角膜溃疡胶原酶潜酶氧化活化的动物实验研究

目的观察角膜溃疡氧自由基的产生与胶原酶活化的关系。方法以兔角膜溃疡为模型，用ＳＯＤ＋ＣＡＴ联合滴眼治疗和生理盐水滴眼对照１０天后测定角膜组织ＭＤＡ和胶原酶活性。结果治疗组角膜组织中ＭＤＡ及胶原酶活性均显著低于对照组，并在角膜组织匀浆上清中加入胶原酶潜酶活化剂（ＡＰＭＡ）后，对照组胶原酶活性无变化，而治疗组则显著提高，但总酶活力仍低于对照组。结论在体内氧自由基参与胶原酶潜酶活化；也表明氧自由基的清除可减少释放的胶原酶总量。     

四环素抑制胶原酶活性

对常用四种抗生素的抑活胶原酶作用进行了体外实验观察，结果表明，氯霉素，庆大霉素，青霉素对胶原酶活性无抑制作用，而四环素则显著抑制胶原酶活性，且抑活作用与浓度成正比。     

抗氧化剂治疗角膜溃疡对胶原酶活性影响的观察

目的观察抗氧化剂治疗对角膜组织中胶原酶活性的影响。方法以细菌性角膜溃疡为模型，测定不同抗氧化剂治疗后角膜组织中丙二酰二醛（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）含量和胶原酶活性。结果抗氧化剂联合抗菌素治疗较单用抗菌素能更有效地减少组织脂质过氧化和活性胶原酶生成。结论从动物实验角度证明了抗氧化剂治疗对胶原酶活化的影响，并提示抗氧化剂是一种理想的辅助用药，而且应联合用药。     

人多核白细胞胶原酶潜酶活化的实验研究

对人多核白细胞被激活后释放胶原酶潜酶的活化机制进行了研究。结果表明：激活的多核白细胞可释放明显的胶原酶活性；ＳＯＤ和ＣＡＴ显著抑制释放的潜酶活化，但不影响潜酶的释放。表明活性氧参与胶原酶潜酶的活化，而且最终氧化物为羟自由基（ＯＨ）。     

转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶构建三维角膜基质

目的检测转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶对三维培养的角膜基质细胞的影响,探讨可提高机械性能的组织工程角膜基质层新途径。方法胶原酶消化法获取原代兔角膜基质细胞,以加入转谷氨酰胺酶与胶原凝胶交联为实验组,不加酶交联为对照组。倒置显微镜下每日观察细胞生长情况、Alamar-Blue试剂检测细胞增生、免疫荧光法检测凝胶内细胞波形蛋白、检测透光度、酶消化法检测胶原凝胶抗消化能力。结果实验组细胞胶原凝胶内附着和生长优于对照组,细胞在凝胶内呈树枝状生长。2组细胞均随培养时间延长明显增生（P=0.000）。共焦显微镜下见2组细胞胞浆波形蛋白均阳性表达,实验组细胞伪足更丰富。实验组透光度稍差于对照组。实验组抵抗胶原酶消化的能力显著增强。结论酶交联的胶原凝胶对角膜基质细胞无毒性作用,重构的基质层结构更加稳定,有利于组织工程角膜基质层的构建。     

几种胶原酶抑制剂滴眼液的效果比较

目的 观察比较６种眼科外用药物，为临床筛选较强的抑制胶原酶的眼液。方法 用鼠胶原１、胶原酶及考马斯亮蓝比色法来检测药物抑制胶原酶的能力。结果 ６种药物有不同程度抑制胶原酶作用。其中卡托普利极强、乙酰半胱氨酸和依地酸钠较强，而枸橼酸钠、硫代硫酸钠和四环素较差。结论 ０．５ｇ．Ｌ＾－１卡托普利眼液抑制胶原酶能力极强、副作用小、刺激性极微、药物来源及配制方便。     

抗环血酸抑制胶原酶活性的实验研究

本研究首次在体外观察了抗坏血酸对胶原酶活性的抑制作用。结果表明：抗坏血酸浓度达56．7mmol／L有明显抑制胶原酶活性作用；浓度至85mmoll／L在本反应体系中完全抑制胶原酶活性，加热破坏抗坏血酸则失去抑制作用。这将进一步理解抗坏血酸在治疗角膜碱烧伤及角膜溃疡中的作用。     

胶原酶及胶原酶抑制剂

1962年Gross及Lapiere首先在蝌蚪皮肤中发现胶原酶。在此以前有详细记述的只有细菌的胶原酶。角膜胶原酶的大量研究始于60年代后期,但大多限于动物实验及实验室研究,且绝大部份资料仅阐述了胶原酶在碱性烧伤角膜溃疡中所起的作用。胶原酶抑制剂的临床应用,也只限局于防治碱性烧伤所致的角膜溃疡,而对其他原因引起的角膜溃疡是否有效尚无定论。为进一步探讨胶原酶抑制剂对各种角膜溃疡的防治作用,特综合国外有关资料,以供参考。实验研究一、胶原酶 (一)碱性烧伤角膜组织产生胶原酶:由于角膜碱性燃伤后2周才会发生溃疡,因而认为溃     

半胱氨酸治疗角膜溃疡的实验研究

文献上曾谈到硷烧伤性角膜溃疡由于胶原溶解酶的释放造成角膜板层溶解和穿孔。任何方式的角膜上皮创伤都将释放出蛋白溶解酶,上皮是胶原溶解酶的来源。钙离子是胶原溶解酶活性的必需因素。半胱氨酸通过两个方面抑制胶原溶解酶活性。第一,直接作用于胶原溶解酶分子,还原酶分子中的二硫键。该作用不可逆;第二,和EDTA一样,通过络合钙离子间接抑制溶解酶的作用。该作用是可逆的。所以半胱氨酸是最好的胶原溶解酶抑制     

角膜上皮细胞培养的研究

角膜上皮细胞的重要性已逐渐为人们所重视,对角膜上皮细胞的基础和临床研究亦日渐深入。角膜上皮细胞的组织培养作为研究角膜上皮细胞的一种很好的技术方法,已被很多实验室广泛应用于角膜上皮细胞的胶原、胶原酶代谢产物,粘蛋白代谢产物,病毒感染的影响,细胞分化,各种生长促进因子和药物对上皮细胞生长的影响,基底膜胶原     

角膜硷烧伤的治疗

作者根据以往动物试验证明:严重的兔角膜硷烧伤性溃疡和穿孔是由于角膜所产生的分解胶原的酶(Collagenolytic enzyme)而引起。角膜细胞接触硷之后立即被破坏,7—10天后,重新生长的上皮细胞和再次组成基质的细胞产生一种能使角膜发生溃疡的胶原酶(Collagenase)。用胶原酶抑制剂来治疗急性兔角膜硷烧伤可避免溃疡形成。Brawn等用胶原酶抑制剂、半胱氨酸(Cystein)治疗局部硷烧伤或有溃疡形成的角膜硷烧伤21只限获得良好疗效。因为硷烧伤后     

国产胶原膜对头孢拉定透入眼内的促进作用

报道了在角膜上皮完整、缺损及频繁滴药的情况下，国产胶原膜对头孢拉定透入眼内的促进作用，结果分别为１．５、１．３和１０倍左右。和隐形眼镜比较，将干燥软性眼镜浸在头孢拉定溶液中，胶原膜的眼内促进作用和其相仿，但比湿性软性眼镜作对照组时的前房水内药物的浓度提高１～２倍。以上结果显示胶原膜可显著地提高房水内药物浓度。     

Ⅲ型和Ⅳ型胶原在正常角膜和圆锥角膜中的表达

目的：观察正常人及圆锥有膜中胶原Ⅲ，Ⅳ型胶原的表达，探讨Ⅲ，Ⅳ型胶原在圆锥角膜病变中的变化。方法：采用免疫组织化学－SABC法检测角膜组织中Ⅲ，Ⅳ型胶原的表达。结果：Ⅲ型胶原在正常角膜和圆锥角膜的上皮屠，实质屠及内皮层均有阳性表达，但圆锥角膜比正常角膜的表达弱，而圆锥角膜基质斑块状瘢痕区可见Ⅲ型胶原呈强阳性表达；正常角和圆锥角膜组织中在Bowmans层，Descemets层和基质层均可检测到VI型胶原表达，但圆锥角膜中Ⅳ型胶原表达减低，特别在圆锥角膜的疤痕区内，Ⅳ型胶原明显降低，结论：Ⅲ，Ⅳ型胶原的异常表达会导致角膜基质织维间隙的稳定性降低，改变结缔组织中胶原束的组成，最终影响角膜的正常形态。     

眼用胶原膜及其复合物的沿革

自Fyodoror（198）首先研制成角膜胶原膜以后[1]，美苏均有商业产品问世。目前，在国外角膜胶原膜已广泛应用于眼科临床，国内也有研究报道，其应用前景已得到众多眼科学者的高度重视。一、胶原：胶原是动物主要的结缔组织蛋白。动物体内的成纤维细胞能合成并释放出可溶性胶原单似它由3条卷曲的多肽链螺旋组成，当其被释放出来时，自动整理成重叠的队列，形成先由氢键再由单体队列间共价键稳定的纤维。胶原的氨基酸：l／3是甘氨酸。丙氨酸，脯氨酸和羟脯氨酸各占氨基酸总量的10％。天冬氨酸和谷氨酸共占10％。精氨酸和丝氨酸各约占5％，其…     

胶原酶研究的回顾及角膜胶原酶研究进展

胶原酶在结缔组织的正常代谢及病理损害中起着重要的作用，角膜溃疡的病理损害与胶原酶密切相关。本文对胶原酶研究的发展作了简要的回顾，并简述了基质金属蛋白簇成员、基本特性及可能的活化模式。对角膜胶原酶的研究，则主要对９０年代以来的新的认识和发现作了综述。     

中波紫外线和氧化应激诱导LECs中Ⅰ型胶原降解的分子机制研究

目的 探讨中波紫外线（UVB）和氧化应激诱导人晶状体上皮细胞（LECs）中Ⅰ型胶原降解的时间和剂量依赖方式及其作用信号通路.方法 培养人LECs,用UVB（15 mJ/cm^2）或H2O2（100 μmol/L）分别处理细胞,Western blot法检测不同时间段的Ⅰ型胶原表达和JNK、c-Jun的磷酸化,Glatin酶谱法分析不同时间段的间质胶原酶（MMP-1）表达,且用不同剂量的UVB辐射或不同浓度H2O2作用后检测上述指标.结果 在用UVB和H2O2处理后,Ⅰ型胶原的表达明显下降,8 h后为0.890,24 h后为0.779.UVB和H2O2以时间和剂量依赖的方式诱导JNK-1和c-Jun的磷酸化,MMP-1的表达也以时间依赖的方式增加.结论 在人工培养的人LECs中,UVB、H2O2通过时间和剂量的方式诱导JNK和c-Jun的磷酸化,导致MMP-1和Ⅰ型胶原表达,这一作用通路可能形成潜在的治疗后发性白内障的靶点.     

紫外线照射大鼠角膜胶原ⅠmRNA的表达

目的：观察紫外线照射大鼠角膜胶原ⅠmRNA的表达变化，探讨紫外线辐射对角膜的损伤机制。方法：用20mW、260～365nm的紫外线照射大鼠角膜，用RT-PCR方法检测照射后不同时间点角膜胶原ⅠmRNA的表达变化。结果：角膜经过紫外线辐射后30分钟，角膜胶原ⅠmRNA的表达量稍有上升，2小时下降最多，6小时回升超过正常，在24小时、48小时及7天、14天中角膜胶原ⅠmRNA的表达量呈持续缓慢上升。结论：紫外线辐射可影响大鼠角膜胶原ⅠmRNA的表达。     

正常人及圆锥角膜患者角膜中Ⅳ、Ⅴ型胶原的检测

目的：观察正常人及圆锥角膜患者角膜组织中Ⅳ、Ⅴ型胶原的表达，探讨基底膜损伤在圆锥角膜病变中的作用。方法：采用免疫组织化学SABC法检测角膜组织中Ⅳ、Ⅴ型胶原的表达。结果：正常角膜组织中Ⅳ型胶原表达在Bowman‘s层及Descemet‘s层，圆锥角膜患者Ⅳ型胶原表达也在Bowman‘s层及Descemet‘s层，但其阳性表达因角膜病变的程度不同而呈不同程度的减弱。Bowman‘s层的断裂呈波浪状，实质层排列不规则，局部可见瘢痕形成，Descemet‘s层膜破裂。角膜上皮，基质和内皮层未见明显的阳性表达，Ⅴ型胶原表达在Bowman‘s层及基质层，正常及圆锥角膜中无明显差异，但在圆锥角膜瘢痕区Ⅴ型胶原表达呈强阳性。结论：Ⅳ型胶原是基底膜的主要胶原，Bowman‘s层的断裂导致圆锥角膜的发病过程，最终整个过程以瘢痕形成结束。     

胶原酶研究的回顾及角膜胶原酶研究进展

胶原酶在结缔组织的正常代谢及病理损害中起着重要的作用，角膜溃疡的病理损害与胶原酶密切相关。本对胶原酶研究的发展作了简要的回顾。并简术字基质金属蛋白簇成员，基本特性及可能的活化模式。对角膜胶原酶的研究，则主要对９０年代以来的新的认识和发展作了综述。     

角膜溃疡胶原酶活化与活性氧的相关性研究

从动物实验角度对细菌性角膜溃疡氧自由基与活性胶原酶生成关系进行了观察，结果表明，角膜溃疡后组织中氧自由基产生明显的升高，同时活性胶原酶也高，而经抗氧化治疗后，随氧自由基清除的程度，组织中活性胶原酶的生成也不同程度下降，表现氧自由基的产生与活性胶原酶生成呈正相关（ｒ＝０．９９５６，ｐ＝０．００４４），并通过潜酶活化比较，表明抗氧化治疗后组织中部分潜酶未能活化，说明在体内氧自由基确实参与胶原酶潜酶的变