多西紫杉醇对卵巢癌HO-8910细胞的增殖抑制及诱导凋亡的研究

<正>多西紫杉醇(DTX)是一种广谱的、半合成紫杉类抗肿瘤的化疗药物。已有研究表明,多西紫杉醇可用于治疗多种癌症如乳腺癌、肺癌、胃癌和头颈部癌等。本实验通过研究不同     

氧化苦参碱对卵巢癌HO8910细胞凋亡影响的血清药理学研究

目的探讨氧化苦参碱体内生物转化及含氧化苦参碱血清对人卵巢癌细胞HO8910的诱导凋亡作用机制。方法采用中药血清药理学实验方法,获得大鼠含氧化苦参碱血清,通过HPLC测定含药血清中氧化苦参碱的生物转化情况,通过MTT法、荧光显微镜、DNA琼脂糖凝胶电泳测定含药血清对人卵巢癌HO8910细胞的诱导凋亡作用,流式细胞术检测含药血清作用后细胞周期时相分布。结果给药大鼠血清中出现保留时间为10.8m in的氧化苦参碱峰图,且血清提取液中氧化苦参碱的浓度为40μg/mL,含氧化苦参碱血清能抑制HO8910细胞生长,经含药血清处理的细胞48h出现典型的细胞凋亡形态学变化和DNA片段的梯形条带,HO8910细胞被阻滞在G₀-G₁期。结论氧化苦参碱经肌注体内生物转化后,血清中的主要代谢成分仍保持不变,含氧化苦参碱血清也具有诱导HO8910细胞凋亡的作用。     

氧化苦参碱对卵巢癌HO8910细胞凋亡影响的血清药理学研究

目的探讨氧化苦参碱体内生物转化及含氧化苦参碱血清对人卵巢癌细胞HO8910的诱导凋亡作用机制。方法采用中药血清药理学实验方法,获得大鼠含氧化苦参碱血清,通过HPLC测定含药血清中氧化苦参碱的生物转化情况,通过MTT法、荧光显微镜、DNA琼脂糖凝胶电泳测定含药血清对人卵巢癌HO8910细胞的诱导凋亡作用,流式细胞术检测含药血清作用后细胞周期时相分布。结果给药大鼠血清中出现保留时间为10.8m in的氧化苦参碱峰图,且血清提取液中氧化苦参碱的浓度为40μg/mL,含氧化苦参碱血清能抑制HO8910细胞生长,经含药血清处理的细胞48h出现典型的细胞凋亡形态学变化和DNA片段的梯形条带,HO8910细胞被阻滞在G0-G1期。结论氧化苦参碱经肌注体内生物转化后,血清中的主要代谢成分仍保持不变,含氧化苦参碱血清也具有诱导HO8910细胞凋亡的作用。     

紫杉醇联合固体脂质纳米姜黄素对人卵巢癌HO-8910细胞的抑制作用研究

目的:研究紫杉醇(PTX)联合固体脂质纳米姜黄素(SLN-Cur)对人卵巢癌HO-8910细胞体外生长的抑制作用。方法:试验分为4组,即阴性对照(仅含正常生产的HO-8910细胞)、PTX(2.5μmol/L)、SLN-Cur(10μmol/L)、PTX+SLN-Cur(2.5μmol/L+10μmol/L)组。MTT法测定HO-8910细胞增殖抑制率,透射电镜观察HO-8910细胞凋亡超微结构变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率与细胞周期分布变化,免疫组化法检测凋亡相关基因蛋白酶的表达。结果:PTX、SLN-Cur、PTX+SLN-Cur均可显著抑制人卵巢癌HO-8910细胞的增殖,其中PTX+SLN-Cur作用最强。与阴性对照组比较,PTX、SLN-Cur、PTX+SLN-Cur组凋亡率显著增加,S期细胞比例逐渐降低,G2/M期细胞比例逐渐增高,MMP-9表达减弱,TIMP-2表达增强,其中PTX+SLN-Cur组表现更显著。结论:SLN-Cur对人卵巢癌HO-8910细胞具有较好的体外抑制效果,与PTX联合化疗有增效减毒作用,其机制可能与下调MMP-9表达及上调TIMP-2表达而诱导细胞凋亡有关。     

番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响效果初探

目的研究番茄红素异构体对体外培养的人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响。方法观察含不同比例的顺、反式异构体番茄红素对人卵巢癌HO-8910细胞的增殖抑制作用;采用PI流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞有一定程度的抑制增殖和诱导凋亡的作用,且呈浓度依赖性。结论对人卵巢癌HO-8910细胞,含较高比例顺式番茄红素的Ⅱ号药组抑制增殖与诱导凋亡的作用比全反式番茄红素的I号药组具更强的生物活性。     

双氢青蒿素对卵巢癌细胞株HO-8910生长及Ang-2表达的影响

目的观察双氢青蒿素对人卵巢癌细胞HO-8910裸鼠移植瘤生长及Ang-2表达的影响。方法建立人卵巢癌细胞株系HO-8910裸鼠皮下移植瘤模型。实验分为空白组、顺铂组、青蒿素高剂量组、青蒿素低剂量组、青蒿素高剂量+顺铂组(各组n=5),观测各组小鼠成瘤情况,肿瘤重量差异以及常规病理检查变化,并采用免疫组化法检测肿瘤组织内Ang-2表达情况。结果与给药组比较,对照组小鼠体重大、生长快(P<0.05)。与青蒿素低剂量组比较,高剂量组、顺铂组和联合组肿瘤生长较慢,重量减轻,其抑瘤率分别为49.24%,56.06%,75.00%,差异有统计学意义(P<0.01)。其中联合用药组效果最好(P<0.05),而高剂量组和顺铂组差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果提示给药组中Ang-2的含量明显低于对照组(P<0.05),高剂量组比低剂量组更少(P<0.05),而联合处理组几乎未见Ang-2的表达。结论双氢青蒿素对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长具有抑制作用且成剂量依赖性,与化疗药联合应用效果更好,其机制可能是青蒿素下调Ang-2的表达,直接或间接影响肿瘤组织血管生成而发挥抗肿瘤作用。     

苦参碱抑制人子宫内膜癌细胞增殖转移及机制研究

目的探讨苦参碱对人子宫内膜癌细胞增殖转移的抑制作用及机制。方法 MTT法检测苦参碱对人子宫内膜癌Ishikawa细胞株的抑制作用;流式细胞术观察对细胞周期的影响;ELISA法检测细胞培养上清液中炎性因子IL-8的浓度;Western印迹法检测经苦参碱干预该细胞48h后,NF-кB信号途径中p65的变化。结果苦参碱可显著抑制Ishikawa细胞生长,并呈时间和剂量依赖性。苦参碱使细胞阻滞于G0/G1期。细胞培养上清液中IL-8的浓度随着干预时间延长而减少(P<0.05)。苦参碱作用48h后,细胞NF-кBp65表达明显下降(P<0.05)。结论苦参碱具有抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖的作用,使细胞阻滞于G0/G1期;抑制子宫内膜癌转移的作用,可能与抑制IL-8分泌及阻断NF-кB信号通路有关。     

青蒿琥酯对人卵巢癌细胞株增殖及p38通路的影响

目的:探讨青蒿琥酯(Art)抑制卵巢癌细胞株(CAOV3)增殖及p38通路的影响及机制。方法:培养卵巢癌细胞株(CAOV3),以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法及克隆形成实验测定Art抑制卵巢癌细胞株CAOV3增殖的作用。免疫印记法测定p-p38、Cyclin D1及p21waf/cip1表达。免疫沉淀法纯化蛋白并p38试剂盒测定p38活性。结果:MTT实验及克隆分析法均显示Art明显抑制CAOV3细胞增殖,Art抑制p-p38表达及活性、下调Cyclin D1表达,同时上调p21waf/cip1表达。结论:青蒿琥酯可以抑制卵巢癌细胞株(CAOV3)增殖,其机制与影响p38通路及下游Cyclin D1、p21waf/cip1表达有关。     

氧化苦参碱对人食管癌细胞株Eca109增殖及凋亡的影响

目的:观察氧化苦参碱(Oxy)对食管癌细胞株Eca109的抑制增殖及诱导凋亡作用。方法:培养食管癌细胞株(Eca109),以MTT比色法、生长曲线、及流式细胞术测定Oxy对食管癌细胞株Eca109抑制增殖及诱导凋亡的作用。免疫沉淀法并ERK活性试剂盒测定ERK活性;免疫印记法测定p-ERK1/2、Cyclin D1、p21waf/cip1、Bax及Bcl-2表达。结果:MTT实验及生长曲线显示Oxy明显抑制Eca109细胞增殖,流式细胞术显示Oxy可诱导Eca109细胞凋亡;免疫沉淀法显示Oxy可抑制ERK活性,免疫印记法显示Oxy抑制p-ERK1/2、Cyclin D1及Bcl-2表达,同时上调p21waf/cip1和Bax表达,Bax/Bcl-2比值增加。结论:氧化苦参碱可以抑制食管癌细胞株Eca109增殖,机制与影响ERK及下游CyclinD1、p21waf/cip1表达有关;其诱导凋亡途径与上调Bax表达,降低Bcl-2表达有关。     

姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV-3增殖和凋亡的影响

<正>姜黄素是从姜科黄属植物姜黄根茎中提取的一种植物多酚,具有广泛的药理作用,如抗氧化、抗凝、抗人类免疫缺陷病毒、抗菌、解痉、抗肿瘤、抗突变等作用[1]。因其能抑制多种肿瘤细胞系的生长[2],成为当今的研究热点之一。本实验对姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV-3的体外增殖和凋亡的作     

参一胶囊联合顺铂对高转移人卵巢癌细胞系 HO-8910PM的抑制作用

［摘要］目的观察参一胶囊（Rg3）对高转移人卵巢癌细胞系HO 8910PM的抑制作用。方法细胞分成6组：阴性对照组（A组）：只加新鲜的全培养液；低浓度组（B组）：含10 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液；中浓度组（C组）：含20 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液；高浓度组（D组）：含40 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液；顺铂阳性对照组（E组）：含10 μg &#8226;mL 1顺铂的培养液；顺铂+Rg3联合用药组（F组）：含10 μg&#8226;mL 1顺铂+20 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液。分别从台盼蓝活细胞计数法、细胞的增殖抑制（CCK 8法）进行观察。结果Rg3对人卵巢癌HO 8910PM细胞有明显的抑制作用，显示了较好的细胞毒活性作用（P＜0.05）。Rg3与顺铂联合用药时，细胞毒作用与高浓度Rg3和顺铂组相似，但在微观结构上能造成更大的细胞形态结构损伤。结论Rg3对高转移人卵巢癌细胞有一定的抑制作用，Rg3与顺铂联合用药在细胞结构破坏上可能有相加或协同作用，这将为临床卵巢癌患者进行抗肿瘤治疗提供依据。     

齐墩果酸对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭、转移的影响及其作用机制研究

目的:探讨齐墩果酸抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭、转移的作用及其机制。方法:采用CCK-8法检测不同浓度齐墩果酸(10、20、40、60、80、100μmol/L)作用12、24、36、48 h对卵巢癌SKOV3细胞增殖能力的影响;采用Transwell实验观察低、高剂量齐墩果酸(20、40μmol/L)作用24 h对SKOV3细胞迁移及侵袭能力的影响;采用Western Blotting法检测低、高剂量齐墩果酸对SKOV3细胞中核因子κB p65(NF-κB p65)、肝再生磷酸酶3(PRL-3)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、上皮钙黏着蛋白E(E-cadherin)等蛋白表达的影响;运用脂多糖(LPS)诱导和NF-κB p65质粒转染SKOV3细胞,采用Western blotting法和实时荧光定量PCR考察低、高剂量齐墩果酸对NF-κB/PRL-3通路相关蛋白及其mRNA表达的影响。结果:随着齐墩果酸给药浓度的增加和作用时间的延长,SKOV3细胞的增殖能力有随之降低的趋势,各剂量组的细胞存活率均显著低于对照组(P<0.05或P<0.0...     

苦参碱对上皮性卵巢癌细胞株顺铂敏感性的影响及其机制研究

目的观察苦参碱对卵巢上皮性肿瘤患者肿瘤细胞OVCAR3体外顺铂药物敏感性的影响,并从凋亡抵抗角度探讨其潜在机制。方法体外培养上皮性卵巢癌细胞株OCCAR3,分为两组,不同浓度(10、40、160μmol/L)苦参碱处理组作为实验组,无药物处理组作为对照组。采用MTT法测定不同浓度的顺铂对两组细胞的抑制率,应用ELISA法测定两组细胞中的NF-κB核转录活性。采用Westernblot法检测Livin以及Survivin在两组细胞中的表达量。结果苦参碱处理细胞与对照组比较,对顺铂的药物敏感性不同,顺铂对3种浓度(10、40、160μmol/L)苦参碱处理后肿瘤细胞的IC50分别为(29.75±5.27)、(25.61±4.27)、(17.29±3.35)μmol/L,顺铂对对照组细胞的IC50为(31.65±2.23)μmol/L,差异有统计学意义。苦参碱(10、40、160μmol/L)处理的3组细胞的NF-κB蛋白表达分别为(0.507±0.027)、(0.375±0.019)和(0.311±0.017),对照组NF-κB蛋白表达为(0.705±0.032),差异有统计学意义。苦参碱作用于卵巢癌细胞后Livin、Survivin的表达呈浓度依赖性下调趋势,与对照组比较,差异有统计学意义。结论苦参碱处理后的上皮性卵巢癌细胞对顺铂药物的敏感性增加,其对NF-κB以及Livin、Survivin信号途径的影响是其机制之一。     

苦参碱对HCCLM3人高转移性肝癌细胞体外转移的 作用及机制研究

目的:探讨苦参碱对HCCLM3人高转移肝癌细胞体外转移的作用及其机制.方法:CCK-8检测不同浓度的苦参碱对HCCLM3癌细胞的增殖作用,选取不具有直接抑制细胞增殖效应的药物浓度进行细胞划痕实验,研究苦参碱对HCCLM3癌细胞迁移的影响;Transwell实验研究苦参碱对HCCLM3癌细胞侵袭的抑制影响;实时定量PCR(RT-PCR)和WesternBlot实验研究苦参碱对HCCLM3癌细胞E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(Matrix Metalloprotinase,MMP)-2和MMP-9因子mRNA和蛋白的表达.结果:苦参碱4、8、16 mg·mL-1剂量对HCCLM3癌细胞不产生直接抑制作用(P>0.05);苦参碱4、8、16 mg·mL-1剂量能够抑制HCCLM3癌细胞的迁移和侵袭,且与苦参碱0 mg·mL-1组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);苦参碱4、8、16 mg·mL-1剂量能够减少HCCLM3癌细胞的N-cadherin、Vimentin、MMP-2和MMP-9因子mRNA和蛋白的表达,并增加E-cadherin mRNA和蛋白的表达.结论:苦参碱能够抑制HCCLM3癌细胞的转移和侵袭,其机制可能与抑制细胞上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白以及MMP-2和MMP-9有关.     

冬凌草甲素抑制人胃腺癌细胞生长和诱导凋亡作用研究

目的:研究冬凌草甲素对人胃腺癌BGC-823细胞的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法:采用MTT、透射电镜、流式细胞仪等方法对经冬凌草甲素体外作用的BGC-823细胞进行观察和检测。结果:16、32、64μg·mL-1冬凌草甲素能显著抑制BGC-823细胞的生长,并呈浓度-时间依赖性。64μg·mL-1的冬凌草甲素作用24、48、72h的抑制率分别为68·5%、90·8%、94·7%。32μg·mL-1冬凌草甲素作用2h后,电镜下BGC-823细胞的线粒体和内质网增殖肿胀;作用8h后,线粒体和内质网空泡化,内部结构消失,细胞核染色质边集呈凋亡的典型改变;作用24h后,流式细胞仪检测BGC-823细胞G2/M期阻滞,凋亡率为37·8%。结论:冬凌草甲素对人胃腺癌BGC-823细胞具有生长抑制和诱导凋亡作用,生长抑制可能与G2/M细胞周期阻滞有关,诱导凋亡可能通过线粒体和(或)内质网途径起作用。     

苦参碱对人突变肉瘤细胞系MS0812的抑制增殖和诱导凋亡体外实验

目的:观察苦参碱(matrine)对体外培养的人肉瘤细胞系MS0812细胞的增殖和诱导调亡作用.方法:苦参碱处理人肉瘤细胞系MS0812后,应用MTT比色法检测不同浓度苦参碱和不同作用时间对MS0812细胞的增殖作用的影响,TUNEL法和流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:苦参碱浓度大于500.0 mg·L-1作用24h对MS0812 细胞增殖有抑制作用;通过TUNEL试剂盒可以发现凋亡阳性细胞;流式细胞仪检测随着苦参碱浓度的增加,凋亡率逐渐升高.结论:苦生碱体外对肿瘤细胞系MS0812的生长抑制和诱导凋亡作用有限.     

戊地昔布联合阿霉素对人乳腺癌细胞增殖的抑制作用及其机制研究

目的:研究戊地昔布联合阿霉素对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖的抑制作用及其机制。方法:将人MCF-7细胞随机分为空白对照组、溶剂对照组、阿霉素(0.25mg·L-1)组、戊地昔布(25、50、100μmol·L-1)组及联用组(阿霉素0.25mg·L-1+戊地昔布25、50、100μmol·L-1),加入相应药物继续培养,检测培养24、48、72h(n=6)后各组人MCF-7细胞的增殖抑制率;检测戊地昔布25μmol·L-1时培养48h后各组细胞周期和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白、细胞周期蛋白(CyclinD1)及环氧酶2(COX-2)蛋白表达。结果:与溶剂对照组比较,除戊地昔布25μmol·L-1培养24h外,阿霉素组、戊地昔布组及联用组增殖抑制率均明显增加(P均<0.01),且呈浓度、时间依赖性;与阿霉素组和戊地昔布组比较,联用组增殖抑制率均明显增加(P均<0.01)。戊地昔布组细胞阻滞于G0/G1期,S期细胞比例明显减少(P<0.05);联用组细胞阻滞于G0/G1期和G2/M期。与溶剂对照组比较,戊地昔布组、阿霉素组及联用组PCNA、CyclinD1蛋白表达均明显降低(P<0.05或P<0.01),仅戊地昔布组和联用组COX-2蛋白表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:戊地昔布与阿霉素联用具有协同抑制人MCF-7细胞增殖的作用,可能与抑制CyclinD1和PCNA蛋白表达从而阻滞细胞周期有关。     

雷公藤内酯醇联合奥沙利铂抗人结肠癌细胞SW480增殖的体外研究

目的观察雷公藤内酯醇（Triptolide,TPL）和奥沙利铂（Oxaliplatin,L-OHP）单用及联合应用对人结肠癌细胞SW480体外增殖的影响,初步探讨其作用机理。方法 MTT法检测L-OHP和TPL单用和联合对人结肠癌细胞株SW480增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期改变。结果 TPL和L-OHP联合应用对SW480细胞的增殖有协同抑制作用。流式细胞仪检测发现细胞阻滞于S期,G2/M期细胞减少及出现凋亡峰;结论实验证实TPL和L-OHP联合应用能协同抑制SW480细胞增殖,其作用机理有可能是通过阻滞细胞周期引起的。     

苦参碱对乙醛活化的肝星状细胞CFSC-8B增殖和胶原合成的影响及机制研究

目的:研究苦参碱对乙醛活化的大鼠肝星状细胞CFSC-8B增殖和胶原合成的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:取体外培养的CFSC-8B细胞,分为空白对照组、模型组、阳性对照组(2.5μmol/L秋水仙碱)和苦参碱低、中、高浓度组(30、60、120μmol/L)。除空白对照组外,其余各组细胞均加入200μmol/L乙醛溶液诱导活化,并同时加入相应药液(空白对照组和模型组加入等体积空白培养液),共同作用24 h后,采用CCK-8法检测各组细胞的存活率。另取细胞分为空白对照组、模型组、阳性对照组(2.5μmol/L秋水仙碱)和苦参碱中、高浓度组(60、120μmol/L),同法活化和加药处理。分别采用酶消化法检测细胞培养液中羟脯氨酸(Hyp)含量;采用酶联免疫吸附法检测细胞培养液中Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)含量;采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测细胞中α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β₁(TGF-β₁)、TGF-β₁Ⅰ型受体(TβR-Ⅰ)、TGF-β₁Ⅱ型受...     

苦参碱与3种抗肿瘤药物联合作用对KBV200耐药细胞株细胞周期的影响

目的:探讨苦参碱分别与3种常用抗肿瘤药物长春新碱(VCR)、阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)合用对KBV200耐药细胞株细胞周期的影响。方法:将培养后的KBV耐药细胞分为对照组、抗肿瘤药物组及其与苦参碱合用组,采用流式细胞仪检测、分析各组细胞周期的变化及凋亡情况。结果:与抗肿瘤药物单用组比较,苦参碱与VCR、ADM合用组细胞处于不同周期的细胞比例及凋亡数均无明显变化;苦参碱与DDP合用组G0~G1期细胞数下降、G2~M期细胞数升高。结论:推测苦参碱逆转KBV200细胞对VCR和ADM的耐药作用可能与细胞周期及凋亡无关;苦参碱能轻度增强DDP的细胞毒作用。