不用药物预防移植物排斥反应

美国 Stanford大学医学中心研究人员的一项研究结果表明 ,肾脏移植受者可能无需终身应用免疫抑制药物来预防器官排斥反应。　　这项研究结果来自 4例 12～ 18个月前施行肾脏移植的患者。研究人员对每例肾脏移植后患者给予免疫抑制药物环孢素和强的松以预防器官排斥反应。移植后 ,每例肾脏受者的免疫系统还接受多次小剂量照射和药物以减少免疫攻击细胞数。然后给每例受者注射肾脏供者的血液干细胞。这些干细胞进入受者骨髓 ,产生新的血液细胞和免疫细胞 ,与受者的血液混和 ,使受者的免疫细胞把移植器官视作自身器官 ,然后停用免疫抑制药物。…     

单克隆抗体能降低移植物排斥反应

由美国蛋白设计(PDL)公司创制、Hattmann-La Roche公司开发的人源化单克降抗体(McAb)与标准免疫抑制药一起使用时,可使肾移植患者的急性器官排斥反应降低40%.最近PDL和Roche公司对旨在预防肾移植患者急性移植物排斥反应的两项McAb(Zenapax)Ⅲ期试验结果进行了初步分析,500多名患者参与了这些试验.在第一项试验中,所有患者均接受环孢菌素和强的松的标准免疫抑制方案,其中半数患者还接受Zenapax.接受McAb的患者与未接受者相比,急性排斥反应降低40%.近半数仅接受免疫抑制药的患者发生急性排斥反应,而接受ZenaPax加免疫抑制药的患者仅28%发生急性排斥反应.第二项试验包括三种药物治疗加Zenapax.所有患者均接受环孢菌素、强的松和硫唑嘌呤.将Zenapax加入此方案后,急性排斥反应降低37%(无Zenapax组的发生率为35%,Zenapax组为22%).     

调节活化正常T细胞表达与分泌趋化因子与子宫内膜异位症的关系

目的分析RANTES(调节活化正常T细胞表达与分泌趋化因子)在子宫内膜异位症患者发病中的作用与价值。方法选取2012年2月至2014年2月于我院接受治疗的40例子宫内膜异位症患者为观察组,同时选取同期于我院接受宫内节育器(IUD)治疗的20例正常子宫内膜患者为对照组,检测两组患者子宫内膜标本中RANTES的表达水平。结果经受IL-1β刺激2 d、3 d后观察组患者病理标本细胞中RANTES蛋白表达水平明显高于对照组,同时观察组患者病理标本细胞上清液对单核细胞的趋化指数呈明显上升趋势,与对照组相比差异显著(P<0.05)。结论子宫内膜异位症患者RANTES蛋白表达水平的差异是导致子宫内膜异位病灶形成的重要原因,需在临床上引起广泛重视。     

人眼球后成纤维细胞产生趋化因子研究

目的研究人眼球后成纤维细胞(RF)经白介素1β(IL-1β)刺激产生调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)及其对外周血淋巴细胞(PBL)的趋化作用,以探讨RANTES在Gaves眼病(GO)发病中的作用。方法胶原酶消化GO和斜视患者眼球后结缔组织以获得RF;用不同浓度的IL-1β孵育RF24小时,ELISA法检测RF培养上清中的RANTES;用96微孔板ChemoTXSystem进行趋化实验检测RF产生的RANTES对PBL的趋向性。结果RF在体外不能自发产生RANTES,而经IL-1β刺激之后,GO患者RF产生的RANTES明显高于正常对照组,并在一定范围内具有浓度依赖性;经IL-1β刺激的RF培养上清可增强PBL的游走能力,此效应可明显的被鼠抗人RANTES抗体抑制。结论IL-1β可刺激RF在体外产生具有生物学功能的RANTES,其在GO发病中可能起着重要的作用。     

川芎嗪联用环孢素A抗皮肤移植排斥反应的作用机制研究

目的：探讨川芎嗪（TMPZ）联用亚剂量环孢素A（CsA）对同种异体小鼠皮肤移植的抗排斥反应作用。方法：将BALB/c小鼠作为供体,C57BL/6小鼠作为受体,行背-背皮肤移植术。随机分为模型组、TMPZ组（50 mg·kg^-1）、CsA组（10 mg·kg^-1）、TMPZ+亚剂量CsA组（TMPZ 50 mg·kg^-1+CsA 5 mg·kg^-1）、假手术组,腹腔注射给药10 d。观察受体鼠移植皮片的存活情况,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆中白介素-2（IL-2）、IL-4、IL-10、γ-干扰素（IFN-γ）含量,流式细胞术分析脾脏CD4⁺、CD25⁺T淋巴细胞亚群的比例。结果：各给药组小鼠移植皮片的存活天数均有不同程度的延长,与模型组相比差异均有显著性（P<0.01）。TMPZ+CsA组的移植皮片存活天数比TMPZ组或CsA组均有显著延长（P<0.05或P<0.01）;与模型组相比,TMPZ+CsA组以及TMPZ单用组均可明显减少血浆Th1类细胞因子（IL-2、IFN-γ）的表达（P<0.01）,明显增高Th2类细胞因子（IL-4、IL-10）的表达（P<0.01）。与模型组相比,各给药组均可明显增高脾脏CD4⁺ CD25⁺T淋巴细胞的比例（P<0.05或P<0.01）。结论：TMPZ具有抑制同种异体小鼠皮肤移植排斥反应的效果,与CsA联合应用可能具有协同作用,其作用机制可能与影响Th1/Th2细胞因子、刺激CD4⁺、CD25⁺T淋巴细胞的表达等有关。     

缺血后处理对肾移植急性排斥反应中细胞毒作用的影响

目的探讨缺血后处理(IPO)对大鼠移植肾急性排斥反应(AR)中细胞毒杀伤作用的影响及机制。方法实验分为对照组(同基因移植:供、受鼠均为Wistar大鼠)、AR组和IPO组(异基因移植:供鼠为SD大鼠,受鼠为Wistar大鼠)。其中IPO组受鼠于移植完成后实施IPO,即开放肾动脉30 s,阻断30 s,共循环3次,然后完全开放。术后1、3、5、7d取各组受鼠血清和移植肾组织,检测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;观察肾脏组织学改变;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测移植肾核因子-кB(NF-кB)P65、穿孔素、颗粒酶B及FasL mRNA和蛋白的表达。结果 IPO组大鼠肾功能及肾组织病理损伤均较AR组减轻。术后各时间点,AR、IPO组穿孔素、颗粒酶B及FasLmRNA和蛋白表达均明显高于对照组(P<0.01),IPO组均较AR组降低(P<0.05,P<0.01)。AR、IPO组肾细胞核内NF-кBP65蛋白水平也较对照组明显升高(P<0.01),IPO组较AR组明显降低(P<0.01),但AR组NF-кB P65 mRNA的表达与IPO组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。肾细胞核内NF-кB P65蛋白表达分别与穿孔素、颗粒酶B和FasL蛋白表达呈正相关(r=0.541、0.267、0.433,P<0.05)。结论 IPO可减轻移植肾AR中的细胞毒杀伤作用,其机制可能与抑制NF-кB活性,从而抑制穿孔素-颗粒酶B和Fas/FasL途径有关,而非下调NF-кB的表达。     

补肾法延缓免疫衰老的研究

免疫系统衰老是老年个体感染疾病、癌症、自身免疫病发病率、死亡率增高的主要原因。此外，免疫衰老与个体寿命之间的联系也得到了大量的证据支持。T淋巴细胞是免疫系统调控上述疾病及状态的主要效应细胞，而正是这类细胞最易发生衰老相关性功能紊乱，细胞凋亡是衰老T淋巴细胞功能紊乱的主要机制之一。     

062 T细胞反应趋化因子提供新的药物靶标

最近的研究结果表明，某些趋化因子如CCL19和CCL21是T细胞增殖重要且有效的诱导物，两种因子趋化活性的研究证实，其能诱导T细胞和树突状细胞的迁移，并能促进胞吞作用和抑制细胞凋亡。这些研究进展增加了研究者对这两种分子的了解，并能为疫苗的合理设计和癌症治疗提供新的思路。     

达昔单抗对移植肾急性排斥反应的预防作用

急性排斥反应（AR）是移植肾早期丧失功能的主要原因.常发生在移植后1周～6个月,机制主要是细胞免疫,T淋巴细胞活化,经过细胞介导的免疫应答,导致移植肾功能损伤.达昔单抗（Dac,赛尼派）作为第一个人源化白细胞介素2（IL-2）受体拮抗剂,可选择性阻断T淋巴细胞活化、增殖,从而阻止急性排斥发生.我们对肾移植患者手术前后应用达昔单抗,观察其对肾移植AR的预防作用及其安全性.     

炎症相关细胞在动脉粥样硬化发生发展过程中的作用

炎症反应为动脉粥样硬化(AS)发生发展过程中的核心因素。与炎症相关的细胞,如血管内皮细胞、单核/巨噬细胞、T淋巴细胞和血管平滑肌细胞,及其分泌的细胞因子与AS的发生、发展密切相关。因此,认识AS病理过程中炎症细胞间的相互作用机制并加以干预,是目前防治AS研究的一个重要方向。     

柚皮苷对人皮肤角质细胞分泌趋化因子RANTES及其核转录因子-kB信号通路影响的实验研究

目的：研究炎症性细胞因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）和γ干扰素（IFN-γ）对人皮肤角质细胞（HaCaT）分泌趋化因子RANTES的诱导作用;以阿维A为阳性对照药,研究柚皮苷对此诱导作用的抑制作用及其机制。方法：将HacaT分为阴性对照组、模型刺激组（TNF-α＋IFN—γ）、阿维A预处理组（TNF-α＋IFN—γ＋阿维A）和柚皮苷预处理组（TNF-α＋IFN—γ＋柚皮苷）等;采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定HaCaT细胞经单用和合用TNF-α、IFN-γ刺激以及加入阿维A和柚皮苷后RANTES的分泌量。采用免疫细胞化学方法和Western blot法检测HaCaT中核转录因子-KB P65（NF—kB P65）蛋白的表达。结果：单用或合用TNF—α、IFN-γ可显著诱导细胞分泌RANTES,并以合用组作用最显著（P〈0．01）。柚皮苷、阿维A均能明显抑制TNF-α、IFN-γ诱导的RANTES的分泌（P〈O．01）及NF—kB P65蛋白的表达。结论：柚皮苷可以抑制TNF-α、INF-γ诱导RANTES的分泌及相关蛋白的产生,其机制可能是通过抑制NF—kB信号传导途径的活化而实现。     

低分子量肝素对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响

目的通过观察低分子量肝素(LMWH)对体外培养的外周血内皮祖细胞(EPC)数量和功能的影响,旨在探讨EPC参与LMWH治疗心血管疾病的作用机制。方法采用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,培养7 d后,洗去非贴壁细胞,分别加入50,100,200和400 kU.L-1的LMWH培养一定时间(6,12,24,48和72 h)后收集细胞进行研究。激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-Ⅰ和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPC,并在倒置荧光显微镜下计数。分别采用MTT比色法,改良的Boyden小室和黏附能力实验来观察EPC的增殖能力,迁移能力和黏附能力。结果LMWH能显著增加外周血EPC数量,200 kU.L-1浓度的LMWH作用48 h影响最为显著(对照vs200 kU.L-1LMWH,44±5vs112±9)。LMWH也能显著改善外周血EPC的增殖能力(对照vs200 kU.L-1LMWH,0.504±0.097vs0.828±0.109),迁移能力(对照vs200 kU.L-1LMWH,8±6vs40±8)和黏附能力(对照vs200 kU.L-1LMWH,9±4vs29±4)。结论增加EPC的数量及促进其增殖、迁移和黏附等功能是LMWH治疗心血管疾病的作用机制之一。     

血管抑素抑制G422脑胶质瘤生长的实验研究

目的:研究血管抑素(AS)对荷G422脑胶质细胞系小鼠的治疗作用。方法:应用MTT法观察AS对血管内皮细胞系ECV-304和人脑胶质瘤细胞系TJ-905增殖的影响;建立G 422脑胶质瘤小鼠皮下移植模型。皮下注射AS,剂量为10mg/(kg·d)和50mg/(kg·d),连续治疗14天,观察瘤体比和抑瘤率变化。结果:AS对ECV-304细胞抑制作用呈量效依赖性关系,IC(50)=3.7mg/L。体内实验显示,50mg/(kg·d)剂量组抑瘤率达84.3％。结论:本研究为AS用于脑胶质瘤的治疗提供了实验依据,说明AS在肿瘤治疗中有广泛的应用前景。     

FasL转染小鼠树突状细胞诱导异系T淋巴细胞凋亡的研究

目的:制备稳定表达FasL蛋白的小鼠骨髓源树突状细胞(DC)并探讨其体外诱导异系T淋巴细胞凋亡的机制。方法:采用培养基选择法体外培养小鼠骨髓源DC,脂质体法转染FasL基因至小鼠成熟DC,流式细胞仪检测转染前后FasL蛋白的表达。混合淋巴细胞培养,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测DC对异系T淋巴细胞增殖的影响,流式细胞仪检测诱导异系T淋巴细胞凋亡的能力。结果:体外培养可获得成熟的小鼠骨髓源DC,转染FasL基因的DC较未转染DCFasL蛋白表达明显升高,混合淋巴细胞培养结果显示,FasL转染后DC对异系T淋巴细胞刺激指数明显下降(P<0.01),且诱导T淋巴细胞凋亡的能力明显增加(P<0.01)。结论:培养基选择法可收获大量骨髓源DC,具有典型形态,高表达MHCⅡ和共刺激分子,所获骨髓源DC能激活初始型T细胞免疫应答。脂质体转染FasL基因至小鼠骨髓源DC,可以使DC高表达FasL蛋白。转染FasL的DC体外刺激异系T淋巴细胞增殖的能力下降,且能明显诱导T淋巴细胞凋亡。     

钙调素拮抗剂小檗胺逆转K562／ADR细胞株多药耐药的研究

目的:研究钙调素拮抗剂小檗胺(BBM)抑制白血病细胞增殖并逆转细胞多药耐药的作用。方法:以四唑氮蓝(MTT)法测定小檗胺对K562细胞、耐阿霉素K562细胞(K562/ADR)的增殖抑制作用并求得其IC_(50);测定联合应用阿霉素和BBM后K562/ADR细胞对阿霉素的IC_(50)值及其增敏倍数。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测小檗胺作用前后K562/ADR细胞多药耐药基因(MDR)在mRNA水平的表达,应用免疫组织化学方法测定P170表达量。结果:小檗胺能显著抑制K562及K562/ADR细胞增殖,其IC_(50)值分别为5.32 μg·mL~(-1)和 10.97μg·mL~(-1)。联合应用阿霉素和1 μg·mL~(-1)小檗胺使K562/ADR细胞对阿霉素的IC_(50)由5.94 μg·mL~(-1)降低至2.93μg·mL~(-1),其增敏倍数为2.03倍。8 μg·mL~(-1)小檗胺作用K562/ADR细胞24 h后P170的表达量由85.45％降低至63.86％,72 h后MDR1mRNA的表达以β-actin为内参照的半定量比值也由处理前的1.625降至0.877。结论:小檗胺对K562、K562/ADR有显著的增殖抑制作用,小檗胺能部分逆转K562/ADR细胞对阿霉素的耐药,其作用是通过抑制MDR1在mRNA和P170水平的表达而实现的。     

金雀异黄素对正常的和过氧化氢损伤的内皮细胞的影响(英文)

目的 :观察金雀异黄素 (genistein)对体外培养的血管内皮细胞 (ECV 3 0 4)生长的影响和对过氧化氢引起ECV 3 0 4细胞损伤的保护作用。方法 :将ECV 3 0 4细胞与金雀异黄素 0 .1～ 1 0 0 μmol·L-1共同孵育 2 4～ 96h ,通过MTT法测定细胞存活率。为了观察金雀异黄素对过氧化氢引起ECV 3 0 4细胞损伤的保护作用 ,将细胞分成 3组 ,分别为对照组、过氧化氢损伤模型组和金雀异黄素治疗组 ,治疗组ECV 3 0 4细胞先与金雀异黄素 6.2 5～ 1 0 0 μmol·L-1共同孵育 3 0min ,然后模型组和治疗组ECV3 0 4细胞均加入过氧化氢 1 0mmol·L-1孵育 ,3 0min后以MTT法测定OD值 ,以此反映各组ECV 3 0 4的生存情况。结果 :金雀异黄素对于正常ECV 3 0 4细胞生长的作用与浓度和作用时间有关 ,浓度为1 0 0 μmol·L-1时 ,作用 2 4,48h能明显促进ECV3 0 4生长 (P <0 .0 1 ) ,而作用 96h则表现为明显的抑制作用 (P <0 .0 5 ) ;浓度为 1 0 μmol·L-1时 ,作用48,72h对ECV 3 0 4细胞生长也有促进作用 (P <0 .0 5 ) ;而当金雀异黄素浓度降低为 0 .1 ,1 μmol·L-1时 ,对ECV 3 0 4细胞生长无明显影响。过氧化氢 1 0mmol·L-1可使ECV 3 0 4的存活率明显下降(P <0 .0 5 ) ;预先给予金雀异黄素 2 5 ,5 0 ,1 0 0 μmol·L-1能浓度依赖性地     

老年口腔扁平苔藓免疫电镜细胞观察

目的：探讨老年患者口腔扁平苔藓的免疫发病机理。方法：采用透射电子显微镜观察老年口腔扁平苔藓患者的免疫细胞学变化。结果：上皮层病变,郎格罕细胞呈轻度水肿变性,粘膜上皮基底板呈阶段性溶解,脱落的上皮细胞内有凋亡小体,活化的T淋巴细胞攻击粘膜上皮细胞。固有层病变,固有层活化的肥大细胞数目增多,活化的淋巴细胞与活化的脱颗粒的肥大细胞膜相接触、相吻合,可见淋巴细胞间合作现象及微血管内皮细胞及周细胞损害。结论：老年人口腔扁平苔藓的发病机理是以细胞介导的免疫反应为主,继发或伴发有体液免疫反应。     

单硝酸异山梨酯对小鼠损伤血管修复的影响

目的研究单硝酸异山梨酯对小鼠损伤血管修复的影响。方法采用电刺激小鼠颈总动脉制备血管损伤模型,再应用伊文思蓝染色研究损伤血管内皮修复过程。通过测定血管收缩、内皮依赖性舒张和非内皮依赖性舒张来评估NO对损伤血管功能恢复的影响。结果经单硝酸异山梨酯预处理一周（7 d）和一个月（30 d）的损伤血管,跟生理盐水对照组相比,在内皮修复过程中没有显著性差异,同时血管平滑肌细胞没有显著性改变。经过单硝酸异山梨酯预处理的小鼠损伤血管的功能也没有改善。结论血管平滑肌的修复并不是再生,平滑肌的修复主要靠已有平滑肌细胞的迁移,短期应用单硝酸异山梨酯可一定程度上抑制损伤后血管内膜增厚和血管重构。     

吗啡及纳洛酮对淋巴细胞体外增殖的作用(英文)

目的:研究吗啡对不同淋巴细胞增殖的作用及纳洛酮的影响.方法:观察吗啡对未成熟的、静止的及活化的脾脏淋巴细胞体外增殖影响及纳洛酮的阻断作用.结果:吗啡(1×10~(-10)—1×10~(-6)mol L~(-1))能增加Con A诱导的T-细胞的增殖,1 μmol L~(-1)还能促进LPS诱导的B-细胞的增殖,同时这些增强作用都能被纳洛酮50μmol L~(-1)阻断,纳洛酮单独亦能促进活化T-细胞的增殖.而吗啡1×10~(-10)—1×10~(-5)mol L~(-1)对静止的脾脏淋巴细胞及Con A活化的胸腺淋巴细胞的增殖都无影响.但是吗啡1mmol L~(-1)能广泛抑制静止的、LPS活化的脾脏细胞及Con A活化的胸腺,脾脏淋巴细胞增殖,且都不能被纳洛酮阻断.结论:吗啡对活化T-和B-细胞的促进作用是由细胞表面的阿片受体介导的,此阿片受体随着淋巴细胞的成熟和活化而变化,而吗啡1 mmol L~(-1)对淋巴细胞增殖的抑制作用却不是由经典的阿片受体介导的.