CD4~+CD25~+T细胞在CD8~+T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用

实验旨在研究CD4+CD25+T细胞在CD8+T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用。将小鼠脾脏中分离的单个核细胞分为两组,即去除CD4+CD25+T细胞组和未去除CD4+CD25+T细胞组,测定树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽刺激不同T细胞增殖活性、细胞因子IFN-γ分泌,以及多肽特异性CD8+T细胞对同源性胃癌细胞株MFC的杀伤活性。结果显示预先去除未致敏T细胞中的CD4+CD25+T细胞,所诱导的特异性CD8+CTL对肿瘤细胞免疫应答增强,表现为反应性T细胞对树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽增殖反应增强,IFN-γ分泌量提高及CD8+T细胞对MFC杀伤活性增强。这些结果表明,预先去除未致敏T细胞中的CD4+CD25+T细胞,肿瘤抗原多肽修饰的树突状细胞肿瘤疫苗效能可明显增加。CD4+CD25+T细胞在CD8+T细胞抗肿瘤免疫中起下调作用。     

CD4~+T细胞识别的肿瘤抗原的研究进展

在以往的肿瘤免疫研究中 ,人们往往关注肿瘤特异性CD8+ T细胞的抗肿瘤效应 ,并由此鉴定出许多CD8+ T细胞识别的肿瘤抗原。随着研究的深入 ,CD4 + T细胞在抗肿瘤免疫中的作用逐渐为人们所关注。联合应用MHCⅠ类和MHCⅡ类限制性抗原的肿瘤疫苗将有可能取得更好的抗肿瘤效果。本文就近年来鉴定的CD4 + T细胞识别的肿瘤特异性抗原进行了综述。     

CD4+CD25+T细胞在CD8+T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用

实验旨在研究CD4^＋CD25^＋T细胞在CD8^＋T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用。将小鼠脾脏中分离的单个核细胞分为两组．即去除CD4^＋CD25^＋T细胞组和未去除CD4^＋CD25^＋T细胞组,测定树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽刺激不同T细胞增殖活性、细胞因子IFN一1分泌,以及多肽特异性CD8^＋T细胞对同源性胃癌细胞株MFC的杀伤活性。结果显示预先去除未致敏T细胞中的CD4^＋CD25^＋T细胞,所诱导的特异性CD8^＋CTL对肿瘤细胞免疫应答增强,表现为反应性T细胞对树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽增殖反应增强,IFN-γ分泌量提高及CD8＋T细胞对MFC杀伤活性增强。这些结果表明。预先去除未致敏T细胞中的CD4^＋CD25^＋T细胞,肿瘤抗原多肽修饰的树突状细胞肿瘤疫苗效能可明显增加。CD4^＋CD25^＋T细胞在CD8^＋T细胞抗肿瘤免疫中起下调作用。     

DEC-205靶向的肝素酶CD4~+CD8~+T细胞表位肽纳米颗粒疫苗的抗肿瘤免疫效应研究

目的探索肝素酶CD4~+CD8~+T细胞表位肽纳米颗粒疫苗诱导CTL抗肿瘤免疫反应的可行性,并研究其抗肿瘤免疫杀伤效应。方法根据文献报道方法制备肝素酶表位肽纳米颗粒疫苗;采用流式细胞术检测DEC-205靶向的肝素酶表位纳米颗粒疫苗与树突状细胞(DC)的结合力及入胞效率;采用标准4h~(51)Cr释放实验检测负载DEC-205靶向的肝素酶纳米颗粒疫苗诱导的效应细胞对胃癌及结肠癌细胞的杀伤效率;采用ELISA CD4~+CD8~+T细胞表位DEC-205靶向纳米颗粒疫苗,其颗粒直径为(208±15.3)nm,Zeta电位为(-28.8±2.5)mV;纳米颗粒对多肽的封包率为(22±3.6)%。纳米颗粒疫苗可与树突状细胞有效结合,并可以有效进入树突状细胞内,这种结合和内吞作用随着加入的纳米颗粒的浓度增加而增加。体外杀伤实验结果显示,在效靶比为80∶1时CD4~+CD8~+表位肽纳米颗粒疫苗诱导的效应细胞对肿瘤细胞的杀伤效率可达70%,与单用CD8~+表位肽相比具有统计学意义(P0.01);T细胞增殖实验结果提示,CD4~+CD8~+表位肽组细胞的细胞增殖率显著高于单独使用CD8+表位肽组,细胞因子检测结果提示CD~4+CD8~+表位肽组细胞培养上清中IL-2、IL-12、IFN-γ浓度显著高于单独使用CD8~+表位肽组(P0.01)。结论采用DEC-205靶向PLGA颗粒包裹CD4~+CD8~+表位肽能够更加有效递送抗原信息,能更加有效地诱导CTL反应杀伤肿瘤细胞,本研究为TAA为基础的肿瘤免疫治疗提供一种新的方式。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞和肿瘤免疫

近期研究发现一个有独特免疫调节功能的T细胞亚群 :CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞 ,不仅能抑制自身免疫性疾病发生 ,还可能参与肿瘤免疫的调节。这群细胞具有免疫无能和免疫抑制特性 ,通过与细胞直接接触发挥作用 ,而不依赖于其分泌的细胞因子。肿瘤环境中CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞比例增加 ,导致肿瘤免疫失调 ,去除这群细胞可有效诱导肿瘤免疫 ,为肿瘤治疗提供了一种新的方法。     

CD4~+CD25~+ Treg的免疫调节作用机制以及临床研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)是一个具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,它不仅能够抑制自身免疫性疾病的发生,而且可能参与诱导移植耐受以及肿瘤免疫的调节,在维持机体内环境的稳定中起重要作用。文章旨在对近两年关于CD4+CD25+Treg的免疫调节作用机制以及临床研究进展作一综述。     

CD4~+CD25~+Treg与肺癌的发生发展

机体免疫系统具有免疫监视功能及时识别及清除突变细胞防止肿瘤的发生,免疫监视功能下降可导致肿瘤的免疫逃逸。CD4+C D25+调节性T细胞是具有免疫负调节作用的T细胞亚群,在维持免疫耐受中起重要作用。通过检测FoxP 3和CD127可以发现CD4~+C D25~+调节性T细胞与肺癌的发生发展密切相关。Treg通过表达CTLA-4、GITR和PD-1等分子,分泌TNF-β、IL-6、IL-10和IL-17等细胞因子及抑制CD4~+/CD8~+T细胞、DC、NK细胞等细胞的产生和功能的发挥等促进肿瘤的免疫逃逸和肿瘤的发生发展。Treg和肿瘤微环境介导的血管新生、肿瘤基质破坏和肿瘤细胞与血管内皮细胞的相互作用促进了肿瘤的侵袭和迁移。     

人外周血CD4~+ IL-21~+记忆T细胞的特征

目的:探讨人外周血中白细胞介素21(IL-21)的产生细胞及其特征。方法:分离人外周血单个核细胞(PBMC),分为不刺激或anti-CD3(OKT3)、OKT3+anti-CD28、PMA+ionomycin刺激四个组,流式细胞术(FCM)检测产生IL-21的细胞亚群。PMA+ionomycin刺激PBMC、纯化CD4+、CD4+CD45RA-、CD4+CD45RA+细胞、脐带血单个核细胞(CB-MC),FCM分析产生IL-21细胞的表型特征和IL-21与Th1、Th2、Th17和Th22细胞因子之间的关系。结果:与OKT3、OKT3+anti-CD28相比,PMA+ionomycin能诱导最高量的IL-21产生。产生IL-21的主要细胞为CD4+T细胞,少数CD8+T细胞。CD4+IL-21+T细胞表达CD45RO,不表达CD45RA,其中部分细胞表达CCR6、CCR7或CXCR5。CD4+CD45RA-细胞表达IL-21远高于CD4+CD45RA+细胞。进一步研究表明,PBMC产生IL-21,而CBMC不产生。此外,大约24%的CD4+IL-21+细胞表达IFN-γ,小于10%CD4+IL-21+细胞表达IL-4、IL-17或IL-22。结论:人PBMC在多克隆刺激的条件下,可以诱导IL-21的产生。产生IL-21的主要细胞亚群具有记忆CD4+T细胞的表型。其中一部分CD4+IL-21+T细胞的表型独立于Th1、Th2、Th17和Th22细胞亚群。     

CD4~+CD25~+CD127~(low)识别人外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的优势

目的:探索可用于检测人外周血中CD4+CD25+Treg 细胞的最佳标记物.方法:以 52 名健康人和 47 名非血液系统肿瘤患者为研究对象,采用多色免疫荧光素标记和多参数流式细胞术同时检测外周血中CD4+CD25high、CD4+CD25+FoxP3+和 CD4+CD25+CD127lowT 细胞,并以经典指标CD4+CD25high 和 CD4+CD25+FoxP3+为标准,分析和比较CD4+CD25+CD127low作为识别CD4+CD25+ Treg 细胞的可行性及其优势.结果:健康人和肿瘤患者外周血 CD4+CD25high、CD4+ CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CDl27+lowT 细胞占CD4+T 细胞百分比分别为(1.769±O.682)%和(2.958±1.392)%;(2.905±1.772)%和(5.128±2.227)%以及(5.396±1.306)%和(7.175±2.565)%.三者呈相同的趋势,即肿瘤患者组>健康人组,且三者之间呈显著正相关(P<0.05).用两种不同标记法高纯度分选CD4+ CD25high 和 CD4+CD25+CD127lowT 细胞群后,FoxP3 阳性率分别为90.9%和92.7%.结论:CD4+CD25+CD127low 三标记法可以帮助识别 CD4+CD25+Treg 和部分激活的 CD4+T 细胞,提高CD4+CD25+Treg细胞的可检出数量,并且不影响细胞活性度,是反映CD4+CD25+Treg 细胞更理想的指标.     

032 CD4+T细胞识别的肿瘤抗原的研究进展

在以往的肿瘤免疫研究中，人们往往关注肿瘤特异性CD8+T细胞的抗肿瘤效应，并由此鉴定出许多CD8+T细胞识别的肿瘤抗原。随着研究的深入，CD4+T细胞在抗肿瘤免疫中的作用逐渐为人们所关注。联合应用MHCⅠ类和MHCⅡ类限制性抗原的肿瘤疫苗将有可能取得更好的抗肿瘤效果。本文就近年来鉴定的CD4+T细胞识别的肿瘤特异性抗原进行了综述。     

调节性CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞、免疫抑制剂与移植免疫耐受

CD4+CD25+Treg是调节性T细胞的重要类型之一,在自身免疫耐受及移植免疫耐受的诱导和维持中起重要作用。然而,目前广泛应用于器官移植的免疫抑制剂对CD4+CD25+调节性T细胞的影响并不十分明确。在器官移植时能够通过免疫抑制剂诱导特异性的CD4+CD25+调节性T细胞,将提高受者免疫耐受的敏感性,有利于器官移植物的长期存活及移植免疫耐受的建立。相反,有些免疫抑制剂可能在避免移植排斥反应的同时,也阻断了有利于移植耐受建立的免疫反应。因此,免疫抑制剂对移植免疫耐受的潜在作用应当引起足够重视。有利于免疫耐受形成的免疫抑制药物的研发将是一个发展重要方向。     

B7H1-Ig诱导Tr1细胞向CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞转化的研究

为探讨Ⅰ型调节性T细胞(Tr1)与CD4+CD25+Foxp3+Treg之间的转化和相互关系,以预包被而固相化的B7H1-Ig融合蛋白加抗CD3单抗刺激初始CD4+CD62L+T细胞,分析细胞因子及Foxp3表达水平的变化,检测细胞功能;在B7H1-Ig开始刺激时或诱导细胞分化结束后加入重组人TGF-β,观察其对细胞分化的影响。结果显示,B7H1-Ig激活的CD4+T细胞产生高水平IL-10、IFN-γ和IL-5,极低水平的IL-2和IL-4,不表达Foxp3,通过分泌抑制性细胞因子IL-10发挥免疫抑制功能,证实B7H1-Ig可诱导Tr1细胞的产生。同时发现TGF-β不影响B7H1-Ig刺激的初始CD4+T的分化,却可促进B7H1-Ig诱导的已分化Tr1细胞向CD4+CD25+Foxp3+Treg转化,提示在特定条件下,Tr1细胞可转化的CD4+CD25+Foxp3+Treg。研究结果为将来临床应用CD4+Treg治疗免疫失调性疾病奠定了基础。     

癌灶CD4~+CD25~+和CD8~+ T细胞亚群与卵巢浆液性癌患者生存期相关

检测卵巢浆液性癌患者癌组织中CD4+CD25+及CD8+T细胞的数目,探讨其两种T细胞介导的免疫功能对疾病发展及预后的影响。免疫组织化学双标及单标的染色方法检测41例卵巢浆液性癌患者手术切除癌组织标本中CD4+CD25+和CD8+T细胞的数目。结果显示,癌灶中CD4+CD25+T淋巴细胞为(19.95±11.50)个/10HPF,CD8+T淋巴细胞为(43.46±16.69)个/10HPF。生存分析发现高CD4+CD25+T细胞组患者总生存期较低CD4+CD25+T细胞组缩短,差异有显著性(P<0.05);而高CD8+T细胞组患者总生存期与低CD8+T细胞组相比延长,且差异有显著性(P<0.05),此外两种T细胞数目与患者年龄、病理分级、临床分期、腹水细胞学及淋巴结转移等临床病理因素均无关(P>0.05)。结果表明,卵巢浆液性癌中高CD4+CD25+T细胞提示患者预后不良,可能与CD4+CD25+T细胞介导的免疫抑制导致肿瘤免疫逃逸有关;癌组织中高CD8+T细胞提示患者预后较好,两种T细胞对卵巢浆液性癌预后的评估有重要的价值,同时可以通过阻断CD4+CD25+T细胞的免疫抑制作用改善卵巢浆液性癌患者的预后,为卵巢癌治疗提供靶目标。     

多发性骨髓瘤患者外周血Th1/Th2及CD4~+CD25~+Tregs的表达分析

目的:检测多发性骨髓瘤(MM)患者外周血T辅助细胞亚群(Th1/Th2)及调节性T细胞(CD4+CD25+Tregs)数量和比例的变化,探讨其T细胞免疫功能状态及临床意义。方法:流式细胞术(FCM)检测31例MM患者及20例健康志愿者外周静脉血Th1/Th2及CD4+CD25+Tregs的比例并分析比较。结果:(1)II、III期MM患者Th1细胞比例较对照组降低,III期Th2细胞比例较对照组及I期降低,差异具有显著性;II、III期MM患者CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25highCD127low细胞比例均高于正常组,III期CD4+CD25high、CD4+CD25highCD127low较I期增高,差异具有显著性。(2)化疗后复发组MM患者Th1细胞比例较对照组降低,初诊组及化疗后复发组Th2细胞比例较对照组及稳定期组降低,差异具有显著性;初诊组及化疗后复发组CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25highCD127low细胞比例均高于正常组,复发组CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25highCD127low明显高于稳定组及初诊组,差异具有显著性。(3)相关性分析Th1、Th2细胞与CD4+CD25+Tregs存在不同程度的负相关(均P0.05或0.01)。结论:MM患者外周血Th1、Th2细胞比例降低,调节性T细胞比例增高,两者相互调节,并与疾病临床分期、病情进展相关,对指导治疗也有一定的价值。     

T细胞疫苗免疫前后外周血CD4~ 和CD8~ T细胞变化的分析

目的 观察T细胞疫苗免疫前后外周血CD4~+和CD8~+T细胞的变化情况,探讨T细胞疫苗诱导特异性免疫耐受的作用及其机理。方法 制备针对Wistar大鼠的SD大鼠T细胞疫苗,用制备好的T细胞疫苗去免疫正常的SD大鼠,同时设特异性抗原对照组和空白对照组。于免疫前和免疫后规定时点分别进行单向混合淋巴细胞反应(MTT法),于相同时点通过流式细胞分析对外周血CD4~+和CD8~+T细胞进行检测。结果 在T细胞疫苗组,平均OD值免疫后比免疫前显著降低(P<0.01)CD4/CD8比值免疫后比免疫前显著降低(P<0.05);在特异性抗原对照组,免疫后的OD值显著高于免疫前(P<0.01),同时CD4/CD8比值于免疫后显著增高(P<0.05);空白对照组各时点各指标比较无显著差异(P>0.05)。结论T细胞疫苗可以诱导同种抗原特异性免疫耐受,CD4~+反应性T细胞克隆与CD8~+抗独特型T细胞克隆相对比例优势的转换可能在T细胞疫苗诱导的免疫耐受形成中发挥关键作用。     

新生儿、儿童及成人外周血CD4~+和CD8~+T细胞分泌IFN-γ及IL-4变化的研究

本研究应用相应的荧光标记的抗体 ,从单细胞水平检测了正常无家族过敏史的 17例新生儿、 18例儿童及 10例成人外周血CD4+ 、CD8+ 细胞分泌IFN γ、IL 4的变化 ,结果显示产生IFN γ的CD4+ (Th1)和CD8+ (Tc1)细胞、产生IL 4的CD4+ (Th2 )细胞及同时产生IFN γ/IL 4的CD4+ (Th0 )细胞 ,随着年龄的增长而明显增高 (P <0 0 5 ) ,Th1/Th2比值也明显升高 (P <0 0 5 )。表明从新生儿期至成人Th1、Tc1、Th2、Th0有一个正常生理性增加过程 ,其中Th1、Tc1变化更为显著 ,可能与抗原暴露接触有关。     

人早孕期外周及蜕膜CD4~+CD25~+调节性T细胞变化

正常生理妊娠类似于同种异体移植,妊娠的维持有赖于母-胎免疫耐受的形成,妊娠失败也多因母体对胚胎的免疫排斥所致。CD4+CD25+调节性T细胞是一群重要的具有免疫抑制功能的T细胞亚群。研究证实,该类细胞抑制CD4+CD8+T细胞活化及增殖,它在防止自身免疫性疾病的发生、诱导移植耐受等方面发挥重要的作用[1～4],但有关其在人母-胎免疫调节中的作用尚缺乏系统研究。为探讨调节性T细胞在人母-胎免疫调节中的作用,本研究采用流式细胞术分别对正常生育期妇女黄体期外周血、正常人早孕期外周血及蜕膜淋巴细胞CD4+CD25+T细胞进行了分析研究。1材…     

T-bet和Eomes对细胞免疫功能的调控作用

T-box expressed in T cells(T-bet)和Eomesodermin(Eomes)是调控I型效应T细胞的重要转录因子,对CD4I型辅助T细胞(Th1细胞)、NK细胞、CD8+细胞毒T淋巴细胞(CTL)等的分化发育和功能调控有重要作用。机体的抗肿瘤免疫主要依赖T淋巴细胞介导的适应性免疫应答和NK细胞介导的固有免疫应答。T-bet和Eomes通过调控这些免疫细胞影响抗肿瘤免疫应答,对肿瘤的发生、发展及转归有重要意义。     

HIV-1囊膜糖蛋白-ISCOMs可诱导CD8~+T杀伤细胞

与死疫苗或减毒活疫苗相比,仅含B 细胞及T 细胞决定簇的亚单位疫苗具有一定的优越性。但问题是大多数蛋白质虽可诱导抗体及CD_4~+MHCⅡ类限制性Th 及CTL,却不能诱导CD_8~+MHCⅠ类限制性CTL。本文作者发现,以免疫刺激复合物(ISCOMs)为佐剂,用HIV gp160或流感病毒血凝素皮下免疫小鼠一次,便可产生HIV 或流感病毒特异性CD_8~+MHCⅠ类限制性CTL,并且至少持续4个月,重复10次以上,效果稳定。反之,若以福氏佐剂与     

体外扩增自体CD4~+CD25~+调节性T细胞促进小鼠供体来源肿瘤的转移

目的研究输注体外扩增自体CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)治疗是否存在增加供体来源肿瘤转移的风险。方法取Balb/c(H-2d)小鼠骨髓细胞,在重组鼠源性GM-CSF和IL-4诱导以及TNF-α刺激下分化为成熟树突状细胞。免疫磁珠法(MACS)从Balb/c(H-2d)小鼠脾脏分选出CD4+CD25+Tregs,加入成熟树突状细胞和高浓度重组鼠源性IL-2,体外扩增7 d。流式细胞术检测新鲜以及扩增后CD4+CD25+Tregs纯度及免疫抑制功能。将Balb/c(H-2d)小鼠随机分为2组,实验组:经尾静脉注射1×107体外扩增后CD4+CD25+Tregs,24 h后注射5×105 B16-F10(H-2b)(鼠源性黑色素瘤细胞);对照组:单独输注5×105 B16-F10(H-2b)。结果新鲜分选和扩增后CD4+CD25+Tregs纯度及免疫抑制功能无明显下降。对照组肺部肿瘤结节为(9±8)个,实验组肺部肿瘤结节为(118±15)个。与对照组相比,实验组肺部肿瘤结节明显增加(P0.01)。结论体外扩增的CD4+CD25+Tregs具有抑制机体抗肿瘤能力,过继输注体外扩增的自体CD4+CD25+Tregs治疗移植后排斥反应,能够增加供体来源肿瘤转移的风险。