幽门螺杆菌依赖丝裂原活化蛋白激酶信号通路诱导SGC7901细胞表达分泌白细胞介素-8

背景:已知前炎症细胞因子白细胞介素(IL)鄄8在慢性活动性胃炎、消化性溃疡等幽门螺杆菌(H.pylori)感染相关疾病的发生、发展中起重要作用,但H.pylori诱导胃上皮细胞表达、分泌IL鄄8的分子机制尚不明确。目的:通过体外实验了解H.pylori对人胃癌细胞株SGC7901表达、分泌IL鄄8的影响,探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在H.pylori诱导SGC7901细胞IL鄄8mRNA表达和IL鄄8蛋白分泌中的作用。方法:SGC7901细胞经p38MAPK特异性抑制剂SB203580预作用2h,再加入H.pylori标准菌株CCUG17874共培养。采用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测IL鄄8mRNA的表达,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测IL鄄8蛋白的分泌,观察SB203580对H.pylori诱导SGC7901细胞表达、分泌IL鄄8的影响。结果:H.pylori能诱导SGC7901细胞表达、分泌IL鄄8。SB203580能以剂量依赖的方式抑制H.pylori诱导的SGC7901细胞IL鄄8蛋白分泌,经终浓度为0.3、1、3和10μmol/L的SB203580预作用2h,SGC7901细胞的IL鄄8蛋白分泌与未经SB203580预作用组相比分别减少了26%、51%、64%和73%(P<0.05);SB203580也能使H.pylori诱导的IL鄄8mRNA表达显著减弱。结论:H.pylori能诱导胃上皮细胞表达、分泌IL鄄8,该作用在一定程度上依赖于MAPK信号通路。     

整合素连接激酶经磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路促进胃癌细胞增殖和迁移

目的探讨整合素连接激酶(ILK)对胃癌细胞增殖、侵袭的影响及相关机制。方法利用基因转染建立过表达ILK基因的HGC-27及KATOⅢ胃癌细胞株;细胞计数试剂(CCK)8和Transwell实验研究上调ILK基因表达对HGC-27及KATOⅢ细胞增殖和迁移能力的作用;Western印迹实验检测上调ILK基因表达是否可影响HGC-27及KATOⅢ细胞Akt及p-Akt蛋白的表达。结果上调ILK基因表达可显著促进HGC-27及KATOⅢ细胞的增殖和迁移能力;上调ILK基因表达可明显上调HGC-27及KATOⅢ细胞p-Akt蛋白水平。结论 ILK经磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路参与及影响胃癌细胞的致癌潜能。     

白细胞介素6和维甲酸诱导胃癌细胞凋亡研究

目的 探讨重组白细胞介素6(IL-6)在体外对胃癌细胞凋亡的诱导作用。方法 在细胞培养体系中加入IL-6诱导，维甲酸(RA)作为对照药物，用琼脂糖凝胶电泳和透射电镜观察IL-6和RA对SGC7901胃癌细胞DNA电泳、超微结构的影响。结果 IL-6诱发胃癌细胞DNA出现典型的梯状改变较RA作用显著。电镜观察IL-6及RA作用胃癌细胞出现核固缩、染色体边集等凋亡改变。结论 提示IL-6和RA促进SGC7901胃癌细胞凋亡，且随着剂量加大和时间增加，诱发凋亡程度增高。需进一步探讨IL-6治疗胃癌的可能性及价值。     

菟丝子醇提物对胃癌SGC7901细胞凋亡的影响

目的 探讨菟丝子(CCL)醇提物诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的作用.方法 以CCL(10、50、100 mg/L)作用于人胃癌SGC7901细胞,同时设DMSO和培养液作为对照组.采用HE染色法观察细胞形态变化,琼脂糖凝胶电泳法分析SGC7901细胞的DNA片段化.结果 HE染色镜下可见较为典型的凋亡形态学变化:细胞变小,核皱缩,荧光强度增强,核仁消失,新月体样改变,凋亡小体形成等;琼脂糖电泳出现明显的"梯状"条带,并存在剂量依赖性,而对照组未出现梯状条带.结论 CCL能够诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡.     

叶酸对胃癌细胞凋亡的影响

目的胃癌的发生与发展中有细胞凋亡的变化,叶酸抗肿瘤的机理涉及到维持ＤＮＡ甲基化水平等,其与凋亡的关系尚未明了。方法以高低两种浓度的叶酸干预培养的人胃癌ＭＫＮ－４５和ＭＫＮ－２８细胞系７２小时后,以原位ＤＮＡ断端切口标记法和ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳检测凋亡形态学改变和ＤＮＡ断裂情况。结果未加干预者两种细胞系的凋亡指数均低于５％,不同分化细胞系间比较差异无显著性;低浓度叶酸可诱导ＭＫＮ－４５细胞凋亡,而高浓度者使ＭＫＮ－２８细胞凋亡率增加。结论胃癌细胞自然凋亡率较低。叶酸干预可影响凋亡的发生。     

术前区域性动脉化疗对胃癌细胞凋亡的影响

细胞坏死和细胞凋亡是肿瘤死亡的两个基本途径 ,细胞凋亡是肿瘤细胞在基因调控下的生理性死亡过程 ,各种抗肿瘤药物均能诱导肿瘤细胞凋亡 ,化疗所产生的许多副作用和肿块缩小可能都是由于肿瘤细胞凋亡增多而致[1] 。为观察术前选择性动脉插管化疗 (又称介入化疗 )抑制和杀灭胃癌细胞作用与细胞凋亡之间关系 ,我们采用脱氧核苷酸末端标记法 (ＴＵＮＥＬ法 )对 110例胃癌患者术前介入化疗和未化疗的术后病理切片进行肿瘤细胞凋亡的检测 ,同时对比观察病理组织学改变 ,以期阐明术前介入化疗抑制和杀灭胃癌细胞的机制。材料与方法一、临床资料11…     

哇巴因诱导白血病细胞凋亡的作用机制

目的：研究哇巴因对白血病细胞株Jurkat是否具有凋亡诱导作用，探索其可能的信号传导通路，阐明哇巴因诱导细胞凋亡的作用机制。方法：采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察哇巴因对白血病细胞生长的抑制程度；应用电镜及流式细胞术观测细胞凋亡；应用Western-blot检测细胞外信号调节蛋白激酶(extracelluar sig-nal-regulated kinase1/2简称 ERK1/2)的表达。结果：哇巴因能诱导白血病细胞凋亡，细胞凋亡的数量与哇巴因的浓度呈正相关，Western-blot检测结果显示哇巴因作用后，磷酸化：ERK1/2的表达减低。结论：细胞外信号调节蛋白激酶ERK通路可能参与了哇巴因引起的白血病细胞的凋亡过程。     

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路与高血压

综述磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的构成、转导途径及其在高血压及相关靶器官损害中的作用机制,并阐述基于PI3K/Akt信号通路高血压的中医药治疗进展,旨在为高血压的临床诊疗提供新的思路和治疗靶点。     

5-氟尿嘧啶诱导人胃癌细胞的凋亡

为了解5-氟尿嘧啶(5-FU)对人体胃癌细胞凋亡的诱导作用,我们对10例胃癌患者经5-FU 治疗7天后进行细胞凋亡检测,并与10例未作任何化疗的病人作对照,现报告如下:     

细胞外组蛋白H4对淋巴细胞凋亡的影响及其与MAPKs信号通路的调控关系

目的 探讨细胞外组蛋白H4对小鼠淋巴细胞Raw264.7细胞凋亡的影响及其与促分裂素原活化蛋白激酶（MAPKs）信号通路的调控关系。方法 收集Raw264.7细胞分为低浓度刺激组、高浓度刺激组及对照组,分别加入50μg/m L、100μg/m L组蛋白H4及不做任何处理,采用FCM法检测各组细胞凋亡率,选取既能诱导细胞凋亡又具有较低细胞毒性的组蛋白刺激浓度进行后续实验。组蛋白H4在去除脂多糖污染后,使用筛选浓度刺激Raw264.7细胞,分别在刺激开始0、5、10、30、60、120 min收取细胞,Western blotting法检测细胞磷酸化ERK(p-ERK)、p-JNK、p-p38蛋白表达。分别使用ERK通路抑制剂、JNK通路抑制剂、p38通路抑制剂、DMSO细胞冻存液预处理Raw264.7细胞1 h,作为ERK抑制组、JNK抑制组、p38抑制组、阴性对照组,另设空白对照组正常培养不做处理,每组分别给予或不给予筛选浓度的组蛋白刺激,采用FCM法检测各组给予或不给予组蛋白刺激的细胞凋亡率。结果 低浓度刺激组、高浓度刺激组细胞凋亡率均高于对照组（P均<0.05）,低浓度刺激组...     

白藜芦醇诱导胃癌细胞凋亡的分子机制

白藜芦醇是从多种葡萄属植物中提取的多酚类化合物[1] 。近年来发现白藜芦醇具有抗癌作用[2 ,3 ] 。通过透射电镜和ＴＵＮＥＬ法 ,在体外定性、定量地研究白藜芦醇与胃癌细胞凋亡的关系 ;通过免疫组化法和ＲＴ ＰＣＲ检测凋亡相关基因ｂｃｌ 2和ｂａｘ的表达 ,研究白藜芦醇诱导胃癌细胞凋亡发生的可能机制。　　一、材料与方法1.细胞系 :胃癌细胞株ＳＧＣ 790 1,由山东省立医院中心实验室传代培养。2 .白藜芦醇对胃癌细胞的生长抑制率测定 :将细胞以10 5/ｍｌ浓度接种于 96孔板 ,每孔 10 0 μｌ,2 4ｈ后分别加入不同浓度的白藜芦醇 ,分别培…     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导人胃癌耐药细胞凋亡的研究

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)是最近发现的肿瘤坏死因子 (TNF)家族新成员 ,因其独特结构和作用特点 ,有可能成为临床上重要的抗肿瘤因子[1] 。许多研究证实 ,TRAIL可诱导许多恶性肿瘤细胞凋亡 ,包括血液系统恶性肿瘤细胞、乳腺癌等[2 ,3 ] 。我们在另一实验中已证实TRAIL能诱导胃癌细胞凋亡 ,现进一步研究TRAIL体外诱导胃癌耐药细胞的凋亡作用 ,为临床上解决胃癌多药耐药这一难题提供新的思路和方法。一、材料和方法1.材料 :SGC790 1 VCR胃癌耐药细胞引自第四军医大学西京医院消化病研究所 ,为SGC 790 1胃癌细胞经长…     

人端粒酶反义寡脱氧核苷酸对胃癌细胞系SGC-7901的生长抑制和诱导凋亡的研究

背景端粒酶活性在胃癌组织中表达率很高,在正常胃黏膜组织中则基本不表达.因此,以端粒酶为靶点的反义治疗有望成为胃癌治疗的有效途径之一.目的检测特定的人端粒酶反义寡脱氧核苷酸(AS-ODN)对胃癌细胞系SGC-7901生长的抑制作用,并证明其主要机制为抑制端粒酶活性和诱导细胞凋亡.方法用改良的聚合酶链反应(PCR)-端粒重复扩增协议(TRAP)法定量检测端粒酶AS-ODN作用前后SGC-7901细胞的端粒酶活性;台盼蓝染色法观察SGC-7901细胞活力;光镜和电镜观察凋亡细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果SGC-7901细胞有端粒酶活性表达.不同浓度的端粒酶AS-ODN作用于SGC-7901细胞48～96 h后,细胞端粒酶活性和生长受到明显抑制,光镜、电镜观察和流式细胞仪检测均证实有细胞凋亡存在.错义AS-ODN(N-ODN)处理组SGC-7901细胞则无显著变化(P＜0.05).结论端粒酶AS-ODN通过抑制胃癌细胞的端粒酶活性和诱导细胞凋亡,最终抑制胃癌细胞生长,其抑制作用呈剂量、时间依赖性和序列特异性.端粒酶AS-ODN对端粒酶活性的抑制比对细胞生长的抑制更敏感,两种抑制作用并不完全平行.     

胃泌素促FAK-Src-ERK1/2通路的活化对大肠癌细胞运动和侵袭的影响

大肠癌的侵袭和转移是影响疗效、预后和导致死亡的重要因素。胃泌素通过与肿瘤细胞表面的胃泌素受体（CCK-BR）结合而刺激肿瘤细胞的生长和增殖。我们前期研究证明胃泌素通过胃液素-胃液素受体．黏着斑激酶（FAK）信号传导通路引起结肠癌细胞侵袭力的增加。本研究观察了胃泌素及其受体对大肠癌细胞FAK-Src-细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1／2）通路的影响以进一步了解胃泌素及其受体对大肠癌细胞运动、侵袭和转移的作用机制。     

阿霉素诱导磷脂酰肌醇3''''-激酶丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶FKHRL1通路对胃癌细胞化疗耐药性的影响

目的探讨阿霉素在胃癌细胞中诱导PI3'K/Akt/FKHRL1通路的激活,对胃癌细胞SGC-7901化疗效果的影响及两者的关系.方法 2004-01～2005-09武汉大学人民医院消化内科采用MTT比色法检测胃癌细胞的生存率,Western印迹法检测FKHRL1磷酸化表达水平,同时观察PI3'K/Akt抑制剂wortmannin对阿霉素诱导的上述变化的影响.结果阿霉素抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,呈时间依赖性的诱导FKHRL1磷酸化.wortmannin可明显增强阿霉素的细胞生长抑制作用,同时下调阿霉素诱导的磷酸化FKHRL1表达.结论阿霉素可能是通过激活SGC-7901细胞的PI3′K/Akt通路,呈时间依赖性诱导FKHRL1磷酸化,从而影响胃癌细胞的化疗耐药性.wortmannin可以阻断PI3'K/Akt/FKHRL1通路而提高胃癌的化疗敏感性.     

阿霉素诱导磷脂酰肌醇3′-激酶 丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶FKHRL1通路对胃癌细胞化疗耐药性的影响

目的探讨阿霉素在胃癌细胞中诱导PI3′K／Akt／FKHRL1通路的激活，对胃癌细胞SGC-7901化疗效果的影响及两者的关系。方法2004-01-2005-09武汉大学人民医院消化内科采用MTT比色法检测胃癌细胞的生存率，Western印迹法检测FKHRL1磷酸化表达水平，同时观察PI3′K／Akt抑制剂wortmannin对阿霉素诱导的上述变化的影响。结果阿霉素抑制胃癌细胞SGC-7901的生长，呈时间依赖性的诱导FKHRL1磷酸化。wortmannin可明显增强阿霉素的细胞生长抑制作用，同时下调阿霉素诱导的磷酸化FKHRL1表达。结论阿霉素可能是通过激活SGC-7901细胞的PI3′K／Akt通路，呈时间依赖性诱导FKHRL1磷酸化。从而影响胃癌细胞的化疗耐药性。wortmannin可以阻断PI3′K／Akt／FKHRL1通路而提高胃癌的化疗敏感性。     

死亡配体TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的研究

肿瘤坏死因子（TNF）是一个超家族,具有抗肿瘤作用,既往发现的TNF及Fas配体等虽然有抗肿瘤作用,但因细胞毒性作用甚强,对正常组织损伤太大,限制了其在临床应用。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNF related apopto-sis inducing ligand,TRAIL）是最近发现的TNF家族新成