PPARγ、MMP-7和TIMP-1在大肠癌的表达及意义

过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）属于核激素受体，在多种消化道组织中有表达，并在肿瘤细胞的增殖与分化调控中发挥重要作用。基质金属蛋白酶（MMPs）及其组织抑制剂（TIMPs）参与细胞外基质的合成与降解，与癌肿的侵袭和转移密切相关。MMP-7也称基质溶解素，具有特异的上皮源性。研究表明，PPARγ的激动剂曲格列酮能通过抑制大肠癌细胞中MMP-7的mRNA和蛋白质合成，降低大肠癌的侵袭和转移潜能。我们用免疫组化技术检测PPARγ MMP-7和TIMP-1在大肠癌中的表达，探讨它们在大肠癌发生和发展中的作用及相互关系。     

Fas信号通路促进胃癌细胞的侵袭及转移

目的探讨Fas通路的非凋亡信号在胃癌细胞株AGS中促进增殖转移的作用。方法流式细胞仪检测AGS细胞表面Fas及FasL表达情况;根据FasL不同作用浓度梯度,绘制细胞生长曲线;shRNA沉默AGS的Fas表达后,或NOK-1拮抗FasL后,利用transwell实验检测AGS的侵袭能力;免疫组化检测FasL表达与E-cadherin关系。结果低浓度的FasL（12.5ng/ml）刺激对细胞增殖无明显抑制作用,反而能提高肿瘤细胞的侵袭能力。在沉默Fas受体或经NOK-1拮抗FasL后,该效应减弱。FasL和E-cadherin在胃癌组织中的表达呈负性相关。结论低剂量的FasL不能诱导AGS产生凋亡效应,反而通过Fas信号通路促进其侵袭转移能力。     

肿瘤干细胞在肿瘤侵袭转移中的作用机制及功能相关信号通路研究进展

肿瘤干细胞是肿瘤组织中存在的少量具有自我更新能力和分化潜能的细胞。目前可通过一些干细胞分子标志物(CD177、CD133、CD44等)对其进行识别。肿瘤干细胞可通过上皮间叶转变途径诱导肿瘤细胞侵袭,通过趋化因子诱导肿瘤细胞迁移,并能够诱导肿瘤组织血管生成。肿瘤干细胞可通过多种信号转导通路如Wnt/β-catenin信号通路、Notch通路、Patched通路等参与肿瘤的侵袭和转移。     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药机制研究进展

以吉非替尼和厄罗替尼为代表的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂在部分非小细胞肺癌患者中的治疗效果显著,但几乎所有患者最终均表现为耐药.因此,为提高该类药物的效用,对耐药性的研究便显得至关重要.基因突变、细胞表型改变、受体内化、信号通路成分及其调节因子的基因表达改变等都可以导致肿瘤细胞摆脱对表皮生长因子受体信号通路的专一性依赖而产生耐药.     

基质金属蛋白酶9作用后大肠癌细胞肿瘤坏死因子受体1的变化

目的研究基质金属蛋白酶9（MMP-9）对大肠癌细胞肿瘤坏死因子受体1（TNFR1）表达的影响以及通过促进其脱落形成可溶性肿瘤坏死因子受体1（sTNFR1）从而促进大肠癌侵袭和转移的可能途径。方法免疫荧光法研究TNFR1在大肠癌细胞SW1116中的表达；用MMP-9干预培养的大肠癌SW1116细胞，用流式细胞术检测MMP-9不同剂量和不同作用时间时TNFR1表达变化，同时应用双抗体夹心ELISA法检测细胞培养上清中sTNFR1的变化。结果SW1116细胞表达TNFR1；MMP-9使SW1116细胞表面TNFR1脱落形成sTNFR1有剂量和时间依赖性。结论MMP-9促进大肠癌细胞表面TNFR1脱落形成sTNFR1，可能与大肠癌侵袭转移密切相关。     

Notch信号通路与肿瘤侵袭、转移的研究进展

Notch信号通路是一条在生物进化过程中高度保守的通路,广泛存在于无脊椎动物和脊椎动物中,主要通过调控细胞的增殖、凋亡及分化影响组织和器官的正常发育。近年来,有关Notch信号通路与肿瘤的研究取得了较大的进展,对其与肿瘤的发生、发展有了更深的认识,并有研究表明,Notch信号参与肿瘤的侵袭、转移。本文就Notch信号通路在肿瘤侵袭、转移中的作用和可能的分子机制作一综述。     

PBLD通过MAPK通路抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和转移

目的分析PBLD对HepG2细胞增殖、侵袭及转移的影响,并初步探讨其发挥作用的分子机制。方法首先利用细胞转染技术构建PBLD过表达的HepG2稳转细胞株,CCK-8法检测PBLD过表达后肝癌细胞增殖能力的变化,Transwell实验检测PBLD过表达后HepG2细胞侵袭、转移能力的变化,最后利用Western-blot技术筛选并验证PBLD可能的下游信号通路。结果 PBLD过表达后HepG2细胞的增殖能力被显著抑制(P0.05),同时,发生侵袭、迁移的细胞数量与空载对照细胞相比显著减低[(68±12.5)vs.(19±10.21),P0.01;(30±8.83)vs.(11±4.41),P0.01]。进一步Western-blot检测结果显示,PBLD过表达可显著抑制MAPK信号通路相关分子的表达。结论 PBLD可通过MAPK信号通路抑制Hep G2细胞的增殖、侵袭和转移。     

细胞外调节蛋白激酶信号通路在乙型肝炎病毒X基因调控c-met基因启动子中的作用

目的 明确在乙型肝炎病毒X基因(HBx)对原癌蛋白质(c-met)基因启动子区的调控中所涉及的信号传导通路及其在肝癌侵袭和转移中的作用.方法 用Western blot比较可能涉及的信号通路特异性阻断剂对HBx调控c-met表达的影响,分析在该调控过程中所涉及的信号通路.体外侵袭试验验证信号传导通路在HBx调控c-met表达中的作用.对数据进行析因设计的方差分析.结果 HBx引起c-met表达水平的增加,细胞外调节蛋白激酶信号通路抑制剂U0126能够降低该作用,而p38MAPK信号通路抑制剂SB203580、PI-3K信号通路抑制剂wortmanin则未显示出该作用.体外细胞侵袭试验也证实了U0126能够降低HBx引起的HepG2细胞的强侵袭性[(74.3±6.2)个与(34.6±5.2)个,F=113.45,P＜0.01].结论 HBx引起肝癌细胞的侵袭转移可能与其通过细胞外调节蛋白激酶信号通路对c-met基因启动子区(-183 bp～-100 bp)的调控有关.     

p38MAPK信号通路特异性阻断剂SB203580抑制VEGF诱导肝癌转移的实验研究

肿瘤浸润和转移特性是影响肿瘤患者生存和预后的关键因素,包括基质胶原纤维的降解、肿瘤细胞的迁移、肿瘤血管形成等步骤。血管内皮细胞生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)是重要的血管形成因子,在肝癌、胃癌、大肠癌等消化道肿瘤组织中有较高表达,与肿瘤浸润和转移密切相关。但VEGF与受体结合后产生生物学效应的细胞内信号传导通路尚不清楚,我们运用VEGF诱导肝癌细胞,观察分裂原激活蛋白激酶(Mitogen-ac-tivated protein kinase,MAPK)家族p38信号通路在其诱导肝癌细胞转移中的作用。     

胃壁细胞胃泌素受体及受体后信号传递的研究

胃泌素 ( gastrin)是一类能引起酸分泌的胃肠道多肽激素 ,其按所含氨基酸数可分为 G- 34、G- 1 7、G-1 4,分别称为大胃泌素、胃泌素和小胃泌素 ,它由 G细胞分泌。胃泌素的主要生理作用为促进胃酸分泌 ,并与组胺及乙酰胆碱有协同作用 ,它可直接通过与壁细胞上胃泌素受体结合而促进泌酸 ,或可通过激活 ECL细胞释放组胺而介导 [1]。胃泌素刺激壁细胞酸分泌以及 ECL细胞释放组胺都是通过相同的胃泌素受体 ,而胃泌素对 ECL细胞又表现出营养作用 ,Kinoshita等 [2 ]比较了壁细胞与 ECL细胞内胃泌素受体信号传导通路 ,认为壁细胞与 ECL细胞…     

胃泌素对胆管癌细胞运动及侵袭能力的影响

目的观察胃泌素对胆管癌细胞运动及侵袭能力的影响。方法取人胆管癌细胞系QBC939进行Transwell小室实验,空白对照组不处理,人胃泌素-17（G17）组分别在小室内加入1、10、100 pmol/L的G17,G17＋胃泌素受体拮抗剂L60组分别在小室内加入1、10、100 pmol/L的G17、L60试剂,以穿膜细胞数观察细胞的运动及侵袭能力。结果与空白对照组比较,G17组穿膜细胞数随G17浓度增加而增加（P均〈0.05）;与G17组比较,相同浓度的G17＋L60组穿膜细胞数均减少（P均〈0.05）。结论胃泌素可增强胆管癌细胞的运动及侵袭能力。     

磷脂酰肌醇3''-激酶通路活化对化疗药物诱导的胃癌细胞凋亡的影响

磷脂酰肌醇3＇-激酶（P13＇K）信息传导通路的激活已被认为是肿瘤细胞抗凋亡的主要机制之一，我们前阶段对胃癌化疗药物对蛋白激酶B（PKB）及其下游分子的影响进行了研究，但是P13＇K作为其上游信号分子在其中所起的作用尚不得而知。我们通过观察阿霉素、足叶乙甙对人胃癌细胞系SGC7901的作用，探讨P13＇K信号通路活化对体外胃癌细胞化疗效果的影响并探讨其可能的机制。     

CD74基因表达对急性髓系白血病细胞增殖与侵袭的抑制作用

目的:探讨白细胞分化抗原74（CD74）基因表达对急性髓系白血病（AML）细胞增殖、侵袭及巨噬细胞移动抑制因子（MIF）/细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的影响。方法:收集83例AML患者的骨髓样本（AML组）、25例正常供者的骨髓样本（对照组）及人AML细胞系HL60、MOLM-13、THP-1、U-937、人原代正常骨髓单个核细胞（BMMC）为研究对象，Western blot检测AML骨髓样本及各细胞系中CD74蛋白表达；利用LipofectamineTM2000转染试剂盒对MOLM-13细胞进行转染，并分为空白组（细胞不进行转染）、si-NC组（将si-NC转染于细胞）、si-CD74组（将si-CD74转染于细胞）；Western blot检测各组细胞中CD74、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及MIF/ERK信号通路相关蛋白MIF、磷酸化细胞外信号调控蛋白激酶（p-ERK）、ERK表达水平；CCK-8法检测各组MOLM-13细胞在0、24、48、72h的增殖情况；Transwell实验检测各组MOLM-13细胞侵袭情况。结果:与对照组比较，AML组骨髓细胞中CD74蛋白表达水平显著升高（P<0.05），CD74蛋白在HL60、MOLM-13、THP-1、U-937细胞系中均高表达，且在MOLM-13细胞系中表达量最高。与空白组和si-NC组比较，si-CD74组MOLM-13细胞的OD450值（在24、48、72h时）、细胞侵袭数目、CD74、MMP-9、MIF和p-ERK蛋白表达显著降低（P均<0.05），但空白组与si-NC组比较, 差异无统计学意义（P均＞0.05）。结论:干扰AML细胞中CD74表达，可抑制细胞增殖与侵袭，其作用机制可能与抑制MIF/ERK信号通路有关。     

Moesin调控肺癌A549细胞增殖、侵袭的实验研究

目的研究Moesin在非小细胞肺癌中的作用及其机制。方法通过数据库分析发现Moesin高表达在非小细胞肺癌患者中与不良预后相关。利用Western Blot检测Moesin在肺癌细胞株内表达情况。选取Moesin表达量中等A549细胞株进行实验。将A549细胞分为对照组和Moesin干扰组,分别利用CCK-8, Transwell检测细胞增殖、转移的作用,利用Western blot检测干扰Moesin对细胞增殖、上皮间充质转移(EMT)信号通路蛋白的影响。结果干扰Moesin后,增殖信号通路p-AKT, p-ERK,EMT信号通路E-cadherin, N-cadherin, Vimtein等蛋白都有明显变化,并且肺癌细胞表型如增殖,转移、侵袭能力也有明显下降。结论 Moesin在非小细胞肺癌中表达上调,其高表达与不良预后相关。并且,通过影响下游增殖、转移信号通路蛋白,Moesin可促进肺癌细胞增殖转移。     

大肠癌组织中P13K、Akt和HGF的表达变化及意义

目的观察磷酯酰肌醇3激酶（P13K）、丝苏氨酸激酶（Akt）和肝细胞生长因子（HGF）在大肠癌组织中的表达,探讨三者在大肠癌发生发展中的作用及其相关性。方法采用免疫组化法检测48例大肠癌和9例正常大肠组织中P13K、Akt和HGF。结果大肠癌组织中P13K、Akt和HGF的阳性表达率分别为60．42％、68．75％和72．92％,均明显高于正常大肠组织的11．11％、11．11％、22．22％（P均〈0．05）;P13K、Akt、HGF的表达呈正相关关系（r分别为0．348、0．465、0．451,P均〈0．05）。P13K、Akt和HGF异常表达与大肠癌Dukes分期和淋巴结转移有关（P〈0．05）,而与其组织分化程度无关（P〉0．05）。结论大肠癌组织中P13K、Akt和HGF表达均上调,其与大肠癌的生长、侵袭、转移密切相关;HGF可能通过促进P13K／Akt信号通路的激活,增强肿瘤细胞侵袭能力。     

胃泌素受体拮抗剂丙谷胺对原代培养大肠癌细胞作用的研究

目的：在体外观察胃泌素受体持抗剂丙谷胺（PGL）对原代培养大肠癌活细胞数（吸光度，A值）和DNA合成（脉冲数，CPM值）的影响，为大肠癌病人临床应用胃泌素受体拮抗剂治疗提供实验依据。方法：对25例大肠癌根治术病人的新鲜标本进行细胞分离和原代培养，采用MTT比色分析法检测活细胞数；3H－TdR掺入法测定DNA合成．结果：PGL组高、中和低分化腺癌活细胞数和DNA合成与对照组比差异均无显著性（P均>0.05),5肽胃泌素（PG）组活细胞数和DNA合成均显著高于对照组（P均＜0．01），PGL＋PG组活细胞数和DNA合成均显著低于PG组（P均＜0．01），而与对照组比差异无显著性（P均＞0．05）。结论：丙谷胺对原代培养大肠癌细胞的增殖无明显影响，但可抑制胃泌素对大肠癌细胞的促增殖作用。     

整合素与肿瘤转移

肿瘤侵袭和转移是肿瘤的恶性标志和特征，也是导致肿瘤患者治疗失败和死亡的主要原因。阻断肿瘤细胞的侵袭和转移为治疗肿瘤患者提供了一条新途径。肿瘤转移是一个复杂的多步骤多环节的过程，它需要几条信号传导通路的协调工作，包括肿瘤细胞增生、周围环境改变、侵袭和转移及分化四个步骤。在肿瘤转移过程中发生许多肿瘤细胞和细胞外基质(ECM)的相互作用，整合素在此过程中发挥主要作用。因此，近年来对整合素的关注也越来越多。本文就整合素与肿瘤及肿瘤转移的关系结合近几年的研究作一综述。     

ERK1／2抑制剂PD98059对大肠癌细胞侵袭和转移的影响

目的观察细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1／2）抑制剂PD98059对大肠癌细胞侵袭和转移的影响,探讨其可能机制。方法PD98059不同浓度（0、10、20、40μmo1／L）干预大肠癌细胞24h。用Boyden小室检测其体外运动和侵袭能力,Western blot法检测ERK1／2磷酸化蛋白和ERK1／2蛋白表达情况。结果随着PD98059剂量增大,大肠癌细胞穿膜数逐渐减少（P〈0．05）,磷酸化ERK1／2蛋白水平逐渐降低（P〈0．05）,ERK1／2蛋白水平无明显变化（P〉0．05）。结论PD98059能抑制大肠癌细胞的运动和侵袭力;其机制与PD98059抑制磷酸化ERK1／2有关。     

磷酸化Akt和PTEN在非小细胞肺癌组织中表达水平及其意义

原癌基因Akt蛋白磷酸化Akt（p-Akt）在癌发生的信号传导事件中起重要作用。抑癌基因PTEN功能丢失可激活磷脂酰肌醇3磷酸／Akt信号传导通路，参与癌发生过程。本研究应用免疫组织化学方法同时检测p-Akt和PTEN蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达情况，探讨两在NSCLC侵袭、转移中的作用和相关关系及其在患预后中的意义。     

泛素特异性蛋白酶对肿瘤细胞增殖侵袭转移的促进作用机制研究进展

细胞周期中的蛋白质降解受泛素连接酶和去泛素化酶（DUB）双向调控，泛素特异性蛋白酶（USP）是DUB中的主要成员，它可去除靶蛋白中的泛素，从而调节蛋白酶体的降解、定位和活性。USP在肿瘤细胞周期G1、S、G2和M期转化中发挥着重要作用，其可以通过各种信号通路来促进各时期之间的转换，从而促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移。USP可以通过促进细胞周期蛋白/细胞周期蛋白依赖性激酶的上调或者抑制细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的表达来促进肿瘤细胞增殖侵袭转移。