P—糖蛋白表达在急性非淋巴细胞白血病中的意义

为探讨成人急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）表达及其与临床、生物学特征的关系，用单克隆抗体ＵＩＣ２及流式细胞术间接免疫荧光法对１６９例ＡＮＬＬ（初治１５２例，难治７例，缓解１０例）患者Ｐ－ｇｐ进行检测。结果显示：初治者Ｐ－ｇｐ表达率为２９％，明显低于难治者的７１％，而缓解者无Ｐ－ｇｐ表达。ＡＮＬＬ亚型中以杂合型急性白血病及急性单核细胞白血病表达较高，阳性率分别为６７％及４７％。Ｐ－ｇｐ表达与ＣＤ３４、ＣＤ７、ＣＤ１４或ＣＤ４２ｂ／ＣＤ６１高度相关。细胞遗传学研究显示：Ｐ－ｇｐ在染色体预后差组表达最高（５４％），而在预后好组表达低（７％）。Ｐ－ｇｐ＋ＡＮＬＬ的完全缓解率为２３％，明显低于Ｐ－ｇｐ－者的７６％。结果提示：Ｐ－ｇｐ表达是成人初治ＡＮＬＬ化疗耐药的指标，综合免疫分型及核型分析可以更准确地判断预后及指导治疗。     

急性非淋巴细胞白血病P-糖蛋白表达及排出活性检测的临床意义

目的探讨成人初治急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）表达及罗丹明１２３排出活性（Ｒ１２３Ｅ）与预后的关系。方法流式细胞术检测ＡＮＬＬ白血病细胞Ｒ１２３Ｅ及Ｐｇｐ表达。结果Ｒ１２３Ｅ＋率及Ｐｇｐ＋率分别为３９５％及３４２％。Ｍ３的Ｒ１２３Ｅ＋率（０／６）明显低于其他亚型（４３８％）（Ｐ＜００５）。Ｐｇｐ表达与活性存在明显相关性（Ｐ＜０００１），７８９％的患者表达与活性一致（１０例Ｐｇｐ＋Ｅ＋，２０例Ｐｇｐ－Ｅ－）；２１１％存在表达与活性分离（３例Ｐｇｐ＋Ｅ－，５例Ｐｇｐ－Ｅ＋），Ｐｇｐ－Ｅ＋提示非Ｐｇｐ介导的排出活性在ＡＮＬＬ耐药中可能具有重要作用。Ｒ１２３Ｅ＋完全缓解（ＣＲ）率（２／１１，１８２％）及Ｐｇｐ＋者的ＣＲ率（２／１０，２０％），明显低于Ｒ１２３Ｅ－的９２９％（１３／１４）及Ｐｇｐ－的８６７％（１３／１５）（Ｐ分别＜００１及＜０００１）。结论Ｐｇｐ表达及活性检测在成人ＡＮＬＬ中均具有重要的预后意义     

E-cad在中枢神经系统白血病患者骨髓中的表达及意义

目的 探讨急性白血病(AL)患者骨髓血单个核细胞表面上皮型钙黏蛋白(E-cad)的表达及其在中枢神经系统白血病(CNSL)的发生、发展、浸润、复发、预后和疗效判定中的临床意义.方法 应用流式细胞术(FACS)检测骨髓血单个核细胞表面E-cad的表达.结果 AL组骨髓血单个核细胞(BM-MNC)表面E-cad的表达(%)显著低于对照组(P<0.01),非CNSL组又显著高于CNSL组(P<0.01);AL组治疗后显著高于治疗前(P<0.01);非高白细胞血症组显著高于高白细胞血症组(P<0.01).结论 AL患者骨髓血单个核细胞表面E-cad的表达与CNSL发生密切相关,E-cad表达的动态变化是反映AL患者病情及治疗效果的重要指标,可作为AL髓外浸润尤其是CNSL的诊断、鉴别诊断、用药监督和筛选、判定复发、疗效和预后的监测指标之一.     

成人急性淋巴细胞白血病P-糖蛋白表达及其与预后关系研究

本研究分别用免疫组化方法、流式细胞仪检测53例成人初治急性淋巴细胞白血病(ALL)患者白血病细胞P-糖蛋白(P-gp)表达、功能,探讨P-gp与成人初治ALL预后的关系.     

免疫双标记细胞的检测在中枢神经系统白血病诊断中的意义

目的：观察末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）及淋巴细胞系列相关抗原双标记细胞在脑脊液中的检出对中枢神经系统白血病（CNS－L）的临床意义。方法：采用免疫荧光标记技术配合流式细胞术，检测初治或安全缓解期急性淋巴细胞白血病脑脊液中TdT及淋巴系列相关抗原双标记细胞及其治疗后的变化。结果：64例中8例脑脊液检出上述免疫双标记细胞，均为急性淋巴细胞白血病，其中1例无CNS－L临床迹象，免疫双标记细胞占3.38%，经治疗后免疫双标记细胞在脑脊液均明显减少或消失。结论：脑脊液中免疫双标记细胞的检出对CNS－L的诊断及治疗指导具有重要的临床意义。弥补了常规细胞形态学的不足。     

细胞表面分化抗原和胞浆内抗原在急性白血病免疫分型中的应用

目的　探讨细胞表面分化抗原CD117及胞浆内抗原CD79a、CD3、MPO在急性白血病细胞的表达规律及意义。方法　对2001-02~2003 -12哈尔滨医科大学附属第二医院血液科39例初诊急性白血病病人,采用CD45 /SSC双参数散点图设门方法,运用直接免疫荧光技术,进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果　双表型急性白血病(BAL)CD117表达率为87. 5%。急性髓系白血病(AML)CD117表达率为88%、cMPO表达率为70%,cCD79a及cCD3 在AML中未见表达。6例急性淋巴细胞白血病(ALL)中2例B ALL,cCD79a均为阳性,CD117均为阴性; 3例T ALL,cCD3 均为阳性,其中1例CD117阳性; 1例T、B混合型ALL,cCD79a及cCD3 均为阳性,并伴有CD117阳性。结论　检测CD117、cMPO、cCD79a、cCD3 有助于鉴别AML、ALL、与BAL,且采用CD45 /SSC双参数散点图设门方法,能排除骨髓中正常细胞的干扰,并可直接地证明双表型或双克隆型急性白血病。     

细胞分化抗原胞浆CD79a在急性白血病细胞上的表达

目的探讨细胞分化抗原胞浆CD79a(CyCD79a)在各型急性白血病细胞上的表达情况及其意义。方法选取2003年1月至2004年4月河北医科大学第二医院急性白血病患者214例及外院选检病例标本7例,采用CD45/SSC双参数散点图设门方法和三色流式细胞术,对急性白血病患者221例各型急性白血病的细胞免疫表型CyCD79a等B系分化抗原进行检测,比较各型急性白血病患者的表达率。结果急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者CyCD79a表达率为100%(57/57),高于CD10、CD19、CD20和胞浆CD22(CyCD22)等其他B系分化抗原表达率;急性髓细胞白血病(AML)患者CyCD79a表达率为0.7%(1/134),低于或等于上述其他B系分化抗原表达率;急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者CyCD79a表达率则为13.3%(2/15)。结论Cy-CD79a对B-ALL具有较高的敏感性和较好的特异性。因此,CyCD79a可以作为诊断B-ALL的一线和首选免疫标志,并可用于B-ALL与T-ALL和AML的鉴别诊断。     

PTTG蛋白在急性白血病中的表达及意义

垂体肿瘤转化基因(PTTG)是近年来从垂体组织中分离的原癌基因,其在多种肿瘤组织及部分正常组织细胞内高度表达,对促进细胞增殖、转化和肿瘤发生有重要的作用。2003年12月至2004年7月,我们采用免疫细胞化学方法对53例急性白血病患者进行了PTTG基因表达检测,以探讨其临床意义,为急性白血病的诊断、疗效评价及预后估计提供参考指标。     

原癌基因C-myc、C-Hras 在急性非淋巴细胞白血病中的表达

本文应用RNA点要交方法,对24例急性非淋巴细胞白血病患者外周血或骨髓细胞及10例正常骨髓细胞中C-myc,C-H-ras的转录水平进行了分析。结果显示;①在24例急性非淋巴细胞白血病患者中,15例C-myc基因表达阳性,11例C-H-ras基因表达阳性。在正常10例骨髓标本中,3例C-myc基因表达阳性,1例C-H-ras基因表达阳性。②在10例急性非淋巴细胞白血病中C-myc基因、C-H-ras基因同时表达。     

急性白血病患者细胞周期蛋白E及依赖激酶抑制剂表达的意义

目的：探讨细胞周期蛋白E（cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂（p27KIP1)对成人初治急性白血病（AL）发展及预后的作用。方法：用流式细胞术检测60例AL及17例对照cyclin E、p27 KIP1、多药耐药基因蛋白p170表达及细胞周期分布;逆转录－聚合酶链反应检测46例成人AL患者及17例对照的骨髓cyclin E、p27KIP1、多药耐药蛋白的mRNA水平。结果：60例AL患者全周期及G2／M期cyclinE表达均高于对照组（＜0．01或0．05）;p27KIP1全周期表达亦均高于对照组,但G2／M期差异无显著性（P＞0．05）;cyclinE与p27KIP1的表达呈正相关;AL患者cyclin E高表达组缓解率（44．8％）低于正常表达组（77．4％）（P＜0．01）;复发率（92．3％）高于正常表达组（41．7％）（P＝0．003;p27KIP1表达对AL缓解率、复发率的影响无统计学意义（P＞0．05,P＝0．89）。结论：cyclinE在成人AL有异常高表达,并可能促使AL的发展,是AL缓解率、复发率的重要危险因素。     

Survivin在柔红霉素诱导白血病细胞凋亡作用机制中的研究

目的：探讨Survivin在柔红霉素（DNR）作用机制中的作用,为进一步探讨白血病细胞对DNR耐药机制提供研究方向。方法：实验选用高表达Survivin的Molt-4细胞,逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测DNR作用后Survivin mRNA的表达,免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物（SABC）方法检测DNR作用后Survivin蛋白的表达,免疫印迹方法检测DNR作用后Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的表达。结果：Survivin mRNA和蛋白表达水平随DNR浓度加大和作用时间延长而降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;Caspase-3与Caspase-9蛋白活化片断随DNR浓度加大和作用时间延长而增多（P〈0.05）,Caspase-8未见明显活化片断。结论：①Survivin在DNR作用机制中发挥重要作用;②DNR可能通过线粒体途径诱导白血病细胞凋亡,Caspase-3和Caspase-9在凋亡通路中发挥重要作用。     

急性早幼粒细胞白血病骨髓白血病细胞P-gp及MRP和LRP的表达

多药耐药（MDR）的分子机制至今尚未完全被阐明，膜转运蛋白P-糖蛋白（P-gP）、多药耐药相关蛋白（MRP）和肺耐药蛋白（LRP）过度表达对于白血病治疗失败的影响至今仍是一个有争议的问题。急性早幼粒细胞白血病（APL）是一个具有特异形态学和细胞遗传学特征的在细胞生物学和临床方面被明确定义的一种白血病亚型。该病如果DIC能够被很好地控制，绝大多数患者可获得长期完全缓解（CR）。因此，我们应用流式细胞仪对49例APL患者骨髓白血病细胞P-gP、MRP和LRP的表达情况进行了评估，并对初治与难治复发患者之间膜转运蛋白表达的相关性亦进行了描述。     

HMGB-1在白血病患者血浆中的表达及临床意义

目的探讨高迁移率族蛋白-1(HMGB-1)在白血病发病及疗效判定中的临床意义。方法选择40例初诊未治白血病患者(白血病组)、50例良性血液病患者(良性血液病组)及50例健康志愿者(对照组),应用ELISA法检测其血浆HMGB-1水平,并以ROC曲线分析血浆HMGB-1水平诊断白血病的效能。结果白血病组治疗前后血浆HMGB-1分别为12.792 7、3.877 7 ng/mL,良性血液病组和对照组分别为6.237 1、3.788 5 ng/mL,白血病组化疗前显著高于化疗后及良性血液病组、对照组(P均<0.001),后三者间无显著差异(P>0.05);HMGB-1诊断白血病的ROC曲线下面积(AUC)为0.916,诊断临界值为8.677 1 ng/mL,诊断白血病的敏感度为77.50%、特异度为90.00%。结论血浆HMGB-1水平变化与白血病患者病情进展及临床疗效有一定相关性,有望作为临床辅助诊断白血病及判断治疗后病情转归的参考指标。     

环孢素A对急性淋巴细胞白血病细胞P-糖蛋白表达及抑制功能的研究

应用可以干扰P-糖蛋白(P—gp)功能的药物，如环孢素A(CsA)等逆转剂，这些药物与P—gp连接，从而阻止抗癌药物的排泄，这样就增加了表达P—gp的细胞内抗癌药物的浓度，而不增加P—gp^-急性髓系白血病(AML)细胞或敏感细胞内抗癌药物的浓度。本研究CsA对6例初治和15例难治复发急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓白血病细胞P-gp的表     

急性白血病患者细胞周期蛋白B1表达与耐药的关系

目的　探讨细胞周期蛋白B1 (cyclinB1 )在急性白血病 (AL)中的表达以及与耐药的关系。方法　本研究对 85例初治AL患者 (其中敏感组 47例 ,耐药组 38例 )及 1 7例正常人采用流式细胞术检测cyclinB1、p1 70蛋白表达水平。采用半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测cyclinB1、多药耐药基因 1 (mdr 1 )、DNA拓扑异构酶Ⅱ的两个同工酶TOPOⅡα、TOPOⅡβ以及bcl 2的mRNA水平。结果　 (1 )耐药组cyclinB1蛋白 (M =1 2 3 % )和mRNA (M =0 2 1 7)以及TOPOⅡα(M =0 2 36)、TOPOⅡβ(M =0 32 8)的mRNA表达水平明显低于敏感组cyclinB1蛋白 (M =2 2 7% )和mRNA (M =0 563)、TOPOⅡα(M =0 51 4 )、TOPOⅡβ(M =0 635) (P <0 0 1 )。全部正常人cyclinB1蛋白的表达水平 <5 % ,在相同条件下未检出cyclinB1、TOPOⅡα、mdr 1的mRNA表达。 (2 )耐药组患者的p1 70蛋白 (M =1 4 3 % )及mdr 1 (M =1 0 71 )、bcl 2 (M =0 941 )的mRNA表达水平明显高于敏感组p1 70蛋白 (M =3 6 % )、mdr 1 (M =0 0 94)和bcl 2 (M =0 1 53)的mRNA表达水平 (P <0 0 1 )。 (3)cyclinB1蛋白与TOPOⅡα、TOPOⅡβ的mRNA表达呈正相关 (rTOPOⅡα=0 472 ,P <0 0 1 ) ;(rTOPOⅡβ=0 683 ,P <0 0 1 ) ;cyclinB1mRNA与TOPOⅡα     

端粒酶在急性白血病细胞中的表达及其与P-170表达的关系

目的：探讨端粒酶在急性白血病发生发展中的作用，及其与多药耐药P－170表达的关系。方法：采用PCR ELISA方法检测6例正常人和22例急性白血病未治时端粒酶活性及其中10例患者化疗前后端粒酶活性变化，10例患者端粒酶活性与P－170表达的关系。结果：端粒酶活性在白血病细胞株和急性白血病患者骨髓中的高度表达与正常人有明显区别（P＜0.01），化疗后端粒酶活性水平明显下降（P＜0.01），急性白血病端粒酶表达与P－170有一定相关性。结论：端粒酶活性与恶性血液病的发生、发展有关，为恶性血液病的诊断和疗效监测提供了一种较理想的参考指标。     

HSP70在急性白血病外周血细胞中的表达及临床意义

应用RT-PCR半定量分析法,测定热休克蛋白70(HSP70)mRNA在急性白血病(AL)外周血细胞(AL组)中的表达。结果AL组初治和复发者HSP70 mRNA表达水平均显著高于缓解者和对照组(P<0.001),复发者表达水平显著高于初治者(P<0.05)。认为HSP70 mRNA在AL细胞中表达较正常人明显增高,可能是AML预后较差的一种标志。     

肺耐药蛋白在急性白血病中的表达及意义

目的 探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞肺耐药蛋白（LRP）的表达及意义。方法 采用LRP单克隆抗体、流式细胞技术分别测定15例单纯缺铁性贫血患者（对照组）和65例AL患者（AL组）LRP的表达率。结果 LRP的表达率在初治和复发／难治急性淋巴细胞白血病（ALL）患者分别高于初治和复发／难治急性髓细胞白血病（AML）患者（P均〈0．05）;AML中M5亚型表达率高于M3亚型（P〈0．05）。初治及复发／难治LRP（＋）者缓解率明显低于LRP（-）者（P〈0．05）。结论 LRP的表达与AL患者临床预后密切相关,化疗前检测LRP表达率有助于个体化治疗和预测疗效。