胀亡-持续性局灶脑缺血星形胶质细胞的死亡方式

目的动态观察大鼠持续性局灶脑缺血后星形胶质细胞的形态学变化,探讨星形胶质细胞的死亡方式.方法将48只SD大鼠随机分为免疫组化组、免疫组化对照组、电镜实验组和电镜实验对照组.采用颈内动脉线栓并环扎的方法建立持续性局灶脑缺血模型.免疫组化组和电镜实验组大鼠按照缺血时间（3h、6h、12h、24h、48h）平均随机分为5个亚组.对照组为术后24h取脑.免疫组化标本采用HE染色及TUNEL-GFAP双染.电镜标本在中心区、边缘区分别取材、染色后,透射电镜观察.结果随着时间的延长,脑缺血中心区及边缘区星形胶质细胞逐渐出现核肿胀、染色质分散、边聚、空泡变,核膜破溃,染色质溢出.随着缺血时间延长,中心区GFAP阳性细胞数逐渐减少,直至基本消失.缺血边缘区则可见到GFAP阳性细胞数量逐渐增多.TUNEL-GFAP双染未见阳性细胞.结论持续局灶脑缺血后,星形胶质细胞未见凋亡,推测胀亡是星形胶质细胞主要的死亡方式.     

Regional brain polyamine levels in permanent focal cerebral ischemia

Transient global cerebral ischemia has been shown to induce marked changes in the polyamine pathway with a significant increase in putrescine, the product of the ornithine decarboxylase reaction. This study examined the relationship between tissue and extracellular polyamines and regional cerebral blood flow and brain edema. Six hours of focal ischemia in cats (n=10) was produced by permanent middle cerebral artery occlusion. Extracellular polyamines were measured in extracellular fluid obtained by microdialysis. Regional cerebral blood flow using laser Doppler flowmetry and specific gravity, an indicator of brain edema, were measured in contralateral (non-ischemic), penumbra and densely ischemic brain regions. A significant increase in the tissue putrescine level was found in the penumbra but there was no difference in the putrescine levels between contralateral and densely ischemic regions. There was no significant change in the spermidine and spermine levels in the three regions. Extracellular levels of putrescine and spermidine were found to be significantly lower than the tissue levels and no change in polyamines was observed in any region. Significant edema formation was observed in densely ischemic and penumbra regions. This is the first demonstration that tissue putrescine is increased in the penumbra region, an area of incomplete ischemia that is developing brain edema.     

Doxycycline inhibits MMPs via modulation of plasminogen activators in focal cerebral ischemia

Tetracyclines inhibit matrix metalloproteinases (MMPs) and reduce infarction volume following cerebral ischemia. In this thesis an involvement of urokinase could be proven. Cerebral ischemia in rats was induced for 3 h followed by 24 h reperfusion (suture model). Each 6 animals received orally either doxycycline or water. Doxycycline treatment began 10 days before ischemia. MMP-2 and MMP-9 were substantially decreased. The possibility of involvement of the endogenous MMP inhibitors in the MMP inhibiting mechanisms was excluded. The plasminogen activator uPA was significantly decreased by doxycycline indicating an MMP inhibiting mechanism including the plasminogen/plasmin system. In the doxycycline group, this resulted in a decreased damage to the cerebral microvessels and less loss of the basal lamina antigen collagen type IV. Hemoglobin extravasation was also significantly reduced. Our results suggest that doxycycline may have a potential use as an anti-ischemic compound since it provides microvascular protection by inhibiting the plasminogen system.     

基质金属蛋白酶抑制剂KB-R7785对鼠局灶脑缺血的保护作用

目的 研究表明,脑缺血后基质金属蛋白酶（MMPs）可以破坏血脑屏障、促进脑水肿的形成及炎性细胞的浸润、加快神经细胞的死亡,从而加重缺血性脑损害。本研究观测MMPs抑制剂、KB-R7785对缺血性脑卒中的保护作用。方法 采用线段血管内栓塞大脑中动脉（MCAO）获得小鼠脑缺血模型。观察不同时间、剂量KB-R7785对24h后脑梗塞灶体积的影响,同时应用酶谱印迹技术检测缺血后脑组织中MMPs活性。结果 酶谱印迹显示MMP-9活性在缺血后6h表达增强,24h后达峰值。MCAO前30 min单次注射KB-R7785（100mg·kg-1）可显著抑制 MMP-9的活性;单次注射或缺血后1及4.5h分次注射KB-R7785（100mg·kg-1）均可明显减小脑梗塞体积（P<0.01）。结论MMP-9可促进脑梗塞形成;MMPs抑制剂、KB-R7785具有改善缺血性脑损伤作用。     

甘露醇在脑缺血动物实验中的治疗作用

观察甘露醇对脑缺血鼠脑组织羟自由基的清除作用。方法采用线栓法制成大脑中动脉脑缺血模型，利用高压液相色谱技术测定脑组织中羟自由基的含量。结果脑缺血组鼠脑皮层及纹状体内２，３－二羟基苯甲酸（２，３－ＤＨＢＡ）、２，５－ＤＨＢＡ的水平较对照组增高３～４倍。甘露醇能有效地降低局灶性缺血脑皮层及纹状体２，３－ＤＨＢＡ及２，５－ＤＨＢＡ的水平，改善缺血后神经功能损害，且甘露醇持续慢滴组较快滴组效果明显。甘露醇快速滴注组能减轻缺血脑组织的水肿，而甘露醇慢滴组作用不明显。结论甘露醇的脑保护作用不完全与脱水降颅压有关，可能是通过清除羟自由基而发挥重要的脑保护作用     

大鼠局灶性脑缺血再灌注区域STAT3激活的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注区域信号转导子与转录激活子-3(STAT3)激活变化,探讨其与梗死面积变化的关系. 方法 99只雄性SD大鼠分为假手术组和缺血2 h、6 h再灌注不同时间组,线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.各组动物于不同时间点处死取脑,取相应部位脑组织行TTC染色.采用免疫组化及免疫印迹法检测STAT3蛋白表达和磷酸化水平,分析其与梗死面积变化的相关性. 结果缺血后TTC染色可见部分右侧大脑半球失染呈白色.缺血6h组再灌注0 h较缺血2 h再灌注0 h TTC失染面积大.差异有统计学意义(P<0.05).缺血2 h再灌注24 h后失染面积较灌注0 h明显变小,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化定位:STAT3在胞浆中表达,磷酸化STAT3(P-STAT3)在胞核中表达.Western blot半定量分析结果:缺血再灌注不引起STAT3蛋白表达的变化,但P-STAT3表达增加,随着再灌注时间延长,24 h达到峰值.STATS激活的水平与TTC失染面积变化呈负性相关(缺血2 h组:r=-0.680,P<0.05;缺血6 h组:r=-0.672,P<0.05). 结论 脑缺血再灌注不同时间STAT3表达水平无明显变化,但可诱导缺血区域磷酸化水平增加,其激活水平与梗死面积相关.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注区域STAT3激活的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注区域信号转导子与转录激活子-3(STAT3)激活变化,探讨其与梗死面积变化的关系. 方法 99只雄性SD大鼠分为假手术组和缺血2 h、6 h再灌注不同时间组,线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.各组动物于不同时间点处死取脑,取相应部位脑组织行TTC染色.采用免疫组化及免疫印迹法检测STAT3蛋白表达和磷酸化水平,分析其与梗死面积变化的相关性. 结果缺血后TTC染色可见部分右侧大脑半球失染呈白色.缺血6h组再灌注0 h较缺血2 h再灌注0 h TTC失染面积大.差异有统计学意义(P<0.05).缺血2 h再灌注24 h后失染面积较灌注0 h明显变小,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化定位:STAT3在胞浆中表达,磷酸化STAT3(P-STAT3)在胞核中表达.Western blot半定量分析结果:缺血再灌注不引起STAT3蛋白表达的变化,但P-STAT3表达增加,随着再灌注时间延长,24 h达到峰值.STATS激活的水平与TTC失染面积变化呈负性相关(缺血2 h组:r=-0.680,P<0.05;缺血6 h组:r=-0.672,P<0.05). 结论 脑缺血再灌注不同时间STAT3表达水平无明显变化,但可诱导缺血区域磷酸化水平增加,其激活水平与梗死面积相关.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注区域STAT3激活的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注区域信号转导子与转录激活子-3(STAT3)激活变化,探讨其与梗死面积变化的关系. 方法 99只雄性SD大鼠分为假手术组和缺血2 h、6 h再灌注不同时间组,线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.各组动物于不同时间点处死取脑,取相应部位脑组织行TTC染色.采用免疫组化及免疫印迹法检测STAT3蛋白表达和磷酸化水平,分析其与梗死面积变化的相关性. 结果缺血后TTC染色可见部分右侧大脑半球失染呈白色.缺血6h组再灌注0 h较缺血2 h再灌注0 h TTC失染面积大.差异有统计学意义(P<0.05).缺血2 h再灌注24 h后失染面积较灌注0 h明显变小,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化定位:STAT3在胞浆中表达,磷酸化STAT3(P-STAT3)在胞核中表达.Western blot半定量分析结果:缺血再灌注不引起STAT3蛋白表达的变化,但P-STAT3表达增加,随着再灌注时间延长,24 h达到峰值.STATS激活的水平与TTC失染面积变化呈负性相关(缺血2 h组:r=-0.680,P<0.05;缺血6 h组:r=-0.672,P<0.05). 结论 脑缺血再灌注不同时间STAT3表达水平无明显变化,但可诱导缺血区域磷酸化水平增加,其激活水平与梗死面积相关.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注区域STAT3激活的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注区域信号转导子与转录激活子-3(STAT3)激活变化,探讨其与梗死面积变化的关系. 方法 99只雄性SD大鼠分为假手术组和缺血2 h、6 h再灌注不同时间组,线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.各组动物于不同时间点处死取脑,取相应部位脑组织行TTC染色.采用免疫组化及免疫印迹法检测STAT3蛋白表达和磷酸化水平,分析其与梗死面积变化的相关性. 结果缺血后TTC染色可见部分右侧大脑半球失染呈白色.缺血6h组再灌注0 h较缺血2 h再灌注0 h TTC失染面积大.差异有统计学意义(P<0.05).缺血2 h再灌注24 h后失染面积较灌注0 h明显变小,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化定位:STAT3在胞浆中表达,磷酸化STAT3(P-STAT3)在胞核中表达.Western blot半定量分析结果:缺血再灌注不引起STAT3蛋白表达的变化,但P-STAT3表达增加,随着再灌注时间延长,24 h达到峰值.STATS激活的水平与TTC失染面积变化呈负性相关(缺血2 h组:r=-0.680,P<0.05;缺血6 h组:r=-0.672,P<0.05). 结论 脑缺血再灌注不同时间STAT3表达水平无明显变化,但可诱导缺血区域磷酸化水平增加,其激活水平与梗死面积相关.     

Plasminogen activation in focal cerebral ischemia and reperfusion.

In focal cerebral ischemia the plasminogen-plasmin system plays a role in the fibrinolysis of vessel-occluding clots and also in the proteolysis of extracellular matrix components, which potentially contributes to brain edema and bleeding complications. The authors investigated the plasminogen activation after middle cerebral artery occlusion with and without reperfusion (reperfusion intervals 9 and 24 hours) in rats by histologic zymography and compared areas of increased plasminogen activation to areas of structural injury, which were detected immunohistochemically. After 3 hours of ischemia, increased plasminogen activation was observed in the ischemic hemisphere. The affected area measured 5.2%+/-8.5% and 19.4%+/-30.1% of the total basal ganglia and cortex area, respectively. Reperfusion for 9 hours after 3 hours of ischemia led to a significant expansion of plasminogen activation in the basal ganglia (68.8%+/-42.2%, P < 0.05) but not in the cortex (43.0%+/-34.6%, P = 0.394). In the basal ganglia, areas of increased plasminogen activation were related to areas of structural injury (r = 0.873, P < 0.001). No such correlation was found in the cortex (r = 0.299, P = 0.228). In this study, increased plasminogen activation was demonstrated early in focal cerebral ischemia. This activation may promote early secondary edema formation and also secondary hemorrhage after ischemic stroke.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注区域STAT3激活的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注区域信号转导子与转录激活子-3(STAT3)激活变化,探讨其与梗死面积变化的关系. 方法 99只雄性SD大鼠分为假手术组和缺血2 h、6 h再灌注不同时间组,线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.各组动物于不同时间点处死取脑,取相应部位脑组织行TTC染色.采用免疫组化及免疫印迹法检测STAT3蛋白表达和磷酸化水平,分析其与梗死面积变化的相关性. 结果缺血后TTC染色可见部分右侧大脑半球失染呈白色.缺血6h组再灌注0 h较缺血2 h再灌注0 h TTC失染面积大.差异有统计学意义(P<0.05).缺血2 h再灌注24 h后失染面积较灌注0 h明显变小,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化定位:STAT3在胞浆中表达,磷酸化STAT3(P-STAT3)在胞核中表达.Western blot半定量分析结果:缺血再灌注不引起STAT3蛋白表达的变化,但P-STAT3表达增加,随着再灌注时间延长,24 h达到峰值.STATS激活的水平与TTC失染面积变化呈负性相关(缺血2 h组:r=-0.680,P<0.05;缺血6 h组:r=-0.672,P<0.05). 结论 脑缺血再灌注不同时间STAT3表达水平无明显变化,但可诱导缺血区域磷酸化水平增加,其激活水平与梗死面积相关.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注区域STAT3激活的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注区域信号转导子与转录激活子-3(STAT3)激活变化,探讨其与梗死面积变化的关系. 方法 99只雄性SD大鼠分为假手术组和缺血2 h、6 h再灌注不同时间组,线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.各组动物于不同时间点处死取脑,取相应部位脑组织行TTC染色.采用免疫组化及免疫印迹法检测STAT3蛋白表达和磷酸化水平,分析其与梗死面积变化的相关性. 结果缺血后TTC染色可见部分右侧大脑半球失染呈白色.缺血6h组再灌注0 h较缺血2 h再灌注0 h TTC失染面积大.差异有统计学意义(P<0.05).缺血2 h再灌注24 h后失染面积较灌注0 h明显变小,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化定位:STAT3在胞浆中表达,磷酸化STAT3(P-STAT3)在胞核中表达.Western blot半定量分析结果:缺血再灌注不引起STAT3蛋白表达的变化,但P-STAT3表达增加,随着再灌注时间延长,24 h达到峰值.STATS激活的水平与TTC失染面积变化呈负性相关(缺血2 h组:r=-0.680,P<0.05;缺血6 h组:r=-0.672,P<0.05). 结论 脑缺血再灌注不同时间STAT3表达水平无明显变化,但可诱导缺血区域磷酸化水平增加,其激活水平与梗死面积相关.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注区域STAT3激活的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注区域信号转导子与转录激活子-3(STAT3)激活变化,探讨其与梗死面积变化的关系. 方法 99只雄性SD大鼠分为假手术组和缺血2 h、6 h再灌注不同时间组,线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.各组动物于不同时间点处死取脑,取相应部位脑组织行TTC染色.采用免疫组化及免疫印迹法检测STAT3蛋白表达和磷酸化水平,分析其与梗死面积变化的相关性. 结果缺血后TTC染色可见部分右侧大脑半球失染呈白色.缺血6h组再灌注0 h较缺血2 h再灌注0 h TTC失染面积大.差异有统计学意义(P<0.05).缺血2 h再灌注24 h后失染面积较灌注0 h明显变小,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化定位:STAT3在胞浆中表达,磷酸化STAT3(P-STAT3)在胞核中表达.Western blot半定量分析结果:缺血再灌注不引起STAT3蛋白表达的变化,但P-STAT3表达增加,随着再灌注时间延长,24 h达到峰值.STATS激活的水平与TTC失染面积变化呈负性相关(缺血2 h组:r=-0.680,P<0.05;缺血6 h组:r=-0.672,P<0.05). 结论 脑缺血再灌注不同时间STAT3表达水平无明显变化,但可诱导缺血区域磷酸化水平增加,其激活水平与梗死面积相关.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注区域STAT3激活的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注区域信号转导子与转录激活子-3(STAT3)激活变化,探讨其与梗死面积变化的关系. 方法 99只雄性SD大鼠分为假手术组和缺血2 h、6 h再灌注不同时间组,线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.各组动物于不同时间点处死取脑,取相应部位脑组织行TTC染色.采用免疫组化及免疫印迹法检测STAT3蛋白表达和磷酸化水平,分析其与梗死面积变化的相关性. 结果缺血后TTC染色可见部分右侧大脑半球失染呈白色.缺血6h组再灌注0 h较缺血2 h再灌注0 h TTC失染面积大.差异有统计学意义(P<0.05).缺血2 h再灌注24 h后失染面积较灌注0 h明显变小,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化定位:STAT3在胞浆中表达,磷酸化STAT3(P-STAT3)在胞核中表达.Western blot半定量分析结果:缺血再灌注不引起STAT3蛋白表达的变化,但P-STAT3表达增加,随着再灌注时间延长,24 h达到峰值.STATS激活的水平与TTC失染面积变化呈负性相关(缺血2 h组:r=-0.680,P<0.05;缺血6 h组:r=-0.672,P<0.05). 结论 脑缺血再灌注不同时间STAT3表达水平无明显变化,但可诱导缺血区域磷酸化水平增加,其激活水平与梗死面积相关.     

缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的 探讨缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制。方法 将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血组和缺血预处理组,每组10只。使用改良线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型。采用Longa-Bederson（LB）评分法评估缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血后神经功能的影响,采用TTC染色方法分析大鼠海马区梗死面积,采用TUNEL染色法分析大鼠海马区细胞凋亡,使用气相色谱方法分析缺血预处理后大鼠海马区域丙酮酸含量。结果 缺血预处理组大鼠LB评分[（1.67±0.21）分}明显优于缺血组[（3.17±0.31）分;P<0.05]。缺血预处理组大鼠海马区梗死面积[（154±8.1）mm2]明显少于缺血组[（221.20±5.86）mm2;P<0.05]。缺血预处理组大鼠海马区域丙酮酸含量[（3.70±0.20）μmol/g]明显高于缺血组[（2.58±0.17）μmol/g;P<0.05]。结论 缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血具有显著神经保护作用,其机制可能与明显减少大鼠脑组织梗死、增加海马丙酮酸含量、减少细胞凋亡有关。     

糖皮质激素受体阻断剂抑制成年雄性大鼠持续性局灶脑缺血后Caspase-3基因表达

目的研究糖皮质激素受体阻断剂RU38486对成年雄性大鼠持续性局灶脑缺血后Caspase-3基因表达和凋亡的影响.方法健康成年雄性大鼠72只随机分为空白组、对照组和RU38486组,脑缺血前1 h注射麻油和RU38486(20 mg/kg).利用左侧大脑中动脉电凝术建立持续性局灶脑缺血模型,分别用原位杂交、免疫组化SP法和TUNEL法标记Caspase-3 mRNA阳性细胞、Caspase-3蛋白阳性细胞和凋亡细胞.结果RU38486组与对照组比较,Caspase-3基因表达开始时间推迟到脑缺血12 h,12 h～5 d Caspase-3基因表达减少(P＜0.01),并且局限在缺血半暗带;凋亡细胞的变化时程与对照组相似,但凋亡细胞数量减少(P＜0.05).结论脑缺血前阻断糖皮质激素受体可下调Caspase-3基因表达和减少细胞凋亡,提示脑缺血后应激水平的糖皮质激素可能有加重脑缺血后凋亡的作用.     

实验性慢性糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的制作

目的建立合适的实验性慢性糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,并比较分析影响模型制备成功的因素。方法140只体质量为180～220g的雄性Wister大鼠禁食12h后,于腹腔内一次性注射链脲霉素55mg/kg,普通饮食饲养42～47d,在饲养过程中每7d饮水中给予2次庆大霉素(6.4×104U/只)。选择体质量为240～310g、血糖水平13.5～25.6mmol/L的成模实验性慢性糖尿病大鼠制作脑缺血再灌注模型;另选择70只体质量为240～310g的同种雄性大鼠制作单纯脑缺血再灌注模型作为对照。采用Longa线栓法制作糖尿病脑缺血再灌注及单纯脑缺血再灌注大鼠模型,并用Longa神经功能评分标准,比较两组大鼠模型制备成功率,分析两组大鼠模型制备失败及死亡原因。结果(1)糖尿病模型制备:慢性糖尿病大鼠模型制备成功标准为血糖水平>13.5mmol/L,糖尿病组模型制备成功90只;淘汰50只,其中因衰竭而死亡19只,血糖水平未达标31只。在实验过程中,糖尿病组大鼠的血糖水平升高、体质量降低,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。(2)脑缺血再灌注模型制备:单纯脑缺血再灌注组大鼠神经功能评分低于糖尿病脑缺血再灌注组(P<0.05)。两组模型制备成功大鼠的大体标本与组织病理学变化相近,仅程度略有不同;糖尿病脑缺血再灌注组大鼠仅脑组织中线结构移位时     

Topically applied adipose-derived mesenchymal stem cell treatment in experimental focal cerebral ischemia

In this study, the neuro-modulation effect of topical mesenchymal stem cells (MSCs) was tested in a rodent middle carotid artery occlusion (MCAO) model. Twenty-four hours after MCAO, craniotomy was made and 0.8 × 10⁶ GFP-MSCs were topically applied to the exposed parietal cortex. The MSCs were fixed in position by a thin layer of fibrin glue (N = 30). In the control group, saline were topically applied to the ipsilateral parietal cortex (N = 30). Three days after topical application, few GFP-positive cells were found in the ischemic penumbra. They expressed GFAP and NeuN. Topical MSCs triggered microglial activation, astrocytosis and cellular proliferation at day 3. The recovery of neurological functions were significantly enhanced as determined in Rotarod test and Morris Water Maze test with smaller infarct volume. PCR array showed that expressions of ten genes of neurogenesis were altered in the penumbra region (fold change > 1.25, p < 0.05) in MSCs group: Apoe, Ascl1, Efnb1, Mef2c, Nog, A100a6 and B2m were up-regulated; Pax2, Pax3 and Th were down-regulated. In conclusion, topical application provided a direct and effective transplant method for the delivery of MSCs to the surface of ipsilateral cerebral cortex and the topical MSCs could improve the neurological function from cerebral ischemia resulting from a major cerebral artery occlusion in a rodent experimental model.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后早期生长反应基因-1 mRNA的表达

目的探讨早期生长反应基因-1( early growth response gene-1,Egr-1)mRNA在大鼠局灶性脑缺血再灌注后的表达情况。方法取10只健康雄性SD大鼠,体重200 ～250 g,应用原位杂交和RT-PCR方法检测大鼠局灶性脑缺血再灌注后Egr-1 mRNA的表达情况。结果 (1)原位杂交结果:假手术组神经元及胶质细胞为轻度阳性表达。缺血2 h再灌注2 h后,缺血侧Egr-1 mRNA细胞阳性表达明显增强。再灌注4 h时Egr-1 mRNA细胞阳性表达最高,再灌注22 h Egr-1 mRNA细胞阳性表达下降,至166 h时下降更加明显,但仍显著高于假手术组。(2)RT-PCR结果:大鼠脑缺血再灌注后缺血侧Egr-1 mRNA的表达明显高于假手术组,P<0.01。动态观察发现,脑缺血2h再灌注2 h后,Egr-1 mRNA即高表达,缺血2 h再灌注4 h达高峰,再灌注46 h已明显下降,但仍高于假手术组,P<0.01,随缺血再灌注时间延长,Egr-1 mRNA表达又逐渐增多,至再灌注166 h其表达亦明显高于假手术组,P<0.01。结论缺血再灌注后Egr-1 mRNA有规律性表达。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注区域STAT3激活的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注区域信号转导子与转录激活子-3(STAT3)激活变化,探讨其与梗死面积变化的关系. 方法 99只雄性SD大鼠分为假手术组和缺血2 h、6 h再灌注不同时间组,线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.各组动物于不同时间点处死取脑,取相应部位脑组织行TTC染色.采用免疫组化及免疫印迹法检测STAT3蛋白表达和磷酸化水平,分析其与梗死面积变化的相关性. 结果缺血后TTC染色可见部分右侧大脑半球失染呈白色.缺血6h组再灌注0 h较缺血2 h再灌注0 h TTC失染面积大.差异有统计学意义(P<0.05).缺血2 h再灌注24 h后失染面积较灌注0 h明显变小,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化定位:STAT3在胞浆中表达,磷酸化STAT3(P-STAT3)在胞核中表达.Western blot半定量分析结果:缺血再灌注不引起STAT3蛋白表达的变化,但P-STAT3表达增加,随着再灌注时间延长,24 h达到峰值.STATS激活的水平与TTC失染面积变化呈负性相关(缺血2 h组:r=-0.680,P<0.05;缺血6 h组:r=-0.672,P<0.05). 结论 脑缺血再灌注不同时间STAT3表达水平无明显变化,但可诱导缺血区域磷酸化水平增加,其激活水平与梗死面积相关.