视网膜前膜IgG,C3,胶原和Ki—M7免疫组织化学研究

利用免疫组织化学染色对１２例增殖性玻璃体视网膜病变的视网膜前膜组织进行检查。光镜下，８例前膜主要由视网膜色素上皮细胞，成纤维细胞样细胞、巨噬细胞及胶原纤维构成，免疫荧光染色的前膜组织分别呈ＩｇＧ、补体Ｃ３、Ⅲ型胶原及Ｋｉ－Ｍ７抗体反应阳性，表明视网膜前膜中有体液免疫成分介入，巨噬细胞在ＰＶＲ形成的反应机制中可能起重要作用。     

基质金属蛋白酶在视网膜前膜的表达和意义

目的 研究增生性玻璃体视网膜病变（PVR）视网膜前膜中基质金属蛋白酶（MMPs)的表达。探讨MMPs在PVR病理过程中的作用。方法 经扁平部玻璃体切割术（PPV）和膜剥离术取得PVRC3-D3级视网膜前膜21例，免疫组织化学法分析MMP-2和MMP-9在PVR视网膜前膜的表达，同时进行视网膜色素上皮细胞（RPE）和巨噬细胞染色。结果 21例PVR视网膜前膜MMP-2阳性染色15例，MMP-9阳性8例，RPE细胞表达18例，巨噬细胞表达9例。结论 PVR视网膜前膜有MMP-2和MMP-9表达，可能主要由RPE细胞和巨噬细胞分泌，对PVR的发生和发展起重要作用。     

台盼蓝染色在玻璃体视网膜手术中应用的研究进展

视网膜前膜及视网膜内界膜的剥除是玻璃体切除术中的关键步骤，对视网膜前膜及内界膜的有效染色可使手术医师清晰辨别并准确、彻底剥除这些组织，减少对视网膜的损伤，降低复发率。近年来，台盼蓝染色技术在玻璃体视网膜手术中的应用取得了良好的临床效果。本文就台盼蓝对视网膜毒性的基础研究、台盼蓝染色在眼后节手术中的临床应用做一综述。     

增殖性玻璃体视网膜病变中视网膜前膜的台盼蓝染色

目的：明确台盼蓝是否有助于增殖性玻璃体视网膜病变中视网膜前膜的去除。方法：10例增殖性玻璃体视网膜病变化玻璃体切除手术的患者，剥除视网膜前膜，直到不能清楚辨认为止。液气交换后，注入0．06％台盼蓝溶液于视网膜膜表面。1min后，去除多余的染料，气液交换后，完成视网膜前膜的剥除。剥除的视网膜前膜标本送透射电镜分析。主要结果测量：每例患者在手术中，对剥除台盼蓝染色的视网膜前膜效率进行评分。结果：所有患者眼内视网膜前膜台盼蓝染色是一种有用的辅助方法，手术中使视网膜表面膜更清楚辨认，更易于剥除。在着染的视网膜前膜与无着染的其下面的视网膜组织间建立了很好的对比度。电镜显示只有视网膜表面膜组织被去除了。术后3个月随访观察未见有与膜染色相关的副作用发生。结论：由于台盼蓝可促使视网膜前膜完整、安全的去除，所以在手术治疗增殖性玻璃体视网膜病变中，台盼蓝可能成为一种重要的新工具。     

增生性视网膜前膜中Caspase-3及Bax的表达

目的 观察凋亡及凋亡调控基因Caspase-3／Bax在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)中视网膜前膜(epiretinal membrane)的表达及与凋亡的相关性。方法20例增生性玻璃体视网膜病变的视网膜前膜标本，分别进行Caspase-3和Bax免疫组织化学染色，观察表达情况及染色强度。结果Caspase-3及Bax在视网膜前膜中有较好的表达。正常视网膜组织中未见Caspase-3及Bax的表达。结论在视网膜前膜中存在细胞凋亡，Caspase-3及Bax的表达表示视网膜前膜的细胞凋亡的程度。     

特发性黄斑孔手术内界膜的超微结构特点

目的 对老年特发性黄斑孔手术所取组织进行组织学鉴定和比较。方法 6例老年特发黄斑孔患者行玻璃体切割，内界膜剥除，SF6填充手术时取出的标本，以及3例尸体眼的后极部视网膜组织，2例黄斑前膜患者手术中取出的视网膜前膜，用透射电镜进行组织学研究。结果 黄斑孔手术的取材在电镜下表现为一层连续起伏的基底膜组织，上附疏松的玻璃体胶原纤维，未见细胞和视网膜神经层成分，与尸体眼玻璃体视网膜交界的形态相似。而黄斑前膜可见纤维星形细胞，巨噬样细胞及间断的基底膜组织。结论 确证了老年特发黄斑孔手术时用吲哚菁绿染色后撕除的组织是视网膜内界膜。内界膜的剥除在多种黄斑手术中具有重要意义。     

台盼蓝染色在玻璃体视网膜手术中应用的研究进展

视网膜前膜及视网膜内界膜的剥除是玻璃体切除术中的关键步骤,对视网膜前膜及内界膜的有效染色可使手术医师清晰辨别并准确、彻底剥除这些组织,减少对视网膜的损伤,降低复发率。近年来,台盼蓝染色技术在玻璃体视网膜手术中的应用取得了良好的临床效果。本文就台盼蓝对视网膜毒性的基础研究、台盼蓝染色在眼后节手术中的临床应用做一综述。     

早产儿视网膜病变的视网膜前新生血管增生膜组织病理学观察

目的 研究早产儿视网膜病变(ROP)的视网膜前新生血管增生膜(视网膜前增生膜)组织病理学特点及其发病机制.方法 回顾性系列病例研究.对24例(34只眼)手术获取的5期ROP视网膜前增生膜进行光镜观察,其中15例(15只眼)再行透射电镜观察,取2例(2只眼)行神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)染色.应用SPSS 11.0统计学软件,对ROP视网膜前增生膜的新生血管数与相关临床因素进行Spearman等级相关分析;应用STATA 7.0统计学软件,对视网膜前增生膜的成纤维细胞数与相关临床因素进行随机效应模型分析.结果 光镜下观察,可见视网膜前增生膜以胶原纤维为主,新生血管和细胞分布不均,新生血管数与早产儿出生后周龄、校正周龄呈负相关(r=-0.469,-0.482;均P<0.05),与孕周和出生体重无关(r=-0.179,-0.272;均P>0.05),成纤维细胞数与患儿的孕周、出生后周龄、校正周龄呈负相关(Z=-1.99,-3.45,-3.64;均P<0.05),与出生体重无关(Z=0.21,P>0.05).透射电镜下观察,可见视网膜前增生膜中有多种细胞成分,包括成纤维细胞、肌纤维母细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞、炎性细胞等.GFAP染色证实ROP的视网膜前增生膜中存在神经胶质细胞,且多分布在视网膜表面.结论 ROP视网膜前增生膜的主要细胞成分是成纤维细胞和肌纤维母细胞,视网膜前增生膜的退化与患儿出生后周龄和校正周龄相关,但与出生体重无关.神经胶质细胞在ROP视网膜前增生膜的形成中扮演重要角色.     

Vinculin和α-平滑肌肌动蛋白在视网膜前膜细胞及其迁出传代细胞中的表达

目的 分析vinculin和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)在视网膜前膜细胞及其迁出传代细胞中的表达.方法 手术中取得视网膜前膜共17例,选取倒置相差显微镜下易于展开和辨别细胞形态的组织5例,清洗展开固定后,以单克隆抗vinculin和抗α-SMA抗体及含荧光素的二抗染色;不易展开和辨别细胞形态的组织12例置于明胶涂层的盖玻片上培养,将迁出的细胞培养传代,免疫荧光染色后在荧光显微镜下观察.结果 术中取得的视网膜前膜细胞抗vinculin和α-SMA抗体染色阳性.12例视网膜前膜组织中,7例培养24 h后细胞从组织迁移至明胶涂层的盖玻片上并增殖,其中4例可培养至第2代,4例中2例可培养至第3代,这些细胞抗vinculin和抗α-SMA抗体染色均呈阳性.结论 术中剥离的视网膜前膜细胞及其迁出传代细胞均表达vinculin和α-SMA,提示这些细胞具有较强且较恒定的收缩能力.     

增生性玻璃体视网膜病变增生膜中基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达

目的研究增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy，PVR）增生膜中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMP）及其抑制剂（tissue inhibitors of matrix metalloproteinases，TIMP）的表达。方法采用免疫组织化学技术的SP法，检测PVR增生膜和正常尸眼神经视网膜标本中MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达，光镜观察染色结果。结果41例PVR增生膜标本HE染色切片光镜下可见视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial，RPE）细胞、神经胶质细胞、成纤维细胞、巨噬细胞等细胞成分，它们被大量细胞外基质所包绕。视网膜前膜中以RPE细胞为主要增生细胞，视网膜下膜中以神经胶质细胞为主要增生细胞。免疫组织化学染色结果显示：（1）25例PVR增生膜标本表达MMP-2，11例PVR增生膜标本表达MMP-9，14例PVR增生膜标本表达TIMP-1；（2）22例视网膜前膜标本表达MMP-2，3例视网膜下膜标本表达MMP-2，差异有显著性（P〈0．05）；（3）正常尸眼神经视网膜标本中未检测到MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达。结论细胞外基质与PVR增生膜的形成关系密切，MMP-2、MMP-9及TIMP-1在PVR形成过程中发挥重要作用，通过合理地调控MMP和TIMP的平衡，为预防和治疗PVR提供可能性理论依据。     

玻璃体切割术后视网膜前膜中Ⅱ、Ⅳ型胶原及CD8 T淋巴细胞检测

目的 探讨玻璃体切割术后视网膜前膜的发病机制.方法 采集裂孔源性视网膜脱离玻璃体切割术后因增生性玻璃体视网膜病变(PVR)再次行剥膜术的所有视网膜前膜标本35例,分黄斑前膜组与周边前膜组.用免疫组织化学方法检测35例视网膜前膜中CD8 T淋巴细胞及Ⅱ型、Ⅳ型胶原的表达,比较两组间3个指标的阳性率.结果 黄斑前膜组中13例Ⅱ型胶原阳性表达(86.67%),5例Ⅳ型胶原阳性表达(33.33%),11例CD8 T淋巴细胞阳性表达(73.33%);周边前膜组中,17例Ⅱ型胶原阳性表达(85%),1例Ⅳ型胶原阳性表达(0.05%),18例CD8 T淋巴细胞阳性表达(90%).结论 孔源性视网膜脱离玻璃体切割术后视网膜前膜发生与玻璃体视网膜界面有关.CD8 T淋巴细胞在这种视网膜前膜发生中起一定作用.     

人玻璃体膜及视网膜前膜免疫组化研究

目的 鉴定人玻璃体膜及视网膜前膜的细胞成分。方法 对增生性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）１２例和外伤性ＰＶＲ８例患者经玻璃体手术取出的增生膜标本,用鼠抗人角蛋白、波形蛋白、神经胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）和ＣＤ１４等４种单抗做免疫组织化学ＡＢＳ法染色并观察。结果 １２例ＰＶＲ膜抗角蛋白染色均为阳性,６例抗ＧＦＡＰ阳性,１０例抗ＣＤ１４阳性;８例外伤性ＰＶＲ膜２例抗角蛋白染色阳性,７例抗ＧＦＡＰ阳性,３     

脉络膜脱离型视网膜脱离患者的视网膜前膜组织病理学观察

脉络膜脱离型视网膜脱离（简称脉脱型视网膜脱离）是一种特殊类型的复杂性视网膜脱离，对其临床病例报道文献中并不少见，而对其视网膜前膜的组织病理学特征观察，目前尚未见报道。我们对4例典型的脉脱型视网膜脱离患者的视网膜前膜进行了免疫组织化学研究。     

玻璃体切割术后视网膜前膜中Ⅰ、Ⅲ型胶原及fibronectin的表达

目的:检测孔源性视网膜脱离行玻璃体切割术后视网膜前膜中fibronectin,Ⅰ,Ⅲ型胶原表达。方法:采集孔源性视网膜脱离玻璃体切割术后因PVR再次行剥膜术的所有视网膜前膜标本35例,分黄斑前膜组与周边前膜组。用免疫组织化学方法检测35例视网膜前膜中fibronectin,Ⅰ,Ⅲ型胶原的阳性表达。将两组间3个指标阳性率进行统计学分析。结果:黄斑前膜组中Ⅰ、Ⅲ型胶原阳性表达均为14例(93%),12例FN阳性表达(80%)。周边前膜组中,19例Ⅰ型胶原阳性表达(95%),7例Ⅲ型胶原阳性表达(35%),17例FN阳性表达(85%)。两组比较,Ⅲ型胶原阳性表达有显著性差异(P<0.01)。结论:孔源性视网膜脱离PPV术后视网膜前膜中含Ⅰ,Ⅲ型胶原和FN,可能在玻璃体切割术后视网膜再次脱离过程中起作用。     

胎盘生长因子在早产儿视网膜病变纤维血管膜中的表达

目的　研究胎盘生长因子（ｐｌａｃｅｎｔａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＰＬＧＦ）在早产儿视网膜病变（ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙｏｆｐｒｅｍａｔｕｒｉｔｙ,ＲＯＰ）纤维血管膜的血管内皮细胞、周细胞、巨噬细胞和胶质细胞中的表达和分布。方法　玻璃体切割术中取ＲＯＰ患者视网膜表面纤维血管膜保存备用,冰冻切片,ＨＥ染色、免疫组织化学染色和免疫荧光染色观察ＰＬＧＦ在纤维血管膜上的表达和分布。结果　ＨＥ染色及免疫组织化学染色结果显示ＰＬＧＦ在纤维血管膜中可见阳性表达。免疫荧光双标记法实验结果显示纤维血管膜的ＰＬＧＦ可能由血管内皮细胞、周细胞、巨噬细胞和胶质细胞表达。结论　ＰＬＧＦ可能参与了ＲＯＰ的发病过程,ＰＬＧＦ在ＲＯＰ发病中的作用及其分子机制需要进一步研究。     

人视网膜前膜中粘附分子的免疫组织化学观察

目的 观察增生性玻璃体视网膜病变(Proliferative vitreoreti nopathy，PVR)的视网膜前膜(epiretinal membranes，ERM)中粘附分子(ICAM-1，Mac-1) 的表达。方法用免疫组织化学方法对20例复杂视网膜脱离行玻 璃体切割术时剥离的视网膜前膜进行观察。结果ICAM-1和Mac-1分别在18和15例视网膜前膜中表达，两种粘附分子同在12例视网膜前膜中表达。结论ERM中有ICAM-1和Mac-1的表达，提示粘附分子在PVR的发 生发展中有一定作用。（中华眼底病杂志，2000，16：71-138）     

曲安奈德染色法在玻璃体切除手术中的应用

目的探讨曲安奈德（TA）染色法在玻璃体切除手术中协助辨别和清除残留玻璃体皮质和视网膜前膜的作用及效果。方法选取2008年6月至2010年5月,对我院85例（88只眼）玻璃体视网膜疾病行TA染色法玻璃体切除手术,切除中轴部玻璃体后,注入TA悬浊液染色玻璃体皮质和增生膜,切除残留的玻璃体皮质和视网膜前膜。术后随访时重点观察患者视力、眼压、白内障形成、玻璃体残留及视网膜复位情况。结果 85例（88只眼）术中注入TA后,残留的玻璃体皮质及视网膜前膜均能清晰地显示,容易辨认切除残留的玻璃体皮质和视网膜前膜位置和范围。术后随访观察6～12个月,81只眼（92.05%）视力有不同程度的提高,与手术前相比差异具有统计学意义（P〈0.05）。术前40只眼视网膜脱离术后38只眼（95%）视网膜完全复位,术后未发现与TA相关的严重并发症。结论玻璃体切除手术中,应用TA染色玻璃体,可以清晰地显示残留的玻璃体皮质和视网膜前膜,有助于彻底切除玻璃体皮质和视网膜前膜,提高了手术的安全性和准确性。     

糖尿病患者视网膜前新生血管膜中血管内皮细胞的增殖和激活

目的研究Ⅰ型糖尿病患者增殖型糖尿病视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＰＤＲ）视网膜前新生血管膜中血管内皮细胞的增殖和激活状态。方法用双重免疫荧光及碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法检查Ⅰ型糖尿病患者１８例ＰＤＲ视网膜前新生血管膜血管内皮细胞的增殖和激活状态，并与患者的主要临床特征相比较。结果１８例标本中，１６例（８８．９％）含增殖状态的血管内皮细胞，１４例（７７．８％）的内皮细胞呈激活状态；应用双重染色技术，发现在含增殖状态内皮细胞的１６例中有１４例（８７．５％）内皮细胞同时处于激活状态。结论ＰＤＲ视网膜前新生血管膜中大多数新生血管内皮细胞呈增殖和激活状态，提示血管内皮细胞在ＰＤＲ的病理生理和发展中起重要作用     

病理性近视黄斑裂孔患者黄斑区视网膜前膜的组织学观察

目的 观察病理性近视内界膜表面结构的组织学变化与黄斑裂孔发生发展的关系.方法 同顾分析行玻璃体切割手术的病理性近视黄斑裂孔患者34例34只眼的临床资料.患眼屈光度均超过-6.00 D,眼轴26.00～33.12 mm,平均眼轴长度27.74 mm.5只眼为黄斑裂孔无视网膜脱离(黄斑裂孔组),29只眼为黄斑裂孔合并后极部视网膜浅脱离(视网膜脱离组).对入选患眼行睫状体平坦部三切口的玻璃体切割手术,手术中观察Weiss环以判断玻璃体后脱离程度,获取34只眼的视网膜前膜及19只眼的内界膜组织标本,行苏木精-伊红(HE)及醋酸铀-枸橼酸铅双染色,采用光学及透射电子显微镜观察.结果 玻璃体切割手术中,5只眼出现Weiss环,24只眼的视网膜表面有多层玻璃体组织残留.光学显微镜观察发现,内界膜表面的视网膜前膜主要由玻璃体胶原纤维.星形胶质细胞及细胞外基质组成.透射电子显微镜观察发现,19只眼的内界膜标本中,5只眼可她内界膜一玻璃体胶原纤维-细胞的"三明治"样结构,1只眼可见内界膜损伤、表面组织牵引和星形胶质细胞移行.结论病理性近视玻璃体后界面劈裂、内界膜表面组织结构的变化是黄斑裂孔发生发展直至视网膜脱离的重要原因.     

瘦素在增殖性糖尿病性视网膜病变和增殖性玻璃体视网膜病变中的表达

目的 通过检测瘦素在增殖性糖尿病性视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy,PDR）和增殖性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreous retinopathy,PVR）中的表达,探讨瘦素在PDR、PVR发生、发展过程中可能的调节机制。方法 分别用免疫组织化学染色的方法和酶联免疫吸附实验检测30例PDR患者、20例PVR病变患者眼内视网膜前膜中瘦素的表达,以及患者的血清、眼前房水、玻璃体液中瘦素的浓度。用Chi－Square Tests统计学方法分析和比较PDR、PVR与对照组之间瘦素表达的差异。结果 免疫组织化学染色结果：30例PDR患者中,有18例患者眼内视网膜前膜的瘦素受体呈阳性表达,阳性率为60%,与对照组比较,差异有统计学意义;20例PVR患者中,有3例患者眼内视网膜前膜的瘦素受体呈阳性表达,其中2例为血管纤维性视网膜前膜,1例为细胞纤维性视网膜前膜,阳性率为15%,与对照组比较,差异无统计学意义。ELISA结果：检测30例PDR患者的血清、眼前房水、玻璃体液中瘦素的浓度,与对照组之间差异有统计学意义（P＜0.05）;检测20例PVR患者的血清、眼前房水、玻璃体液中瘦素的浓度,与对照组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 瘦素可能主要是通过促进新生血管的生成参与到增殖性糖尿病性视网膜病变的发生、发展中,与增殖性玻璃体视网膜病变的发生、发展无明显相关性。