ME491和KAI1基因抗胰腺癌转移作用的评价

目的探讨不同转移抑制基因ME491和KAI1对胰腺癌抗转移作用的影响。方法2003-11～2004-02在沈阳军区总医院消化内科实验室采用原位杂交法和免疫组织化学技术分别对正常胰腺组织(17例)及胰腺癌组织(50例)中的ME491和KAI1基因及其蛋白表达进行检测。结果ME491和KAI1在胰腺癌组织中的表达高于正常组织,ME491在有转移和没有转移组织中的表达差异无显著性,但KAI1在无转移的组织中的表达高于有转移的组织。结论ME491可能与胰腺癌转移无明显相关,KAI1基因具有明显抗胰腺癌转移作用。     

KAI1复制缺陷型腺病毒载体抑制人胰腺癌细胞迁移实验研究

目的 构建携带人肿瘤转移抑制基因KAI1复制缺陷型腺病毒载体并初步研究其对体外肿瘤细胞迁移的影响。方法 用Ad—EasyTM系统大肠杆菌中同源重组的方法，构建Ad—KAI1腺病毒载体，并在293细胞中包装、扩增和纯化，用其感染人胰腺癌细胞并检测KAI1的表达。结果 构建的Ad—KAI1可以高效感染人胰腺癌细胞系PANCl，并检测到感染Ad-KAI1的PANCl细胞中KAI1的高表达；同时观察到Ad-KAI1可以抑制胰腺癌细胞系PANCl的迁移。结论 携带人肿瘤转移抑制基因KAI1复制缺陷型腺病毒载体可抑制人胰腺癌细胞转移，为KAI1抗胰腺癌转移基因治疗提供依据。     

KAI1 PNA探针的制备及其在胰腺癌中的应用

目的：制备DIG标记KAI1 RNA探针和分析KAI1基因在胰腺癌中的表达。方法：以线性KAI1基因DNA质粒为模板，采用体外转录法掺入DIG-11-UTP制备RNA探针，并通过化学发光法检测。应用该探针通过Northern blot对12例正常胰腺组织和30例原发性胰腺癌组织中的KAI1基因mRNA进行分析。结果：该方法标记的KAI1 RNA探针浓度?a1ng/цl时即可检测。Northern bolt分析发现25例无转移的胰腺癌中KAI1基因在2.4kb处存在明显的杂交信号，5例发生转移的晚期胰腺癌杂交信号较弱，正常胰腺组织中该基因的表达水平呈阴性或弱阳性。结论：本法标记的KAI1RNA探针灵敏度高，KAI1基因低表达与胰腺癌转移有关。     

KAI1基因在胰腺癌中的突变分析

目的：探讨KAI1基因在胰腺癌中的突变情况。方法：对17例伴有淋巴结转移的原发性胰腺癌（Ⅲ期），7例无淋巴结转移的原发性胰腺癌（2例I期，5例Ⅱ期）和9例正常胰腺组织标本进行KAI1基因突变分析。结果：24例胰腺癌标本中，7例证实有KAI1点突变。这种突变出现在886位核苷酸上，导致从A到G的转变，缬氨酸置换异亮氨酸，且有突变的癌标本均属于晚期有转移的胰腺癌（Ⅲ期）。结论：上述结果提示KAI1基因突变使KAI1 mRNA水平降低可能是胰腺癌转移的主要因素之一。     

KAI1和CD44v6在骨肉瘤中的表达及意义

目的探讨KAI1和CD44v6蛋白在骨肉瘤中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法,检测87例骨肉瘤组织中KAI1和CD44v6蛋白的表达,用Cox风险回归模型评价骨肉瘤患者预后独立因素。结果KAI1蛋白与肿瘤的分化程度、远处转移相关,而CD44v6仅与远处转移相关。骨肉瘤KAI1和CD44v6的表达无相关性。Cox模型分析显示影响骨肉瘤患者预后因素是KAI1表达、远处转移和Enneking外科分期。结论KAI1和CD44v6的异常表达参与了骨肉瘤的转移过程,KAI1表达、远处转移、Enneking外科分期是预测骨肉瘤患者预后的独立因素。     

KAI1基因的表达与结肠癌转移的关系

目的探讨KAI1基因的表达与结肠癌转移的关系.方法用Northern blot及原位杂交分析法对10例正常人及24例结、直肠癌患者组织中的KAI1 mRNA表达分别进行检测.结果 North-ern blot分析显示,在正常及结肠癌组织中均有不同程度的KAI1 mRNA表达,原发性结肠癌伴淋巴结转移的KAI1 mRNA表达水平明显低于无淋巴结转移者(P＜0.01);原位杂交的KAI1 mRNA表达与Northern blot分析结果相一致,并发现KAI1 mRNA主要出现在原发性结肠癌细胞中,而肿瘤周围间质KAI1 mRNA相对呈低表达.结论 KAI1 mRNA表达在结肠癌的抗转移中具有一定的作用.     

胰腺癌细胞中KAI1蛋白的表达分析

目的研究KAI1基因在人高转移胰腺癌细胞株PANC Ⅰ和MiaPacaⅡ中的表达,并进行KAI1基因在胰腺癌中抗转移作用的有关研究,为今后利用KAI1基因治疗胰腺癌提供实验和理论依据.     

KAI1表达与胃癌生物学特性的关系

胃癌的发生、发展涉及到多种癌相关基因的异常改变.研究表明,抑癌基因KAI1具有抑制恶性肿瘤转移的作用,但在胃癌中研究较少.我们应用免疫组化方法检测KAI1在胃癌中的表达,并对它的表达规律及其与胃癌临床病理指标和生存期的关系作一些探讨,以求阐明KAI1在胃癌发展和转移中的意义。     

KAI1 RNA探针的制备及其在胰腺癌中的应用

目的制备DIG标记KAI1 RNA探针和分析KAI1基因在胰腺癌中的表达.方法以线性KAI1 基因DNA质粒为模板,采用体外转录法掺入DIG-11-UTP制备RNA探针,并通过化学发光法检测.应用该探针通过Northern blot对12例正常胰腺组织和30例原发性胰腺癌组织中的KAI1基因mRNA进行分析. 结果该方法标记的KAI1 RNA探针浓度为1 ng/μl时即可检测.Northern bolt分析发现25例无转移的胰腺癌中KAI1基因在2.4 kb处存在明显的杂交信号,5例发生转移的晚期胰腺癌杂交信号较弱,正常胰腺组织中该基因的表达水平呈阴性或弱阳性.结论本法标记的KAI1 RNA探针灵敏度高,KAI1基因低表达与胰腺癌的转移有关.     

KAI1基因在胰腺癌中的突变分析

目的探讨KAI1基因在胰腺癌中的突变情况.方法对17例伴有淋巴结转移的原发性胰腺癌(Ⅲ期),7例无淋巴结转移的原发性胰腺癌(2例Ⅰ期,5例Ⅱ期)和9例正常胰腺组织标本进行KAI1基因突变分析.结果24例胰腺癌标本中,7例证实有KAI1点突变.这种突变出现在886位核苷酸上,导致从A到G的转变,缬氨酸置换异亮氨酸,且有突变的癌标本均属于晚期有转移的胰腺癌(Ⅲ期).结论上述结果提示KAI1基因突变使KAI1 mRNA水平降低可能是胰腺癌转移的主要因素之一.     

KAI1/CD82、VEGF在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82和血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌浸润和转移中的作用。方法采用免疫组织化学SP法检测62例乳腺癌组织中KAI1/CD82和VEGF表达情况,并分析两指标间及与肿瘤临床病理参数的关系。结果 62例乳腺癌组织中KAI1/CD82和VEGF阳性表达率分别为50.00%和62.90%,但两者表达无显著相关;KAI1/CD82在浸润性导管癌组织中的阳性表达率明显低于导管内癌局部浸润者、有淋巴结转移者阳性表达率明显低于无淋巴结转移者,VEGF在临床分期Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌组织中的阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期者、在淋巴结转移者中阳性表达率明显高于无淋巴结转移者(P均<0.05)。结论 KAI1/CD82和VEGF均在乳腺癌浸润和转移中起重要作用,此为乳腺癌的临床诊治、预后评估及多靶点治疗提供了新思路。     

KAI1 复制缺陷型腺病毒载体抑制人胰腺癌细胞迁移实验研究

目的 构建携带人肿瘤转移抑制基因KAI1复制缺陷型腺病毒载体并初步研究其对体外肿瘤细胞迁移的影响.方法 用Ad-EasyTM系统大肠杆菌中同源重组的方法,构建Ad-KAI1腺病毒载体,并在293细胞中包装、扩增和纯化,用其感染人胰腺癌细胞并检测KAI1的表达.结果 构建的Ad-KAI1可以高效感染人胰腺癌细胞系PANC1,并检测到感染Ad-KAI1的PANC1细胞中KAI1的高表达;同时观察到Ad-KAI1可以抑制胰腺癌细胞系PANC1的迁移.结论 携带人肿瘤转移抑制基因KAI1复制缺陷型腺病毒载体可抑制人胰腺癌细胞转移,为KAI1抗胰腺癌转移基因治疗提供依据.     

肾母细胞瘤组织中KAI1／CD82的表达变化及意义

目的观察肾母细胞瘤组织中KAI1／CD82的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测48例份肾母细胞瘤组织和11例份正常肾组织中的KAI1／CD82蛋白。结果肾母细胞瘤组织中KAI1／CD82蛋白阳性表达率为50％,正常肾组织无KAI1／CD82表达。肾母细胞瘤组织中KAI1／CD82蛋白阳性表达率与肿瘤转移有关（P〈0．05）,与临床分期无关（P〉0．05）。结论肾母细胞瘤中KAI1／CD配表达升高。KAI1／CD82阳性表达率可以作为预测肿瘤是否转移的指标。     

KAI1／CD82与肝细胞癌转移相关性的研究进展

肝细胞癌是恶性程度最高的消化道肿瘤之一，虽然已有多种治疗方法和手段，但其高复发和转移性使患者预后差，生存率低。如何及早预测、诊断及治疗肝细胞癌，成为研究的重点和难点。分子生物学的迅速发展和检测技术的进步，为肿瘤分子生物学的研究提供了有利的条件。KAI1／CD82基因蛋白与多种恶性肿瘤的复发和转移相关。本文综述了KAI1／CD82的特点及其与肝细胞癌转移相关性的研究进展。     

KAI1基因抑制胰腺癌细胞转移机制的探讨

目的本研究将pCMV-KAI1重组质粒转染人高转移胰腺癌细胞株PANC Ⅰ和MiaPacaⅡ中,观察转染前后KAI1基因对胰腺癌细胞侵袭转移能力和运动能力的影响,从基因水平探讨KAI1基因抗胰腺癌转移的能力.     

KAI1和CD44V6在胃癌的表达及其与患者生存的关系

目的 检测胃癌组织中KAⅡ和CD44V6的表达情况,分析其与临床病理特征及病人生存期之间的关系.方法 采用免疫组化的方法检测92例胃癌组织KAI1和CD44V6的表达水平.结果 KAI1和CD44V6在胃癌异常表达率为42.4%和61.9%,KAI1和CD44V6的表达率与胃癌分化程度、临床分期、淋巴结转移和远处转移显著相关(P<0.05),KAI1的高表达和CD44V6的低表达具有显著的生存优势(P<0.05),且独立于分化程度、临床分期、淋巴结转移和远处转移.结论 KAI1和CD44V6的表达与胃癌分化程度、临床分期及预后密切相关,KAI1和CD44V6的异常表达似可作为预测胃癌预后不良的指标.     

KHI1正反义基因对MHCC97-H肝癌细胞KAI1蛋白表达的影响

目的:构建KAI1基因正、反义真核表达质粒,了解其对高转移潜能的MHCC97—H肝癌细胞KAI1蛋白表达的影响.方法:利用亚克隆技术构建KAI1基因正、反义真核表达质粒,并用脂质体法将其分别转入高转移潜能的MHCC97-H肝癌细胞系,通过免疫细胞化学SP法检测KAI1蛋白表达情况。结果:限制性内切酶分析证明两个重组子的结构均与KAI1正、反义基因表达质粒的预期结构一致。免疫细胞化学SP法检测显示,转入正义KAI1基因后的肝癌细胞KAI1蛋白染色加深,(细胞积分光密度 integra oculus dehter,IOD20.127 ± 5.099 vs 12.675±1.921,P<0.01);而转入反义KAI1基因的肝癌细胞则KAI1蛋白染色变浅,(IOD 8.681±2.472 vs 12.675 ± 1.921,P<0.01).结论:成功构建了KAIl基因正、反义真核表达质粒.KAI1正义基因能上调肝癌细胞KAI1蛋白的表达,相反,KAI1反义基因则能下调肝癌细胞KAI1蛋白的表达.     

KAI1基因mRNA在大肠癌中的表达及其临床意义

KAI1基因是一个肿瘤转移抑制基因，研究表明，它对多种肿瘤有抑制转移作用。为研究它在大肠癌发生、发展中所起的作用，我们应用原位杂交方法，检测KAI1基因的mRNA在正常大肠黏膜组织、大肠腺瘤及大肠癌中的表达，寻找其变化规律，探讨它与大肠癌发生、发展的关系。     

KAI1基因转染的胰腺癌细胞系的建立

目的转染pCMV—KAI1重组质粒入人胰腺癌细胞株MiaPacaⅡ和Panc1，观察KAⅡ基因的表达，为进行KAI1基因在胰腺癌中抗转移作用的有关研究提供实验用靶细胞，并为今后利用KAI1基因治疗胰腺癌提供实验和理论依据。方法采用Western blot方法从7种胰腺癌细胞中筛选出无KAI1表达的MiaPacaⅡ和Panc1细胞株，通过脂质体转染法将pCMV—KAI1重组质粒转染到MiaPacaⅡ和Panc1中，经G418筛选4周，获得单克隆细胞系，应用Western blot、免疫荧光及免疫细胞化学方法检测转染细胞系KAI1蛋白的表达。结果获得了稳定表达KAI1基因的MiaPacaⅡ和Panc1胰腺癌细胞克隆；经Western blot分析显示转染后的胰腺癌细胞株MiaPacaⅡ与Panc1有明确的分子质量为29100KAI1蛋白表达，而未转染细胞无KAI1蛋白表达；免疫荧光显示，转染的胰腺癌细胞质中可见明显的荧光，而无转染的母细胞无荧光；免疫细胞化学检测显示，无转染的细胞呈阴性反应，转染的细胞呈中到强度的阳性反应。结论pCMV—KAI1重组质粒经转染人人胰腺癌细胞株MiaPacaⅡ和Panc1后可表达KAI1蛋白，从而建立了KAIl蛋白表达的MiaPacaⅡ和Panc1细胞系。     

跨膜蛋白KAI1和FasL蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨乳腺癌组织及其癌旁正常乳腺组织、纤维腺瘤组织中KAI1和FasL蛋白表达及与淋巴结转移的关系.方法 采用免疫组化检测25例伴淋巴结转移的乳腺癌、40例无淋巴结转移的乳腺癌、纤维腺瘤组及20例癌旁正常组织中KAI1和FasL蛋白的表达.结果 乳腺癌组织中KAI1蛋白表达阳性率显著低于纤维腺瘤组、癌旁正常组织,差异有统计学意义(P＜0.05).且随着淋巴结转移的出现,KAI1 蛋白表达阳性率降低,各组间差异具有统计学意义(P＜0.05),与组织分级成正相关;乳腺癌组织中FasL蛋白表达阳性率显著高于纤维腺瘤组、癌旁正常乳腺组织,差异有统计学意义(P＜0.05),且与淋巴结转移、组织分级呈负相关.结论 KAI1 基因表达下调和FasL 基因表达上调在乳腺癌发展中起重要作用,且二者的表达阳性率与乳腺癌淋巴结转移有关.