓度为１０μｇ／Ｌ作用３天达到最大促增殖效果;ＥＧＦ浓度为１－１０＾２μｇ／Ｌ对人晶体上皮细胞增殖有促进作用,浓度为１０＾２μｇ／Ｌ具有最大促增殖效果。抗ＥＧＦＲ抗     

bFGF诱导人晶状体上皮细胞增殖过程中细胞外信号调节激酶的作用

目的:检测细胞外信号调节激酶(extracellular regulated kinase,ERK)在碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)诱导的人晶状体上皮细胞增殖过程中的表达与活化;检测ERK1/2特异性阻断剂PD98059对人晶状体上皮细胞增殖的影响。方法:人晶状体上皮细胞系SRA01/04体外培养,采用MTT比色法和[3H]-TdR掺入法检测ERK阻断剂PD98059对人晶状体上皮细胞活力和DNA合成的影响;Westernblot法测定bFGF对培养的人晶状体上皮细胞ERK,c-Jun氨基末端激酶(JNK),P38蛋白表达及PD98059对环氧合酶-2(COX-2)表达的影响。结果:10μg/LbFGF能显著刺激人晶状体上皮细胞增生,1μmol/LPD98059即能显著抑制bFGF启动的HLEC增殖,其效应呈浓度依赖性(P<0.01)。10μg/LbFGF可激活ERK信号通路,诱导COX-2蛋白表达,其效应在30min内达到高峰,6h后逐渐减弱,此作用可被10μmol/LPD98059阻断;10μg/LbFGF对非磷酸化ERK,磷酸化和非磷酸化JNK及P38表达无明显影响。结论:有丝分裂原活性蛋白激酶信号传导通路中ERK磷酸化对bFGF启动的人晶状体上皮细胞增殖具有重要的调节作用。     

四种细胞因子对牛晶状体上皮细胞胶原合成的影响及对前胶原mRNA表达的调控

目的 探讨表皮生长因子(EGF)、白细胞介素1(IL-1)、γ干扰素(IFN-γ)和生长抑素8肽(SS-8肽)在晶状体后囊膜混浊形成中的作用及影响胶原合成的机制。方法 细胞接种于96孔培养板贴壁后分别加入含有浓度为10^-2～10^2ng／ml的EGF、10～10^5ng／ml的IL-1、10^-11～10^-7mol／L的SS．8肽及10～10^5U／ml的IFN-γ细胞培养液,采用^3H-脯氨酸掺人法检测对胶原合成的影响;用Northern blot技术检测对Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的调控。结果 EGF 10^-1～10^2ng／ml、IL-1 10^2～10^5ng／ml显著促进胶原合成,IFN-γ 10^3～10^5U／ml、SS-8肽 10^-10～10^-7mol／L显著抑制胶原合成;1ng／ml的EGF及10^3ng／ml的IL-1可增加Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达,而10^3U／ml的IFN-γ及10^-9mol／L的SS-8肽可减少Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达。结论 EGF、IL-1参与了晶状体后囊膜混浊形成中的胶原合成,且对胶原合成的影响是作用于转录水平;IFN-γ、SS-8肽的作用提示其可用于防治晶状体后囊膜混浊。（中华眼科杂志,2004,40：545-548)     

阿魏酸对高糖诱导的人晶状体上皮细胞损伤的保护作用

目的　探讨阿魏酸对高糖诱导的人晶状体上皮细胞（human lens epithelial cells,HLEC）损伤的保护作用。方法　以HLEC为研究对象,将细胞随机分为对照组（HLEC+DMEM）、DMSO组（HLEC+DMEM+DMSO）、高糖组（HLEC+DMEM+30 mmol·L^-1高糖）、高糖+阿魏酸组（HLEC+DMEM+DMSO+30 mmo·L^-1高糖+阿魏酸）。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;流式细胞术检测各组细胞凋亡;Q-PCR检测p53、Bcl-2、Bax mRNA表达水平;免疫细胞化学和Western blot法检测p53、Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果　高糖抑制HLEC的细胞活性,不同浓度阿魏酸干预后,HLEC的细胞活性均明显升高,差异均具有统计学意义（均为P<0.05）。流式细胞术检测结果显示,高糖组HLEC凋亡率高于对照组（P<0.05）,高糖+阿魏酸组细胞凋亡率低于高糖组（P<0.05）;高糖组p53、Bax mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组,而Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平均明显低于对照组（均为P<0.05）;高糖+阿魏酸组p53、Bax mRNA和蛋白表达水平均明显低于高糖组,而Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平均明显高于高糖组（均为P<0.05）。结论　阿魏酸可能通过降低Bax和促进Bcl-2表达,进而减轻高糖诱导的HLEC损伤,从而达到防治糖尿病白内障发生的作用。     

转化生长因子-β、白细胞介素-1和碱性成纤维细胞生长因子对人晶状体上皮细胞的影响

目的:研究体外细胞培养中转化生长因子-β(transforma-tion growth factor beta,TGF-β)、白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对人晶状体上皮细胞(human lens epi-thelial cell,HLEC)的增生作用,对白内障术后晶状体后囊浑浊的预防提供依据。方法:首先进行人晶状体上皮细胞的原代培养,传代培养的晶状体上皮细胞分成各5个实验组,分别加入不同剂量的TGF-β、IL-1,设空白对照组,进行3H-TDR掺入实验,观察TGF-β、IL-1、bFGF对晶状体上皮细胞的作用。结果:TGF-β、IL-1、bFGF对在体外的HLEC增生均有促进作用,并随剂量增加而增强(P<0.05)。结论:TGF-β、IL-1、bFGF在白内障术后的后发性白内障的形成发展过程中起促进作用。     

BHMT对同型半胱氨酸诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的：观察甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)在同型半胱氨酸(Hcy)环境下对人晶状体上皮细胞(HLEC)的保护作用。

方法：构建BHMT基因过表达慢病毒载体,将体外培养的HLEC随机分为3组：正常组：正常培养的HLEC; 对照组：感染了空载体的HLEC-B3,BHMT过表达组(OE)：感染了过表达BHMT基因载体的HLEC-B3,均培养于10% FBS(胎牛血清)培养基+5mmol/L Hcy培养液中。应用EdU(5-乙炔基-2''脱氧尿嘧啶核苷)试剂盒检测细胞的增殖能力,流式细胞仪检测活性氧(ROS)含量,可见分光光度计测算谷胱甘肽(GSH)活性,Western blotting检测内质网应激相关蛋白(GPR78,Nrf2)及凋亡相关酶Caspase-12的表达。

结果：BHMT过表达组较对照组细胞增殖能力增长约30.0%(P<0.05)。ROS检测显示,正常组、对照组、过表达组荧光强度分别为(89.2043±0.3511)%、(91.4502±0.0606)%、(49.5625±0.4502)%,过表达组与正常组有差异(P<0.05); GSH活性检测显示：相比于正常组与对照组,BHMT高表达组GSH活性明显上升(P<0.05); Western blotting结果显示：GRP78的相对表达量在正常组及对照组中明显高于过表达组,Nrf2的相对表达量在正常组与对照组中明显低于过表达组。凋亡相关酶Caspase-12的相对表达量在过表达组中明显低于对照组。

结论：BHMT可以抑制Hcy对HLEC的氧化损伤作用,降低ROS水平,升高GSH活性,减轻内质网应激反应,抑制细胞凋亡。BHMT对Hcy诱导的HLEC氧化损伤有重要的保护作用。     

Diclofenac sodium and cyclosporin A inhibit human lens epithelial cell proliferation in culture

Purpose: To investigate the effect of diclofenac sodium salt and cyclosporin A (CsA) on human lens epithelial cell (HLEC) growth in culture. Methods: Cultures of HLEC were obtained from anterior capsules from extracapsular cataract surgery. Third-passage cells were seeded in 96-well plates in 0.1 ml culture medium. Cytotoxicity was estimated by the tetrazolium test in confluent monolayers after 24 h exposure to a wide range of concentrations of diclofenac and CsA. The effect of subcytotoxic concentrations of diclofenac and CsA on HLEC proliferation in subconfluent cultures was evaluated after 24 and 72 h of exposure. To investigate the relationship between PGEZ synthesis and the inhibitory effect of these drugs, after 24 h of exposure to diclofenac and CsA the production of PGE₂ was measured by radioimmunoassay. We also tested the effect of exogenous PGE₂ addition to diclofenac 72-h-treated cultures. Results: Diclofenac and CsA (at concentrations 65 M and 2.5 M, respectively) inhibited the proliferation of subconfluent cultures of HLEC in a dose-dependent fashion. Diclofenac inhibits PGE₂ synthesis, while CsA at high doses stimulates PGE₂ synthesis of cultured HLEC. Exogenous PGE₂ addition reversed in part the inhibitory effect of diclofenac. Conclusions: Diclofenac and CsA at appropriate doses are effective in inhibiting cultured HLEC proliferation. This could be of interest to prevent posterior capsule opacification. Further in vivo experimental studies seem worthwhile.None of the authors have financial or proprietary interests in any of the products mentioned in this article     

维生素E对IL-6作用的视网膜色素上皮细胞增生及胶原合成的影响

目的 探讨白细胞介素-6(IL-6)对视网膜色素上皮(RPE)细胞增生及胶原合成的作用，以及维生素E对这种作用的影响。方法 采用放射自显影的方法测定RPE细胞增生和胶原合成。用含IL-6和不同浓度维生素E的EMDM培养基培养RPE细胞，加入氚标记的胸腺嘧啶核苷(^3H-TdR)和氚标记的脯氩酸(^3H-proline)，测定每分钟闪烁值cpm，反映^3H-TdR和^3H-proline的掺入量，即RPE细胞增殖和胶原合成情况。结果 IL-6与RPE细胞共同孵育后，^3H-TdR和^3H-proline的掺入量较单纯RPE细胞培养组明显升高，提示IL-6促进RPE细胞增牛明显，胶原合成显著增加：不同浓度的维生素E和IL-6共同培养的RPE细胞^3H-TdR和^3H-proline的掺入量较单纯IL-6培养的RPE细胞组明显降低。且维生素E浓度越高，^3H-TdR和^3H-proline的掺入量越低，提示维生素E抑制IL-6引起的RPE细胞的增生和胶原合成，且抑制作用随浓度的增加而增加。结论 IL-6对RPE细胞的增生和胶原合成有促进作用，维生素E抑制IL-6引起的RPE细胞的增生和胶原合成，抑制作用与维生素E浓度成正比。     

碱性成纤维细胞生长因子对人晶状体上皮细胞增殖及移行作用的影响

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对体外培养的人晶状体上皮细胞（HLEC）增殖及移行作用的影响.方法 在无血清培养液培养的HLEC中分别加入不同终浓度的bFCF（0.01、0.1、1、10及100 μg/L）,MTT法测定其促细胞增殖的情况;流式细胞仪分析细胞周期;HLEC损伤愈合模型,观察不同终浓度bFGF处理24 h后HLEC的移行情况.结果 bFGF浓度为0.1、1、10、100 μg/L时,其对HLEC细胞有明显的促增殖作用,与阴性对照组比较差异具有统计学意义（P〈0.01）,100 μg/L作用24 h增殖率最大,达112.78%,作用强度呈浓度时间依赖性.bFGF通过促进细胞周期变化,与阴性对照组比较差异具有统计学意义（P〈0.01）,G0/G1期细胞减少,S期和G2/M期细胞增多,通过促进HLEC由G0向G1的转化来促进细胞的增殖;bFGF浓度1、10、100 μg/L作用24 h.可明显促进HLEC的移行,其移行能力分别为27.21%、154.42%、和238.77%,与阴性对照组相比,差异有显著统计学意义（P〈0.01）.结论 bFGF可促进HLEC的增殖和移行,是HLEC强有力的有丝分裂原和促移行因子.     

【In Press】Senescence Marker Protein 30 Promotes the Proliferation of Human Lens Epithelial Cells SRA01/04 and Inhibits its Apoptosis

AIM: To study the effect of senescence marker protein 30 (SMP30) on the proliferation and apoptosis of human lens epithelial cell (HLEC) SRA01/04. METHODS: SMP30 overexpression and knock down type cell lines were cultivated by using two groups RGN (SMP30) lentiviral vectors (LV-RGN, LV-RGN-RNAi) and the respective negative control virus infect SRA01/04 cells. Western blot and q-PCR analysis were used to determine RGN overexpression and knock down efficiency. We use Cell Counting Kit-8 (CCK8) assay to measure cell viability and 5-bromodeoxyuridine (BrdU) assay to test cell proliferation. Cell cycle was measured by PI FACS assay and Cell apoptosis was tested by Annexin-V APC assay through flow cytometry. We use western blot to measure the content of caspase-3 in SRA01/04. RESULTS: We used PCR and WB techniques to determine the successful transfection of SMP30 overexpression (OE) and knock down (KD) SRA01/04 cell lines. By CCK8, Brdu and PI FACS cell cycle assay, it was found that the SMP30 OE group promoted cell proliferation (P<0.05) compared with the control group, and the KD group inhibited cell proliferation (P<0.05).The results of Annexin V APC signal staining detection indicated that compared with respective control group, the cell apoptosis rate was higher in KD group (P<0.05) but lower in OE group (P<0.01). The expression of caspase-3 was down-regulated in OE group through Western Blot assay and up-regulated in KD group compared with respective control group. CONCLUSION: Proliferation of SRA01/04 was promoted by over-expressing SMP30 and apoptosis was suppressed. Increasing the expression of SMP30 may protect HLEC SRA01/04 against apoptosis in cataract.     

双氯芬酸钠滴眼液对培养人晶状体上皮细胞的抑制作用

目的　研究双氯芬酸钠滴眼液对人晶状体上皮细胞增殖的抑制作用。方法　分离培养人晶状体上皮细胞 ,在培养液内加入双氯芬酸钠滴眼液 ,并以高三尖杉酯碱作为对照。测定药物对细胞的半效抑制量 ;观察药物对细胞贴壁和形态学的影响。结果　双氯芬酸钠滴眼液作用 2 4h对晶状体上皮细胞半效量ID50 为 0 78μg/ml,72hID50 为0 63 μg/ml,作用时间对细胞的抑制率无明显差异 (P >0 0 5 ) ;与对照组相比 2 4h的ID50 无显著差异 (P >0 0 5 ) ,而 72hID50 有明显差异 (P <0 0 5 )。结论　双氯芬酸钠滴眼液对培养人晶状体上皮细胞在体外试验有抑制作用 ,但作为滴眼液能否作为防治后囊混浊的一种药物尚需进一步研究才能确定