牙龈蛋白酶及其致病作用

牙龈卟啉单胞菌是引起和加重牙周炎的重要致病菌,其分泌的牙龈蛋白酶是其主要的毒力因子之一。本文就牙龈卟啉单胞菌牙龈蛋白酶以及牙龈蛋白酶对细菌生长和黏附的影响、对组织的破坏作用、对宿主防御机制的作用等研究进展作一综述。     

牙龈卟啉菌蛋白酶的研究进展

革兰氏阴性厌氧菌牙龈卟啉菌和牙周炎病因密切相关,生物化学和分子生物学的进展表明牙龈卟啉菌可合成多种蛋白酶,蛋白酶是细菌重要的毒力因子,具有复杂的生理功能。本文简述了牙龈卟啉菌蛋白酶的生物学作用及其在牙周炎组织破坏中的影响。     

牙龈卟啉菌的蛋白酶及其在牙周病病理机制中的作用

牙龈卟啉菌与牙周病发生、发展关系密切。其蛋白溶解酶能入侵并破坏组织,逃避宿主防御功能等。近年研究主要集中于该菌产生的具有胰蛋白酶样活性的半胱氨酸酶,即牙龈蛋白酶R,牙龈蛋白酶K,它们具有多种活性,是牙周病发展中一个重要毒性因子。     

牙龈卟啉菌蛋白酶的结构和作用

牙龈蛋白酶是牙龈卟啉菌的主要致病因子，因其对宿主蛋白的广泛活性受到了普遍关注本文就牙龈蛋白酶的生化特征、基因结构、蛋白分子结构与作用的研究现状作一综述。     

BMP-7在牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡中的保护作用

目的：研究牙龈蛋白酶对成骨细胞MC3T3-E1的增殖及凋亡的作用,以及BMP-7在此过程中的保护作用.方法：分离提纯牙龈蛋白酶,建立牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡模型,使用MTT法、TUNEL/DAPI染色法检测牙龈蛋白酶对成骨细胞增殖及凋亡的影响,并且研究BMP-7对于牙龈蛋白酶造成的细胞凋亡的保护作用.结果：牙龈蛋白酶呈剂量和时间依赖性地抑制成骨细胞增殖,诱导成骨细胞凋亡.在500和1000 ng/ml浓度范围内,BMP-7呈剂量依赖性地减轻牙龈蛋白酶对成骨细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用.结论：BMP-7能有效抵抗牙龈蛋白酶诱导产生的成骨细胞增殖抑制及细胞凋亡.     

牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K基因真核表达载体的构建和体外表达

目的：构建牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K基因的真核表达载体，并检测其在体外真核细胞中的表达情况。方法：利用基因重组技术构建牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K基因重组质粒pcDNA3.1( )-KGPcd，然后通过脂质体将pcDNA3.1( )-KGPcd瞬时转染COS7细胞，以RT-PcR和间接免疫荧光法检测重组质粒的转录水平和蛋白表达情况。结果：成功构建了牙龈蛋白酶K真核表达载体；转染的COS7细胞中可检测到目的蛋白的转录和表达。结论：成功构建了pcDNA3.1( )－KGPcd真核表达载体并在哺乳动物细胞中能够正确转录和表达，为下一步作为基因疫苗免疫动物提供了依据。     

牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡中促凋亡蛋白Bad的表达改变

目的:检测牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡中Bad的表达改变,为保护成骨细胞提供依据。方法:8.348U/L牙龈蛋白酶处理成骨细胞0、4、8、16、24、48和72h,或将不同浓度牙龈蛋白酶与成骨细胞作用24h后,蛋白质印迹法检测Bad蛋白表达改变。结果:在一定范围内,牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡中呈时间和剂量依赖性上调Bad的表达,牙龈蛋白酶抑制剂TLCK有效抑制牙龈蛋白酶所诱导的Bad的高表达。结论:牙龈蛋白酶上调Bad的表达,促凋亡蛋白Bad参与了牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡过程。     

牙龈卟啉菌的蛋白酶及其在牙周病病理机制中的作用

牙龈卟啉菌与牙周病发生、发展关系密切。其蛋白溶解酶能入侵并破坏组织，光避宿主防御功能等。近年研究主要集中于该菌产生的具有胰蛋白酶样活性的半胱氨酸酶，即牙龈蛋白酶Ｒ，牙龈蛋白酶Ｋ，它们具有多种活性，是牙周病发展中一个重要毒性因子。     

牙龈卟啉单胞菌牙龈蛋白酶的研究进展

牙周炎是一种牙齿支持组织的慢性炎症性疾病,能引起结缔组织和牙槽骨的破坏而导致渐进性附着丧失,最终可能导致牙齿脱落.革兰氏阴性厌氧菌牙龈卟啉单胞菌是慢性牙周炎的重要致病菌,具有包括脂多糖、菌毛、血细胞凝集素和胞外蛋白酶在内的多种毒力因子,其中牙龈蛋白酶提供的蛋白水解活性占该生物体产生的一般蛋白水解活性的大部分(85％),...     

牙龈蛋白酶对M1型巨噬细胞表达抑菌细胞因子的调控作用

目的:探讨牙龈蛋白酶对M1型巨噬细胞表达抑菌细胞因子的调控作用。方法:采用sheets改良法从Pg ATCC 33277培养物上清中制备牙龈蛋白酶,应用质谱法鉴定牙龈蛋白酶,底物发色法测定酶活性,鲎试剂检测牙龈蛋白酶中LPS残留量。体外细胞模型实验评价牙龈蛋白酶对大肠杆菌脂多糖(Ec-LPS)诱导的M1型巨噬细胞表达抑菌细胞因子的影响。实验分为3组:阴性对照组、Ec-LPS组和Ec-LPS+牙龈蛋白酶组,采用qRT-PCR和ELISA法检测M1型巨噬细胞表达的抑菌细胞因子白细胞介素12(IL-12)、一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素10(IL-10)在基因和蛋白水平的表达情况。结果:制备的牙龈蛋白酶为RgpA,活性20 U/L,LPS残留量<0.01EU/mL。qRT-PCR和ELISA结果显示,与阴性对照组相比,Ec-LPS组IL-12和iNOS基因和蛋白的表达水平明显升高,IL-10的表达降低,即成功诱导M1型巨噬细胞,组间有显著差异(P<0.01);Ec-LPS+牙龈蛋白酶组IL-12、iNOS和IL-10基因和蛋白的表达较Ec-LPS组显著降低,但高于阴性对照组,组间有显著差异(P<0.01)。结论:牙龈蛋白酶具有抑制M1型巨噬细胞表达抑菌细胞因子IL-12、iNOS的作用。