PI3K/Akt/mTOR信号通路相关lncRNA在非小细胞肺癌发展中的最新进展

肺癌是目前全球范围内最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和病死率较高。肺癌的发病机制涉及多条信号通路,其中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在非小细胞肺癌(NSCLC)的发展过程中具有重要作用,而长链非编码RNA(lncRNA)作为抑癌或促癌因子能够通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路影响NSCLC细胞的生长、增殖、凋亡、迁移、侵袭、转移和耐药。因此,进一步深入研究lncRNA与PI3K/Akt/mTOR信号通路在NSCLC发生发展中的调控作用,不仅对探索NSCLC的发病机制具有重要意义,还可为改善NSCLC的治疗现状提供新的指导。     

EGFR与PI3K/AKT信号通路相关蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义

目的 研究表皮生长因子受体(EGFR)和磷酸肌醇3激酶、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶信号通路相关蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达以及其临床意义.方法 应用免疫组化学SP法检测100例NSCLC组织及其相应正常癌旁组织中的EGFR、PI3K、AKT蛋白表达水平.结果 100例正常的癌旁组织中EGFR、PI3K及AK...     

基于PI3K/AKT信号通路的中药单体治疗肺癌的研究进展

肺癌是一种发病率较高的恶性肿瘤,是威胁人类生命健康的重大疾病.中药单体是从中药材中提取出的主要有效成分.近年来,有多篇文献报道中药单体通过调控PI3K/AKT信号通路抑制肺癌细胞增殖、侵袭和迁移,并诱导肺癌细胞凋亡.PI3K/AKT信号通路在肺癌发生和发展的过程中扮演着一个重要的角色,PI3K/AKT信号通路的异常激活...     

丙泊酚通过靶向调控PI3K/AKT/mTOR信号通路体外抑制乳腺癌细胞生长

探讨丙泊酚通过PI3K/AKT/mTOR信号通路对乳腺癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。方法 在体外,丙泊酚10 mg/mL分别与乳腺癌MCF-7和BT474细胞系共孵育分为对照组和丙泊酚组。PI3K过表达质粒经丙泊酚处理后转染MCF-7细胞分为对照组、丙泊酚+PI3K组、PI3K组,分别检测细胞的生存、侵袭及凋亡情况。Western blot检测PI3K/AKT/ mTOR信号通路相关蛋白表达水平。在体内构建MCF-7小鼠模型,免疫组化和TUNEL实验用于检测乳腺癌细胞的生长和凋亡情况。结果 丙泊酚显著抑制乳腺癌细胞的生长和侵袭能力（P＜0.05）。Western blot和细胞凋亡实验结果显示,丙泊酚通过降低Bcl-2和Bcl-w在乳腺癌细胞中的表达水平来诱导细胞凋亡（P＜0.05）。丙泊酚降低了乳腺癌细胞中磷酸肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B (AKT)和mTOR蛋白表达水平（P＜0.05）。对P13K进行过表达处理后显示,PI3K过表达逆转了丙泊酚对MCF-7细胞的生长和侵袭的抑制作用（P＜0.05）。体内实验表明,丙泊酚治疗明显抑制MCF-7小鼠模型中的肿瘤生长,促进了细胞凋亡（P＜0.05）。结论 丙泊酚通过PI3K/AKT/mTOR信号通路体外抑制乳腺癌细胞的生长和侵袭,促进细胞凋亡     

miR-15b通过靶向LPAR3抑制子宫内膜癌细胞PI3K/AKT信号通路活化

【摘要】 目的 探讨miR-15b靶向溶血磷脂酸受体3（LPAR3）调控PI3K/AKT信号通路对子宫内膜癌细胞（HEC-1B）增殖的影响。方法 生物信息学分析预测并通过荧光素酶报告基因实验验证miR-15b与LPAR3之间的靶向结合作用;将HEC-1B细胞分为NC组、miR-15b mimic组、miR-15b inhibitor组、siRNA-LPAR3组和miR-15b inhibitor+ siRNA-LPAR3组,实时荧光定量PCR和Western blot检测miR 15b、LPAR3和PI3K/AKT信号通路相关因子磷脂酰肌醇 3 激酶（PI3K）、苏氨酸激酶（AKT）在HEC 1B和人子宫内膜上皮细胞（HEEC）中的表达水平;噻唑蓝（MTT）法检测HEC-1B的细胞活力;流式细胞术检测HEC-1B的细胞周期分布;Transwell测定法检测HEC-1B的细胞迁移和侵袭能力。结果 LPAR3为miR-15b的靶基因;与HEEC组相比,HEC-1B组中LPAR3、PI3K和AKT mRNA和蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）,而miR-15b表达显著降低（P＜0.05）;与NC组相比,siRNA-LPAR3组细胞PI3K/AKT信号通路相关因子mRNA和蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）,miR-15b mimic组细胞LPAR3和PI3K/AKT信号通路相关因子mRNA和蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）;与NC组相比,siRNA-LPAR3组HEC-1B的细胞活力、S期细胞比例、迁移和侵袭能力均明显降低（P＜0.05）,miR-15b mimic组HEC-1B的细胞活力、S期细胞比例、迁移和侵袭能力均明显降低（P＜0.05）,抑制miR-15b的表达后,上述现象被逆转(P＜0.05)。与miR-15b inhibitor组相比,miR-15b inhibitor+ siRNA-LPAR3组HEC-1B的细胞活力、S期细胞比例、迁移和侵袭能力均显著下降（P＜0.05）。结论 miR-15b可能通过靶向LPAR3抑制HEC-1B的PI3K/AKT信号通路活化,从而抑制HEC-1B细胞的增殖。     

基于PI3K/AKT信号通路探讨中医药治疗肺癌研究进展

磷脂酰肌3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路是生物体内重要的信号转导系统之一,具有调节细胞生长、分化、凋亡等多种功能,与肺癌细胞的增殖、凋亡、自噬、侵袭转移、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation, EMT)等细胞活动密切相关。中医药可以通过干预PI3K/AKT通路及其相关靶点蛋白调节细胞周期蛋白与凋亡相关蛋白的表达,从而抑制增殖、诱导凋亡;通过上调自噬相关蛋白的表达,促进肺癌细胞自噬;通过下调基质金属蛋白酶(matrix-metalloproteinase, MMP)的表达,降低肺癌细胞侵袭转移能力;通过多靶点、多机制逆转EMT和耐药。但是,中医药基于PI3K/AKT信号通路治疗肺癌的研究也存在许多不足：(1)PI3K/AKT信号通路与多条通路纵横交错,许多研究发现,中医药可以同时影响多条信号通路的表达,但各条通路之间的相互影响与相互作用尚未阐明。(2)PI3K/AKT信号通路作用广泛,多数研究仅证实中医药的抗肺癌作用与通路...     

EGFR蛋白在非小细胞肺癌中的表达

目的 检测PI3K/AKT信号传导通路相关蛋白EGFR在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）中的表达情况,并探讨其与NSCLC临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化Maxvision二步法检测EGFR在NSCLC和正常肺组织中的表达,同时使用SPSS17.0软件进行统计分析.结果 EGFR蛋白在NSCLC和正常肺组织中的阳性率分别为68.4%（54/79）和27.3%（3/11）,两组比较差异有统计学意义（P﹤0.05）.在NSCLC中,EGFR的高表达与性别、淋巴结转移、病理类型无关,与分化程度密切相关（P﹤0.05）.结论 EGFR在NSCLC中的表达明显高于正常肺组织,并与NSCLC的分化程度有关,表明EGFR可能促进NSCLC的发生发展,因此,检测该因子表达可以指导NSCLC的诊断和治疗.     

LncRNA CASC9高表达激活PI3K/AKT信号通路促进口腔鳞癌细胞增殖转移

目的：探索lncRNA CASC9在口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）中的表达、功能及机制。方法：用原位杂交检测101例口腔鳞癌组织中CASC9的表达并行临床相关性和生存分析;siRNA干扰口腔鳞癌SCC15细胞中CASC9;qPCR和Western blot检测SCC15中PI3K、AKT和p-AKT的mRNA和蛋白表达水平;CCK-8实验、流式细胞和Transwell分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭。结果：CASC9在口腔鳞癌组织中的表达明显升高（P=0.000）;CASC9表达水平与肿瘤大小、颈淋巴结转移及临床分期呈显著正相关（P<0.05）,CASC9高表达的患者生存时间明显缩短（P=0.007）;CASC9是OSCC的独立危险因素（P<0.05）;沉默CASC9后,PI3K和p-AKT表达明显降低（P<0.05）,SCC15细胞增殖、迁移和侵袭能力明显减弱（P<0.05）。结论：CASC9通过激活PI3K/AKT通路促进OSCC发展;CASC9可能是OSCC新的临床预后标志物和治疗靶点。     

PI3K/AKT/mTOR信号通路在妇科恶性肿瘤中的研究进展

PI3K/AKT/mTOR是近20年来研究比较广泛的信号通路之一。此通路可调控细胞内一系列重要的生物学活动,包括细胞的增殖、凋亡、侵袭、迁移与自噬等。在宫颈癌、卵巢癌及子宫内膜癌中均已发现PI3K/AKT/mTOR通路的激活,该通路的激活导致细胞异常增殖、侵袭及血管生成等重要生物过程的改变,均是可能造成恶性肿瘤发生的因素。因此本文将PI3K/AKT/mTOR信号通路在妇科恶性肿瘤中的研究进展做一综述,为治疗妇科恶性肿瘤在靶向治疗中提供一定的方向和思路,从而研制出更好的靶向妇科恶性肿瘤的药物,提高患者的晚期生存率。     

lncRNA MNX1-AS1在非小细胞肺癌中的表达及调控PI3K/AKT通路对癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)MNX1-AS1(lncRNA MNX1-AS1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的生物学功能及可能的作用机制。方法:选取2017年6月至2019年3月期间在本院进行手术治疗的75例NSCLC患者癌组织及癌旁组织标本,RT-qPCR法检测标本lncRNA MNX1-AS1表达水平,分析lncRNA MNX1-AS1表达与NSCLC临床病理特征及预后的相关性;体外培养NSCLC细胞系PC-9细胞,分别转染si-MNX1-AS1(si-MNX1-AS1组)、si-NC(si-NC组),MTT法及EdU实验检测各组PC-9细胞增殖;Transwell小室法检测细胞迁移与侵袭;Western blot实验检测PI3K/AKT通路相关蛋白表达。结果:lncRNA MNX1-AS1在NSCLC癌组织与细胞系中表达水平显著升高(P<0.05)。lncRNA MNX1-AS1表达与TNM分期和淋巴转移有关(P<0.05),Kaplan-Meier生存分析显示,lncRNA MNX1-AS1高表达组患者3年累积生存率显著低于低表达组,差异有统计学意义(...     

lncRNA TTN-AS1靶向抑制miR-1271的表达对肺癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制

目的：探讨lncRNA TTN-AS1调控miR-1271表达对肺癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制。方法：在人肺癌A549细胞中转染TTN-AS1 siRNA或miR-1271 mimics,采用qRT-PCR检测TTN-AS1和miR-1271的表达,CCK-8实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测PI3K、p-AKT、PCNA、E-cadherin和cleaved caspase 3表达。共转染miR-1271 inhibitors和TTN-AS1siRNA,观察抑制miR-1271对抑制TTN-AS1诱导的A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。双荧光素酶报告基因实验检测TTN-AS1和miR-1271及miR-1271和PDK1的靶向作用关系,Western blot分析过表达或抑制TTN-AS1/miR-1271对PDK1表达的影响。结果：抑制TTN-AS1及过表达miR-1271均可明显抑制A549细胞增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡,下调PI3K、p-AKT和PCNA表达,上调E-cadherin和cleaved caspase 3表达（P ＜0.05）。抑制miR-1271可逆转抑制TTN-AS1对A549细胞增殖和侵袭能力的抑制作用以及对细胞凋亡的促进作用。TTNAS1和PDK1与miR-1271均存在靶向调控关系。结论：lncRNA TTN-AS1可通过靶向调节miR-1271/PDK1并抑制PI3K/AKT信号通路降低A549细胞增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡。     

山茶花提取物抑制胶质瘤细胞SW1088增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的 探究山茶花提取物通过调控miR-526b-3p的表达抑制磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）信号通路抑制胶质瘤细胞SW1088增殖、迁移和侵袭的分子机制。方法 收集对数期SW1088细胞,用浓度为30、60、120 mg/L的山茶花提取物处理细胞,分别记为低剂量组、中剂量组、高剂量组,以正常培养SW1088细胞作为对照组;按照脂质体法将miR-NC、miR-526b-3p转染至SW1088细胞中分别记为miR-NC组、miR-526b-3p组;将anti-miR-NC、anti-miR-526b-3p转染至SW1088细胞中,并加入高剂量山茶花提取物分别记为anti-miR-NC+高剂量组、anti-miR-526b-3p+高剂量组。MTT、Transwell分别检测细胞增殖活性和细胞迁移、侵袭能力;Western blot检测细胞周期素D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶9（MMP9）、磷酸化的PI3K（p-PI3K）、磷酸化的AKT（p-AKT）蛋白表达水平;qRT-PCR检测miR-526b-3p相对表达量。结果 山茶花提取物或过表达miR-526b-3p可降低胶质瘤细胞SW1088增殖活性,同时降低细胞迁移数量、侵袭数量,以及CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白水平,增加miR-526b-3p相对表达量。此外,高剂量组可降低SW1088细胞中p-PI3K、p-AKT蛋白水平。抑制miR-526b-3p可减弱山茶花提取物对胶质瘤细胞SW1088增殖、迁移和侵袭以及PI3K/AKT信号通路的影响。结论 山茶花提取物可能通过调控miR-526b-3p/PI3K/AKT信号通路抑制胶质瘤细胞SW1088增殖、迁移和侵袭     

莪术醇对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响

目的：探讨莪术醇对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法：采用CCK-8法检测不同浓度（5、10、25、50、100 μmol/L）莪术醇,0 μmol/L莪术醇为对照组,干预SKOV3细胞24 h、48 h的增殖抑制率,并计算IC50值;划痕实验和Transwell小室法分别检测细胞的迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测莪术醇及PI3K/AKT通路阻断剂LY294002对细胞PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达的影响。结果：莪术醇对SKOV3细胞的增殖有明显抑制作用,呈浓度依赖性但不呈现时间依赖性,IC50值为48 μmol/L;莪术醇能明显抑制SKOV3细胞的迁移与侵袭,促进其凋亡（均P＜0.01）,降低细胞PI3K、AKT总蛋白表达（均P＜0.05）,显著降低其活化形式p-PI3K、p-AKT的表达（均P＜0.01）;莪术醇与LY294002联用后表现出良好的协同作用,较单独用莪术醇时下调p-PI3K、p-AKT蛋白更为显著（P＜0.05）。结论：莪术醇能抑制SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭,并诱导其凋亡,其作用机制与抑制PI3K/AKT通路有关。     

SHP-2对人绒毛膜滋养层细胞增殖、侵袭、迁移和PI3K/AKT信号通路蛋白表达的影响

目的 探讨Src同源物2磷酸酶2（SHP-2）对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo增殖、侵袭、迁移和PI3K/AKT信号通路蛋白表达的影响。方法 用定量实时聚合酶链反应（qRT-PCR）检测SHP-2在子痫前期（PE）组胎盘组织中的表达水平。采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）、克隆形成实验、划痕闭合和Transwell分析检测敲低或过表达SHP-2对人绒毛膜滋养细胞（HTR-8/SVneo）增殖、集落形成、迁移和侵袭能力的影响。Western blot检测侵袭相关蛋白的表达和磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）的磷酸化水平。结果 HP-2在PE组胚胎组织中低表达。敲低SHP-2显著抑制HTR-8/SVneo细胞的增殖、集落形成、侵袭和迁移,此外,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin)的表达显著下调,E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达显著上调,PI3K和AKT的磷酸化水平显著降低,然而,过表达SHP-2具有相反的效果。结论 SHP-2在PE胎盘组织中低表达,SHP-2过表达可促进滋养层细胞的增殖、侵袭和迁移能力,提示SHP-2可能是临床治疗PE的潜在靶点     

沉默转导重排基因对抑制乳腺癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨转导重排基因(rearranged during transfection,RET)在乳腺癌中的作用机制.方法 选取2015年6月至2016年6月在北京大学深圳医院确诊的乳腺癌女性患者,采用实时荧光定量PCR对60例乳腺癌组织和20例癌旁组织中RET mRNA的相对表达量进行检测;经RET-siRNA转染乳腺癌细胞株MCF-7和乳腺癌内分泌耐药细胞株 MCF-7/Aro 后,MTT 检测细胞增殖作用,Transwell 细胞迁移实验评价细胞迁移能力, Western-blot和RT-PCR检测RET及磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT1)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、重组人丝裂原活化激酶(MEK)1和MEK2的相对表达情况.结果 乳腺癌组织中RET mRNA的相对表达量高于癌旁组织(2.70 ± 1.37 vs.1.29 ± 0.51),差异有统计学意义(P<0.05).沉默 RET 后,MCF-7和MCF-7/Aro增殖、迁移能力受抑制,PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白表达量下调.结论 RET-siRNA能有效抑制RET基因的表达,抑制乳腺癌细胞增殖侵袭,其作用机制可能是通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白,进而抑制乳腺癌细胞增殖.     

姜黄素调节AKT/PI3K活性抑制人膀胱癌T24细胞的增殖和迁移

研究姜黄素对膀胱癌T24细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。培养膀胱癌T24细胞,然后采用不同浓度的姜黄素进行干预。使用CCK8法检测姜黄素处理后T24细胞的存活率,Transwell实验检测其侵袭力。采用western blot检测处理前后T24细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9的表达水平以及蛋白激酶B(AKT)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)磷酸化。CCK8结果表明姜黄素能够以浓度和时间依懒性抑制T24细胞的增殖。Transwell结果显示姜黄素能降低膀胱癌T24细胞的迁移能力。姜黄素也能降低T24细胞p-AKT和p-PI3K磷酸化以及MMP2和MMP9蛋白的表达,并且呈浓度依赖性。以上结果表明姜黄素通过抑制AKT/PI3K信号通路降低MMP2和MMP9的表达,从而抑制膀胱癌T24细胞的增殖和迁移。     

华蟾素对非小细胞肺癌细胞株A549细胞增殖及PTEN/AKT/mTOR信号通路表达的影响

目的观察华蟾素对肺癌细胞A549及PTEN/AKT/mTOR信号通路蛋白表达的影响。方法在培养肺癌细胞株NCI-A549中分别加入不同浓度的华蟾素,应用细胞计数试剂盒-8检测24、48、72 h后细胞增殖活力,Ki67及EdU检测72 h细胞增殖活力,免疫印迹法检测磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白以及磷酸化第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白的同源基因（phosphorylated-phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,p-PTEN）蛋白表达。结果0.2 μg/mL华蟾素作用于A549细胞株48 h后显示明显抑制增殖作用（P < 0.01）,0.8 μg/mL华蟾素处理12 h后均具有不同程度抑制增殖作用（P < 0.05~P < 0.01）。不同浓度华蟾素作用于细胞72 h后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-S6、p-PTEN表达量均较对照组下降（P < 0.05~P < 0.01）,而PI3K、AKT、mTOR、S6及PTEN表达量与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。结论华蟾素可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白磷酸化,抑制肺癌细胞A549的增殖。     

黄芩素通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路诱导膀胱癌细胞凋亡

目的 研究黄芩素对膀胱癌细胞的作用及机制。 方法 膀胱癌细胞T24和5637经黄芩素(处理组)或二甲基亚砜(对照组)处理后,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)以及胸腺嘧啶核苷类似物(EdU)插入实验检测细胞增殖和DNA复制速率;划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;流式细胞技术检测细胞周期和细胞凋亡水平;Western blotting检测PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)等蛋白的表达水平;裸鼠成瘤实验检测黄芩素对于体内膀胱癌细胞增殖能力的影响。 结果 黄芩素可以在体内和体外抑制膀胱癌细胞的增殖速率,高浓度黄芩素体外抑制率可达80%以上,体内抑制率约50%。黄芩素可以减缓DNA复制并降低肿瘤细胞的迁移和侵袭能力,诱导细胞停滞在G₀/G₁期,发生细胞凋亡,与对照组相比差异有统计学意义。黄芩素处理后,PI3K的表达以及AKT和mTOR的磷酸化水平降低,Bax/Bcl-2的比值升高。 结论 黄芩素通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制膀胱癌细胞增殖,发生周期阻滞,诱导细胞凋亡。