宫颈脱落细胞HPV E6/E7 mRNA检测与宫颈癌变的相关性

目的分析宫颈脱落细胞HPV E6/E7 mRNA定量检测结果与宫颈癌及癌前病变的关系。方法选取2018年1月-2019年1月浙江萧山医院接诊的228例因宫颈疾病就诊的妇女为研究对象,均接受TCT、HPV DNA分型检测和HPV E6/E7mRNA定量检测。部分患者接受阴道镜病理检查,对比不同TBS分级及病理诊断结果患者的E6/E7 mRNA表达水平和HPV DNA检测结果。结果 TCT检出未见上皮内病变细胞或恶性细胞(NILM) 135例、意义不明确的不典型鳞状细胞(ASCUS)23例、宫颈不典型鳞状细胞(ASC-H) 9例、低度鳞状上皮内病变(LSIL) 29例、高度鳞状上皮内病变(HSIL) 23例、宫颈鳞状细胞(SCC) 9例。在TBS标准下,NILM患者的HPV DNA阳性率显著高于HPV E6/E7 mRNA (P0. 05); ASCUS、ASC-H、LSIL、HSIL、SCC患者的HPV DNA阳性率与HPV E6/E7 mRNA比较,差异均无统计学意义(均P 0. 05)。病理学检测结果显示,宫颈炎症/正常54例、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级20例、CINⅡ级52例、CINⅢ级51例、宫颈癌19例。宫颈炎/正常患者的HPV DNA阳性率显著高于HPV E6/E7 mRNA (P0. 05); CINⅠ～Ⅲ级及宫颈癌患者的HPV DNA阳性率与HPV E6/E7 mRNA阳性率比较,差异无统计学意义(P0. 05)。HPV DNA检测对宫颈癌及癌前病变的诊断灵敏度及诊断符合率与HPV E6/E7mRNA检测比较,差异均无统计学意义(均P0. 05),但HPV E6/E7 mRNA检测的诊断特异度、阳性预测值及阴性预测值均显著高于HPV DNA检测(均P0. 05)。结论 HPV E6/E7 mRNA表达与宫颈癌变密切相关,HPV E6/E7 mRNA定量检测对宫颈癌及癌前病变具有较高的阳性预测值,其可作为宫颈病变筛查的有效手段。     

HPVE6/E7mRNA检测在宫颈癌早期病变中的表达及临床诊断价值分析

目的分析HPVE6/E7mRNA检测在宫颈癌早期病变中的表达及临床诊断价值,为能有效预测宫颈病变持续性感染及进展风险并对宫颈癌发生预警提供理论依据。方法选取2016年10月-2017年9月在盐城市妇幼保健院接受诊治的160例宫颈上皮内瘤变(CIN)和疑似宫颈癌女性患者为研究对象,均接受宫颈活检组织病理学检测,同时开展HPV DNA检测和HPVE6/E7mRNA检测。观察并对比HPVE6/E7mRNA和HPV DNA检测结果,分析在慢性宫颈炎及不同的CIN等级和宫颈癌中HPVE6/E7mRNA的表达水平。结果 HPVE6/E7mRNA检测的特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确性均高于HPV DNA检测,差异有统计学意义(P0. 05); HPVE6/E7mRNA检测的灵敏度与HPV DNA检测对比差异无统计学意义(P0. 05)。宫颈癌患者的HPVE6/E7mRNA含量高于慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ的HPVE6/E7mRNA含量,差异有统计学意义(P0. 05)。结论 HPVE6/E7mRNA检测能有效筛查出宫颈癌早期病变,且能预测持续性感染及进展风险,亦可对宫颈癌发出预警,利于临床及时制定治疗方案,在临床诊断及预警宫颈癌方面具有较高的应用价值,值得临床推广。     

人乳头状瘤病毒E6/E7 mRNA检测宫颈高度病变的临床评价

目的 评价人乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA检测宫颈高度病变的效能.方法 用PreTect~(TM) HPV-Proofer检测法检测65例妇女宫颈上皮细胞HPV E6/E7 mRNA转录情况,以液基细胞学检测(LBC)结果为标准评价HPV E6/E7 mRNA检测宫颈高度病变[不能除外高度不典型鳞状细胞(≥ASC-H)]的效能.结果 高度组(≥ASC-H组)HPV E6/E7 mRNA转录阳性率(63.6%)高于低度组(相似文献   

人乳头瘤病毒E6/E7信使核糖核酸表达与宫颈病变病理级别相关性分析

目的研究高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E 6/E 7信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)表达水平与宫颈病变病理级别的相关性。方法收集2016年在青岛市市立医院就诊的可疑宫颈病变患者300例为研究对象,均行宫颈薄层液基细胞学(thinprep cytologic test,TCT)检查,收集宫颈口及宫颈管的脱落细胞行HPV分型检测和HPV E 6/E 7 mRNA定量检测,阴道镜下宫颈多点活检,结合组织病理诊断结果进行统计分析。结果不同年龄组HPV E 6/E 7 mRNA阳性率比较差异有统计学意义(P0.05);HPV E 6/E 7 mRNA和HPV分型阳性率随着宫颈病变进展呈逐渐增加趋势,但两者检出率比较差异无统计学意义(P0.05);不同病理级别的宫颈病变HPV E 6/E 7 mRNA表达量比较,差异有统计学意义(H=151.859,P0.05);相关性分析显示,病理分级与HPV E 6/E 7 mRNA表达量呈正相关(r=0.630,P0.05);HPV E 6/E 7 mRNA检测的特异度和阳性预测值高于HPV分型检测(P0.05)。结论 HPV E 6/E 7mRNA的表达量随宫颈病变病理级别的升高而升高。     

HPV E6/E7 mRNA检测在液基薄层细胞学异常女性患者宫颈病变筛查中的临床应用

目的探讨高危人乳头瘤病毒(HPV) E6/E7 mRNA检测在液基薄层细胞学(TCT)异常女性宫颈病变筛查中的临床应用价值。方法选取2015年11月-2016年11月在湖州市妇幼保健院妇科门诊就诊患者同时行TCT检测、高危型HPV DNA检测及脱落细胞学HPV E6/E7检测,其中TCT异常且高危型HPV DNA阳性或者HPV E6/E7阳性患者252例进一步行阴道镜检查,必要时行宫颈活检。结果随着宫颈组织学病变的加重,HPV E6/E7 mRNA阳性表达率随之增加,病理组织学诊断≤LSIL组(包括宫颈炎及LSIL)中HPV E6/E7 mRNA的阳性表达率显著低于病理组织学诊断≥HSIL组(包括HSIL及宫颈癌),病理组织学诊断≤LSIL组中HPV E6/E7 mRNA的阳性表达率低于HPV DNA的阳性表达率,差异均有统计学意义(P0. 05);病理组织学诊断≥HSIL组中两者的阳性表达率比较差异无统计学意义(P0. 05)。HPV E6/E7 mRNA检测预测组织学诊断≥HSIL病变的特异度、阳性预测值及阴性预测值均高于HPV DNA,差异均有统计学意义(P0. 05);而两者的灵敏度比较差异则无统计学意义(P0. 05)。HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA对诊断≥HSIL者的ROC曲线下面积分别为0. 777、0. 594,HPV E6/E7mRNA检测≥HSIL者的准确性高于HPV DNA,差异有统计学意义(P0. 05)。结论高危HPV E6/E7 mRNA阳性表达率与宫颈病变级别呈正相关;在TCT异常患者中,结合高危HPV E6/E7 mRNA检测对高级别宫颈上皮内病变具有较高的诊断价值,与HPV DNA相比它具有更高的特异度及阴性预测值,更有助于宫颈病变的筛查。     

Aptima HPV E6E7 mRNA检测宫颈高级别病变的效果评估

目的评估Aptima人乳头瘤病毒(HPV) E6E7 mRNA检测宫颈高级别病变的临床价值。方法选取510例女性,收集宫颈脱落细胞标本用于Aptima HPV E6E7 mRNA检测。Aptima HPV E6E7 mRNA检测为阳性的病例同时进行HPV E6E7分型检测和阴道镜定点活检,同时对63例HPV E6E7检测阴性,但高度怀疑病变的患者进行阴道镜定点活检,以病理诊断为金标准,评估Aptima HPV E6E7 mRNA检测在宫颈高级别病变中的临床价值。结果 Aptima HPV E6E7 mRNA检测的灵敏度为96. 3%,特异度为76. 9%,阳性预测率为36. 4%,阴性预测率为98. 4%,其中HPV E6E7分型的阳性预测率高达73. 9%,HPV E6E7检测与HPV E6E7分型检测的阳性预测率差异有统计学意义(P0. 05)。HPV E6E7检测对于宫颈上皮内瘤变(CIN) 2及以上病变的检出率比CIN1有明显优势(P0. 05)。结论 Aptima HPV E6E7 mRNA检测CIN2及以上病例有很好的灵敏度和阳性预测率,可以有效减少CIN1及以下病变检出率,在早期宫颈高级别病变筛查中有重要的临床价值。     

HPV E6/E7 mRNA P53及P16在宫颈脱落细胞中的表达与在ASCUS分层管理中的应用

目的检测人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA、P53及P16在宫颈脱落细胞中的表达,分析其在未能明确意义的不典型鳞状细胞(ASCUS)分层管理中的应用。方法选取2016年4月—2018年10月郑州大学附属肿瘤医院220例宫颈液基薄层细胞学(TCT)检查结果为ASCUS的患者,采用支链DNA技术和细胞涂片免疫组化法检测宫颈脱落细胞中HPV E6/E7 mRNA、P53及P16表达情况。结果宫颈炎、低度鳞状上皮内病变(LSIL)及高度鳞状上皮内病变(HSIL)患者中HPV E6/E7 mRNA、P53及P16阳性率比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。HPV E6/E7 mRNA与P53蛋白不相关(r=1.107,P=0.112),HPV E6/E7 mRNA与P16蛋白呈正相关(r=0.363,P=0.000),P53与P16蛋白呈正相关(r=0.477,P=0.000)。结论 HPV E6/E7 mRNA、P53及P16蛋白在ASCUS患者宫颈脱落细胞中的阳性率随宫颈病变程度增加而增加,检测三者可作为ASCUS分流管理的方法。     

人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA检测在人乳头瘤病毒阳性患者分流中的应用价值

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA检测在HPV阳性患者分流中的应用价值。方法选取2015年5月-2016年4月就诊于吉林大学第一医院的200例行柏氏液基细胞学检测(TCT)且经HPV DNA检测证实为HPV阳性的患者,行HPV E6/E7 mRNA检测、活检及病理学检查,分析结果之间的关系。结果不同TCT分级的病变间HPV E6/E7 mRNA阳性率比较差异有统计学意义,且HPV E6/E7 mRNA阳性率与TCT分级呈正相关(F=9.474,P0.05)。HPV E6/E7 mRNA拷贝数与TCT分级也呈正相关(P0.05)。不同病理分级的病变间HPV E6/E7 mRNA阳性率比较差异有统计学意义,且HPV E6/E7 mRNA阳性率与病理分级呈正相关(F=33.563,P0.05)。HPV E6/E7 mRNA拷贝数与病理分级也呈正相关(P0.05)。HPV E6/E7 mRNA检出CIN 2+宫颈病变的敏感性为80.70%,特异性为60.40%,阳性预测值为69.40%,阴性预测值为76.30%。结论HPV E6/E7 mRNA表达与宫颈病变程度密切相关。HPV E6/E7 mRNA检测用于HPV阳性患者分流可有效排除风险,减少对HPV阳性患者的过度诊疗。     

HPVE6/E7mRNA在宫颈病变中的应用价值

目的对宫颈病变患者宫颈HPVE6/E7mRNA的表达情况进行检测,探讨HPVE6/E7mRNA在宫颈病变诊断中的应用价值。方法选择2014年12月-2016年4月在金华市浦江县妇幼保健院宫颈门诊进行宫颈液基细胞血检查及宫颈病理学检查的500例患者作为研究对象,其中病理检查结果显示宫颈正常或者宫颈慢性炎症者314例,宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级者78例,CINⅡ级39例,CINⅢ级者33例,宫颈癌16例。观察宫颈不同病变组患者中HPV DNA和HPVE6/E7mRNA的检测情况、宫颈HPV DNA检测结果及HPVE6/E7mRNA检测结果和宫颈病理结果的比较情况、HPV DNA和HPVE6/E7mRNA对宫颈癌及宫颈CIN的筛查结果比较情况。结果宫颈不同病变组患者HPV DNA阳性率比较,差异有统计学意义(P0.05)。宫颈HPV DNA检测结果和宫颈病理结果比较,差异有统计学意义(P0.05)。宫颈不同病变组患者HPVE6/E7mRNA阳性率比较,差异有统计学意义(P0.05)。宫颈HPVE6/E7mRNA检测结果和宫颈病理结果比较,差异有统计学意义(P0.05)。HPVE6/E7mRNA对宫颈癌和宫颈CIN的筛查特异度和阳性预测值均高于HPV DNA(P0.05)。结论 HPVE6/E7mRNA对宫颈疾病的预测灵敏度和HPV DNA相似,但HPVE6/E7mRNA的预测特异度高于HPV DNA,在宫颈病变的筛查中具有一定意义,可以作为宫颈病变的筛查方法。     

HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈病变进程中的临床应用研究

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA检测在宫颈病变过程中的应用价值。方法收集137例宫颈病变疑似患者的HPV DNA、HPV E6/E7 mRNA、薄层液基细胞学检测(TCT)以及组织病理检测结果,综合比较分析HPV E6/E7 mRNA检测的潜在应用价值。结果 HPV E6/E7 mRNA阳性率为77.1%,低于HPV DNA检测。而在更高病理级别样本中(≥CINⅡ),HPV E6/E7 mRNA检测灵敏度为80.3%,特异度为50.0%,阳性预测值为56.3%以及阴性预测值为76.0%。HPV E6/E7 mRNA的ROC曲线线下面积为0.652,95%CI为0.571~0.732,HPV DNA为0.630,0.547~0.713(P=0.0045)。经过长期治疗观察与跟踪研究整理,相对比HPV DNA检测,HPV E6/E7 mRNA的对CINⅠ和CINⅡ阳性病例的预测比例与病理进程更加符合。结论 HPV E6/E7 mRNA对宫颈病变的监测与诊断预测具有明显的指导意义。     

人乳头瘤病毒 E6／E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的意义

目的：评估人乳头瘤病毒（HPV）E6／E7mRNA检测在宫颈癌筛查中的意义。方法对3381名行机会性宫颈癌筛查的女性分别行液基细胞学（TCT）、HPV DNA及HPV E6／E7mRNA检查,其中371例结果可疑者行阴道镜下活检。分别记录其TCT、HPV DNA及HPV E6／E7mRNA检测结果及活检病理结果等,采用SPSS 19．0软件进行数据分析。结果人群筛查中HPV E6／E7mRNA的总阳性率为16．47％（557／3381）;炎症患者与宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ级患者HPV E6／E7mRNA的阳性率分别为60．73％（116／191）和68．60％（83／121）,差异无统计学意义（F＝1．98,P＞0．05）;炎症患者与CIN Ⅰ级患者mRNA表达量分别为7781．26±2686．13和7498．47±2860．08 copy／mL,亦无显著差异（ t＝0．07,P＞0．05）,而CIN Ⅱ-Ⅲ级患者HPV E6／E7mRNA的阳性率为89．10％（49／55）,mRNA表达量为30716．66±10281．89,均显著高于炎症患者（χ2＝15．55,t＝2．19）及CINⅠ患者（χ2＝8．47,t＝2．18）,差异均有统计学意义（P＜0．05）;不同活检病理分级（≤CIN Ⅰ或≥CIN Ⅱ）中,只有HPV E6／E7mRNA的检测结果有显著性差异（χ2＝15．45,P＜0．05）;对于宫颈CIN Ⅱ以上病变的诊断,HPV E6／E7mRNA的敏感度最高（89．83％）;TCT特异度最高（62．18％）。 HPV E6／E7mRNA最佳工作点为1637．48copy／mL,其诊断宫颈高级别上皮内瘤变的敏感度为79．70％,特异度为63．50％。 ROC曲线下面积为0．75（P＜0．05）。结论 HPV E6／E7mRNA检测诊断宫颈高级别上皮内瘤变具有较高的敏感性和特异性,在宫颈癌筛查具有较为重要的意义。     

TCT标本检测高危HPV E6/E7mRNA及在宫颈病变中的应用研究

目的 探讨新柏超薄液基细胞学检测(Thin-prep cytology test,TCT)标本检测高危人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)E6/E7 mRNA可行性及在宫颈癌筛查中的应用价值.方法 两种标本处理方法,分别在22例经超薄液基细胞学技术标本检测HPV E6/E7 mRNA及HPV E6/E7 DNA;对108例不同病变程度宫颈癌标本采取超薄液基细胞学技术检测高危HPV(high-risk HPV,HR-HPV)E6/E7 mRNA及高危HPV E6/E7 DNA,并行统计学处理.结果 两种方法处理标本行Willcoxon配对秩和检验比较,差异无显著意义(P＞0.05).随着宫颈病变程度增加,HPV E6/E7 mRNA表达率相应增加.新柏液基细胞学技术检测108例标本高危HPV E6/E7 mRNA表达的相对拷贝数为320.554±779.104,高危HPV E6/E7 DNA为1540.963士3575.255,两者秩相关检验,相关系数为1.结论 超薄液基细胞学检测标本可行高危HPV E6/E7 mRNA及HPV E6/E7 DNA检测;宫颈癌筛查检测HPV E6/E7 mRNA有一定临床意义.     

HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA和TCT检测在宫颈上皮内瘤变筛查中的应用

目的分析人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E 6/E 7 mRNA、第二代杂交捕获技术(hybrid Capture,HCⅡ)和薄层液基细胞学技术(thinprep cytology test,TCT)在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)筛查中的效能,选择适宜的分流筛查方案。方法采用病例-对照研究设计,80例CINⅠ~+的病例样本为HCⅡ或TCT筛查阳性并经组织学诊断;132例正常或炎症标本包括:组织学诊断正常或炎症的标本;HCⅡ阴性,TCT阴性且HPV E 6/E 7 mRNA均为阴性的标本。检测方法分别为:TCT进行细胞学检测、用b-DNA技术检测其HPV E 6/E 7 mRNA和用HCⅡ检测HPV DNA。结果在212例正常或宫颈炎和CIN标本中,HCⅡ的阳性率(37.74%)显著高于HPV E 6/E 7 mRNA的阳性率(25.94%)(P0.05);与TCT的阳性率(31.60%)比较差异无统计学意义(P0.05)。TCT的检出率高于HPV E 6/E 7mRNA的检出率,但差异无统计学意义(P0.05)。HPV E 6/E 7 mRNA与HCⅡ的符合率最高,Kappa为0.733,P=0.000;其次为HC II和TCT的符合率,Kappa为0.564,P=0.000;HPV E 6/E 7 mRNA与TCT的符合率,Kappa仅为0.519,P=0.000。并且,在HCⅡ检测结果阳性的67例CINⅠ~+样本中,HPV E 6/E 7 mRNA检测或TCT检测结果皆为阳性。而在HCⅡ阳性的13例正常或炎症样本中,HPVE 6/E 7 mRNA+或TCT结果阳性仅有7例(53.85%)。结论在CINⅠ~+分流筛查方案中,HPV E 6/E 7 mRNA和TCT共同作为HCⅡ阳性分流筛查的方法,可有效降低HCⅡ的假阳性。     

E6AP与HPV16、18蛋白表达的关系及其在宫颈癌组织中的表达及意义

目的:探讨E6AP基因与HPV16、18蛋白表达的关系及其在宫颈癌发生、发展过程中的作用和意义。方法:在40例宫颈癌、10例CIN及10例正常宫颈组织中采用免疫组化检测宫颈癌组织中HPV-16、18型E6蛋白表达,RT-PCR技术检测E6AP基因的表达。结果:宫颈癌组织中HPV-16、18型E6蛋白的阳性表达明显高于CIN组织和正常宫颈组织,CIN组织中的阳性表达高于正常宫颈组织,差异均有统计学意义。E6蛋白阳性组织E6APmRNA的表达(0.0946±0.0715)明显高于阴性组织中的E6APmRNA表达(0.0062±0.0103),差异有统计学意义。E6AP基因在癌组织中表达高于CIN组织及正常宫颈组织(P<0.05),E6AP的表达水平随临床分期的进展而升高(P<0.05)。结论:E6AP基因的表达与高危型人乳头瘤病毒HPV16、18E6蛋白的表达具有密切的关系,参与了宫颈上皮癌变的发生、发展过程,与宫颈癌的发生、发展密切相关。     

HPV 18型E6蛋白抗原表位预测与分析

目的 用生物信息学方法分析预测HPV 18型E6蛋白的B细胞和T细胞表位,为宫颈癌免疫治疗的疫苗及药物开发提供参考靶点。方法 基于NCBI中HPV18型E6蛋白的氨基酸序列,利用DNA star软件预测其二级结构、亲水性、表面可及性及柔韧性;利用ABCpred软件预测出其B细胞表位;综合使用CTLPred和NetMHC 4.0软件分析其CTL表位;ProPred和NetMHCIIpan 3.1软件预测其Th表位。结果 HPV 18型E6蛋白二级结构中α螺旋和β转角较多且分布较为均匀;预测出了4个B细胞表位,它们大多与亲水性强、表面可及性好、柔韧性好的蛋白区域重叠,易于结合抗体;E6蛋白具有丰富的细胞毒性和辅助性T细胞表位。结论 HPV 18型E6蛋白作为宫颈癌免疫治疗的理想靶点具有同时诱导特异性体液免疫和细胞免疫的潜能,通过对其B/T细胞抗原表位的预测为免疫治疗相关疫苗及药物抗原肽的选择提供了理论依据。     

HPV16E7蛋白在宫颈癌中的表达和意义

目的：探讨人乳头瘤病毒１６Ｅ７蛋白（ＨＰＶ１６Ｅ７）与宫颈癌间的关系。方法：采用免疫组化ＳＰ法对１５例正常宫颈组织、８０例宫颈鳞癌、１７例腺癌组织进行了研究。结果：①ＨＰＶ１６Ｅ７蛋白在宫颈癌中的表达明显高于正常宫颈组织,且在鳞癌中的表达明显高于腺癌;②ＨＰＶ１６Ｅ７蛋白表达与宫颈癌的临床分期成负相关,与组织学分级、淋巴结转移无关。结论：预防ＨＰＶ感染是防止宫颈癌发生的重要措施之一。     

尖锐湿疣患者血清及宫颈分泌物HPV 6bE7抗体检测方法的建立及流行病学意义

目的 建立尖锐湿疣(CA)患者血清和宫颈分泌物人乳头瘤病毒(HPV)6b型E7特异性抗体检测方法.方法 利用PCR扩增HPV 6b E7全长基因,构建重组原核表达质粒pET32a(+)/HPV 6b E7,原核表达产物采用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.进一步经镍螯合亲和层析法(Ni-NTA Agarose)纯化后作为包被抗原,以间接ELISA方法分别对56例CA患者、81名健康对照者的血清和宫颈分泌物标本中的特异性抗体进行检测,另取43例宫颈癌患者的血清标本作为对照;同时用PCR方法对56例CA组织标本进行HPV6bDNA的检测.结果 从CA组织标本中扩增的HPV 6b E7全长基因与标准序列(GenBank登录号:NC001355)同源性为99.5%.HPV 6b E7融合蛋白在原核表达系统中得到了较高效的表达(40μg/ml).经间接ELISA检测,CA组血清特异性IgG抗体水平明显高于宫颈癌组和健康对照组(P＜0.05),吸光度(A)均值分别为1.82±0.48、1.36±0.39和1.39±0.27.CA组宫颈分泌物特异性sIgA抗体水平亦显著高于健康对照组(P＜0.05),A值分别为0.63±0.26和0.53±0.06.经PCR检测,CA患者组织HPV 6b E7DNA阳性率为78.6%(44/56).与PCR检测结果比较,HPV6bE7特异性IgG和sIgA抗体用于检测CA患者HPV 6b感染的敏感性分别为68.2%(30/44)、54.6%(24/44),特异性均为100%(12/12).结论 CA患者血清和宫颈分泌物HPV 6b E7特异性抗体,用于诊断HPV 6b感染具有一定的敏感性和较高的特异性,可用于HPV 6b感染的流行病学调查.     

A novel therapeutic vaccine composed of a rearranged human papillomavirus type 16 E6/E7 fusion protein and Fms-like tyrosine kinase-3 ligand induces CD8+ T cell responses and antitumor effect

The development of cervical cancer is mainly caused by infection with high risk genotypes of human papillomavirus, particularly type 16 (HPV16), which accounts for more than 50% of cervical cancer. The two early viral oncogenes, E6 and E7, are continuously expressed in cervical cancer cells and are necessary to maintain the malignant cellular phenotype, thus providing ideal targets for immunotherapy of cervical cancer. In this study, a novel vaccine strategy was developed based on a rationally shuffled HPV16 E6/E7 fusion protein, the addition of Fms-like tyrosine kinase-3 ligand (Flt3L) or the N domain of calreticulin (NCRT), and the usage of a CpG adjuvant. Four recombinant proteins were constructed: m16E6E7 (mutant E6/E7 fusion protein), rm16E6E7 (rearranged mutant HPV16 E6/E7 fusion protein), Flt3L-RM16 (Flt3L fused to rm16E6E7), and NCRT-RM16 (NCRT fused to rm16E6E7). Our results suggest that Flt3L-RM16 was the most potent of these proteins in terms of inducing E6- and E7-specific CD8⁺ T cell responses. Additionally, Flt3L-RM16 significantly induced regression of established E6/E7-expressing TC-1 tumors. Higher doses of Flt3L-RM16 trended toward higher levels of antitumor activity, but these differences did not reach statistical significance. In summary, this study found that Flt3L-RM16 fusion protein is a promising therapeutic vaccine for immunotherapy of HPV16-associated cervical cancer.     

人乳头瘤病毒16 E2、E6癌基因在子宫颈癌中的表达及E2缺失分析

目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）16型E2、E6癌基因的表达及含量变化在子宫颈癌发生中的作用，以及E2基因的缺失与子宫颈病变的关系。方法收集山西省肿瘤医院经病理学确诊的141例子宫颈癌新发病例作为病例组，同时选择在同一医院住院、经组织病理学确诊的137例子宫肌瘤患者为良性肿瘤对照组，从社区妇科体检的1582名妇女中随机抽取129名妇女为健康对照组。利用多重PCR对从子宫颈组织和脱落细胞中提取的DNA进行HPVl6 E2、E6基因扩增，在VILBER凝胶成像仪上利用Bio-ID＋＋软件分析E2、E6基因的相对含量。结果HPVl6E6阳性率在子宫颈癌组、子宫肌瘤组和健康对照组分别为46．8％、24．1％和2．3％，HPVl6E2阳性率分别为36．2％、19．0％和0．0％，差异均有统计学意义。子宫颈癌组和子宫肌瘤组中E2缺失率分别为22．73％和21．21％，健康对照组未检出E2阳性者。HPVl6E6和E2含量均为病例组高于对照组，在子宫颈癌组内E6含量明显高于E2（t=2．70，P=0．009），两者的比值为1．24。结论子宫颈癌患者HPVl6E2、E6癌基因的阳性表达率和表达量均高于子宫肌瘤患者和健康妇女，E6癌基因的高表达在子宫颈癌发生中起重要作用，而E2基因的缺失在子宫颈癌变过程中可能发挥着不可忽视的作用。