强迫游泳应激对大鼠海马代谢物水平影响的在体研究

目的 探讨质子磁共振波谱(1H-MRS)在体应激所致海马损伤的应用价值.方法 将24只大鼠随机分为对照组(n=6)、单次应激组(n=6)、2周应激组(n=6)和4周应激组(n=6),利用强迫游泳试验(15min/d)建立应激动物模型,根据行为学和血清皮质酮水平评定应激效果,利用1H-MRS测量大鼠双侧海马N-乙酰天冬氨酸/肌酸(NAA/Cr)和胆碱复合物/肌酸(Cho/Cr)比值.结果 2周应激组血清皮质酮[(1001.36±82.84)ng/ml]明显高于对照组[(191.60±116.41)ng/ml]、单次应激组[(359.09±67.08)ng/ml]和4周应激组[(287.03±37.22)ng/ml],P＜0.05.1H-MRS在体检测结果显示2周应激组大鼠左侧海马NAA/Cr值(1.171±0.087)明显低于对照组(1.304±0.088),P＜0.05,但比4周应激组(1.035±0.039)高,P＜0.05,而与单次应激组(1.239±0.127)相比差异无显著性,4周应激组NAA/Cr值明显低于其他3组;右侧检测显示4周应激组NAA/Cr值(1.015±0.049)明显低于其他3组(对照组,2周应激组和4周应激组分别为1.268±0.070,1.271±0.087,1.211±0.088),而其他各组间比较差异无显著性.双侧Cho/Cr值检测结果各组间均差异无显著性.应激强度与海马代谢物水平呈显著负相关,左侧和右侧的相关系数分别为-0.749和-0.804,P＜0.01.结论 强迫游泳应激可以导致大鼠海马神经元生存活力的下降或结构破坏,海马区代谢物水平改变,左、右侧海马对应激的敏感性表现不对称,并以左侧海马更为明显,1H-MRS可无创性地反映海马区代谢物水平的这一改变.     

强迫游泳应激强度的改变对大鼠海马中c-fos表达习惯化的影响

目的研究应激强度的改变对重复应激导致的大鼠海马中c-fos表达习惯化的影响.方法采用特异抗体的免疫组织化学方法,在重复强迫温水游泳应激导致的c-fos表达习惯化大鼠模型基础上,观察强迫冰水游泳应激对大鼠海马中c-fos表达的影响.结果重复强迫温水游泳应激导致c-fos表达习惯化后,再给予强迫冰水游泳应激使c-fos表达水平再次升高.结论高强度的应激可以逆转低强度应激所引起的习惯化效应.     

强迫游泳应激强度的改变对大鼠海马中c—fos表达习惯化的影响

目的 研究应激强度的改变对重复应激导致的大鼠海马中c—fos表达习惯化的影响。方法 采用特异抗体的免疫组织化学方法，在重复强迫温水游泳应激导致的c—fos表达习惯化大鼠模型基础上，观察强迫冰水游泳应激对大鼠海马中c—fos表达的影响。结果 重复强迫温水游泳应激导致c—fos表达习惯化后，再给予强迫冰水游泳应激使c—fos表达水平再次升高。结论 高强度的应激可以逆转低强度应激所引起的习惯化效应。     

强迫游泳应激大鼠行为和血清皮质酮的变化

目的探讨强迫游泳不同应激阶段和应激强度对大鼠行为和内分泌的影响,并分析这些改变的精神病理学意义。方法建立强迫游泳模型,将大鼠随机分为对照组、单次应激组、2周应激组和4周应激组。采用旷场试验评定应激后大鼠的行为反应,酶联免疫吸附实验检测血清皮质酮水平。结果随着应激次数增加,大鼠的主动性运动逐渐减少,而被动性运动逐步增加。单次应激组的直立和修饰[(7.50±2.04)次,(8.33±1.88)次]明显高于对照组[(1.84±0.35)次,(5.05±0.88)次]、2周应激组[(2.54±0.66)次,(4.21±0.37)次]和4周应激组[(2.83±0.75)次,(3.61±0.46)次]。2周应激组和4周应激组血清皮质酮水平[(1001.35±202.91)ng.ml-1,(728.67±250.87)ng.ml-1]明显高于对照组[(626.52±349.89)ng.ml-1]和单次应激组[(359.09±164.32)ng.ml-1]。血清皮质酮水平与应激强度呈正相关(r=0.488,P<0.05)。应激适应组修饰、直立的次数[(6.11±5.04)次,(5.67±4.92)次]明显高于非适应组[(3.64±1.96)次,(1.64±1.06)次]而其皮质酮水平[(580.43±383.52)ng.ml-1]明显低于非适应组[(812.32±157.80)ng.ml-1]。结论(1)单次应激组大鼠表现焦虑样行为增多,慢性应激可导致大鼠行为的明显抑制;(2)在强迫游泳实验中存在主动性与被动性行为个体差异,具有不同的精神病理学意义。     

噻奈普汀对强迫游泳应激大鼠行为及血清皮质酮的影响

目的探讨应激导致大鼠行为和血清皮质酮浓度的改变以及噻奈普汀的抗抑郁机理。方法将24只大鼠随机分为对照组、4周应激组、4周应激给水组和4周应激给药组,各应激组大鼠连续给予强迫游泳试验4周,每天持续15min。游泳后给予灌胃,4周应激给药组按50mg/kg给予噻奈普汀生理盐水溶液灌胃,4周应激给水组按相同比例给予生理盐水灌胃,采用Open-Field法评定行为,使用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清皮质酮水平。结果应激后对照组爬格数明显高于4周应激组和4周应激给水组(47.50±29.66)次,(12.67±11.38)次,P(0.05;(47.50±29.66)次,(7.67±3.01)次,P(0.05),而与4周应激给药组比较差异无显著性(P>0.05);对照组大鼠修饰次数明显高于4周应激组和4周应激给水组[(7.00±1.79)次,(2.50±2.35)次,P(0.05;(7.00±1.79)次,(3.17±3.19)次,P(0.05],而与4周应激给药组相比差异无显著性(P>0.05)。对照组血清皮质酮明显低于其他3组(P(0.01)。结论应激可以导致大鼠焦虑样行为增加和皮质酮激素水平升高,噻奈普汀可以有效减少应激所致焦虑样行为。     

两种慢性强迫游泳应激抑郁模型的行为学比较

目的 比较两种慢性强迫游泳应激抑郁模型的行为学特点,探讨慢性强迫游泳应激抑郁模型的建立方法,方法 18只SD雄性大鼠随机分为对照组和应激组(S1组和S2组).应激组连续给予14 d、水温分别为(23±0.5)℃和(10±0.5)℃、每天5 min强迫游泳,观察3组大鼠应激7 d和14 d的体质量、摄食、旷场实验和液体消耗实验的变化.结果 S2组在应激7 d后体质量增长率、24 h摄食率低于对照组(P＜0.05);应激14 d后体质量增长率[(12.26±4.04)%]、24 h摄食率((9.49±0.96)%]、摄糖量[(28.63±3.51)g]、糖水偏好[(76.25±2.51)%]、水平得分(12.17±9.00)、垂直得分(3.17±3.60)均低于对照组(P＜0.0S).S1组在应激7 d后出现体质量增长率、24 h摄食率明显下降,在应激14 d后除体质量增长率下降外,24 h摄食率、垂直得分和糖水偏好均高于对照组(P＜0.05).结论 较低水温的慢性强迫游泳应激14 d能诱发大鼠的抑郁行为,可能更适合于建立应激抑郁模型.     

强迫游泳应激大鼠行为和血清皮质酮的变化

目的探讨强迫游泳不同应激阶段和应激强度对大鼠行为和内分泌的影响,并分析这些改变的精神病理学意义.方法建立强迫游泳模型,将大鼠随机分为对照组、单次应激组、2周应激组和4周应激组.采用旷场试验评定应激后大鼠的行为反应,酶联免疫吸附实验检测血清皮质酮水平.结果随着应激次数增加,大鼠的主动性运动逐渐减少,而被动性运动逐步增加.单次应激组的直立和修饰[(7.50±2.04)次,(8.33±1.88)次]明显高于对照组[(1.84±0.35)次,(5.05±0.88)次]、2周应激组[(2.54±0.66)次,(4.21±0.37)次]和4周应激组[(2.83±0.75)次,(3.61±0.46)次].2周应激组和4周应激组血清皮质酮水平[(1001.35±202.91)ng.ml-1,(728.67±250.87)ng.ml-1]明显高于对照组[(626.52±349.89)ng.ml-1]和单次应激组[(359.09±164.32)ng.ml-1].血清皮质酮水平与应激强度呈正相关(r＝0.488,P <0.05).应激适应组修饰、直立的次数[(6.11±5.04)次,(5.67±4.92)次]明显高于非适应组[(3.64±1.96)次,(1.64±1.06)次]而其皮质酮水平[(580.43±383.52)ng.ml-1]明显低于非适应组[(812.32±157.80)ng.ml-1].结论 (1)单次应激组大鼠表现焦虑样行为增多,慢性应激可导致大鼠行为的明显抑制;(2)在强迫游泳实验中存在主动性与被动性行为个体差异,具有不同的精神病理学意义.     

慢性应激对大鼠海马NGF、NT-3表达的影响及应激停止后的变化

目的 探讨慢性应激对大鼠海马神经元NGF、NT-3蛋白表达的影响及其应激停止后的变化. 方法 采用慢性强迫游泳和孤养制作动物模型.运用open-field法观察大鼠行为学的变化,运用免疫组织化学方法观察大鼠海马DG区、CA3区NGF、NT-3的表达. 结果 与对照组相比,实验组1大鼠海马CA3、DG区NGF、NT-3的平均灰度值显著增加[灰度值分别为(187.25±0.87),(169.67±0.94),(183.49±0.21),(157.33±0.39),P＜0.05和P＜0.01],实验组2平均灰度值与对照组2相比同样增加[灰度值分别为(186.31 4±0.68),(170.30±1.22),(187.79 4±1.01),(162.79±0.98),P＜0.05]. 结论 慢性应激使大鼠海马NGF、NT-3表达降低,应激30d后,其表达仍低于对照组.     

噻奈普汀对强迫游泳应激大鼠行为及血清皮质酮的影响

目的 探讨应激导致大鼠行为和血清皮质酮浓度的改变以及噻奈普汀的抗抑郁机理.方法 将24只大鼠随机分为对照组、4周应激组、4周应激给水组和4周应激给药组,各应激组大鼠连续给予强迫游泳试验4周,每天持续15min.游泳后给予灌胃,4周应激给药组按50mg/kg给予噻奈普汀生理盐水溶液灌胃,4周应激给水组按相同比例给予生理盐水灌胃,采用Open-Field法评定行为,使用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清皮质酮水平.结果 应激后对照组爬格数明显高于4周应激组和4周应激给水组(47.50±29.66)次,(12.67±11.38)次,P＜0.05;(47.50±29.66)次,(7.67±3.01)次,P＜0.05),而与4周应激给药组比较差异无显著性(P＞0.05);对照组大鼠修饰次数明显高于4周应激组和4周应激给水组[(7.00±1.79)次,(2.50±2.35)次,P＜0.05;(7.00±1.79)次,(3.17±3.19)次,P＜0.05],而与4周应激给药组相比差异无显著性(P＞0.05).对照组血清皮质酮明显低于其他3组(P＜0.01).结论 应激可以导致大鼠焦虑样行为增加和皮质酮激素水平升高,噻奈普汀可以有效减少应激所致焦虑样行为.     

噻奈普汀对慢性应激大鼠海马N-乙酰天冬氨酸和胆碱复合物代谢水平的影响

目的 探讨慢性应激对大鼠行为和在体海马代谢物浓度的影响以及噻奈普汀的药理作用.方法 将24只大鼠随机分成4组:对照组、4周应激组、4周应激加水组、4周应激用药组.采用强迫游泳试验,建立应激模型.应激后给予灌胃给药,4周应激组给予噻奈普汀50mg/kg,4周应激加水组按相同比例给予生理盐水.根据行为学和血清皮质酮水平评定应激效果,利用1H-MRS测量大鼠双侧海马N-乙酰天冬氨酸/肌酸(NAA/Cr)和胆碱复合物/肌酸(Cho/Cr)比值.结果 4周对照组皮质酮的水平明显低于其他组(P＜0.01),1H-MRS在体检测左侧海马NAA/Cr浓度4周应激用药组(1.287±0.061),对照组(1.304±0.088)明显高于4周应激组(1.035±0.039)和4周应激加水组(1.020±0.085)(P＜0.01),用药组和对照组差异无显著性,应激组和应激加水组差异无显著性.右侧海马NAA/Cr浓度4周应激用药组(1.278±0.080)和对照组(1.268±0.070)明显高于4周应激组(1.015±0.049)和4周应激加水组(1.021±0.067)(P＜0.01),用药组和对照组差异无显著性(P＞0.01),应激组和应激加水组差异无显著性(P＞0.01).双侧Cho/Cr值检测结果各组间均差异无显著性.结论 双侧海马在体NAA/Cr浓度降低提示,强迫游泳应激可以导致大鼠海马神经元生存活力的下降或结构破坏;噻奈普汀作为一种新型抗抑郁药可以对抗这一改变.     

不同应激方式引发的抑郁大鼠行为特征比较

目的 了解经历不同类型的应激后大鼠抑郁样行为的差异.方法 将新生的SD大鼠随机分为母爱剥夺应激组(27只)、慢性温和应激组(29只)、双重应激组(31只)和正常对照组(30只).母爱剥夺组大鼠于出生后即接受母爱剥夺应激,慢性温和应激组大鼠在成年后接受慢性温和应激,双重应激组大鼠先接受母爱剥夺应激,成年后再接受慢性温和应激,对照组不接受任何实验处理.采用强迫游泳实验和糖水偏爱实验作为评估大鼠抑郁样行为的指标.结果 在强迫游泳实验中,母爱剥夺组[( 119.30±65.56)s]、慢性温和应激组[(145.00±80.24)s]及双重应激组[(170.03±61.75)s]大鼠静止漂浮时间长于对照组[(81.14±52.40)s,F=11.53,P＜0.01],其中双重应激组长于母爱剥夺应激组(P＜0.01),慢性应激组和双重应激组、母爱剥夺组大鼠差异无统计学意义(均P＞0.01);在糖水偏爱实验中,慢性温和应激组[(0.43±0.28)]、双重应激组[(0.50±0.26)]和对照组[ (0.54±0.28)]大鼠的糖水偏爱率差异有统计学意义(F=4.33,P＞0.01),母爱剥夺组[(0.32±0.22)]的糖水偏爱率低于对照组和双重应激组(均P＜0.05);雌、雄大鼠的静止漂浮时间和糖水偏爱率在不同应激方式下的差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 3种应激方式均可导致大鼠表现出某种抑郁样行为.不同应激方式所致的抑郁样行为在不同性别的大鼠间无差异.     

幼年应激致成年大鼠应激敏感性增加的突触形态学变化

目的 观察幼年应激对成年大鼠应激敏感性的影响及神经机制.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为应激组(30只)和非应激组(30)只,应激方式为强迫游泳.应激前及应激结束8周后两次以提尾实验评定大鼠的情绪性行为以观察大鼠的应激敏感性.行为评定完毕后光镜下观察左侧海马CA3区锥体细胞数目,电镜下拍摄左侧海马CA3区突触照片,然后在全自动图像分析仪下分析突触的形态学变化.结果 (1)应激前后应激组大鼠情绪性行为得分增加数[(1.20±0.60)分]大于非应激组[(-0.13±0.83)分](P<0.05).(2)应激组大鼠左侧海马CA3区锥体细胞数[(36.34±1.23)个]小于非应激组大鼠[(42.24±1.48)个](P<0.05).(3)应激组大鼠左侧海马CA3区突触数密度[(1.01±0.15)N/μm3]、面密度[(0.20±0.04)μm2/μm3]、圆盘面积[(0.05±0.02)μm2]、活性区长度[(314.78±46.32)nm]、曲率(1.02±0.04)、突触后致密物质厚度[(46.35±6.81)nm]小于非应激组数密度[(1.16±0.21)N/μm3]、面密度[(0.29±0.06)μm2/μm3]、圆盘面积[(0.07±0.02)μm2]、活性区长度[(339.83±55.16)nm]、曲率(1.11±0.06)、突触后致密物质厚度[(71.32±9.55)nm].结论 幼年应激会增加成年大鼠的应激敏感性;神经可塑性的降低可能是其机制.     

噻萘普汀对慢性应激大鼠海马体积影响的在体研究

目的 在体观察噻萘普汀对强迫游泳大鼠海马体积的影响.方法 将24只大鼠随机分成4组:对照组(n=6)、4周应激组(n=6)、4周应激生理盐水组(n=6)和4周应激噻萘普汀组(n=6),各应激组大鼠接受连续4周的强迫游泳应激.根据行为学和血清皮质酮水平评定应激效果,4周后行MRI扫描在体检测左右海马的体积.结果 4周应激组、4周应激加水组及4周应激给药组的血清皮质酮水平[(728.67±77.67)ng/ml,(765.37±250.87)ng/ml,(863.49±282.31)ng/ml],均比对照组[(191.60±116.41)ng/ml]明显升高(P＜0.01).左、右侧绝对海马体积比较,4周应激组[(59.45±5.05)mm3,(61.66±5.32)mm3]和4周应激加水组[(61.01±6.06)ng/ml,(61.43±3.12)ng/ml]均比对照组明显减小(P＜0.01);4周应激给药组大鼠均较4周应激组和4周应激加水组明显增加(P＜0.01),而与对照组之间差异无显著性(P＞0.05).大鼠双侧海马相对体积组间比较结果与绝对体积一致.应激后大鼠爬格数与海马体积呈正相关(r=0.557～0.598,P＜0.05).结论 噻萘普汀可逆转强迫游泳慢性应激导致的大鼠双侧海马体积减少.     

幼年应激致成年大鼠应激敏感性增加的突触形态学变化

Objective To observe the influence of stress in childhood on adult rat's stress sensitization and the neural mechanism. Methods Sixty male Sprague-Dawley rats were randomly divided into stress group (thirty) and non-stress group(thirty). The rats in stress group were given 14 repeated daily forced swimming. The emotional behaviors were tested at the beginning of the experiment and when stress of forced swimming ended 8 weeks later. When the appraisal of behavior ended,the pyramidal neuron in the left hippocampal CA3 regions were counted under the light microscope, the pictures of synapses in the left hippocampal CA3 regions were got under the electromicroscope,and the morphological changes of synapses were analyzed with the automatic image analyzing system. Results (1) The score (1.20±0.60) of emotional behavior of stress group increased more than non-stress group(-0.13±0.83) (P<0.05). (2) The number of pyramidal neuron in the left hippocampal CA3 re-gions of stress group rats was small than that of non-stress group rats. (3) The number density [(1.01±0.15) N/ μm3 ], prosop density (0.20±0.04 )μm2/μm3], the average area of synaptic linkage [(0.05±0.02) μm2], the length of active areas [(314.78±46.32) nm], the curvatures (1.02±0.04), the thickness of postsynaptic dense material [(46.35±6.81) nm] in the left hippocampal CA3 regions of the stress group were small than those of non-stress group (P<0.05). Conclusion The stress in childhood could increase the stress sensitization of adult rats,and the decrease of synaptic plasticity might be the mechanism.     

皮质酮与应激在大鼠PTSD样记忆损害形成过程中的交互作用

目的 研究皮质酮与应激在大鼠的创伤后应激障碍（PTSD）样记忆损害中的作用及交互效应.方法 分别以0 mA、0.8 mA及1.4 mA的电击量对大鼠进行预实验.首先大鼠接受恐惧任务训练,训练后24 h进行场景恐惧记忆测试,然后采用泛化测试验证大鼠PTSD样记忆损害模型是否复制成功.为了观察糖皮质激素的作用,采用双侧肾上腺切除术,并以皮质酮替代饲养,大鼠在手术后7天进行行为学实验.根据是否接受皮质酮替代及电击量分为四组：空白对照组（无皮质酮替代,电击量0 mA）、皮质酮组（皮质酮替代,电击量0 mA）、电击组（无皮质酮替代,电击量1.4 mA）、皮质酮-电击组（皮质酮替代,电击量1.4 mA）.采用析因设计资料的方差分析,对皮质酮与电击的交互作用进行统计分析.结果 0.8 mA组与0 mA组比较,大鼠的僵住反应百分比升高;0.8 mA组与1.4 mA组比较,大鼠的僵住反应百分比下降,并且1.4 mA组出现泛化效应.在析因设计资料的方差分析中,皮质酮-电击组与其他各组的僵住反应百分比均差异有统计学意义（P＜0.05）,其他各组之间差异无统计学意义.皮质酮（F=6.464,P＜0.05）和电击（F=53.419,P＜0.01）均对PTSD样记忆损害形成发挥作用,且皮质酮与电击之间存在交互效应（F=11.580,P＜0.05）.结论 高电击量（1.4 mA）能够诱导出大鼠PTSD样记忆损害,皮质酮与应激在此过程中存在交互效应.