活性维生素D对去势大鼠骨转化的影响

用骨形态计量学等方法探讨活性维生素D对骨转化的影响,以及预防绝经后骨质疏松的可能性及机理.选用4月龄SD大鼠,随机分为双卵巢切除组,假手术对照组,双卵巢切出后给予罗钙全治疗组(剂量0.0208ug/100g,灌胃,间天1次,共10周).结果:卵巢切除10周后,骨小梁体积、骨小梁宽度、肱骨重量及肱骨钙、磷含量明显较对照组低;成骨细胞指数,破骨细胞指数较对照组高.表明高转化骨质疏松的动物模型成立.活性维生素D治疗组骨小梁体积、肱骨干重、灰重、肱骨钙、磷含量较卵巢切除组高,与对照组无差别,成骨细胞指数较对照组高,破骨细胞指数较卵巢切除组低.表明活性维生素D具有预防绝经后骨质疏松的作用,其主要机理可能是抑制骨的吸收,骨的形成相对增加而起作用.     

生物钙抗去势雌鼠失骨作用的研究

本文用生物钙对去势雌鼠失骨的防治作用进行了研究。４月龄Ｗｉｓｔａｒ雌鼠３０只，随机分为假手术对照组（对照组）、双侧卵巢切除组（切除组）及双侧卵巢切除后补充生物钙组（补钙组），补钙剂量为每只鼠每天５０ｍｇ／ｋｇ，经口灌胃。９０天后处死动物，分别检查血钙、血磷、血清碱性磷酸酶，右侧胫骨病理组织学，左侧胫骨形态计量学，以及股骨湿重、干重、灰重和骨钙、磷元素Ｘ线能谱分析。结果显示：与对照组比较，切除组大鼠骨小梁变细小，骨小梁体积下降，宽度降低，成骨细胞指数和破骨细胞指数均增加，骨重下降，骨钙、磷含量减少，呈典型的骨质疏松症病理学改变；补钙组动物血清钙及骨钙、磷含量明显升高，骨小梁体积及骨小梁平均宽度明显高于切除组动物，说明生物钙在防治去势大鼠骨质丢失方面有一定作用。作者认为，补钙后防治骨质疏松症的主要机理在于纠正去势后的负钙平衡，抑制过高的骨转换，特别是抑制破骨细胞的活性。     

尼尔雌醇预防大鼠卵巢切除后骨质疏松

作者选用4月龄雌性SD大鼠随机分为:卵巢切除组,假手术组(开腹后关腹)及切除卵巢术后给予尼尔雌醇(CEE_3)组。按每100g体重给CEE_3 0.15mg灌胃,每周1次,共10周。取右侧胫骨制成不脱钙骨切片进行骨计量学测定,并测定肱骨重量,无机质重量及骨钙、磷含量等。结果:从卵巢切除组骨小梁体积,骨小梁宽度、骨重量和无机质重量与体重之比及骨钙含量等方面显示绝经后骨质疏松动物模型建立。而尼尔雌醇组各指标与假手术组相似(P>0.05),表明尼尔雌醇通过抑制过高的骨转换,恢复骨再建过程的平衡而防止切除卵巢大鼠的失骨,提示可用于预防绝经后骨质疏松。     

去卵巢大鼠骨质疏松病理学观察及NOS荧光素原位杂交研究

目的观察去卵巢大鼠骨质疏松病理形态和计量学改变以及NO与骨代谢的关系,探讨NO在骨质疏松发病机制中的作用和意义。方法通过图像分析仪对骨组织进行形态计量学分析及荧光素原位杂交方法观察eNOS在成骨细胞和破骨细胞中的表达。结果在去势模型组相对骨小梁体积、骨小梁平均厚度及eNOS在成骨细胞与破骨细胞中的表达较假手术组减少(<0.05),尼尔雌醇/左炔诺孕酮治疗组相对骨小梁体积、骨小梁平均厚度及成骨细胞与破骨细胞内eNOS的表达均较去势模型组明显升高(<0.01)。结论去势后雌性大鼠骨丢失为骨转换加快和重建负平衡(骨吸收超过骨形成)所致;成骨细胞与破骨细胞代谢与NOS表达有关,破骨细胞功能与NO呈负相关关系。尼尔雌醇和左炔诺孕酮能降低这种骨转换的负平衡并且提高成骨细胞与破骨细胞内NO水平,从而影响其功能,达到抑制骨吸收,降低骨转换的目的。     

骨痛宁搽剂对去势雌鼠骨组织病理学及形态计量学的影响

目的 观察骨痛宁搽剂对去势大鼠骨质疏松所致的骨组织病理学与骨形态计量学改变的影响.方法通过切除大白鼠卵巢建立大鼠雌激素缺乏OP模型,分别给予骨痛宁搽剂(TN组)、骨质增生一贴灵(T组)及骨友灵搽剂(Y)于大鼠大腿外用,并与正常大鼠(N组)、假手术(S组)及模型(OP组)对照,苏木精-伊红染色,分别观察骨组织病理形态改变,测量骨小梁体积、骨小梁周长、破骨细胞指教、成骨细胞指数.结果 T、Y及OP组均有骨小梁破坏等OP改变,而TN改变较T、Y及OP组轻微;骨计量学测定发现,TN、T、Y及OP组大白鼠切除卵巢后小梁体积百分比降低;T、Y及OP组骨小梁周长低于S、N及TN组;T、Y及OP组成骨细胞指数及破骨细胞指数升高.结论 骨痛宁搽剂对去势大鼠骨质疏松所致的骨组织病理学与骨形态计量学改变具有保护作用.     

国产羟乙膦酸钠抗去势大鼠骨质疏松实验研究

目的:探讨国产羟乙膦酸钠对去势大鼠骨质疏松的疗效。方法:将4月龄wistar雌性大鼠55只随机分为6组:卵巢切除(OVX)组、假手术(SHAM)组、雌二醇阳性对照(E)组、羟乙膦酸钠灌服低剂量(IGL)组、中剂量(IGM)组、高剂量(IGH)组,共给药12周。主要测定动物骨重及钙、磷含量和骨形态计量等。结果:去势大鼠骨干重、灰重及钙、磷含量显著降低,骨小梁体积及宽度明显减小,破骨细胞及成骨细胞活性均增加,但破骨显著大于成骨,羟乙膦酸钠各剂量组均恢复至接近正常水平。结论:国产羟乙膦酸钠能有效防治去势大鼠骨质疏松,并对子宫无副作用。     

去卵巢大鼠骨质疏松经治疗后骨组织计量学的研究

目的：建立大鼠骨质疏松模型;探讨去卵巢后雌性大鼠骨丢失的组织学机制及尼尔雌醇和左炔诺孕酮的治疗作用,方法：通过图像分析仪对骨组织进行形态计量学分析。结果：与假手术组比较,去卵巢大鼠组相对骨小梁体积,骨小梁平均厚度及骨小梁周长均显著减少（P＜0．01）,而成骨细胞指数,破骨细胞指数,骨小梁吸收表面和成骨细胞覆盖骨小梁表面百分比均明显增加（P＜0．01）,尼尔雌醇和左炔诺孕治疗组上述各指标接近于假手术组（P＞0．05）,结论：本实验去卵巢大鼠骨质疏松模型成立,去势后雌性大鼠骨丢乃骨转换加快（高转换型）和重建负平衡（骨吸收超过骨形成）所致。用尼尔雌醇和左炔诺孕酮治疗能降低这种转换的负平衡,达到治疗骨质疏松的目的。     

去卵巢大鼠骨质疏松经治疗后骨组织计量学的研究

目的 :建立大鼠骨质疏松模型 ;探讨去卵巢后雌性大鼠骨丢失的组织学机制及尼尔雌醇和左炔诺孕酮的治疗作用。方法 :通过图像分析仪对骨组织进行形态计量学分析。结果 :与假手术组比较 ,去卵巢大鼠组相对骨小梁体积、骨小梁平均厚度及骨小梁周长均显著减少 (P <0 .0 1) ,而成骨细胞指数、破骨细胞指数、骨小梁吸收表面和成骨细胞覆盖骨小梁表面百分比均明显增加 (P <0 .0 1)。尼尔雌醇和左炔诺孕酮治疗组上述各指标接近于假手术组 (P >0 .0 5 )。结论 :本实验去卵巢大鼠骨质疏松模型成立 ;去势后雌性大鼠骨丢失乃骨转换加快 (高转换型 )和重建负平衡 (骨吸收超过骨形成 )所致 ;用尼尔雌醇和左炔诺孕酮治疗能降低这种骨转换的负平衡 ,达到治疗骨质疏松的目的。     

健脾中药对骨质疏松症大鼠骨组织形态的改善作用

目的：观察健脾中药对骨质疏松症大鼠骨组织形态的改善作用。方法：55只大鼠随机分为空白组、模型组、葡萄糖酸钙组、雌激素组、参归促钙灵组5组,每组11只。造模后分别灌胃给予相应药物,给药3个月后,处死动物制作骨骼切片。通过半自动图像分析仪测量股骨下端的骨小梁、类骨质的表面积、周长、宽度、各类组织的交界面、成骨细胞及破骨细胞数等数据。运用计算机分析仪测量骨小梁体积密度、骨小梁表面积密度、类骨质体积密度、类骨质表面积密度、成骨细胞指数、破骨细胞指数等参数。结果：参归促钙灵联合葡萄糖酸钙、雌激素联合葡萄糖酸钙均能显著增加骨小梁体积密度及表面积密度,升高成骨细胞指数,降低破骨细胞指数,两纽比较差异无统计学意义。结论：参归促钙灵联合葡萄糖酸钙、雌激素联合葡萄糖酸钙既能抑制骨吸收,又能刺激成骨细胞产生更多的骨基质,使骨代谢转为正平衡．使丢失的骨量得到一定程度的恢复。从而有效地阻止骨质疏松症的发展。     

依替膦酸钠治疗切除卵巢大鼠骨质疏松疗效观察

目的:制备大鼠骨质疏松模型,皮下注射依替膦酸钠,观察其对骨质疏松的疗效。方法:将4月龄w istar雌性大鼠61只随机分为6组:卵巢切除组(O组)、假手术组(S组)、雌二醇阳性对照组(E组)、药物注射低剂量组(L组)、中剂量组(M组)、高剂量组(H组),给药12周。测定动物子宫重量,血清钙、磷、ALP含量,骨重及骨钙、磷含量和骨形态计量等指标。结果:O组子宫重量、骨钙、磷含量及骨小梁体积和宽度均显著低于S和E组,骨干重和灰重下降;OB I升高、OC I显著增加,破骨显著大于成骨;OS、MAR及血清ALP活性等均显著增加。提示卵巢切除后由于骨再建平衡破坏,骨转换加速,骨量明显丢失。依替膦酸钠各剂量组对子宫均无影响,其余指标与S、E组接近。结论:皮下注射国产依替膦酸钠能有效防治切除卵巢大鼠骨质疏松,对子宫无刺激作用。     

糖尿病性骨质疏松的病因探讨

糖尿病性骨质疏松的主要原因是胰岛素的相对或绝对不足.胰岛素是骨生成重要因子,胰岛素缺乏影响钙的运转和维生素D的代谢,使尿钙排除增加,致钙、磷吸收减少.血钙降低发生继发性PTH分泌增加,骨钙动员破骨细胞活性增加,加重骨质疏松.胰岛素缺乏,成骨细胞活性降低,骨更新率和钙化率下降.     

雌性去势大鼠骨细胞内间隙连接蛋白43阳性表达率的动态变化及意义

目的研究雌性去势大鼠骨细胞内间隙连接蛋白43(Cx43)阳性表达率的动态变化及其意义。方法56只4月龄SD大鼠随机分为4个实验组,每个实验组又分为去势组和对照组。在术后4周、10周、16周22周处死大鼠,用骨组织形态计量学方法检查实验动物右胫骨上端骨小梁体积比(TBV,%)、骨小梁平均厚度(MTT,μm)的动态变化。用免疫组化的方法观察去势组与对照组内Cx43阳性表达率的动态变化。结果术后4周后去势组TBV、MTT较对照组明显减少(p<0.05)。免疫组化发现:术后4周、10周、16周、22周,去势组成骨细胞内Cx43阳性表达率低于对照组(p<0.05),且呈逐渐降低的趋势,破骨细胞内Cx43阳性表达率高于于对照组(p<0.05),且成逐渐增高趋势。术后4周、10周、16周、22周,去势组成骨细胞内Cx43阳性表达率均低于破骨细胞内Cx43阳性表达率(p<0.05)。结论切除大鼠双侧卵巢后4周即可制备大鼠的骨质疏松动物模型。Cx43在去势大鼠成骨细胞中的表达下降,而破骨细胞内Cx43的增加,破坏了成骨细胞的骨形成与破骨细胞的骨吸收功能之间的偶联动态平衡,使破骨细胞的骨吸收大于成骨细胞的骨形成,是去势大鼠骨质疏松发生机制中的重要因素。     

尼尔雌醇、维生素D_3和钙对去卵巢大鼠骨质疏松预防作用的实验研究

选用３月龄雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，随机分为５组：正常对照（Ａ组）；卵巢切除（Ｂ组）；卵巢切除＋尼尔雌醇（Ｃ组）；卵巢切除＋钙＋维生素Ｄ３（Ｄ组）；卵巢切除＋尼尔雌醇＋钙＋维生素Ｄ３（Ｅ组）。１５周后测血清钙、磷和碱性磷酸酶、骨密度，观察光镜及电镜下骨标本图片。结果表明，单用尼尔雌醇或单用钙＋维生素Ｄ３均可预防骨质疏松。用尼尔雌醇＋钙＋维生素Ｄ３优于单用尼尔雌醇或单用钙＋维生素Ｄ３。从而表明，联合用药可较好地抑制骨吸收，对促进骨形成有协同作用。     

复方鹿茸健骨胶囊抗骨质疏松作用

目的 观察复方鹿茸健骨胶囊的抗骨质疏松作用。方法 采用去卵巢或 ig 给予维甲酸造成大鼠骨质疏松模型,ig 给予复方鹿茸健骨胶囊治疗,观察其对骨质疏松大鼠骨质量、骨长、骨密度、骨强度、骨钙、血钙、骨形态学改变的影响。结果 复方鹿茸健骨胶囊 3.2、1.6、0.8 g/kg ig 给药可明显增加去卵巢或维甲酸所致骨质疏松大鼠骨质量、骨长、骨密度、骨强度;对去卵巢大鼠血钙及骨钙水平有明显增加作用;肱骨组织病理学结果显示,给予复方鹿茸健骨胶囊大鼠骨小梁增粗,骨皮质厚度增加,软骨细胞增生活跃,骺板变宽,成骨细胞明显活跃,破骨细胞减少。结论 复方鹿茸健骨胶囊有明显的抗骨质疏松作用。     

倍美力对去势大鼠骨折愈合Ⅰ型胶原表达的影响

目的探讨倍关力在绝经后骨质疏松性骨折愈合中的作用及可能机制。方法选用6个月龄雌性sD大鼠,分为倍美力组、SHAM组（假手术组）和OVX组（去势组）。除SHAM组外其余两组均切除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松动物模型。去势后第8周各组行右股骨骨折建立骨折模型,同时倍美力组开始服药,按0．065rag／（kg·d）灌胃。三组均在骨折后第2、4、6、8周处死大鼠后行放射学观察骨痂变化;光镜观察骨痂苏木精一伊红染色及MASSON染色,Ⅰ型胶原的免疫组织化学染色及平均灰度值测定。结果①放射学：OVX组骨痂密度在骨折后2、4、6、8周时均低于其他两组,在8周时OVX组骨折线仍然存在,SHAM组和倍美力组骨折线模糊甚至消失;②骨痂组织学：OVX组与倍美力组和SHAM组相比,软骨成分较多,骨小梁表面破骨细胞明显增多,成骨细胞较小、梭形。第8周骨小梁变细、中断,SHAM组和倍关力组骨小梁表面成骨细胞体积大,胞浆丰富,破骨细胞少,随骨折愈合骨小梁逐渐增加,小梁骨粗大,排列紧密;③Ⅰ型胶原的MASSON染色和免疫组化：OVX组胶原稀疏、排列紊乱;其他两组胶原排列紧密、方向基本一致。Ⅰ型胶原的表达早期主要在软骨细胞及其周围基质,随后相继出现成骨细胞及细胞间质、骨痂周边组织、骨小梁。经图像分析测定在4周时各组的Ⅰ型胶原阳性表达均较2、6、8周强,倍关力组和SHAM组的Ⅰ型胶原阳性表达间无差异,但在各周均较OVX组表达明显增强。结论倍美力使Ⅰ型胶原合成增多,胶原形成紧密、排列一致,有利于骨质疏松性骨折的愈合。     

骨膦预防大鼠卵巢切除后骨质疏松的研究

为对骨膦的药效学进行综合评价,取8月龄雌性Wistar大鼠44只,随机分为4组,每组11只.骨膦组大鼠切除双侧卵巢后,皮下注射骨膦12周,与单纯卵巢切除组(OVX组)、假手术组(SHAM组)及口服尼尔雌醇组(E3组)比较.用骨生物力学、骨密度测量和骨形态计量学等方法对骨膦的药效学进行综合评价.结果:与SHAM组比较,OVX组骨灰重、骨干重、骨钙含量和骨密度、抗弯力、骨小梁体积密度及宽度均明显降低,而成骨细胞指数和破骨细胞指数、尿羟脯氨酸则明显增高.骨膦和E3能使上述指标显著改善,接近正常水平.由此表明骨膦和E3能有效防止去势雌鼠骨量的丢失.     

机械加载在骨质疏松小鼠治疗中的应用研究

<正>骨质疏松是绝经后妇女的一种严重疾病,并容易导致骨折。前期工作表明,脉冲性机械加载可以促进小鼠骨生长和骨损伤愈合。然而,我们的原创性脉冲性脊柱机械加载对小鼠骨质疏松的改善作用尚需探索。使用绝经后骨质疏松动物模型卵巢切除(OVX)小鼠,我们验证假设:脊柱机械加载通过促进成骨细胞的分化和抑制破骨细胞的发育治疗骨质疏松。C57BL/6雌性小鼠(14周龄)随机分为3组:假手术组,OVX对照     

左归丸含药血清对成骨细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响

目的通过观察左归丸含药血清对成骨细胞骨保护素(OPG)、细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)mRNA表达的影响,探讨其治疗骨质疏松症的作用机制。方法体外分离、培养成骨细胞,实验分为3组:正常血清组、卵巢切除血清组、卵巢切除含药血清组。采用原位杂交法,检测成骨细胞OPG、RANKL mRNA的表达。结果卵巢切除血清组与正常血清组相比,成骨细胞OPG mRNA的表达显著下调,而RANKL mRNA表达明显上调;卵巢切除含药血清组与卵巢切除血清组相比,成骨细胞OPG mRNA的表达明显上调,RANKL mRNA的表达明显下调;而与正常血清组相比,无显著性差异。结论在去势状态下,左归丸含药血清一方面直接抑制RANKL的分泌,使破骨细胞活性降低;另一方面促进成骨细胞分泌OPG,使之与RANKL的结合增多,进而使破骨细胞活性降低,从而达到治疗骨质疏松的目的。     

骨质疏松模型骨组织中IL-6,IL-1β,TNF-α的表达特征

目的:通过测定切除卵巢骨质疏松模型小鼠骨组织中白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)相关细胞因子的表达特征,探讨其在骨质疏松发病过程中的生物学意义.方法:选用4月龄雌性BALB/C小鼠随机分假手术对照组和去卵巢骨质疏松模型组,术后第12周用ABC免疫组织化学方法测定骨组织中IL-6,IL-1β,TNF-α的蛋白含量并进行细胞定位.结果:免疫组织化学染色结果显示,3种蛋白在模型组和对照组均有阳性表达,主要位于骨小梁周边成骨细胞、破骨细胞及骨髓细胞胞浆中,模型组蛋白含量明显高于对照组且与骨密度呈负相关(P＜0.01或P＜0.05).结论:小鼠骨质疏松模型骨组织相关破骨细胞分化因子IL-6,IL-1β,TNF-α表达增高,导致破骨活动增强,骨吸收大于骨形成,最终导致骨质疏松.     

老鹳草素对实验性骨质疏松症及破骨细胞生成的影响

目的评价老鹳草素（geraniin，Ge）对实验性骨质疏松症的影响并探讨其初步作用机制．方法用维甲酸建立大鼠骨质疏松模型，观察Ge20mg／kg灌胃给药1周后对骨质疏松相关指标的影响．机械法分离1Et龄SD大鼠四肢长骨获得破骨细胞（osteoclast，oc），接种于培养板中培养，在培养液中分别加入不同浓度的Ge和Ⅱ型碳酸酐酶（carbonic anhydraseⅡ，CAⅡ）阻断剂乙酰唑胺（acetazolamide，Az），应用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP）和甲苯胺蓝染色技术，观察不同浓度Ge对OC生存率的影响．结果维甲酸70mg／kg体重灌胃15d，模型组大鼠的体重下降，卵巢指数下降，血清碱性磷酸酶（alkaliner,hosphatase,ALP）升高，骨钙含量减少，骨小梁稀疏，骨小梁表面积减小，骨小梁间隙面积增大，表明大鼠骨质疏松模型复制成功．与模型组比较，Ge组和尼尔雌醇片阳性对照组的卵巢指数高，骨钙增高，骨小梁较密集，骨小梁间隙面积小，骨小梁表面积大，Ge可降低血清ALP同时升高血清钙水平．Ge呈浓度依赖性减少体外培养的TRAP染色阳性的多核细胞（成熟破骨细胞，mature osteoclast，mOC）数目．结论老鹳草素对维甲酸致大鼠骨质疏松症有对抗作用，明显抑制体外培养OC的生存率可能是抗骨质疏松作用的机制之一.