Klf4抑制Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞增殖的研究

目的探讨Klf4基因对大鼠软骨细胞增殖影响及相关机制。方法从出生24 h SD幼鼠的股骨头提取软骨细胞,细胞免疫荧光鉴定Col2a1和Sox9基因的表达。转染慢病毒载体PCDH-GFP-Klf4和辅助质粒PSPAX2及PMD2.0G至293ft细胞中产生慢病毒,48 h后收集病毒上清,用其感染大鼠软骨细胞作为Klf4组,用PCDH-GFP慢病毒感染细胞作为对照组。采用CCK8法检测2组细胞生长增殖变化;采用Western blot方法,分别检测2组细胞中Klf4基因表达、增殖相关基因PCNA和CyclinD1蛋白表达、Wnt/β-catenin信号通路上下游基因表达情况。结果原代培养软骨细胞均强表达Col2a1和Sox9基因。慢病毒PCDH-GFP-Klf4和PCDH-GFP成功感染软骨细胞,Klf4基因在软骨细胞过表达。Klf4组软骨细胞生长明显受到抑制,PCNA和CyclinD1蛋白表达和Wnt/β-catenin信号通路相关基因表达均明显下调。结论过表达Klf4基因可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路相关分子的表达而抑制软骨细胞增殖。     

桃核承气汤对慢性肾衰竭大鼠Wnt4/β-catenin信号通路中p-GSK-3β的影响

目的 探讨慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾纤维化(RIF)过程中,桃核承气汤对Wnt4/β-catenin信号通路p-GSK-3β的影响。方法 100只清洁级Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、治疗组,各25只,模型组和治疗组行5/6肾切除术,假手术组仅做双肾被膜剥离术,正常组不做处理。造模成功后,治疗组予桃核承气汤灌胃,其余3组予等量生理盐水灌胃,给药时间共为8周。Western Blot法检测肾组织中Wnt4/β-catenin信号通路的相关蛋白含量,光镜观察肾组织。结果 Wnt4、p-GSK-3β、β-catenin蛋白含量,治疗组比模型组显著降低(P<0.05);光镜观察,模型组的肾小球结构固缩,肾间质纤维增生严重,治疗组明显减轻。结论 桃核承气汤对CRF的作用机制,可能与降低Wnt4、p-GSK-3β、β-catenin蛋白含量从而调节Wnt4/β-catenin信号通路有关。     

基于Wnt/β-catenin通路研究三物白散对胃癌AGS细胞凋亡的影响

目的 研究三物白散对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响并基于Wnt/β-catenin通路探讨其机制。方法 SPF级雄性SD大鼠28只,随机分为对照组及三物白散高、中、低剂量组,每组7只。三物白散高、中、低剂量组分别按0.125、0.0625、0.03125g·kg^-1·d^-1剂量灌胃,对照组以等剂量生理盐水灌胃。每日灌胃1次,连续7d。末次给药后45min经腹主动脉取含药血清。CCK-8法检测三物白散含药血清对胃癌AGS细胞活性的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测细胞Wnt1、β-catenin、Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞Wnt1、β-catenin、Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3蛋白的表达。结果 与对照组相比,5%、10%、15%、20%高浓度组含药血清可呈浓度—时间依赖性抑制AGS细胞活性。细胞凋亡检测结果显示高浓度组AGS细胞凋亡率显著高于对照组(P<0....     

紫草素对宫颈癌细胞株Caski侵袭迁移及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨紫草素对宫颈癌细胞株Caski细胞侵袭迁移及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制情况;采用Transwell小室侵袭迁移实验检测Caski细胞侵袭迁移情况;采用qPCR方法检测Caski细胞GSK-3β、Wnt2B表达情况;采用Western bloting方法检测Caski细胞β-Catenin、p-β-Catenin蛋白含量。结果:紫草素可抑制Caski细胞的增殖,具有时间-浓度依赖性,并可抑制细胞的侵袭迁移,增加Caski细胞GSK-3β mRNA和p-β-Catenin蛋白的表达量,减少Caski细胞Wnt mRNA和β-Catenin蛋白的表达量。结论:紫草素可能通过抑制Caski细胞Wnt/β-Catenin信号通路抑制Caski细胞的侵袭迁移。     

白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠Wnt/β-catenin和TGF-β1-Smad2/3信号通路的影响

目的探究白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠Wnt/β-catenin和TGF-β1-Smad2/3信号通路的影响。方法利用链脲佐菌素一次性注射制作糖尿病肾病模型,40只SD大鼠随机分成白藜芦醇组(5 mg/kg)、氯沙坦组(30 mg/kg)、白藜芦醇联合氯沙坦组(5 mg/kg藜芦醇联合30 mg/kg氯沙坦)和模型组,每组小鼠10只,1次/d,均持续作用8周。检测尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、24 h尿蛋白及空腹血糖水平,计算肾脏指数,实时荧光定量PCR、Western blot法及免疫组化法检测Wnt4、β-catenin及TGF-β1、Smad2/3表达。结果与模型组比较,白藜芦醇组、氯沙坦组、白藜芦醇联合氯沙坦组的BUN、Scr、24 h尿蛋白和空腹血糖水平显著降低(P0.05),肾脏指数降低(P0.05),Wnt4、β-catenin、TGF-β1、Smad2/3 mRNA及蛋白表达明显降低(P0.05);与白藜芦醇联合氯沙坦组比较,白藜芦醇组以上指标差异无统计学意义(P0.05),而氯沙坦组以上指标明显增加(P0.05)。结论白藜芦醇能够降低Wnt/β-catenin和TGFβ1-Smad2/3信号通路的表达水平,改善DN肾脏病理进程,减少肾脏受到的损害。     

白杨素调控Wnt/β-catenin 通路对前列腺癌PC-3 细胞株侵袭和迁移的影响

目的：探讨白杨素调控Wnt/β-连环蛋白（β-catenin） 通路对前列腺癌PC-3 细胞株侵袭和迁移的影响。方法：设PC-3 细胞组、5-氟尿嘧啶组、白杨素低剂量组、白杨素高剂量组。5-氟尿嘧啶组加入5-氟尿嘧啶使最终浓度为80.0 μg/mL,白杨素低、高剂量组加入白杨素使最终浓度分别为60.0 μg/mL、120.0 μg/mL,培养72 h。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT） 及结晶紫染色测定细胞存活率及克隆形成数目,Transwell 法测定细胞侵袭水平,annexinV-FITC/PI 试剂盒测定细胞凋亡水平,逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR） 法及蛋白质印迹法（Western blot） 测定细胞β-catenin 基因和蛋白水平。结果：与PC-3 细胞组比较,其余3 组细胞存活率、克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 和蛋白表达水平均降低（P＜0.05）,凋亡率升高（P＜0.05）。与白杨素低剂量组比较,白杨素高剂量组细胞、存活率、克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 和蛋白表达水平降低（P＜0.05）,凋亡率升高（P＜0.05）。与5-氟尿嘧啶组比较,白杨素低剂量组细胞、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 和蛋白表达水平升高（P＜0.05）,凋亡率降低（P＜0.05）;白杨素高剂量组细胞、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 和蛋白表达水平降低（P＜0.05）,凋亡率升高（P＜0.05）。结论：白杨素能抑制前列腺癌PC-3细胞株增殖、侵袭,诱导前列腺癌PC-3 细胞株凋亡,其机制与白杨素可通过抑制β-catenin mRNA 及蛋白的表达进而抑制Wnt/β-catenin 通路有关。     

石见穿多糖通过Wnt/β-catenin信号通路调控骨肉瘤细胞的迁移和侵袭

目的探讨石见穿多糖通过Wnt/β-catenin信号通路调控骨肉瘤细胞的迁移和侵袭。方法不同浓度石见穿多糖(0、0.25、0.5、1 mg/mL)处理人OS MG63细胞24 h,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,RT-PCR检测人OS细胞β-catenin mRNA表达,Western blot检测人OS MG63细胞Vimentin、E-cadherin蛋白表达。结果石见穿多糖抑制细胞迁移、侵袭(P<0.01),降低β-catenin mRNA及Vimentin蛋白表达(P<0.05,P<0.01),促进E-cadherin蛋白表达(P<0.01),且上述作用呈现剂量依赖性。结论石见穿多糖能抑制人OS MG63细胞的迁移和侵袭能力,这种作用可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,从而阻断EMT过程而引起的。     

Wnt/β-catenin信号通路在类风湿关节炎中的表达

类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是以滑膜炎为主要病理表现的系统性疾病,目前已有研究证实,Wnt/β-catenin信号通路是类风湿关节炎发生发展的关键环节。一方面Wnt/β-catenin信号通路活化促进成骨细胞增殖分化,促进骨组织修复;另一方面,成纤维样滑膜细胞中Wnt/β-caten in通路上调,促进成纤维样滑膜细胞增殖,加重软组织增生,破坏骨关节。因此如何通过调节Wnt/β-catenin通路抑制成纤维样滑膜细胞增殖的同时促进骨修复对RA治疗具有重要研究意义。     

姜黄素对人口腔黏膜上皮细胞系增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探究姜黄素对人口腔黏膜上皮细胞系增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:取生长至对数期的人口腔上皮癌Ca9-22细胞,分为对照组及5 μmol/L姜黄素处理组、10 μmol/L姜黄素处理组、20 μmol/L姜黄素处理组、40 μmol/L姜黄素处理组,分别于处理24、48、72 h后采用MTT法检测细胞存活率,采用流式细胞仪检测不同浓度姜黄素对Ca9-22细胞凋亡的影响,Caspase-3、Caspase-9活性检测试剂盒检测Caspase-3、Caspase-9活性,免疫印迹法检测β-catenin、C-myc、Wnt1、Bcl-2及Bax表达。结果:与对照组比较,不同浓度姜黄素均对人口腔上皮癌Ca9-22细胞的增殖有一定抑制作用,且与浓度、时间有关。5 μmol/L姜黄素处理组、10 μmol/L姜黄素处理组、20 μmol/L姜黄素处理组、40 μmol/L姜黄素组处理48 h后,细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9活性及Bax mRNA表达均高于对照组,Bcl-2 mRNA及β-catenin、C-myc、Wnt1表达低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:姜黄素可抑制人口腔上皮癌Ca9-22细胞增殖并诱导Ca9-22细胞凋亡,其机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路的表达有关。     

黄芪多糖通过Wnt/β-catenin信号通路促进肝癌细胞凋亡研究

目的探讨黄芪多糖通过Wnt/β-catenin信号通路对人肝癌Hep G2细胞增殖及凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Hep G2细胞增殖能力和存活率;Annexin V-FITC/PI双染和Caspase-3活性检测细胞凋亡;荧光素酶实验检测黄芪多糖(100、200 mg/L)处理后Hep G2细胞Wnt/β-catenin通路活性改变;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting法检测细胞内的β-catenin、c-myc和CyclinD1表达水平。结果与对照组比较,随着黄芪多糖质量浓度的增加和作用时间的延长,Hep G2细胞存活率显著降低(P0.05)。与对照组比较,黄芪多糖100、200mg/L组Hep G2细胞凋亡率显著升高(P0.05);凋亡关键因子Caspase-3的相对活性显著升高(P0.05),cleaved Caspase-3蛋白水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著降低;荧光素酶活性显著降低(P0.05);β-catenin、c-myc和Cyclin D1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P0.05、0.01)。结论黄芪多糖通过下调Wnt/β-catenin信号通路抑制凋亡相关基因Bcl-2的表达,促进Hep G2细胞凋亡。     

针刺基于Wnt/β-catenin通路治疗阿尔茨海默病的实验研究进展

研究证实,Wnt/β-catenin信号通路参与了阿尔茨海默病(AD)的发生发展过程。针刺通过对该通路的各靶点及整体的调控实现治疗AD的作用。本文通过对近年来针刺治疗AD的研究进行了回顾和梳理,分别从针刺对Wnt/β-catenin信号通路重要成分(Wnt蛋白、β-catenin、糖原合成酶激酶-3β)及整体、多药耐药性蛋白(ABCB1)、低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)等方面的调控作用进行综述。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨川芎嗪对结肠癌大鼠抗肿瘤机制的研究北大核心

目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探讨川芎嗪对结肠癌大鼠抗肿瘤的机制。方法:取SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、Wnt/β-catenin信号通路抑制剂XAV939(10 mg/kg)组、川芎嗪(200 mg/kg)组、联合(川芎嗪+XAV939)组,12只/组。各给药组腹腔注射给药,正常对照组及模型组腹腔注射相应体积生理盐水,各组连续给药30 d。记录所有大鼠生存情况、体质量、肿瘤质量、肿瘤体积、脾脏及胸腺指数;检测中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞水平;HE染色检测大鼠肿瘤组织病理学,免疫印迹及RT-PCR检测大鼠结肠组织Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白及mRNA表达。结果:正常对照组大鼠活动正常,皮毛柔顺有光泽,大便正常。模型组大鼠精神萎靡,皮毛蓬乱,肛门有血渍,大便覆盖有鲜血,各给药组大鼠皮毛欠光泽,活动略迟缓,便血量较少。与正常对照组比较,模型组中性粒细胞比例、单核细胞计数显著升高,淋巴细胞比例、体质量、脾脏指数、胸腺指数显著降低,结肠组织β-catenin mRNA及蛋白、Wnt3a蛋白表达显著升高,DKK1 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组上述指标均显著改善,肿瘤质量显著降低,肿瘤体积显著减小(P<0.05),结肠组织病理学明显改善。联合组各指标改善均显著优于川芎嗪组(P<0.05)。结论:川芎嗪对结肠癌大鼠具有显著的抗肿瘤作用,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

苦豆碱在艾滋病患者外周血PBMC中调控Wnt/β-catenin信号通路影响T细胞表达机制分析

目的 观察苦豆碱干预艾滋病患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)后,对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白水平及T细胞表达的影响,从而探讨苦豆碱治疗艾滋病的机制。方法 选取广州医科大学附属市八医院感染科收治的20名艾滋病患者作为试验者,随机分为实验组及对照组。分离试验者外周血PBMC,分别加入苦豆碱溶液及0.9%氯化钠溶液干预培养,干预前后用流式细胞仪检测CD3⁺,CD4⁺,CD8⁺,CD45⁺和Foxp3⁺表达;Western blot检测苦豆碱对糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β),磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phospho-GSK-3β,p-GSK-3β),β-连环蛋白(β-catenin),磷酸化-β-连环蛋白(phospho-β-catenin,p-β-catenin),蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)和叉...     

中医药调控Wnt/β-catenin信号通路防治肝纤维化的研究进展

肝纤维化是多种肝脏慢性疾病的共同病理过程,且被认为是肝硬化、肝癌的必经阶段,因此,抗肝纤维化治疗对患者的预后具有重要的现实意义。Wnt/β-catenin信号通路是调控许多肝脏疾病的关键信号通路之一,可通过调控炎症反应、细胞凋亡、氧化应激干预肝纤维化的进程,而靶向干预该通路,如DDK1、Niclosamide、ICG-001、PRI-724、PSH等拮抗剂的长期有效性和负面作用尚未证实。大量研究表明中医药在抗肝纤维化的地位日益受到关注。基于肝纤维化虚实夹杂的中医病因病机,中药以补虚、解毒、化瘀和标本兼治等治法多靶点、多层次调节Wnt/β-catenin信号通路发挥肝保护作用。本文就Wnt/β-catenin通路与肝纤维化的关系阐述中医药延缓肝纤维化的潜在作用,以期为防治肝纤维化提供策略。     

orchinol对胃癌SGC-7901细胞侵袭迁移和Wnt3a/β-catenin信号通路的影响

研究中药绶草中分离得到的主要的9,10-二氢菲类单体化合物orchinol对人胃癌SGC-7901细胞侵袭和迁移的抑制作用及初步的分子机制。体外培养人胃癌SGC-7901细胞,分别加入终浓度为5,10,20,40,80μmol·L-1的orchinol处理细胞24,48,72 h,采用MTT法检测orchinol对SGC-7901细胞活力的影响;利用伤口愈合实验、Transwell实验分别分析5,10,20μmol·L^-1orchinol作用48 h后对SGC-7901细胞的迁移和侵袭能力的影响;Western blot法检测orchinol对SGC-7901细胞β-catenin,Wnt-3a,DvL2,cyclinD1,GSK-3β蛋白表达水平的影响。结果显示,orchinol在5~80μmol·L^-1能以剂量和时间依赖性的方式抑制SGC-7901细胞的活力,orchinol分别处理细胞24,48,72 h后,其对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为77.79,42.96,7.85μmol·L^-1;与对照组相比,5,10,20μmol·L^-1orchinol作用48 h,可明显抑制SGC-7901细胞侵袭和迁移的能力(P<0.05,P<0.01),且呈剂量依赖关系;Western blot结果显示,orchinol可显著下调β-catenin,Wnt3a,DvL2,cyclinD1蛋白、显著上调GSK-3β蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。以上结果提示orchinol能显著抑制SGC-7901细胞侵袭和迁移能力,其机制可能是与orchinol抑制Wnt3a/β-catenin信号通路及下游基因蛋白的表达有关。     

隐丹参酮调控Wnt/β-catenin 信号通路对胃癌细胞抑制作用的研究

目的：探究隐丹参酮调控Wnt/β-连环蛋白（β-catenin） 信号通路对胃癌细胞的抑制作用。方法：将人胃癌BGC-823 细胞株分为对照组,隐丹参酮低、中、高剂量组（以下简称低、中、高剂量组）,高剂量+SKL2001 组,高剂量+XAV939 组。低、中、高剂量组在培养过程中加入20、40、80 μmol/L 的隐丹参酮;高剂量+SKL2001 组中加入80 μmol/L 隐丹参酮与20 μmol/L SKL2001;高剂量+XAV939 组中加入80 μmol/L 的隐丹参酮与1 μmol/L 的XAV939。采用MTT 法、Transwell 小室法、细胞划痕实验分别检测细胞的增殖能力及迁移侵袭能力。采用RT-PCR 与蛋白免疫印迹法检测细胞中蓬乱蛋白DSH 同源物2（Dvl2）、糖原合成酶激酶-3（GSK-3β）、β-catenin 和G1/S-特异性周期蛋白-D1（Cyclin D1） 表达水平。结果：与对照组比较,低、中、高剂量组处理24 h、48 h、72 h 后细胞增殖抑制率、GSK-3β 蛋白及mRNA 表达上升（P＜0.05）,Dvl2、β-catenin、Cyclin D1 蛋白及mRNA 表达降低（P＜0.05）,且呈剂量依赖性（P＜0.05）。细胞划痕48 h 后,低、中、高剂量组细胞迁移能力、过膜细胞数及划痕愈合率均降低（P＜0.05）,且随着剂量增加而降低（P＜0.05）;与高剂量组比较,高剂量+SKL2001 组迁移能力、过膜细胞数及划痕愈合率均增高（P＜0.05）;与高剂量+SKL2001 组比较,高剂量+XAV939 组迁移能力、过膜细胞数及划痕愈合率均降低（P＜0.05）。结论：隐丹参酮能通过抑制Wnt/β-catenin 信号通路的活性对胃癌细胞起抑制作用。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨中医药治疗胃癌前病变研究现状

胃癌前病变（PLGC）是正常胃黏膜组织发生病理学癌变的异常过程,是胃癌发生前的必经阶段,亦是降低胃癌发病率的重要切入点。Wnt/β-catenin信号通路参与了PLGC的发生发展过程,当Wnt信号通路激活时,β-catenin向核内聚集,诱导原癌基因异常表达。中医药治疗PLGC疗效肯定,且查阅大量文献表明中医药对Wnt/β-catenin信号通路具有调控作用。因此,从中药及针灸两方面着手,将中医药基于Wnt/β-catenin信号通路治疗PLGC的理论及研究现状进行综述,从而提出中医药疗法调控该信号通路治疗PLGC的问题及思考,为治疗PLGC及预防胃癌发生的中医药科研工作提供一定的启发,并为PLGC的中医临床应用提供参考依据。     

敷和备化方对肝癌干细胞Wnt/β-catenin通路的影响

目的 探讨敷和备化方对CD⁺₁₃₃HepG2肝癌干细胞Wnt/β-catenin通路的影响。方法 通过免疫磁珠法分筛出CD⁺₁₃₃HepG2肝癌干细胞后,在干细胞培养液中诱导和培养,流式细胞术鉴定CD⁺₁₃₃HepG2细胞比例,将CD⁺₁₃₃HepG2肝癌干细胞分为血清对照组、空白对照组、XVV939阳性药对照组、敷和备化方组。血清对照组加入体积分数为16%正常大鼠血清培养基,空白对照组加入相同剂量正常培养基,阳性对照组加入相同剂量含1μmol/L XVV939的培养基,敷和备化方组加入体积分数为16%敷和备化方含药血清培养基,药物作用6 d后采用RT-PCR以及Western blot检测Wnt/β-catenin通路相关因子Wnt1、β-catenin、PI3K、AKT的mRNA以及蛋白表达。结果 与空白对照组和血清对照组相比,阳性药对照组和敷和备化方组皆可下调Wnt1、β-catenin、PI3K、Akt的...     

温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎小鼠滑膜增殖、凋亡及Hotair/Wnt1/β-catenin通路的影响

目的 以胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠为实验对象进行体内实验，从Hotair/Wnt1/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的角度，分析温化蠲痹方（WHJBD）对类风湿关节炎（RA)的干预机制。方法 选用雄性DBA/1J小鼠建立CIA模型，将造模成功小鼠按随机数字表法分为4组：模型组（CIA组）、温化蠲痹方组（WHJBD组）、甲氨蝶呤组（MTX组）、WHJBD+MTX组，每组6只。并随机选取同一批次的正常小鼠6只作为正常组。WHJBD组每天予WHJBD灌胃（25.78 g/kg）、MTX组每周予MTX灌胃（1.288 mg/kg）、WHJBD+MTX组同时予WHJBD及MTX灌胃，正常组及CIA组予同等剂量生理盐水灌胃，均持续4周。采用游标卡尺测量足掌和踝关节的肿胀程度并计算关节肿胀度，实时荧光定量PCR法检测各组Hotair、Wnt抑制因子1(WIF1)、C-myc、G1/S-特异性周期蛋白（CyclinD1）表达水平，免疫组化法检测Wnt1、β-catenin、肿瘤增殖抗原抗体（Ki-67）、Caspase3、B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白（Bax）蛋白表达...     

壮骨止痛方对体外培养成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的观察壮骨止痛方对体外培养成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法取新生SD大鼠颅骨进行成骨细胞原代培养,传代后随机分为4组:假手术组、模型组、对照组、中药组。培养3代后进行鉴定,加入相应含药血清干预48 h。测定各组成骨细胞Wnt3a、β-catenin、LRP5、GSK3βmRNA及蛋白的表达情况。结果与假手术组比较,模型组β-catenin、LRP5蛋白及mRNA降低(P0.05),GSK3β蛋白及mRNA升高(P0.05)。与模型组比较,对照组和中药组β-catenin、LRP5蛋白及mRNA表达升高(P0.05),GSK3β蛋白表达降低(P0.05),中药组GSK3βmRNA表达降低(P0.05)。与对照组比较,中药组β-catenin蛋白及mRNA表达升高(P0.05),GSK3βmRNA表达降低(P0.05)。结论壮骨止痛方可通过上调Wnt3a、β-catenin、LRP5蛋白的表达,下调GSK3β的表达调控Wnt/β-catenin信号通路。