重组红细胞血型糖蛋白A脂质体与麦胚凝集素的相互作用

本研究应用重组的红细胞血型糖蛋白A脂质体．分别与麦胚凝集素和交联有麦胚凝集素的Sepharose 4B(WGA—Sepharose4B)相互作用。结果发现重组的红细胞血型糖蛋白A脂质体与麦胚凝集素作用，有明显的凝集现象；并能结合在交联有麦胚凝集素的Sepharose颗粒周边4B上．从而为人工模拟红细胞膜提供了一可靠的实验依据。     

傅里叶变换红外技术研究麦胚凝集素作用下血型糖蛋白A构象变化

目的进一步阐明麦胚凝集素作用下，膜血型糖蛋白Ａα螺旋改变的部位。方法：首先，制备重组蛋白体膜血型糖蛋白Ａ，然后，以ＦＴＩＲ技术定量测定麦胚凝集素作用下，血型糖蛋白Ａ二级结构的改变。结果发现：麦胚凝集素结合于血型糖蛋白，导致血型糖蛋白Ａα螺旋减少，β结构增加。且相同浓度的麦胚凝集素作用下，重建脂蛋体膜血型糖蛋白Ａα螺旋下降较多，溶液血型糖蛋白Ａα螺旋下降较少。提示：麦胚凝集素作用下，膜血型糖蛋白Ａ膜内、膜外螺旋均有减少。     

麦胚凝集素沉淀血清糖蛋白对原发性肝癌的诊断意义

采用麦胚凝集素(浓度5mg／me)分别与48例样品血清孵育，沉淀物用N-乙酰葡萄糖胺复溶，SDS-PAG电泳谱发现有三条区带；结果表明：原发性肝癌患者血清中与麦胚凝集素结合的二条区带SDS-PAG电泳谱带浓度显著增加；其机制可能是糖苷转移酶活性异常，或糖蛋白的生成增加，而清除能力下降．     

健康人肝组织麦胚凝集素亲和型糖蛋白表达谱分析

目的分析健康人肝组织麦胚凝集素(wheatgermagglutinin,WGA)亲和型糖蛋白表达谱。方法从30例健康人肝组织混合样本的总蛋白中用WGA凝集素亲和层析分离纯化糖蛋白,再利用双向电泳结合SYPRO Ruby荧光染色进一步分离WGA亲和型糖蛋白。目的蛋白质点经质谱鉴定后对其进行生物信息学分析及功能分类。结果初步建立WGA亲和型糖蛋白的双向电泳图谱,图谱均点数为(650±50)个,质谱鉴定并去冗余共获116个蛋白。经生物信息学分析104个蛋白具有不同程度的N糖基化位点,最后按Gene Ontology的分类原则进行功能分类。结论凝集素亲和层析结合双向电泳荧光染色、质谱鉴定是一种高通量的检测方法,WGA亲和型糖蛋白表达谱的初步构建为后续研究奠定了基础。     

人红细胞血型糖蛋白A单克隆抗体的初步鉴定

目的：制备高效价的人红细胞血型糖蛋白A单克隆抗体（GPA McAb),为研制快速全血凝集试剂提供关键的双功能抗体成分。方法：首先用MNGP亚型GPA,经SPDP与小鼠血清白蛋白连接后,常规免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备GPA McAb;用ELISA和血凝方法对克隆进行筛选和鉴定。结果：4次融合共获3个可分泌高效价GPA McAb细胞株（3F6、5C7和5G3）。分泌的单克隆抗体均与GPA发生特异性反应,但均不引起人A、B、AB和O型红细胞凝集,属于人红细胞GPA的特异性非凝集抗体。在3株抗体中,2株为IgG1亚型,1株为IgG2亚型。结论：小分子GPA经与同种动物（免疫用动物）血清白蛋白连接后用作免疫抗原,研制的2株IgG1亚型抗体可用于全血凝集试剂中双功能抗体的制备。     

麦胚凝集素对红细胞膜变形性的影响

利用分子生物学方法和激光衍射仪研究了红细胞变形性。结果,低粘滞系数(η=2cp)的磷酸缓冲液(PBS)悬浮红细胞,在低切变率((?)=150s~(-1))时红细胞的变形指数(DI)随麦胚凝集素(WGA)浓度的增大而增加;高粘滞系数(η=15cp)的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)悬浮红细胞,在高切变率((?)=800s~(-1))时,WGA浓度增大,红细胞变形指数随之减小。     

从麦胚中快速分离纯化麦胚凝集素

用改良的鸡卵类粘蛋白Sepharose 4B亲和层析法从麦胚中纯化的麦胚凝集素有较高的血凝活性,每100g麦胚丙酮粉的麦胚凝集素平均产率为58.74±6.56mg;纯化的麦胚凝集紊在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)上为单一区带;其表观分子量为34 400;它的专一性半抗原糖为N-乙酰葡糖胺和唾液酸。     

红细胞血型糖蛋白A位点正常变异及肿瘤放疗的影响

了解血型糖蛋白Ａ背景突变水平，观察照射近期的变化规律。方法在正常人和肿瘤放射疗人中进行ＧＰＡ突变分析，结合克隆示记和流式细胞技术，检测ＭＮ杂合子个体中突击凶的变异细胞ＮＯ和ＮＮ，确定变异率。结果对２８个正常成人的初步测定，ＮＯ／ＮＮ变异率     

红细胞血型糖蛋白A位点正常变异及肿瘤放疗的影响

目的了解血型糖蛋白Ａ（ＧＰＡ）背景突变水平,观察照射近期的变化规律。方法在正常人和肿瘤放疗病人中进行ＧＰＡ突变分析,结合单克隆抗体标记和流式细胞技术,检测ＭＮ杂合子个体中罕见的变异细胞ＮＯ和ＮＮ,确定变异率。结果对２８个正常成人的初步测定,ＮＯ／ＮＮ变异率（Ｖａｒｉａｎｔｆｒｅｑｕｅｎｃｙ,Ｖｆ）（８．３±４．１３）／（５．５０±３．７７）×１０－６;ＮＮ变异率与年龄相关性接近显著意义（Ｐ＝０．０５７）,男女之间、吸烟与不吸烟者均无显著差异。随访肿瘤病人,６例治疗前ＧＰＡ变异率ＮＯ（１２．９±６．６０）×１０－６,ＮＮ（７．７±５．０１）×１０－６,与同年龄者无显著差异。连续盆腔照射１月Ｖｆ已有升高,照射２个月的病人ＮＮＶｆ（１７．５±８．９５）×１０－６,显著高于未照病人（Ｐ＝０．０４６８）。结论正常人ＧＰＡ变异率基本与文献相符,年龄等因素可影响背景水平;病人照射后Ｖｆ变化不一,表明个体对辐射敏感性不同,照射近期主要是ＮＮ的变化,是较晚造血周期细胞突变的表现。     

凝胶电泳法测定麦胚凝集素的分子量

凝胶电泳法测定蛋白质分子量的方法已经广泛应用,但该法测定植物凝集素分子量的报道很少.因植物凝集素大都是糖蛋白,用凝胶电泳法测定往往出现拖尾现象.笔者介绍了用平板凝胶电泳法测定麦胚凝集素的最佳条件,其测定结果与文献报道的一致.     

人血型糖蛋白A及糖类对恶性疟原虫裂殖子入侵人红细胞的影响

人红细胞膜上血型糖蛋白A可能是恶性疟的受体。 实验采用体外培养方法,观察血型糖蛋白A,糖类,凝集素对恶性疟原虫FCC-1/HN株入侵人红细胞的影响。结果: 1.自人红细胞膜制得的血型糖蛋白A纯品在50及100μg/ml时抑制入侵分别为91%和100%;制得的卵类粘蛋白纯品在100μg/ml时抑制入侵为40%。     

血型糖蛋白A在恶性疟原虫入侵红细胞中的受体作用

人红细胞膜血型糖蛋白A(GPA)与恶性疟原虫入侵红细胞关系密切。本实验在体外培养条件下,观察了GPA及其抗体,α1-酸性糖蛋白、鸡卵类粘蛋白及麦胚凝集素等对恶性疟原虫入侵红细胞的影响。结果表明:GPA与恶性疟原虫裂殖子之间的结合具有高度特异性和亲和力,有饱和趋势,结合后产生特定的生物效应。首次从配体—受体相互作用的特点,证实了GPA是恶性疟原虫裂殖子识别和结合的受体。     

血型糖蛋白A快迁移变化的椭圆形红细胞增多症一例

血型糖蛋白Ａ快迁移变化的椭圆形红细胞增多症一例李津婴，万树栋患者女，３３岁。１９９１年因贫血就医，１９９２年１月转我院。血红蛋白（Ｈｂ）８７ｇ／Ｌ，网织红细胞（Ｒｅｔ）０．０５８，脾脏不大。直接和间接胆红素分别为３．４和２２．１μｍｏｌ／Ｌ。骨髓象提...     

人血型糖蛋白A衍生物对恶性疟原虫裂殖子识别及入侵红细胞的效应

用电泳纯人血型糖蛋白A(GPA)制得下列衍生物:(1)用胰蛋白酶酶解GPA分离得GPA糖肽;(2)制备GPA和GPA糖肽两种抗体;(3)制备去糖GPA(dGPA);(4)用人红细胞膜全脂分别重组成含GPA及dGPA的两种脂质体。用上述制品对FCC-1/HN株恶性疟原虫裂殖子实验,发现:(1)GPA脂质体可与裂殖子结合,而dGPA脂质体呈阴性反应。(2)GPA,GPA糖肽,GPA抗体,GPA糖肽抗体及GPA脂质体均有阻止恶性疟原虫裂殖子入侵人红细胞的效应。     

化疗对红细胞血型抗原的影响

恶性肿瘤患者在化疗过程中常出现红细胞血型抗原减弱的情况 ,除了肿瘤本身的因素外 ,化疗是否对血型抗原有某些影响作用 ,我们对此进行了观察。现报告如下。1　对象与方法1.1　对象　我院 1995～ 1999年住院的恶性肿瘤患者 138例。其中男 80例 ,女 5 8例 ,年龄 2 3～ 6 0岁。70名健康献血员作为对照组 ,其中男 40例 ,女 30例 ,年龄 2 0～ 5 5岁。1.2　试剂　标准抗体血清抗 - A及抗 - B(效价 >12 8)、抗 - D(效价 6 4)、抗 - H (效价 32 )、抗 - M及抗 - N (效价 6 4)均为长春生物制品研究所提供。1.3　红细胞血型抗原强度判定方法　 AB…     

肝脏肿瘤组织中麦胚凝集素受体的定位

采用ABC法对肝细胞癌、肝内胆管细胞癌等肝脏肿瘤中麦胚凝集素受体进行组织学定位,并以正常肝组织、肝硬变组织及癌周肝组织等为对照,结果表明:肝细胞癌中麦胚凝集素受体的不规则分布与正常肝组织、肝硬变组织中带状分布形成明显对比,与胆管细胞癌中麦胚凝集素受体的分布也有差别。用神经氨酸苷酶处理后,麦胚凝集素受体的分布有明显变化。提示:细胞内麦胚凝集素受体的分布特点有利于肝脏肿瘤的诊断和鉴别诊断。     

冷凝集素对血型鉴定的影响及其探讨

在日常输血工作中,我们经常要对临床病人进行血型鉴定.血型鉴定是一件需要我们检验人员严肃认真对待的工作,不能掉以轻心.在气温较低的冬季或给某些贫血病人做鉴定时,严重的冷凝集素会影响血型鉴定工作.针对此种情况,我们就一例严重贫血孕妇的血型鉴定做了跟踪报道,现摘要如下.     

冷凝集素对血型鉴定的影响与处理

冷凝集素是IgM 型冷抗体引起的自身免疫性疾病,多继发于支原体肺炎、传染性单核细胞增多症、多发性骨髓瘤、肝硬化、淋巴瘤等疾病.血清冷凝集素效价异常升高,可引起血型鉴定及交叉配血困难[1].在日常工作中我们发现了5例因患者血液高冷凝集素造成ABO 血型鉴定时,其正定型和反定型的血型结果不一致的现象.现将结果报告如下.